全自動微粒子化學發(fā)光免疫實驗與TP-IgM抗體檢測在梅毒檢測中的應用對比

賴宇堯　徐培光　賈利軍

【摘要】 目的 對比全自動微粒子化學發(fā)光免疫實驗 （CMIA） 與TP-IgM抗體檢測 （TP-ELISA） 在梅毒檢測中的差異。方法 100例TPPA檢測的疑似梅毒患者血清樣本為研究對象， 分別采用CMIA和TP-ELISA進行檢測。以梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）檢測為診斷金標準， 對比兩種檢測方法的診斷價值差異。結果 TPPA檢測陽性87例， 陰性13例。CMIA檢測陽性82例， 其中真陽性79例， 假陽性3例;陰性18例， 其中真陰性10例， 假陰性8例。TP-ELISA檢測陽性74例， 其中真陽性65例， 假陽性9例;陰性26例， 其中真陰性4例， 假陰性22例。CMIA和TP-ELISA診斷梅毒的敏感度分別為90.80%和74.71%， 特異度分別為76.92%和30.77%， 診斷準確度分別為89.00%和69.00%。CMIA診斷敏感度、特異度以及診斷準確性均顯著高于TP-ELISA， 差別均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 CMIA在梅毒的診斷中具有較好的敏感度、特異度以及診斷準確度， 可以作為梅毒血清學檢測的首選方法。

【關鍵詞】 全自動微粒子化學發(fā)光免疫實驗;TP-IgM抗體檢測;梅毒檢測

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.13.035

梅毒是由梅毒螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病， 主要通過性接觸傳播， 每年全球約有1200萬新發(fā)梅毒病例， 在我國發(fā)病率約為30/100000～40/100000左右[1]。梅毒的診斷主要依賴于流行病學病史、臨床表現(xiàn)以及實驗室檢查等。梅毒血清學檢查是臨床常用的檢查手段， 包括甲苯胺紅不加熱血清學試驗（TRUST）、TPPA、TP-ELISA等[2]。TPPA是目前血清學檢測的金標準， 但是其操作復雜且依賴肉眼對結果進行判讀， 對操作人員技術要求高[3]。CMIA是近年來梅毒檢測的新技術， 但是其敏感度、特異度和診斷價值等尚未得到公認[4]。因此， 本院對100例確診梅毒的患者分別采用CMIA和TP-ELISA進行檢測， 對比兩種檢測在梅毒診斷中的優(yōu)劣， 現(xiàn)將結果報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2015年4月～2018年6月本院100例采用TPPA檢測的疑似梅毒患者血清樣本為研究對象， 其中男62例， 女38例;平均年齡（31.37±9.39）歲。TPPA檢測陽性87例， 陰性13例。

1. 2 納入與排除標準 納入標準：①流行病學病史、臨床表現(xiàn)懷疑為梅毒患者;②血清樣本保留完好;③取得患者知情同意并通過醫(yī)院倫理委員會審核。排除標準：①血清樣本未保留;②合并其他性傳播疾病;③患者入院前接受抗梅毒治療。

1. 3 儀器與試劑 選擇YL-3000型全自動微粒子化學發(fā)光儀器（亞輝龍）及配套試劑。選擇日本富士梅毒TPPA檢測試劑盒（廣州市宜康生物科技有限公司）以及USCNK TP Elisa試劑盒（上海恒斐生物科技有限公司）。

1. 4 檢測方法 患者入院后取次日清晨空腹靜脈血3 ml， 離心分離血清后均采用TPPA、CMIA以及TP-ELISA技術檢測， 具體操作步驟參照說明書。TPPA陽性判定以反應孔細胞沉積為主要判斷對象， 以不規(guī)則沉積和凝集為陽性， 以光滑紐扣狀為陰性。CMIA操作及結果判讀均由設備完成， 以S/CO>1.0為陽性。TP-ELISA結果由酶標儀判讀。對于所有弱陽性均進行再次檢測。

1. 5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2. 1 CMIA與TPPA檢測結果 CMIA檢測陽性82例， 其中真陽性79例， 假陽性3例;陰性18例， 其中真陰性10例， 假陰性8例。見表1。

2. 2 TP-ELISA與TPPA檢測結果 TP-ELISA檢測陽性74例， 其中真陽性65例， 假陽性9例;陰性26例， 其中真陰性4例， 假陰性22例。見表2。

2. 3 CMIA和TP-ELISA診斷效能對比 CMIA和TP-ELISA診斷梅毒的敏感度分別為90.80%和74.71%， 特異度分別為76.92%和30.77%， 診斷準確度分別為89.00%和69.00%。CMIA診斷敏感度、特異度以及診斷準確性均顯著高于TP-ELISA， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

梅毒是由梅毒螺旋體引起的一種慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病， 傳播速度快、累及器官多、臨床表現(xiàn)多樣、潛伏期及病程長等， 梅毒的臨床診斷存在很大的困

難[5]。同時， 人類對梅毒尚無先天免疫， 也無法通過接種疫苗獲得免疫， 僅可通過感染后獲得感染性免疫， 且有再次感染的風險[6]。因此， 對梅毒早期診斷和治療對患者自身和臨床輸血工作的開展十分重要。

梅毒感染后產(chǎn)生的抗體主要包括特異性抗體免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）以及非特異性抗體反應素[7]。人體首先產(chǎn)生特異性抗體IgM， 可在感染2周后測出， 治療后可轉陰， 再發(fā)感染后又為陽性， 因此， IgM是活動性梅毒的表現(xiàn)[8]。在感染4周后產(chǎn)生特異性抗體IgG， 治療后在血清中維持很長一段時間， 甚至終生可在血清中測出[9]。反應素一般在感染5～7周后產(chǎn)生， 為梅毒螺旋體破壞組織后釋放的一種抗原心磷脂刺激產(chǎn)生的非特異性抗體[10]。

梅毒血清學實驗主要包括熒光螺旋體抗體吸收試驗、梅毒螺旋體血球凝集、梅毒螺旋體明膠凝集試驗、梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗以及梅毒螺旋體快速診斷實驗[11]。

TPPA是梅毒血清學檢測的金標準， 使用明膠將梅毒特異性抗原進行包被， 然后與血清中特異性抗體產(chǎn)生凝集反應， 通過肉眼對結果進行觀察和判定[12]。TPPA法診斷梅毒的敏感度和特異度均較高， 但具有是操作復雜、耗時長、容易受檢測者主觀影響等缺點。因此， 選擇一種新的梅毒檢測方法顯得尤為重要。

本院以TPPA為金標準， 對比了TP-ELISA和CMIA在梅毒檢測中的價值， 結果顯示， CMIA檢測的敏感度、特異度及準確度均顯著高于TP-ELISA， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。TP-ELISA與TPPA檢測原理相似， 可批量進行檢測、周期短、結果穩(wěn)定性高， 但是容易受到其他非梅毒密螺旋體感染、抗體滴度等因素影響， 且不同廠家試劑盒制作工藝差異較大， 在臨床應用中存在一定的局限性。CMIA是梅毒螺旋體檢測的新技術， 通過將重組的梅毒螺旋體特異性抗原（Tpn15、17和47）為固相抗原， 包裹與稀釋后加入樣本[13]?？乖涣Ｗ訒c樣本中梅毒螺旋體結合， 并與加入的預觸發(fā)液和觸發(fā)液反應出現(xiàn)化學發(fā)光， 檢測的精確度和準確度較高。同時， CMIA采用機器檢測， 排除了人為因素的影響， 其檢測速度和穩(wěn)定性均高于傳統(tǒng)檢測方法。

綜上所述， CMIA在梅毒的檢測中敏感度、特異度和準確度顯著高于TP-ELISA， 可以替代TP-ELISA成為血清學檢測的首選方法。

參考文獻

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[收稿日期：2020-01-16]