王薪淇,周旭東,周德龍,鄭淑波,高 嵩,董亞琳,路 明
(1.吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,吉林 長春130033; 2.吉林吉農(nóng)高新技術(shù)發(fā)展股份有限公司,吉林 公主嶺136100)
吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院于2000年開始,根據(jù)特用玉米市場需求及產(chǎn)業(yè)整體發(fā)展方向,采用“母高抗、父高質(zhì)”的組配思路進行雜交組配,以“一高兩優(yōu)三抗”,即產(chǎn)量高、商品性優(yōu)、品質(zhì)優(yōu)、抗病蟲、抗低溫和抗藥害為篩選原則,開展了吉農(nóng)糯系列玉米種質(zhì)創(chuàng)新及新品種選育工作。創(chuàng)制了JNX系列(JNX6、JNX1102、BNSS、JNX1201和JNX2402等)糯玉米骨干自交系,育成吉農(nóng)糯4號、吉農(nóng)糯14號和吉農(nóng)糯24號等加工型糯玉米品種和吉農(nóng)糯7號、吉農(nóng)糯8號、吉農(nóng)糯16號和吉農(nóng)糯26號等鮮食糯玉米品種[1-5]。
近年來,分子標(biāo)記技術(shù)輔助作物種質(zhì)類群劃分的研究工作取得突破進展,相比于傳統(tǒng)的經(jīng)驗分群法,基于分子標(biāo)記技術(shù)的類群劃分和遺傳基礎(chǔ)解析更為準(zhǔn)確和高效[6-8]。研究通過SNP分子標(biāo)記技術(shù)對吉農(nóng)糯系列糯玉米自交系進行基因分型,以期明確各骨干系間遺傳基礎(chǔ)差異,劃分類群并建立吉農(nóng)糯系列玉米自交系背景標(biāo)記庫。
研究選取吉農(nóng)糯系列糯玉米骨干系及京科糯2000和墾粘1號父母本在內(nèi)的15份糯玉米自交系作為參試材料,名稱及來源如表1所示。
DNA提?。?~4期取樣本葉片,采用CTAB法提取基因組DNA用于基因分型[9]。
基因分型:研究應(yīng)用石家莊市博瑞迪生物技術(shù)有限公司GTBS基因分型技術(shù),采取基于GenoPlexs多重PCR手段的1K SNP進行基因分型[10]。
表1 15份糯玉米自交系名稱及血緣
PCA分析采用GAPTI軟件進行分析,聚類分析采用MEGA軟件進行分析,數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用EXCEL軟件進行[11-12]。
對15個糯玉米自交系進行聚類分析,如圖1所示。結(jié)果表明,京科糯2000父本BN2和吉農(nóng)糯14號母本JNX1201單獨劃分為A類群;吉農(nóng)糯24號母本JNX2487和吉農(nóng)糯4號父本BNSS被歸類至B類群;其余自交系包含在C類群中。
主成分分析(PCA)結(jié)果如圖2所示。結(jié)果表明,鮮食糯玉米品種吉農(nóng)糯7號和吉農(nóng)糯8號母本集中于A類群中;聚類分析中的A、B兩類群中的4個自交系(BN2、JNX1201、JNX2487和BNSS)被劃分至B群中;吉農(nóng)糯8號母本與京科糯2000母本JN6(京糯6)及墾粘1號父本Nuo2(糯2)相對距離較近,歸為C群;墾粘1母本Nuo1、吉農(nóng)糯7父本和加工型糯玉米父本系(JNX1202、JNX2402)等黃色大粒型自交系被劃分至D類群。由主成分分析結(jié)果可知,吉農(nóng)糯系列鮮食糯玉米母本系衍生為一類種質(zhì),吉農(nóng)糯系列加工型糯玉米自交系趨于兩個衍生方向,一類是近墾粘1號母本Nuo1的父本群,一類是趨近于BN2的母本群,兩群間遺傳距離較遠(yuǎn)。A、B、C和D類群間除A群×B群外,其余類群組合方式均有代表品種出現(xiàn),如C群×B群(京科糯2000)、A群×C群(吉農(nóng)糯8)等,說明該劃分結(jié)果具有代表性和準(zhǔn)確性。
對6個糯玉米品種(吉農(nóng)糯7號、吉農(nóng)糯8號、吉農(nóng)糯14號、吉農(nóng)糯24號、京科糯2000及墾粘1號)的親本間基因型差異進行分析,如圖3所示,結(jié)果如表2所示。由表2結(jié)果可知,6個品種平均基因型差異比例為0.340,兩個加工型糯玉米品種吉農(nóng)糯14號和吉農(nóng)糯24號基因型差異均大于其余4個鮮食玉米品種,說明加工型糯玉米需要更大的雜種優(yōu)勢來滿足其對產(chǎn)量的需求。相比而言,鮮食糯玉米吉農(nóng)糯7號和吉農(nóng)糯8號親本間基因型差異略小于京科糯2000和墾粘1號,吉農(nóng)糯8號親本差異最小,為0.314。
當(dāng)前,借助分子標(biāo)記技術(shù),糯玉米種質(zhì)的遺傳基
表2 6個糯玉米品種親本間基因型差異
礎(chǔ)得以解析,分子標(biāo)記類型也由SSR過渡至高密度SNP[13-18]?;诙嘀豍CR的1K SNP分型技術(shù)可實現(xiàn)單管內(nèi)2 000重以上高度均一的PCR擴增反應(yīng),適用于單樣本50~5 000位點的基因分型檢測,成本低且效率高,在種質(zhì)遺傳基礎(chǔ)解析及類群劃分中性價比突出[9]。
研究結(jié)果表明近年來吉農(nóng)糯系列糯玉米品種親本的選育方向及衍化趨勢;吉農(nóng)糯鮮食母本群×墾粘1母本衍生群和吉農(nóng)糯加工型母本群×墾粘1母本衍生群是吉農(nóng)糯系列品種主要應(yīng)用的雜優(yōu)模式,進一步驗證了通過觀察田間表型和分析選育經(jīng)過來判斷育種材料類群歸屬的準(zhǔn)確性,為高效利用吉農(nóng)糯系列糯玉米自交系雜種優(yōu)勢規(guī)律、理清雜交選育思路提供理論支撐。此外,本研究基于SNP標(biāo)記的基因分型結(jié)果可作為后期分子標(biāo)記輔助選擇、群體改良、輪回選擇等育種工作的背景指紋,用以評判和界定分離后代的遺傳背景及變異幅度。