不同病理類(lèi)型胃息肉幽門(mén)螺桿菌感染及其與黏膜組織內(nèi)HIF-1α表達(dá)的相關(guān)性

陳光遠(yuǎn)，劉星群，王秀艷

(內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院體檢科，呼和浩特 010017)

胃息肉是臨床常見(jiàn)的由于黏膜或腺體上皮過(guò)度增生所產(chǎn)生的良性腫瘤，其具有癌變傾向，其中腺瘤性息肉癌變性最高。依據(jù)病理組織學(xué)特征，胃息肉可分為腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底腺息肉及增生性息肉[1-2]。目前，關(guān)于胃息肉的發(fā)病原因尚未完全明確。研究顯示，幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)感染與胃息肉有一定聯(lián)系[3]。臨床上，胃鏡下胃息肉的檢出率并不高，僅為1.2%～5.0%[4]。部分上消化道疾病的發(fā)生與Hp感染關(guān)系密切，為胃十二指腸潰瘍及慢性胃炎的主要致病因素；同時(shí)有研究證實(shí)，Hp感染與胃癌、胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴癌的發(fā)生密切相關(guān)[5]。缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)屬于氧依賴(lài)性基因表達(dá)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子家族，同時(shí)也是缺氧時(shí)血管所形成的核心調(diào)控因子。在機(jī)體胃黏膜炎癥發(fā)展過(guò)程中，Hp感染所引起氧自由基對(duì)胃黏膜長(zhǎng)期慢性刺激形成低氧環(huán)境，能激活HIF-1α，而HIF-1α又能激活血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，加速微血管產(chǎn)生與細(xì)胞增殖。腺瘤性息肉已被認(rèn)為是癌前疾病之一，有學(xué)者認(rèn)為增生性息肉也可轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒阅[瘤，內(nèi)鏡下所觀察到的胃底腺息肉可能是散發(fā)性的，也可能與家族性腺瘤性息肉病相關(guān)，散發(fā)性胃底腺息肉的惡化轉(zhuǎn)化風(fēng)險(xiǎn)小，且極少發(fā)生異型增生，但與家族性腺瘤性息肉病相關(guān)的胃底腺息肉，其異型增生可高達(dá)25%～41%[6]。本研究旨在分析不同病理類(lèi)型胃息肉Hp感染及其與黏膜組織內(nèi)HIF-1α表達(dá)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年2月至2019年2月在內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院接受治療且經(jīng)胃鏡檢測(cè)確診為胃息肉的124例患者作為胃息肉組，其中腺瘤性息肉10例、炎性息肉19例、胃底腺息肉33例、增生性息肉62例。選取同期100例慢性胃炎患者作為胃炎組。胃息肉組男75例、女49例，年齡25～70歲，平均(51±5)歲。胃炎組男56例、女44例，年齡22～72歲，平均(50±5)歲。兩組患者的性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①胃息肉經(jīng)組織病理學(xué)及胃鏡檢測(cè)確診，慢性胃炎經(jīng)胃鏡檢測(cè)與臨床表征確診；②首次行胃鏡檢測(cè)；③無(wú)胃鏡檢測(cè)禁忌證者；④患者或家屬簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①胃鏡檢測(cè)合并癌變、潰瘍及糜爛者；②近2周使用過(guò)質(zhì)子泵抑制劑或H2受體阻滯劑等抑酸劑；③近4周使用過(guò)抗菌藥物或鉍劑者。

1.3方法 兩組患者的胃黏膜組織行組織活檢及改良吉姆薩染色法鏡檢，檢測(cè)其Hp感染情況及胃黏膜組織內(nèi)HIF-1α信使RNA(messenger RNA，mRNA)的表達(dá)。采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)HIF-1α蛋白表達(dá)，常規(guī)提取細(xì)胞總蛋白，上樣電泳，80 V電壓，溴酚藍(lán)染料至分離膠提高電壓為100 V，分離膠下泳出溴酚藍(lán)結(jié)束電泳。聚偏二氟乙烯膜內(nèi)進(jìn)行蛋白質(zhì)電轉(zhuǎn)移，30 mA恒流，持續(xù)80 min。5% TBST(Tris-buffered saline and Tween)脫脂奶粉封閉聚偏二氟乙烯膜，震蕩50 min。封閉結(jié)束后洗膜3次，每次10 min，膜移至雜交袋，置入漂洗液稀釋抗體，孵育過(guò)夜。洗膜3次，每次10 min，置入過(guò)氧化物酶標(biāo)記二抗，震蕩50 min。在二抗中將聚偏二氟乙烯膜溫育6 min，依次曝光、顯影、定影。清水沖洗，晾干掃描，利用IPP軟件對(duì)掃描圖像目的條帶行灰度分析。

1.4觀察指標(biāo) 比較兩組患者的Hp感染率，胃息肉組患者不同部位、不同病理類(lèi)型胃息肉的Hp感染情況；比較兩組患者胃黏膜組織內(nèi)HIF-1α蛋白與mRNA的表達(dá)；不同病理類(lèi)型胃息肉Hp感染與黏膜組織內(nèi)HIF-1α表達(dá)的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者的Hp感染率比較 胃息肉組的Hp感染率為48.39%(60/124)，胃炎組為79.00%(79/100)，胃息肉組的Hp感染率低于胃炎組(χ2=6.182，P=0.006)。

2.2胃息肉組患者不同部位、不同病理類(lèi)型胃息肉的Hp感染情況 在胃息肉不同部位中，胃竇的Hp感染率為62.96%(34/54)，賁門(mén)為36.36%(4/11)，胃角為40.00%(2/5)，胃體為40.00%(12/30)，胃底為33.33%(8/24)。在不同病理類(lèi)型的胃息肉中，腺瘤性息肉的Hp感染率為30.00%(3/10)，炎性息肉為68.42%(13/19)，胃底腺息肉為15.15%(5/33)，增生性息肉為62.90%(39/62)。

2.3兩組患者胃黏膜組織內(nèi)HIF-1α蛋白與mRNA的表達(dá)比較 胃息肉組胃黏膜組織內(nèi)HIF-1α蛋白與mRNA的表達(dá)量分別為(62.71±4.50)%、(43.18±1.37)%，均高于胃炎組(t=64.449,214.916，均P<0.001)，胃息肉組不同病理類(lèi)型與胃炎組HIF-1α蛋白和mRNA的表達(dá)量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且炎性息肉、胃底腺息肉、增生性息肉患者HIF-1α蛋白與mRNA的表達(dá)量均低于腺瘤性息肉患者(P<0.05)。見(jiàn)表1、圖1。

組別例數(shù)HIF-1α蛋白表達(dá)量HIF-1α mRNA表達(dá)量胃息肉組 腺瘤性息肉1092.17±4.2686.15±1.82 炎性息肉1933.15±4.09a30.18±1.40a 胃底腺息肉3338.42±4.14a35.57±1.26a 增生性息肉6259.06±4.08a55.67±1.69a胃炎組10024.19±4.384.62±1.29F值34.10239.176P值<0.001<0.001

HIF-1α：缺氧誘導(dǎo)因子-1α；mRNA：信使RNA；a與腺瘤性息肉比較，P<0.05

2.4相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，不同病理類(lèi)型胃息肉患者的Hp感染率與HIF-1α的表達(dá)無(wú)相關(guān)性(r=0.055，P=0.219)。

HIF-1α：缺氧誘導(dǎo)因子-1α

3 討 論

胃息肉是由于黏膜或腺體上皮過(guò)度增生所產(chǎn)生的良性腫瘤，其中腺瘤性息肉癌變性最高。胃息肉可分成腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底腺息肉及增生性息肉，目前關(guān)于胃息肉的發(fā)病原因尚未完全明確，Hp感染與胃息肉有一定聯(lián)系。臨床上，胃鏡下胃息肉的檢出率并不高，部分上消化道疾病的發(fā)生與Hp感染密切相關(guān)，同時(shí)胃癌、胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴癌的發(fā)生也與Hp感染密切相關(guān)。胃息肉由細(xì)胞間質(zhì)成分和上皮細(xì)胞增生形成，患者無(wú)特異性表征，一般為腹痛腹脹，且多數(shù)患者是在胃鏡下偶然發(fā)現(xiàn)胃息肉[7]。但腺瘤性息肉會(huì)造成癌變，所以臨床應(yīng)引起足夠的重視。臨床確診胃息肉多根據(jù)組織病理學(xué)檢測(cè)，目前依據(jù)第4版消化系統(tǒng)腫瘤世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)胃息肉分為非腫瘤性息肉、腫瘤性息肉，后者含神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、腺瘤性息肉及胃底腺息肉等，非腫瘤性息肉包含幼年性息肉、增生性息肉、錯(cuò)構(gòu)瘤性息肉及炎性纖維性息肉等。其中，腺瘤性息肉的臨床惡變率高達(dá)6%～47%[8]。

本研究結(jié)果顯示，胃息肉組的Hp感染率低于胃炎組(P<0.05)，說(shuō)明胃炎患者合并Hp的概率高于胃息肉患者，可能是Hp感染導(dǎo)致了胃炎的發(fā)生；在胃息肉不同部位中，胃竇的Hp感染率高于賁門(mén)、胃角、胃體及胃底，說(shuō)明起于胃黏膜上皮細(xì)胞凸入胃內(nèi)的隆起性病變的胃息肉高發(fā)于胃竇部位；在胃息肉患者不同病理類(lèi)型胃息肉中，增生性息肉、炎性息肉的Hp感染率高于胃底腺息肉，這與既往研究[9]結(jié)果一致，提示增生性息肉可能與慢性活動(dòng)性胃炎及伴隨Hp感染有直接聯(lián)系。但有研究顯示，消除Hp感染后胃底腺息肉出現(xiàn)復(fù)發(fā)情況，表明Hp感染對(duì)于胃底腺息肉的發(fā)展可能有抑制作用[10]。胃底息肉一般在Hp感染相關(guān)性胃炎或慢性萎縮性胃炎外正常的胃黏膜區(qū)域內(nèi)發(fā)生，而增生性息肉產(chǎn)生通常與各種類(lèi)型的慢性胃炎有關(guān)，特別是Hp相關(guān)性胃炎和萎縮性胃炎。雖然行Hp感染根治治療可能使息肉消失，但其相關(guān)機(jī)制仍需探究。有研究顯示，胃癌、胃炎和消化性潰瘍等發(fā)病與Hp感染密切相關(guān)[11]。Hp為第一類(lèi)致癌因子，其導(dǎo)致胃癌的可能因素有：①Hp與病毒類(lèi)似，它將DNA內(nèi)一些片段進(jìn)駐至宿主細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致宿主細(xì)胞出現(xiàn)變化；②Hp代謝產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成黏膜類(lèi)型；③Hp能夠?qū)е卵装Y反應(yīng)發(fā)展為急性毒性[12-14]。有研究顯示，氧含量低于6%時(shí)HIF-1α才會(huì)表達(dá)，且伴隨氧含量下降其表達(dá)逐步增加，當(dāng)無(wú)氧或氧氣含量為0.1%～0.2%時(shí)，HIF-1α的表達(dá)會(huì)明顯增加[15-18]。

胃黏膜慢性炎癥是指由多種因素引起的慢性息肉，而此類(lèi)炎癥的主要致病菌為Hp。這種致病菌在慢性淺表性息肉中的檢出率遠(yuǎn)高于其他致病菌，可高達(dá)80%。由于消化淺表性息肉高發(fā)病率、高感染率的特征，已成為臨床較為常見(jiàn)的消化性疾病。該類(lèi)疾病的主要誘因?yàn)椴≡w感染、膽汁反流、熬夜或長(zhǎng)期的不良飲食習(xí)慣等?；加性摬〉幕颊叱Ｓ叙逇狻⒏雇?、胃酸反流、腹部腫脹等臨床癥狀，對(duì)患者進(jìn)行胃鏡檢查可發(fā)現(xiàn)胃黏膜充血、水腫等。此外，Hp在萎縮性息肉患者中也有較高的檢出率。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子為特異性較高血管內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂素，為血管生成的主要促進(jìn)因子，在多個(gè)層次HIF-1α均可對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。同時(shí)，HIF-1α還可誘導(dǎo)環(huán)加氧酶2，環(huán)加氧酶2與其形成的前列腺素均能通過(guò)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子及血小板源生長(zhǎng)因子等調(diào)節(jié)血管生成，從而加速腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示，胃息肉組胃黏膜組織內(nèi)HIF-1α蛋白與mRNA的表達(dá)量均高于胃炎組，且胃息肉組不同病理類(lèi)型間HIF-1α蛋白與mRNA的表達(dá)量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；同時(shí)，炎性息肉、胃底腺息肉、增生性息肉患者HIF-1α蛋白與mRNA的表達(dá)量均低于腺瘤性息肉患者(P<0.05)，與相關(guān)研究[19-21]結(jié)論一致。這說(shuō)明，Hp感染對(duì)胃黏膜長(zhǎng)期慢性刺激形成低氧環(huán)境能激活HIF-1α，同時(shí)增加mRNA的表達(dá)，通過(guò)調(diào)控血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子加速微血管產(chǎn)生與細(xì)胞增殖，促進(jìn)胃息肉生成。

綜上可知，不同病理類(lèi)型胃息肉患者的Hp感染情況不同，但HIF-1α表達(dá)與Hp感染之間的關(guān)系及其對(duì)胃息肉的影響還需進(jìn)一步探究。