C242T基因多態(tài)性與老年急性心肌梗死患者的相關(guān)性

田水 巫廷春 田龍海 葉蕓

(1貴州省人民醫(yī)院心內(nèi)科，貴州 貴陽(yáng) 550002；2貴州省中醫(yī)藥大學(xué)附二院心內(nèi)科)

急性心肌梗死(AMI)是在冠狀動(dòng)脈急性、持續(xù)性缺血缺氧的基礎(chǔ)上發(fā)生，多表現(xiàn)為胸骨后疼痛，可并發(fā)心律失常、休克等，常危及生命〔1〕。AMI是多基因疾病，其發(fā)生發(fā)展與多種易感基因有關(guān)。相關(guān)研究表明，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性降低會(huì)導(dǎo)致血管的氧化功能、氧化應(yīng)激功能及降低活性氧功能的喪失，這與NADPH中細(xì)胞色素p22phox亞基C242T基因多態(tài)性有關(guān)〔2〕。同時(shí)，C242T多態(tài)性也是血紅蛋白的潛在結(jié)合位點(diǎn)之一，對(duì)體內(nèi)低密度脂蛋白表達(dá)水平有影響〔3〕。本文旨在探討C242T基因多態(tài)性與老年AMI患者的關(guān)系。

1 資料及方法

1.1一般資料 選取貴州省人民醫(yī)院2016年7月至2018年3月收治的126例老年AMI患者為病例組，同期選取132例健康體檢者為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《2016年中國(guó)成人血脂異常防治指南》〔4〕、《急性心肌梗死診斷和治療指南》〔5〕診斷標(biāo)準(zhǔn)；意識(shí)清晰，無精神病史；無嚴(yán)重瓣膜病、心房顫動(dòng)等；無嚴(yán)重凝血功能障礙。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝腎疾病者；腦梗死者；周圍動(dòng)脈栓塞者；惡性腫瘤者；依從性差者。本研究已獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其家屬均知情并簽署相關(guān)同意書。

1.2提取外周血白細(xì)胞DNA方法 所有患者晨起空腹采肘靜脈血5 ml，并低溫儲(chǔ)存于乙二胺四乙酸抗凝管中，備用。采用酚-氯仿有機(jī)油提法提取患者外周血白細(xì)胞DNA，并低溫保存于TE緩沖液中，備用。

1.3指標(biāo)檢測(cè) 采用細(xì)胞NADPH氧化酶活性光度法定量檢測(cè)酶活性；采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血糖、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、總膽固醇水平；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定兩組血漿氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)及丙二醛水平；采用ELISA試劑盒測(cè)定血漿氧化低密度脂蛋白 (ox-LDL)水平；采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)檢測(cè)基因型和等位基因。操作步驟均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)、Fisher確切概率法及Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組基線資料比較 兩組平均年齡、性別、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、高血壓史、平均收縮壓、總膽固醇水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；病例組心率、三酰甘油、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、平均舒張壓、空腹血糖、肌鈣蛋白、LDL-C、ox-HDL、ox-LDL、丙二醛水平和NADPH氧化酶活性明顯高于對(duì)照組，而HDL-C水平明顯低于對(duì)照組(P<0.05，P<0.01)。見表1。

表1 兩組基線資料比較

2.2C242T各位點(diǎn)基因型分布情況 經(jīng)Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)各基因型分布頻率均為遺傳平衡(P>0.05)，具有群體代表性。病例組CT+TT基因型攜帶者〔21例(16.67%)〕高于對(duì)照組〔8例(6.06%)〕，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔χ2=7.27,P<0.05,OR(95%CI):1.57(0.87～1.69)〕。

2.3兩組基因型和等位基因頻率比較 病例組TT、CT基因型頻率和T等位基因頻率明顯高于對(duì)照組，而CC基因型頻率和C等位基因頻率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組基因型和等位基因頻率比較

2.4相關(guān)性分析 年齡、性別、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、高血壓史、三酰甘油、LDL-C、HDL-C及總膽固醇均不是混雜因素(χ2=2.62、0.08、0.04、1.05、2.20、2.93、1.82、3.13、1.62、1.95，P=0.11、0.77、0.84、0.31、0.14、0.09、0.18、0.08、0.20、0.16)，而丙二醛、ox-HDL、ox-LDL、NADPH氧化酶活性與C242T基因型相關(guān)(χ2=8.36、6.45、7.33、10.26，P<0.01、P=0.03、0.02、0.00)。

3 討 論

AMI是在冠狀動(dòng)脈病變的基礎(chǔ)上發(fā)生的一種缺血性心肌壞死〔6〕。病因復(fù)雜，可能與高血壓、糖尿病、生活壓力、體力勞動(dòng)等有關(guān)〔7〕。國(guó)外研究表明〔8〕，C242T基因多態(tài)性可減少埃及人AMI的發(fā)生，并發(fā)現(xiàn) CT基因型者ox-LDL血漿濃度顯著低于 CC基因型者。相關(guān)研究表明，基因序列變異能改變其表達(dá)，并導(dǎo)致產(chǎn)生的蛋白質(zhì)功能異常，從而影響疾病進(jìn)展〔9〕。為此，推測(cè)C242T基因多態(tài)性可能與AMI的發(fā)生發(fā)展存在一定關(guān)系。

研究表明，LDL氧化能增強(qiáng)動(dòng)脈粥樣硬化效應(yīng)，而HDL氧化則會(huì)降低抗動(dòng)脈粥樣硬化效應(yīng)〔10〕。另外，其他研究〔3，11〕發(fā)現(xiàn)NADPH氧化酶p22phox亞單位CT+TT基因型攜帶者的ox-LDL水平顯著高于CC基因型，本研究結(jié)果與之相符。另有研究表明，NADPH氧化酶活性與AMI的進(jìn)展存在一定相關(guān)性〔12〕。NADPH氧化酶是血管系統(tǒng)中活性氧的主要來源，活性氧是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素，NADPH氧化酶活性越高，活性氧含量越高，越容易形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊，同時(shí)NADPH氧化酶活性受C242T基因型的影響。丙二醛是血漿脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，有研究表明C242T基因多態(tài)性與丙二醛水平相關(guān)〔13〕。本研究結(jié)果與之相似，表明C242T基因多態(tài)性與老年AMI的發(fā)生有關(guān)。另外，C242T多態(tài)性可能是冠狀動(dòng)脈病變的危險(xiǎn)因素，攜帶T等位基因很可能會(huì)增加冠狀動(dòng)脈疾病的發(fā)生〔14〕。本研究結(jié)果表明，攜帶等位基因T患者發(fā)生AMI的風(fēng)險(xiǎn)較高。

綜上所述，NADPH氧化酶細(xì)胞色素p22phox亞基C242T基因多態(tài)性會(huì)影響NADPH氧化酶的活性，與老年AMI患者存在相關(guān)性。