• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    213例感音神經(jīng)性聾患兒的病因分析

    2020-06-23 06:26:56戴繼任徐彬鄭靜林樂希劉佳付勇
    中華耳科學(xué)雜志 2020年3期
    關(guān)鍵詞:感音神經(jīng)性耳聾

    戴繼任徐彬鄭靜林樂希劉佳付勇*

    1浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科(杭州310000)

    2浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院遺傳代謝科(杭州310000)

    耳聾是影響人類健康的常見原因。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì),全球共有耳聾患者3.6億,其中兒童占8.9%。我國殘疾人群有8296萬,其中7歲以下的聾啞兒童數(shù)量高達(dá)80萬,每年新增約11萬聾兒[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì),重度聽力喪失的新生兒約為0.1%,其中一半屬遺傳性耳聾。另外還發(fā)現(xiàn)許多遲發(fā)性感音神經(jīng)性聽力下降患者的發(fā)病是由于自身的基因缺陷或因基因缺陷和多態(tài)性造成了對致聾環(huán)境因素易感性的增加而致病[2]。因此,遺傳性耳聾的分子病因?qū)W研究非常重要。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    收集2017年1月-2019年5月在我院耳鼻喉科門診確診的213例感音神經(jīng)性耳聾(單側(cè)或者雙側(cè))患兒,年齡0~14歲,男童137例,女童94例。

    1.2 診斷及評估標(biāo)準(zhǔn)

    入選標(biāo)準(zhǔn):①出生時(shí)聽力篩查未通過或者出生時(shí)聽力篩查通過卻出現(xiàn)遲發(fā)性聽力下降;②以耳聲發(fā)射、聲導(dǎo)抗及聽性腦干誘發(fā)電位、聽覺穩(wěn)態(tài)(≤5歲不會配合純音測聽的患兒)、以及純音測聽(>5歲且能配合患者)為檢測技術(shù),診斷為感音神經(jīng)性聾(單側(cè)或者雙側(cè))。

    排除標(biāo)準(zhǔn):分泌性中耳炎、突發(fā)性耳聾、外中耳畸形的患者。

    分級標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)1997年世界衛(wèi)生組織耳聾分級標(biāo)準(zhǔn)[3]:大于5歲患兒以純音測聽結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)分級,選取500-1000-2000-4000Hz聽閾的平均值。據(jù)此將聽力損失進(jìn)行如下分級:(0級)正常:≤25dBHL(1級)輕度:26~40dBHL;(2級)中度:41~60dB;(3級)重度:6l~80dB;(4級)極重 度:>81dB。小于5歲患兒以聽性腦干誘發(fā)電位(ABR)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn),ABR反應(yīng)閾<35dBnHL為正常;36-50dBnHL為輕度聽力下降;51-80dBnHL為中度聽力下降;81-100dBnHL為重度聽力下降;大于100dBnHL為極重度聽力下降[4]。

    1.3 研究方法

    1.3.1 問卷調(diào)查

    在征得聾兒家長同意下,采集受檢兒童相關(guān)信息,包括:聾兒基本信息、聽力狀況、出生史、個(gè)人史、家族遺傳性耳聾病史、母孕期情況、干預(yù)情況、輔助檢查等(詳見表1)。在接受基因檢查前,均詳細(xì)告知家長基因檢測目的、內(nèi)容,檢測局限性、檢測樣本及用途、檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和效力以及保密條款,并簽署了知情同意書。

    1.3.2 ??茩z查

    213例患兒均接受耳鼻咽喉科常規(guī)檢查,排除外耳道鼓膜及中耳炎癥情況,以及全身系統(tǒng)性檢查。

    1.3.3 聽力學(xué)檢查

    1.3.3.1 純音聽閾測試

    采用丹麥MADSEN Astera型純音聽力儀,在噪音<20dBSPL的隔聲室中,采用降10升5測試法測試250~8000Hz氣、骨導(dǎo)聽閾閾值。選取500-1000-2000-4000HZ頻率的氣導(dǎo)聽閾平均值作為主觀聽閾。

    1.3.3.2 電反應(yīng)測聽檢測

    采用美國智聽公司生產(chǎn)的Smart EP腦干誘發(fā)電位儀,EAR-3A氣導(dǎo)插入式耳機(jī)。在隔音屏蔽室內(nèi),按照常規(guī)方法進(jìn)行ABR檢查,以Ⅴ波反應(yīng)閾值作為客觀聽閾。

    1.3.3.3 聲導(dǎo)抗測聽檢測

    采用丹麥國際Madsen公司的Titan中耳分析儀,EAR-3A插入式耳機(jī),≤6個(gè)月嬰兒用1KHz探測音,>6個(gè)月且<12個(gè)月小兒同時(shí)用1KHz和226Hz探測音進(jìn)行檢測,>12個(gè)月小兒采用226Hz探測音進(jìn)行檢測,以單峰A型聲導(dǎo)抗圖為正常。

    1.3.3.4 耳聲發(fā)射

    采用GSI耳聲發(fā)射儀對患兒進(jìn)行初步篩查,使用插入式耳機(jī),對患兒進(jìn)行 500、1000、2000、4000HZ頻率檢測,4個(gè)頻率均通過為正常。

    1.3.4 影像學(xué)檢查

    對于明確診斷為感音神經(jīng)性聾的患兒進(jìn)行顳骨高分辨率水平+冠狀位薄層CT檢查,或行頭顱/內(nèi)聽道磁共振檢查。

    1.3.5 耳聾基因檢測

    采集受檢者2-3ml的外周血,使用EDTA抗凝,注入統(tǒng)一專用真空采血管,統(tǒng)一編號,并在冷凍室儲藏,及時(shí)送檢。具體相關(guān)流程如下:1、詢問病史,一般體格檢查及耳科檢查、完成其他相關(guān)檢查,確診為感音神經(jīng)性聾。2、完成《感音神經(jīng)性聾的臨床資料收集表》的填寫并建立檔案。3、確認(rèn)是否要進(jìn)行耳聾基因檢測,完成《耳聾基因知情同意書》。4、予以收集患兒及父母雙親的外周血并及時(shí)送檢。5、對耳聾基因結(jié)果予以解讀及分析,并予以遺傳咨詢,提出治療或康復(fù)建議。

    1.3.6 判定標(biāo)準(zhǔn)

    根據(jù)美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)與基因組學(xué)會(ACMG)發(fā)布的變異解讀指南進(jìn)行致病性分析:pathogenic/致病性變異;likely pathogenic/疑似致病性變異;uncertain/臨床意義未明變異;likely-benign/疑似良性變異;benign/良性變異。本檢測只報(bào)告根據(jù)ACMG分級為“致病”、“疑似致病”、“臨床意義未明”的變異,不報(bào)告“良性”及“疑似良性”等不具有臨床意義的變異。

    2 結(jié)果

    2.1 耳聾情況

    在213例樣本中,輕度感音神經(jīng)性聾為39例,占18.3%,中度感音神經(jīng)性耳聾45例,占21.1%,重度感音神經(jīng)性聾38例占17.8%,極重度感音神經(jīng)性聾91例,占42.7%.

    2.2 高危因素

    統(tǒng)計(jì)了71份完整問卷表格中,與耳聾相關(guān)的高危因素主要是新生兒高膽紅素血癥,占8.5%,耳聾家族史占7%,早產(chǎn)兒占5.6%,宮內(nèi)感染和新生兒窒息分別占2.8%,耳廓和其他的顱面部畸形和極低體重兒分別占1.4%。

    表1 感音神經(jīng)性聾的臨床資料收集表Table 1 Clinical data collection table for sensorineural hearing loss

    2.3 內(nèi)耳畸形

    本研究中有172例患兒進(jìn)行了高分辨率水平+冠狀位薄層螺旋CT檢查,以Sennaroglu[5]2010分類為標(biāo)準(zhǔn),172例感音神經(jīng)性耳聾患者高分辨率水平+冠狀位薄層螺旋CT檢查的結(jié)果詳見表2。

    表2 43例內(nèi)耳畸形分布情況Table 2 Distribution of 43 cases of inner ear malformation

    2.4 致病基因及突變熱點(diǎn)

    213例感音神經(jīng)性聾患兒中,陽性報(bào)告56例(26.3%),疑似陽性報(bào)告52例(24.4%),未明確報(bào)告16例(7.5%),陰性報(bào)告89例(41.8%)。在陽性報(bào)告、疑似陽性報(bào)告和未明確報(bào)告中主要以GJB2、SLC26A4、USH2A、MYO15A、CDH23、MYO7A突變?yōu)橹鳎ㄔ斠姳?)。

    表3 124例陽性報(bào)告中各個(gè)基因的統(tǒng)計(jì)報(bào)告Table 3 Statistical reports of each gene in 124 positive reports

    在47例GJB2基因突變樣本中,以c.235delC位點(diǎn)突變?yōu)橹鞯募兒贤蛔?8例,以c.235delC和c.109G>A位點(diǎn)復(fù)合雜合突變?yōu)橹鞯碾s合突變19例。在12例SLC26A4基因突變樣本中,純合突變6例,雜合突變6例(詳見表4和表5)。

    表4 陽性檢測結(jié)果中的純合突變Table 4 Homozygous mutations in positive test results

    表5 陽性檢測結(jié)果中的雜合突變Table 5 Hybrid mutations in positive test results

    在陽性報(bào)告、疑似陽性報(bào)告和未明確報(bào)告中,108例患兒進(jìn)行了聽性腦干誘發(fā)電位(ABR)檢查,結(jié)果顯示極重度感音神經(jīng)性耳聾患兒最多,有46例。GJB2基因c.235delC位點(diǎn)、c.109G>A位點(diǎn)突變和SLC26A4基因c.919-2A>G位點(diǎn)突變在該108例患兒中占多數(shù)(詳見表6)。

    表6 在陽性報(bào)告樣本中各級耳聾病例中主要的基因突變例數(shù)Table 6 Number of major gene mutations in deafness cases at all levels in positive report samples

    3 討論

    在本次研究中發(fā)現(xiàn)重度、極重度感音神經(jīng)性聾為主,占60.3%。本研究中重度、極重度感音神經(jīng)性耳聾比例與國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的54.55%—70.43%比例相接近[6,7]。

    3.1 高危因素

    統(tǒng)計(jì)了71份完整問卷表格中,與耳聾相關(guān)的高危因素依次是新生兒高膽紅素血癥、耳聾家族史、早產(chǎn)兒、宮內(nèi)感染、新生兒窒息、耳廓畸形和極低體重兒。根據(jù)楊波等人的研究顯示高危因素依次為早產(chǎn)、新生兒高膽紅素血癥、NICU住院時(shí)間≥5 d[8]。由于本次研究樣本量較少,無法做出相關(guān)性研究,但從結(jié)論中可以發(fā)現(xiàn)本次研究中得出的耳聾高危因素占比與相關(guān)研究結(jié)果相似。

    3.2 內(nèi)耳畸形

    前庭導(dǎo)水管擴(kuò)大是最常見的內(nèi)耳畸形類型,診斷標(biāo)準(zhǔn)為高分辨率顳骨CT顯示總腳至前庭水管外口的連線上前庭水管的寬度超過1.5mm[9]。本研究中最常見的畸形是單純性前庭導(dǎo)水管擴(kuò)大,占58.1%(25/43);其次是半規(guī)管畸形占16.3%(7/43);耳蝸畸形占16.3%(7/43)。這與李幼靖等對NSHL聽力損失患者[10]的研究趨勢相同。但本研究的畸形發(fā)生率較低,這可能與本研究的樣本數(shù)量較少有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)單純性前庭導(dǎo)水管擴(kuò)大患者經(jīng)人工耳蝸植入術(shù)后,均獲得良好的助聽效果。另外,在本研究中發(fā)現(xiàn)共同腔畸形2例。此種畸形的患者術(shù)前需進(jìn)行MRI和電誘發(fā)聽覺腦干反應(yīng)(EABR)檢查,從而確認(rèn)是否存在蝸神經(jīng)及前庭神經(jīng),預(yù)估人工耳蝸植入術(shù)后效果。目前該2例患兒暫未行人工耳蝸手術(shù)。

    3.3 耳聾基因檢測技術(shù)

    NGS是在Sanger測序方法的基礎(chǔ)上得到進(jìn)一步發(fā)展和創(chuàng)新的,通過把大量被檢測的模板DNA片段放在芯片上固定,并進(jìn)行雜交結(jié)合通用的DNA引物,利用不同的方法分別控制4種堿基在DNA引物上的延伸,通過檢測延伸反應(yīng)過程或堿基,實(shí)現(xiàn)DNA序列信息的檢測[11]。高通量測序技術(shù)通過增加更多個(gè)體、更多基因編碼區(qū)更深層次的覆蓋度,來獲取準(zhǔn)確性更高的數(shù)據(jù),已成為現(xiàn)階段在基因組水平上發(fā)現(xiàn)致病基因的有效手段。

    3.4 耳聾基因

    根據(jù)數(shù)據(jù)顯示[12],在歐美人群中常見的耳聾基因是 GJB2、SLC26A4、MYO15A、OTOF、CDH23 和TMC1,其中最常見的耳聾基因?yàn)镚JB2。在我國,GJB2、SLC26A4、線粒體基因 mtDNA(A1555G 和C1494T突變)是最為常見的耳聾基因[13]。本次研究GJB2基因突變檢出率為22.1%;SLC26A4基因突變?yōu)?.63%;USH2A基因突變?yōu)?.29%;MYO15A基因突變?yōu)?.82%;CDH23基因突變?yōu)?.41%。這與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。USH2A、MYO15A、CDH23、MYO7A基因突變也有不同程度的檢出。

    3.4.1 GJB2基因

    GJB2基因在普通耳聾群體中檢出率約為15%~25%[14]。本研究發(fā)現(xiàn)47例患者存在GJB2基因單雜合或雙雜合突變,檢出率為22.1%。根據(jù)戴樸教授等研究結(jié)果顯示,在我國GJB2基因檢出率為21.01%[15],而本次研究結(jié)果與戴樸教授等研究結(jié)果相近,且略微高于戴樸教授等的研究。

    本研究發(fā)現(xiàn)GJB2基因純合突變28例,復(fù)合雜合突變19例。其中有8例極重度感音神經(jīng)性聾的患兒行人工耳蝸植入術(shù),術(shù)后獲得良好助聽效果。因此,我們認(rèn)為GJB2基因突變相關(guān)的感音神經(jīng)性耳聾患者行人工耳蝸植入手術(shù)后效果良好。這與相關(guān)研究[16]結(jié)果相一致。

    3.4.2 SLC26A4基因

    本次研究發(fā)現(xiàn)SLC26A4基因突變檢出率僅次于GJB2,檢出率為5.63%。低于戴樸等研究的SLC26A4基因突變檢出率14.5%。究其原因可能是本次研究樣本數(shù)量較戴樸等研究的少,檢測對象重度以上耳聾比例存在差異所致。

    SLC26A4基因突變與單純前庭水管擴(kuò)大和(或)內(nèi)耳畸形有密切的關(guān)系[17]。在我國,約96%的前庭水管擴(kuò)大的患者由SLC26A4基因突變致病。SLC26A4基因突變在人群中的檢出率為20.35%(雙等位基因突變19.43%,單等位基因突變0.92%),SLC26A4基因(c.919-2A>G)突變是中國大前庭水管患者群的熱點(diǎn)突變[18]。本次研究中有12例確診為SLC26A4基因(c.919-2A>G)突變,其中純合突變6例,雜合突變6例,為該樣本人群的熱點(diǎn)突變。本研究中的12例SLC26A4基因突變患兒,其顳骨CT均提示前庭水管擴(kuò)大,這12例患兒甲狀腺無明顯腫大,其中4例行人工耳蝸植入術(shù),術(shù)后預(yù)后良好。

    3.4.3 MYO15A基因

    MYO15A基因突變可以導(dǎo)致常染色體隱性遺傳非綜合征型感音神經(jīng)性耳聾。MYO15A編碼的肌球蛋白XVa可以維持耳蝸毛細(xì)胞內(nèi)肌球蛋白組織結(jié)構(gòu)及毛細(xì)胞靜纖毛的伸長[19]。相關(guān)研究[20]表明N-末端區(qū)域發(fā)生突變會導(dǎo)致肌球蛋白亞型異常,聽力表型為有殘余聽力的非重度極重度感音神經(jīng)性聾。而非N-末端 區(qū) 域(Motor、MyTH4 1、FERM1、SH3、MyTH4 2、FERM2及PDZ結(jié)構(gòu)域)發(fā)生的突變,聽力表型多為先天性或語前性全頻重度-極重度感音神經(jīng)性耳聾。在本研究中有5例MYO15A基因突變患兒為重度以上神經(jīng)性耳聾,有1例為輕度感音神經(jīng)性耳聾。MYO15A基因研究對感音神經(jīng)性聾的診斷以及對感音神經(jīng)性耳聾患兒的聽力干預(yù)具有意義。

    3.4.4 TMC1基因

    在本次研究中發(fā)現(xiàn)一份TMC1基因復(fù)合雜合突變報(bào)告。該基因有2個(gè)突變位點(diǎn),突變位點(diǎn)為c.16+2T>C/c.969C>G。c.16+2T>C導(dǎo)致氨基酸改變,為剪接突變。根據(jù)ACMG指南,該變異初步判定為致病性變異(Pathogenic)。c.969C>G(編碼區(qū)第969號核苷酸由胞嘧啶變異為鳥嘌呤),導(dǎo)致氨基酸改變p.Y323X,為無義突變。根據(jù)ACMG指南,該變異初步判定為致病性變異(Pathogenic)。對于c.969C>G(編碼區(qū)第969號核苷酸由胞嘧啶變異為鳥嘌呤)的突變分析已經(jīng)明確[21],即導(dǎo)致氨基酸改變p.Y323XTCA1無義突變。但是在TMC1基因中發(fā)生了c.16+2T>C變異,剪接突變導(dǎo)致對蛋白產(chǎn)物的影響。因此,我們接下來將進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)來闡明這一問題。

    3.5 干預(yù)方法

    在我院門診確診的3月齡以上的中重度感音神經(jīng)性耳聾患兒,均予以配戴助聽器,干預(yù)期3-6個(gè)月。重度-極重度感音神經(jīng)性耳聾患兒經(jīng)3-6個(gè)月助聽器干預(yù)后未能得到滿意的助聽效果,則排除相關(guān)手術(shù)禁忌后,予以行人工耳蝸植入。絕大多數(shù)聾兒術(shù)后取得較好的助聽效果,但仍有部分聾兒無明顯效果,推測其原因可能與基因突變導(dǎo)致的病變部位有關(guān)。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[22],人工耳蝸植入術(shù)后效果良好的有以下幾個(gè)基因:GJB2、SLC26A4、12SrRNA(MT-RNR1:A1555G、C1494T)、OTOF、CDH23、MYO6、MYO7A、KCNQ1、TMC1、COCH、LOXHD1、MYO15A、TECTA、ACTG1、TMPRSS3;不確定的有:MYH9、POU3F4、PCDH15;植入效果差的有:CHD7、TIMM8A、DFNB59。因此,通過基因檢測,推斷出可能的分子病因,預(yù)測人工耳蝸植入后的效果,為遺傳性聾的早期診斷和個(gè)體化治療提供理論依據(jù),為耳聾患者提供更精準(zhǔn)的醫(yī)學(xué)指導(dǎo)。

    4 結(jié)論

    本研究結(jié)果表明應(yīng)用NGS可檢測耳聾大樣本群體中的相關(guān)基因突變,有助于發(fā)現(xiàn)以及明確新的、非熱點(diǎn)突變位點(diǎn),提高相關(guān)基因突變的檢出率,同時(shí)也將為感音神經(jīng)性耳聾患兒及其家屬提供更全面的遺傳信息。當(dāng)然在臨床診療過程中需同時(shí)關(guān)注內(nèi)耳畸形及耳聾相關(guān)的新生兒高危因素,為遺傳性聾的早期診斷和個(gè)體化治療提供技術(shù)支持,為感音神經(jīng)性耳聾患者提供更精準(zhǔn)的診療依據(jù),并予以及早干預(yù)。

    猜你喜歡
    感音神經(jīng)性耳聾
    感音神經(jīng)性耳聾及針灸治療
    彭順林對神經(jīng)性耳鳴耳聾的治療經(jīng)驗(yàn)
    深刺聽宮治療耳鳴、耳聾驗(yàn)案
    基于“腦腸相通”理論探討調(diào)和胃腸治療感音神經(jīng)性聾的機(jī)理
    不能耽誤的急癥:突發(fā)性耳聾
    不能耽誤的急癥:突發(fā)性耳聾
    讓魚兒自己咬鉤
    快樂語文(2018年31期)2018-03-01 11:22:56
    聚焦超聲治療神經(jīng)性皮炎的效果觀察
    磁共振對感音神經(jīng)性耳聾人工耳蝸術(shù)前診斷的價(jià)值
    馬鈴薯片緩解帶狀皰疹神經(jīng)性疼痛30例
    国产蜜桃级精品一区二区三区| 日韩三级视频一区二区三区| 极品教师在线免费播放| 午夜精品久久久久久毛片777| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 91九色精品人成在线观看| 在线观看66精品国产| 午夜福利高清视频| 国产高清视频在线观看网站| 麻豆成人午夜福利视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 黄色片一级片一级黄色片| 午夜激情av网站| 亚洲男人的天堂狠狠| 99热6这里只有精品| 成人av在线播放网站| 性欧美人与动物交配| 国产激情欧美一区二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久这里只有精品中国| 亚洲精品粉嫩美女一区| 日韩三级视频一区二区三区| 午夜免费观看网址| 亚洲熟女毛片儿| 99国产精品一区二区三区| 国产精品永久免费网站| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产区一区二久久| 久久久国产成人免费| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲男人天堂网一区| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲成人久久性| 超碰成人久久| 99精品在免费线老司机午夜| 成熟少妇高潮喷水视频| 无人区码免费观看不卡| 日本a在线网址| 久久亚洲真实| 免费人成视频x8x8入口观看| 丝袜美腿诱惑在线| 美女黄网站色视频| 精品电影一区二区在线| 一区二区三区激情视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 麻豆国产av国片精品| 色av中文字幕| 午夜两性在线视频| 亚洲男人天堂网一区| 男人的好看免费观看在线视频 | 两个人免费观看高清视频| 日本a在线网址| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 99久久精品国产亚洲精品| 午夜激情福利司机影院| 成人手机av| 精品一区二区三区四区五区乱码| 午夜老司机福利片| 香蕉国产在线看| 香蕉国产在线看| 99热这里只有是精品50| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久精品综合一区二区三区| 日韩有码中文字幕| 亚洲avbb在线观看| 人妻久久中文字幕网| 首页视频小说图片口味搜索| 国产真实乱freesex| 99在线视频只有这里精品首页| 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲人与动物交配视频| 在线观看日韩欧美| 高清在线国产一区| 身体一侧抽搐| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美日韩黄片免| 波多野结衣高清作品| 午夜精品久久久久久毛片777| 黄色毛片三级朝国网站| 精品电影一区二区在线| 亚洲av第一区精品v没综合| 久久草成人影院| 日本熟妇午夜| 国产精品免费一区二区三区在线| 可以在线观看的亚洲视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 日韩av在线大香蕉| 正在播放国产对白刺激| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产v大片淫在线免费观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久久精品欧美日韩精品| 精品无人区乱码1区二区| 91九色精品人成在线观看| 日韩欧美精品v在线| 欧美日韩乱码在线| 天堂影院成人在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 天堂√8在线中文| 女警被强在线播放| 国产亚洲精品av在线| 精华霜和精华液先用哪个| 国产成人精品久久二区二区91| 成人三级做爰电影| 中文字幕高清在线视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 色哟哟哟哟哟哟| 成人三级黄色视频| 九色成人免费人妻av| 日本免费a在线| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 一a级毛片在线观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产在线观看jvid| 在线免费观看的www视频| АⅤ资源中文在线天堂| 久久精品影院6| 嫩草影院精品99| 啪啪无遮挡十八禁网站| e午夜精品久久久久久久| 一区二区三区国产精品乱码| 无遮挡黄片免费观看| 久久久久久久精品吃奶| 可以在线观看毛片的网站| 神马国产精品三级电影在线观看 | 老司机深夜福利视频在线观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 一级作爱视频免费观看| 亚洲国产精品合色在线| 99在线人妻在线中文字幕| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 中国美女看黄片| 久久久久国产一级毛片高清牌| 精品第一国产精品| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 精品人妻1区二区| 一夜夜www| 国产精品 欧美亚洲| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久香蕉国产精品| 国产精品亚洲av一区麻豆| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 亚洲专区中文字幕在线| 岛国视频午夜一区免费看| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 香蕉丝袜av| 母亲3免费完整高清在线观看| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| svipshipincom国产片| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲五月天丁香| 久久久水蜜桃国产精品网| 免费av毛片视频| 国产不卡一卡二| 国产午夜精品久久久久久| 岛国在线免费视频观看| 18美女黄网站色大片免费观看| 91国产中文字幕| 欧美3d第一页| 999久久久精品免费观看国产| 九九热线精品视视频播放| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久 成人 亚洲| 老司机在亚洲福利影院| 日本黄大片高清| 99re在线观看精品视频| 亚洲av美国av| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲五月天丁香| 久9热在线精品视频| 欧美大码av| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产高清视频在线播放一区| 国产野战对白在线观看| 免费在线观看完整版高清| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 嫩草影院精品99| 1024视频免费在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 成人午夜高清在线视频| 成人精品一区二区免费| 精品乱码久久久久久99久播| 国产v大片淫在线免费观看| 在线a可以看的网站| 久久99热这里只有精品18| 日韩三级视频一区二区三区| 视频区欧美日本亚洲| 国产一区二区三区在线臀色熟女| cao死你这个sao货| 亚洲avbb在线观看| 国内精品久久久久精免费| 久久香蕉精品热| 嫩草影院精品99| 久久午夜综合久久蜜桃| 色噜噜av男人的天堂激情| 成年人黄色毛片网站| 亚洲av成人一区二区三| 99国产综合亚洲精品| 精品熟女少妇八av免费久了| 白带黄色成豆腐渣| 国产精品av久久久久免费| 一本精品99久久精品77| 搡老岳熟女国产| 麻豆成人午夜福利视频| 熟女电影av网| 一个人免费在线观看电影 | 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲成人久久性| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 国产成人系列免费观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| av福利片在线观看| 天天添夜夜摸| 欧美最黄视频在线播放免费| 18禁国产床啪视频网站| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 窝窝影院91人妻| 999久久久精品免费观看国产| 国产精品免费一区二区三区在线| cao死你这个sao货| 看片在线看免费视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产日本99.免费观看| 日本黄色视频三级网站网址| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲欧美日韩东京热| 久久香蕉国产精品| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产又色又爽无遮挡免费看| aaaaa片日本免费| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 岛国在线免费视频观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲国产中文字幕在线视频| 好男人电影高清在线观看| 亚洲精华国产精华精| 中文资源天堂在线| 亚洲国产欧美人成| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 宅男免费午夜| 久久伊人香网站| 午夜福利在线在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久香蕉国产精品| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 在线观看免费视频日本深夜| 他把我摸到了高潮在线观看| 极品教师在线免费播放| 99国产精品一区二区蜜桃av| 青草久久国产| 国产成人av激情在线播放| 我的老师免费观看完整版| 他把我摸到了高潮在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 天堂影院成人在线观看| 国产精品免费视频内射| 久久精品国产清高在天天线| 叶爱在线成人免费视频播放| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 精品电影一区二区在线| 中文字幕人妻丝袜一区二区| а√天堂www在线а√下载| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产精品一及| 精品久久久久久久末码| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产熟女xx| 91字幕亚洲| 久久久精品欧美日韩精品| 成人国语在线视频| www日本在线高清视频| 香蕉av资源在线| 欧美成人免费av一区二区三区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 好男人在线观看高清免费视频| 国产精品一区二区精品视频观看| av视频在线观看入口| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 中文资源天堂在线| 成在线人永久免费视频| 在线国产一区二区在线| 久久久国产精品麻豆| 日韩大尺度精品在线看网址| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 两性夫妻黄色片| 精品一区二区三区av网在线观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99久久无色码亚洲精品果冻| 特大巨黑吊av在线直播| 脱女人内裤的视频| 999久久久国产精品视频| 88av欧美| 日本 欧美在线| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲国产精品999在线| 国产日本99.免费观看| 18禁观看日本| 热99re8久久精品国产| 日本黄大片高清| 一本久久中文字幕| 曰老女人黄片| 国产精品一区二区三区四区久久| 午夜精品在线福利| 91大片在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 制服丝袜大香蕉在线| 首页视频小说图片口味搜索| 午夜激情av网站| 久久亚洲精品不卡| 男插女下体视频免费在线播放| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 免费在线观看影片大全网站| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产麻豆成人av免费视频| 国产人伦9x9x在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲国产欧美一区二区综合| 成人欧美大片| 人人妻人人澡欧美一区二区| 一个人免费在线观看的高清视频| aaaaa片日本免费| 午夜日韩欧美国产| 日韩成人在线观看一区二区三区| 性色av乱码一区二区三区2| 国产成人aa在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 日韩欧美国产一区二区入口| 老汉色av国产亚洲站长工具| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产免费男女视频| av福利片在线| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 黄色视频不卡| 中出人妻视频一区二区| 久久婷婷成人综合色麻豆| 成在线人永久免费视频| 制服人妻中文乱码| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 99久久精品国产亚洲精品| 在线a可以看的网站| 黄片小视频在线播放| 亚洲人成电影免费在线| 国语自产精品视频在线第100页| 啦啦啦免费观看视频1| 毛片女人毛片| 中文字幕久久专区| 91字幕亚洲| 大型av网站在线播放| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久久久亚洲av毛片大全| 51午夜福利影视在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 我的老师免费观看完整版| 极品教师在线免费播放| 国产精品永久免费网站| 女同久久另类99精品国产91| 少妇被粗大的猛进出69影院| 免费在线观看黄色视频的| 中文资源天堂在线| 午夜福利欧美成人| 俺也久久电影网| 99久久99久久久精品蜜桃| 丰满人妻一区二区三区视频av | 99在线视频只有这里精品首页| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 精品久久久久久,| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 成人av一区二区三区在线看| 嫩草影院精品99| 久久久久久久久免费视频了| 一级a爱片免费观看的视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲,欧美精品.| 女人被狂操c到高潮| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 他把我摸到了高潮在线观看| 1024视频免费在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 日韩欧美国产一区二区入口| 日韩欧美免费精品| 一级毛片精品| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久久久久久精品吃奶| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲国产精品sss在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 999久久久国产精品视频| 国产爱豆传媒在线观看 | 999精品在线视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 男人舔女人的私密视频| 少妇的丰满在线观看| 亚洲片人在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产精品,欧美在线| 中出人妻视频一区二区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 精品久久久久久久末码| 特级一级黄色大片| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产成人啪精品午夜网站| 国产高清激情床上av| 中文字幕最新亚洲高清| 国产欧美日韩精品亚洲av| 中文字幕av在线有码专区| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 欧美日本视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产97色在线日韩免费| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 一个人免费在线观看电影 | 99久久99久久久精品蜜桃| 国产精品一区二区三区四区久久| 怎么达到女性高潮| 听说在线观看完整版免费高清| 人人妻人人看人人澡| 九色成人免费人妻av| 九色国产91popny在线| 在线视频色国产色| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 午夜两性在线视频| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲中文av在线| 91老司机精品| av国产免费在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 精品国产亚洲在线| 久久精品成人免费网站| 日韩精品中文字幕看吧| 大型av网站在线播放| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 免费看美女性在线毛片视频| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲激情在线av| 黄色丝袜av网址大全| АⅤ资源中文在线天堂| 无限看片的www在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 午夜福利高清视频| 老司机福利观看| 岛国视频午夜一区免费看| 久久久久久久久中文| 岛国在线免费视频观看| 国产午夜福利久久久久久| 很黄的视频免费| av欧美777| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久久精品欧美日韩精品| 国产亚洲精品av在线| 黄色视频,在线免费观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 欧美午夜高清在线| 精品欧美一区二区三区在线| 国产高清视频在线播放一区| av超薄肉色丝袜交足视频| 国产精品亚洲美女久久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 99久久精品热视频| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲专区字幕在线| 中文字幕熟女人妻在线| 国产区一区二久久| 熟女电影av网| 日韩高清综合在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲av熟女| 欧美日韩黄片免| 亚洲免费av在线视频| 在线永久观看黄色视频| 99国产精品99久久久久| 夜夜爽天天搞| 亚洲成人久久爱视频| 丁香欧美五月| 精品国产乱子伦一区二区三区| 精品国产乱码久久久久久男人| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 桃红色精品国产亚洲av| 男女午夜视频在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 午夜福利免费观看在线| 久热爱精品视频在线9| 黄色片一级片一级黄色片| avwww免费| xxx96com| 制服丝袜大香蕉在线| 一区二区三区激情视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 在线免费观看的www视频| 久久精品国产综合久久久| 国模一区二区三区四区视频 | 国产精品免费一区二区三区在线| 欧美乱码精品一区二区三区| 俺也久久电影网| 最好的美女福利视频网| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲九九香蕉| 999久久久精品免费观看国产| 首页视频小说图片口味搜索| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 两性夫妻黄色片| 精品久久久久久,| 国产在线精品亚洲第一网站| 一夜夜www| 老司机靠b影院| 人妻久久中文字幕网| 亚洲精品粉嫩美女一区| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 无人区码免费观看不卡| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲国产欧美网| www.www免费av| 日本五十路高清| 正在播放国产对白刺激| 国产精品av久久久久免费| 亚洲国产高清在线一区二区三| 女人被狂操c到高潮| 亚洲18禁久久av| 岛国在线观看网站| 女警被强在线播放| 免费av毛片视频| 久久久久免费精品人妻一区二区| 两性夫妻黄色片| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲 欧美一区二区三区| 99久久无色码亚洲精品果冻| 欧美又色又爽又黄视频| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 性色av乱码一区二区三区2| 两个人的视频大全免费| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产亚洲欧美在线一区二区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产视频内射| 男女床上黄色一级片免费看| 色老头精品视频在线观看| 国产成人av教育| 国产私拍福利视频在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产真实乱freesex| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 欧美日本视频| 午夜精品在线福利| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 久久精品影院6| 亚洲色图av天堂| 午夜激情福利司机影院| 在线免费观看的www视频| 9191精品国产免费久久| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久性视频一级片| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产麻豆成人av免费视频| 村上凉子中文字幕在线| 国产69精品久久久久777片 | 久久亚洲精品不卡| 欧美国产日韩亚洲一区| 久久这里只有精品中国| 91大片在线观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 人人妻人人看人人澡| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 色精品久久人妻99蜜桃| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 黄片大片在线免费观看| 午夜视频精品福利| 免费在线观看成人毛片| 一级a爱片免费观看的视频| 日本在线视频免费播放| 免费高清视频大片| 99精品在免费线老司机午夜| 久久中文字幕人妻熟女| 中文亚洲av片在线观看爽| 精品欧美国产一区二区三|