植物酵素抑菌性的初步研究

伊媛媛 范翠翠

摘 要：目的：本研究以植物乳桿菌為發(fā)酵菌，以不同植物配方發(fā)酵得到的6種酵素原液為研究對(duì)象。通過抑菌試驗(yàn)觀察這6種酵素對(duì)常見致病菌金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌的抑菌作用。研究酵素的抑菌作用，對(duì)酵素的功效研究有一定的啟發(fā)和借鑒價(jià)值。

關(guān)鍵詞：植物乳桿菌;酵素;抑菌性

植物酵素是以新鮮的蔬菜、水果、糙米、藥食同源中藥等植物為原料，加入酵母菌或乳酸菌等發(fā)酵菌株進(jìn)行發(fā)酵而產(chǎn)生的富含糖、有機(jī)酸、礦物質(zhì)、維生素等多種營(yíng)養(yǎng)成分的混合發(fā)酵液，又稱為植物發(fā)酵液（plant fermented extract，PFE），具有調(diào)節(jié)腸道菌群、潤(rùn)腸通便等作用。植物乳桿菌是乳酸菌的一種，厭氧或者兼性厭氧，桿狀。許多乳酸菌在生長(zhǎng)代謝過程中，會(huì)產(chǎn)生乳酸、乙酸等有機(jī)酸和過氧化氫，此外還能產(chǎn)生多種具有抑菌或殺菌生物活性的細(xì)菌素，在抑制多種病原微生物和食物腐敗菌等方面具有重要作用。本文主要研究經(jīng)過植物乳桿菌發(fā)酵得到的酵素是否有抑菌作用[1-2]。

1 材料與設(shè)備

1.1 材料

6種植物酵素：桑葚酵素、果蔬膳食纖維酵素、愛醒植物酵素、玫瑰酵素、老姜酵素和五白植物酵素。來自御氏生物技術(shù)有限公司。

1.2 供試菌種

大腸桿菌[ATCC25922]、金黃色葡萄球菌[ATCC6538]，白色念珠菌[ATCC10231]取自漢臣氏（沈陽）兒童制品有限公司。

1.3 試劑和設(shè)備

酵母粉、胰蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、1 mol/L NaOH、1 mol/L HCl、蒸餾水、電子天平、超凈工作臺(tái)、移液槍、高壓蒸汽滅菌鍋與恒溫培養(yǎng)箱等。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 菌液制備

將分別裝有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌的凍存管在水浴鍋中迅速融化，用移液器吸取適量濃菌液加入液體培養(yǎng)基中，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間，備用。

2.2 牛津杯法抑菌實(shí)驗(yàn)

2.2.1 含菌平板制備

稱取酵母粉、胰蛋白胨、氯化鈉與瓊脂粉適量，制成液體培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)pH值至7.1±0.2，高壓滅菌后備用。用生理鹽水梯度稀釋濃菌液，得到106 CFU/mL的菌懸液，備用。將15～20 mL冷卻至46 ℃左右的液體培養(yǎng)基倒入平皿中，待凝固后，加入菌懸液10 μL，均勻涂布。

2.2.2 測(cè)定抑菌效果

用鑷子將無菌牛津杯立在涂布有菌液的平皿中，每個(gè)平皿中分散放置3個(gè)，其中2個(gè)牛津杯中加入200 μL樣品，并將第三個(gè)牛津杯中加入同體積的無菌培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。在培養(yǎng)皿上做好標(biāo)記，置于37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束后用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈的直徑，并做好記錄。

3 結(jié)果與分析

6種植物酵素對(duì)供試菌的抑制效果如表1所示。

由表1可知，6種酵素對(duì)白色念珠菌均沒有抑制作用。

其中玫瑰酵素和老姜酵素對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌沒有抑制作用。

6種酵素中有4種酵素對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌有一定的抑菌作用，對(duì)大腸桿菌的抑菌作用的強(qiáng)弱為：果蔬膳食纖維酵素>愛醒植物酵素>五百植物酵素>桑葚酵素，對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌作用的強(qiáng)弱關(guān)系為：愛醒植物酵素>果蔬膳食纖維酵素>桑葚酵素>五白植物酵素[3]。

4 結(jié)論

酵素在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的生物活性成分包括有機(jī)酸、多肽、寡糖、維生素、氨基酸、礦物元素與抗氧化物等，酵素抑菌作用與其抑菌成分和抑菌機(jī)理密切相關(guān)[4]。由于原材料、生產(chǎn)工藝和處理方法的不同，試驗(yàn)結(jié)果存在差異。本文通過對(duì)酵素抑菌作用進(jìn)行初步研究，為今后酵素功效相關(guān)研究提供了一份參考。

參考文獻(xiàn)

[1]全永亮.泡菜中植物乳桿菌的鑒定及其發(fā)酵液抑菌活性研究[J].中國(guó)調(diào)味品，2017，42（3）：64-68.

[2]賀娜，徐田，耿樹香，等.幾種自制植物酵素功能性成分測(cè)定及感官評(píng)價(jià)[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020，48（1）：208-210..

[3]姚沛琳，張凱迪，張新劍，等.一株植物乳桿菌的抑菌物質(zhì)性質(zhì)研究及抑菌條件優(yōu)化[J].赤峰學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2020，36（1）：70-73.

[4]呂詩文，葉芳，吳國(guó)輝，等.苦瓜抑菌作用的研究進(jìn)展[J].農(nóng)產(chǎn)品加工，2020（1）：84-86.

作者簡(jiǎn)介：伊媛媛（1986—），女，遼寧鐵嶺人，大專。研究方向：微生物檢測(cè)。