氣相色譜法同時測定火龍果中三唑酮·異菌脲和醚菌酯殘留

義國通 陸燕 農(nóng)時鋒

摘要 [目的]建立氣相色譜同時測定火龍果中三唑酮、異菌脲和醚菌酯殘留的分析方法。[方法]樣品用乙腈提取，經(jīng)弗羅里夕柱凈化，氣相色譜檢測，外標(biāo)法定量。[結(jié)果]在0.05～0.50 mg/kg添加水平范圍內(nèi)，三唑酮、異菌脲和醚菌酯的平均回收率在89.2%～104.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在5.7%～8.8%（n=6）;檢出限分別為0.001、0.002、0.006 mg/kg。[結(jié)論]該方法前處理簡便快捷，具有靈敏度高、檢出限低和重現(xiàn)性好的特點(diǎn)，可滿足火龍果中三唑酮、異菌脲和醚菌酯殘留檢測的要求。

關(guān)鍵詞 氣相色譜;三唑酮;異菌脲;醚菌酯;殘留;火龍果

中圖分類號 TS207.5+3 ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

文章編號 0517-6611（2020）10-0171-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.10.046

Abstract [Objective] The research aimed to establish an analytical method for the simultaneous determination of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl residues in Hylocereus undatus by gas chromatography.[Method]The samples were extracted with acetonitrile， purified by Florissian column， detected by gas chromatography， and quantified by external standard method.[Result]The average recoveries of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl were 89.2%-104.6% when the spiked level range from 0.05 to 0.50 mg/kg， with relative standard deviations （RSD） in the range of 5.7%-8.8% （n=6）.The limit of detection of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl were 0.001，0.002，0.006 mg/kg，respectively.[Conclusion]The method has the advantages of simple and fast pretreatment， high sensitivity， low detection limit and good reproducibility， and can meet the requirements for the detection of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl residues in Hylocereus undatus.

Key words Gas chromatography （GC）;Triadimefon;Iprodione;Kresoximmethyl;Residues;Hylocereus undatus

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火龍果（Hylocereus undatus Britt.）又名紅龍果，是原產(chǎn)于中美洲的熱帶亞熱帶水果。20世紀(jì)90年代初引進(jìn)我國南方試種，經(jīng)改良后不斷推廣栽培。隨著種植面積的不斷擴(kuò)大，火龍果病害發(fā)生日趨嚴(yán)重，其常見病害有莖腐病、軟腐病、炭疽病、潰瘍病、黑斑病等，這些病害通常依賴殺菌劑進(jìn)行防治[1-2]。三唑酮（triadimefon）、異菌脲（iprodione）和醚菌酯（kresoxim-methyl）是目前常用殺菌農(nóng)藥，分別屬于三唑類、二甲酰亞胺類和甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑。這3種農(nóng)藥均為高效、低毒、內(nèi)吸性強(qiáng)、持效期長的廣譜性殺菌劑，在農(nóng)業(yè)中廣泛應(yīng)用于致病菌引起的病害防治[3]。

目前，三唑酮、異菌脲和醚菌酯殘留常用的檢測方法有氣相色譜法（GC）[4-6]、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）[7-9]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）[10-11]、液相色譜法（LC）[12-14]和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）[15-17]，但鮮見有利用氣相色譜法同時測定火龍果中三唑酮、異菌脲和醚菌酯殘留的報道。該試驗采用乙腈提取、弗羅里夕柱凈化，氣相色譜電子捕獲檢測器（GC-ECD）檢測，建立同時測定火龍果中三唑酮、異菌脲和醚菌酯殘留量的方法。

1 材料與方法

1.1 儀器

7890A氣相色譜儀（美國Agilent公司）;L530離心機(jī)（湖南湘儀公司）;T25高速分散機(jī)（德國IKA公司）;EH20D電熱板（北京萊伯泰科公司）;N-EVAP-112氮吹儀（美國Organomation公司）;VORTEX-GENIE2漩渦混勻器（美國SI公司）。

1.2 試劑 三唑酮、異菌脲、醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 mg/L）均購于天津阿爾塔科技公司;乙腈、丙酮、正己烷均為美國TEDIA公司色譜純試劑;弗羅里夕固相萃取柱、復(fù)合石墨胺基柱均為美國Agilent公司生產(chǎn);氯化鈉為分析純試劑。

1.3 樣品前處理

1.3.1 樣品提取。

準(zhǔn)確稱取20.00 g制備好的火龍果樣品于100 mL螺口塑料離心管中，加入40.0 mL乙腈，于分散機(jī)上10 000 r/min勻漿1 min后加入7 g氯化鈉繼續(xù)勻漿1 min，然后以5 000 r/min離心5 min，取10.00 mL上清液于50 mL燒杯中，在70 ℃下蒸發(fā)近干，加入3 mL正己烷待凈化。

1.3.2 樣品凈化。依次用丙酮與正己烷（1∶9）混合液5 mL、正己烷5 mL預(yù)淋洗活化固相萃?。⊿PE）柱，待溶劑液面到達(dá)固相吸附劑表面時，立即加入“1.3.1”中待凈化溶液，用15 mL 比色管收集洗脫液，用5 mL丙酮與正己烷（1∶9）混合液沖洗燒杯后淋洗SPE柱，并重復(fù)1次。將收集完淋洗液的比色管置于氮吹儀上50 ℃氮吹至溶液小于5 mL，待比色管冷卻至室溫后用正己烷定容至5.0 mL，在漩渦混勻器上混勻，裝入樣品瓶待測。

1.4 氣相色譜條件

色譜柱：DB-17MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）;進(jìn)樣口溫度：250 ℃;分流比：10∶1;初始溫度150 ℃，保持2 min，以10 ℃/min的速率升至280 ℃，保持5 min;載氣：高純氮;柱流量：1.5 mL/min;檢測器溫度：320 ℃;尾吹氣流量：60 ?mL/min;進(jìn)樣量1 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

分別選取乙腈、丙酮、正己烷作為提取溶劑，以火龍果加標(biāo)樣品回收率為指標(biāo)，比較不同溶劑對3種殺菌劑的提取效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乙腈提取3種農(nóng)藥加標(biāo)回收率都在80%以上;丙酮提取時存在回收率偏高問題（大于120%），且雜峰較多影響測定;正己烷提取時有回收率低于80%現(xiàn)象。因此，該試驗選取乙腈作為提取溶劑。

2.2 凈化柱的選擇 該試驗選取弗羅里夕柱（Florisil）、復(fù)合石墨胺基柱（Carbon/NH2）作為凈化柱，以對火龍果樣品凈化效果和加標(biāo)回收率為考察指標(biāo)，比較這2種常見固相萃取柱的凈化效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)2種固相萃取柱凈化后，加標(biāo)樣品中各添加組分都能很好出峰，樣品基質(zhì)干擾較少，3個不同水平（0.05、0.10、0.50 mg/kg）的加標(biāo)回收率結(jié)果見圖1。由圖1可見，三唑酮和異菌脲的加標(biāo)回收率均在80%以上，且相差不大;醚菌酯經(jīng)弗羅里夕柱凈化后的回收率都在80%以上，而過復(fù)合石墨胺基柱后存在回收率低于80%的情況，且整體比過弗羅里夕柱的回收率偏低。因此該試驗最終選擇弗羅里夕柱（Florisil）作為凈化柱。

2.3 方法線性范圍和檢出限

分別配制0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/L濃度的3種殺菌劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“1.4”條件測定，以各農(nóng)藥峰面積（Y）對其質(zhì)量濃度（X，mg/L）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，將標(biāo)液用樣品基質(zhì)稀釋以3倍信噪比（S/N=3）測定檢出限（LOD）。結(jié)果表明（表1），在0.01～1.00 mg/L 濃度范圍內(nèi)三唑酮、異菌脲和醚菌脂這3種殺菌劑線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)（r）均大于0.999，檢出限分別為0.001、0.002、0.006 mg/kg。

2.4 方法回收率和精密度?

稱取火龍果空白樣品，分別添加3個不同濃度（0.05、0.10、0.50 mg/kg）的3種殺菌劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“1.3”方法提取、凈化和檢測，每個水平做6份平行試驗，計算各添加水平的回收率和精密度，結(jié)果見表2。由表2可見，在3個添加水平下，3種殺菌劑的平均回收率在89.2%～104.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為5.7%～8.8%，說明該試驗方法具有較好的準(zhǔn)確度和精密度，能夠滿足日常檢測分析需求。圖2為火龍果空白樣品和加標(biāo)樣品的色譜圖。

3 結(jié)論

該研究建立了氣相色譜電子捕獲檢測器（GC-ECD）同時測定火龍果中三唑酮、異菌脲及醚菌酯3種殺菌劑殘留的方法。該方法前處理簡便快捷，具有靈敏度高、檢出限低及重現(xiàn)性好的特點(diǎn)，各項技術(shù)指標(biāo)都滿足果蔬中農(nóng)藥殘留量的分析要求，適用于火龍果樣品中3種殺菌劑的快速定性定量檢測。

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