• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甲巰咪唑?qū)Τ踉\Graves

    2020-05-26 02:15:39姜麗莉王靜李振鳳周齊欒雪靜任新雯
    醫(yī)學(xué)信息 2020年8期
    關(guān)鍵詞:甲巰咪唑細(xì)胞因子

    姜麗莉 王靜 李振鳳 周齊 欒雪靜 任新雯

    摘要:目的? 探討甲巰咪唑?qū)Τ踉\Graves'病患者血清相關(guān)細(xì)胞因子及microRNAs(miRNAs)水平的影響。方法? 選取2016年12月~2019年1月于海陽(yáng)市人民醫(yī)院內(nèi)分泌科就診的36例Graves'病初診患者為疾病組,給予甲巰咪唑治療。另選取同期30例健康志愿者作為健康對(duì)照組。比較疾病組治療前、治療后及健康對(duì)照組甲狀腺功能指標(biāo)[游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)、促甲狀腺激素受體抗體(TRAb)]、細(xì)胞因子[IL-2、IL-6、IL-17、TGF-β1]、hs-CRP、microRNAs[miR-16、miR-142-3p、miR-146a、miR-155]的水平。結(jié)果? 疾病組治療前FT3、FT4,TRAb,IL-6、IL-17、TGF-β1、hs-CRP,miR-16、miR-142-3p、miR-155水平高于健康對(duì)照組,TSH、IL-2及miR-146a水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。疾病組治療后FT3、FT4、TRAb、IL-6、TGF-β1、hs-CRP、miR-16、miR-142-3p、miR-155水平低于治療前,而TSH、IL-2、miR-146a水平高于治療前,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);IL-17水平治療前后比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。疾病組治療后TSH、IL-2、miR-146a水平低于健康對(duì)照組,IL-6、IL-17、TGF-β1、hs-CRP、miR-16、miR-155水平高于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),兩組FT3、FT4、TRAb及miR-142-3p水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義表(P>0.05)。結(jié)論? 甲巰咪唑可改善Graves'病患者的甲狀腺功能,血清相關(guān)細(xì)胞因子及miRNAs可作為該病臨床診療的輔助指標(biāo)。

    關(guān)鍵詞:Graves'病;甲巰咪唑;細(xì)胞因子;microRNAs

    中圖分類號(hào):R511.5? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI:10.3969/j.issn.1006-1959.2020.08.031

    文章編號(hào):1006-1959(2020)08-0101-04

    Abstract:Objective? ? To investigate the effect of methimazole on serum-related cytokines and microRNAs(miRNAs) in newly diagnosed Graves' disease patients.Methods? From December 2016 to January 2019,36 newly diagnosed patients with Graves' disease who were treated in the Department of Endocrinology of Haiyang People's Hospital were selected as the disease group and treated with thiamazole.Another 30 healthy volunteers in the same period were selected as the healthy control group.Comparision of thyroid function indexes before treatment ,after treatment of disease group and healthy control group[free triiodothyronine(FT3), free thyroxine(FT4), thyroid stimulating hormone(TSH),thyrotropin receptor antibody (TRAb)],Cytokines [IL-2,IL-6,IL-17,TGF-β1],hs-CRP,microRNAs[miR-16,miR-142-3p,miR-146a,miR-155].Results? Before treatment,the levels of FT3,F(xiàn)T4,TRAb,IL-6,IL-17,TGF-β1,hs-CRP,miR-16,miR-142-3p,and miR-155 were higher than those of healthy controls,TSH,IL- 2 and miR-146a levels were lower than the healthy control group,the difference was statistically significant(P<0.05).After treatment,the levels of FT3,F(xiàn)T4TRAb,IL-6, TGF-β1,hs-CRP,miR-16,miR-142-3p,and miR-155 were lower than before treatment,the levels of TSH,IL-2 and miR-146a were higher than before treatment,the difference was statistically significant(P<0.05); the IL-17 level before and after treatment had no significant difference(P>0.05). After treatment,the levels of TSH,IL-2,miR-146a in the disease group were lower than those in the healthy control group,IL-6,IL-17,TGF-β1,hs-CRP, miR-16,miR-155 were higher than the healthy control group,the difference was statistically significant(P<0.05). There was no statistically significant difference in FT3,F(xiàn)T4,TRAb and miR-142-3p levels between the two groups(P>0.05). Conclusion? Thiamazole can improve thyroid function in patients with Graves' disease.Serum-related cytokines and miRNAs can be used as auxiliary indicators for clinical diagnosis and treatment of this disease.

    Key words:Graves' disease;Methimazole;Cytokines;microRNAs

    Graves'?。╣raves' disease,GD),又稱毒性彌漫性甲狀腺腫,是一種器官特異性自身免疫性疾病,是甲狀腺功能亢進(jìn)癥最常見的類型,約占甲亢的85%。近年來GD發(fā)病率逐年升高,并呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)[1]。該病臨床主要表現(xiàn)為高代謝癥候群、彌漫性甲狀腺腫、眼征、皮損及脛前粘液性水腫。針對(duì)該病,目前主要治療方法包括抗甲狀腺藥物、放射性核素碘、手術(shù)及介入栓塞。其中以抗甲狀腺藥物療法最為安全方便,且治療過程中不會(huì)造成永久性甲減而得到廣泛應(yīng)用??辜谞钕偎幬镏屑讕€咪唑因安全性相對(duì)較好、藥效穩(wěn)定、半衰期長(zhǎng)、患者的依從性較好而被推薦作為臨床治療甲亢的首選藥物[2]。有研究表明,表觀遺傳、環(huán)境和免疫學(xué)因素在GD發(fā)病機(jī)制發(fā)病中起著重要作用,多種免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子共同參與了GD的發(fā)病,尤其是T淋巴細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子,如IL-2、IL-6、IL-17、TGF-β1[3]。除細(xì)胞因子外,miRNAs直接或間接參與了固有性及適應(yīng)性免疫應(yīng)答,從而可能在自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的負(fù)調(diào)控作用。越來越多的研究證實(shí),miRNAs異常與GD的發(fā)生密切相關(guān),研究較多的有miR-16、miR-142-3p、miR-146a 及miR-155[4]。本研究通過檢測(cè)IL-2、IL-6、IL-17、TGF-β1等細(xì)胞因子、hs-CRP及miR-16、miR-142-3p、miR-146a 及miR-155等miRNAs的表達(dá)水平,觀察甲巰咪唑治療GD病的臨床效果,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1資料與方法

    1.1一般資料? 選取2016年12月~2019年1月于海陽(yáng)市人民醫(yī)院內(nèi)分泌科就診的36例Graves'病初診患者為疾病組,疾病組男性7例,女性29例;年齡19~68歲,平均年齡(38.41±11.81)歲,另選取同期30例健康志愿者為健康對(duì)照組,其中男性6例,女性24例;年齡18~60歲,平均年齡(39.06±11.17)歲。兩組性別、年齡比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。疾病組患者均符合2008版《中國(guó)甲狀腺疾病治療指南》中GD病的診斷標(biāo)準(zhǔn),無手術(shù)治療史及合并嚴(yán)重心肺功能不全。健康對(duì)照組無新近感染,且無甲狀腺疾病和家族史。所有研究對(duì)象均排除感染、妊娠、腫瘤、過敏性疾病以及其它免疫性疾病,6個(gè)月內(nèi)均未使用激素及免疫抑制劑。所有參與者均簽署書面知情同意書。

    1.2方法

    1.2.1標(biāo)本收集? 所有研究對(duì)象均于清晨空腹采集肘部靜脈血5 ml,3000 r/min 離心10 min,分離血清并分裝,-80℃保存待測(cè)。

    1.2.2甲狀腺功能相關(guān)指標(biāo)測(cè)定? 采用BECKMAN COULTER UniCel DXI800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀與配套試劑對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行FT3、FT4以及TSH定量測(cè)定。采用羅氏Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀與配套試劑對(duì)TRAb進(jìn)行定量測(cè)定。具體操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

    1.2.3 hs-CRP測(cè)定? 采用免疫透射比濁法進(jìn)行hs-CRP的檢測(cè)。選用BECKMAN COULTER AU5800全自動(dòng)生化儀及伊普諾康生物試劑盒,檢測(cè)步驟參照說明書進(jìn)行。

    1.2.4細(xì)胞因子的測(cè)定 以 IL-2測(cè)定為例,應(yīng)用Human IL-2 ELISA Kit(聯(lián)科生物)進(jìn)行濃度定量測(cè)定,檢測(cè)方法為ELISA,檢測(cè)步驟參照說明書。繪制血清樣本標(biāo)準(zhǔn)曲線,使用Thermo Scientific multiskan go全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀在450 nm及570 nm處進(jìn)行雙波長(zhǎng)吸光值測(cè)定并計(jì)算待測(cè)細(xì)胞因子濃度。IL-6、IL-17、TGF-β1檢測(cè)步驟同上。

    1.2.5 miRNAs的測(cè)定? ①RNA提?。翰捎肨rizol法提取血清樣本中的總RNA。取-80℃保存的血清200 μl,加1 ml Trizol混合均勻,提取過程參照說明書。提取的總RNA應(yīng)用Nanodrop OneC超微量可見分光光度計(jì)檢測(cè)其在波長(zhǎng)260 nm及280 nm 處的吸光度比值以驗(yàn)證其純度。②逆轉(zhuǎn)錄及熒光定量PCR:將提取的總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,以U6為內(nèi)參,反轉(zhuǎn)錄過程參照Takara PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)說明書,反應(yīng)條件:42℃ 15 min,85℃ 5 sec,4℃保存。熒光定量PCR按照QIAGEN QuantiNova? SYBR? Green PCR說明書進(jìn)行,反應(yīng)條件為95℃ 2 min,95℃ 5 sec,60℃ 10 sec,40個(gè)循環(huán)。

    1.3觀察指標(biāo)? 比較疾病組治療前、治療后及健康對(duì)照組甲狀腺功能指標(biāo)[游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)、促甲狀腺素受體抗體(TRAb)]、細(xì)胞因子[IL-2、IL-6、IL-17、TGF-β1]、hs-CRP、microRNAs[miR-16、miR-142-3p、miR-146a、miR-155]。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料用(n)表示,計(jì)量資料采用(x±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.1甲狀腺功能指標(biāo)水平? 疾病組治療前FT3、FT4,TRAb水平高于健康對(duì)照組,TSH水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);疾病組治療后FT3、FT4以及TRAb水平低于治療前,TSH水平高于治療前,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);疾病組治療后TSH水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),兩者FT3、FT4、及TRAb水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

    2.2血清細(xì)胞因子及hs-CRP水平? 疾病組治療前IL-6、IL-17、TGF-β1及hs-CRP水平高于健康對(duì)照組,IL-2水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。疾病組治療后IL-2水平高于治療前,IL-6、TGF-β1、hs-CRP水平低于治療前,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),治療前后IL-17水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);疾病組治療后IL-6、IL-17、TGF-β1及hs-CRP水平高于健康對(duì)照組,IL-2水平低于健康對(duì)照組(P<0.05),見圖1。

    2.3 miRNAs的表達(dá)水平? ?疾病組治療前miR-16、miR-142-3p、miR-155水平高于健康對(duì)照組,miR-146a水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);疾病組治療后miR-16、miR-142-3p及miR-155水平低于治療前,miR-146a水平高于治療前,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);疾病組治療后miR-16、miR-155水平高于健康對(duì)照組,miR-146a水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),兩者miR-142-3p水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見圖2。

    3討論

    目前,臨床上GD治療主要依據(jù)血清中甲狀腺激素水平的變化,然而后者的指示作用存在一定局限性。多項(xiàng)研究證明,細(xì)胞因子及miRNAs在GD發(fā)病過程中起著重要的調(diào)節(jié)及介導(dǎo)作用。故本文通過測(cè)定血清中細(xì)胞因子及miRNAs在甲巰咪唑治療前后表達(dá)水平的變化,探究其在GD診療中的作用。甲巰咪唑是目前臨床上治療GD的主要藥物之一,具有抑制甲狀腺腺泡內(nèi)過氧化物酶、阻礙T3、T4合成及輕度的免疫抑制作用。本研究顯示,GD患者在經(jīng)甲巰咪唑治療6個(gè)月后,F(xiàn)T3、FT4以及TRAb水平均低于治療前,而TSH水平高于治療前,說明甲巰咪唑可抑制甲狀腺激素的合成,改善患者的甲狀腺功能。

    GD通常被認(rèn)為與遺傳、外界環(huán)境變化以及自身免疫系統(tǒng)異常有關(guān)。免疫系統(tǒng)異常主要是免疫細(xì)胞及細(xì)胞因子失衡。IL-2水平增高通??梢蕴崾灸撤N自身免疫性疾病。IL-6可增加T細(xì)胞表達(dá)IL-2及IL-2受體(IL-2R),并參與刺激免疫反應(yīng)的細(xì)胞增殖、分化及自身抗體產(chǎn)生[5]。IL-17是一種強(qiáng)大的前炎癥細(xì)胞因子,通過促進(jìn)炎癥因子分泌將中性粒細(xì)胞招募至炎癥部位形成炎癥反應(yīng),并參與介導(dǎo)自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展[6]。hs-CRP常作為炎性反應(yīng)的一個(gè)重要指示[7]。本研究中,疾病組治療前IL-6、IL-17、TGF-β1及hs-CRP較健康對(duì)照組表達(dá)升高,IL-2降低,說明這些細(xì)胞因子可能參與了GD發(fā)生并促進(jìn)其發(fā)展。治療后,IL-6、IL-17、TGF-β1及hs-CRP較治療前降低,IL-2升高,說明甲巰咪唑具有免疫抑制作用。而IL-17水平變化不明顯,這可能與甲巰咪唑不能抑制外周血中IL-17分泌有關(guān)。同時(shí),GD患者治療后盡管甲狀腺功能回歸正常,但機(jī)體免疫失衡依舊存在。

    大量研究表明,miRNAs在自身免疫疾病的發(fā)生中起關(guān)鍵作用,大多參與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的分化或激活免疫反應(yīng),但其與GD相關(guān)的研究還很少[8]。miR-16可參與炎癥因子及趨化因子生成[9],miR-142-3p削弱了調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Regulatory T cells,簡(jiǎn)稱Tregs)對(duì)CD4+CD25T細(xì)胞增殖反應(yīng)和細(xì)胞因子產(chǎn)生的抑制作用。既往文獻(xiàn)證實(shí)GD患者Treg細(xì)胞抑制功能受損[10],說明miR-146a可能參與CD4+T細(xì)胞功能異常,進(jìn)而影響炎癥發(fā)展[11]。miR-155被認(rèn)為與天然免疫應(yīng)答密切相關(guān),其表達(dá)失調(diào)可引起炎癥及多種自身免疫性疾病。本研究中發(fā)現(xiàn)miR-16、miR-142-3p、miR-146a及miR-155表達(dá)水平在治療前后均發(fā)生了顯著變化,疾病組治療前miR-16、miR-142-3p、miR-155水平高于健康對(duì)照組,miR-146a水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);疾病組治療后miR-16、miR-142-3p及miR-155水平低于治療前,miR-146a水平高于治療前,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);疾病組治療后miR-16、miR-155水平高于健康對(duì)照組,miR-146a水平低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),兩者miR-142-3p水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),說明上述miRNAs可能在GD的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用,可能通過損害GD患者的CD4+T細(xì)胞功能而加重免疫功能亢進(jìn)。同時(shí),甲巰咪唑治療后,miRNAs較治療前有顯著性差異,表明miRNAs可能是甲巰咪唑治療GD的作用機(jī)制之一。

    綜上,甲巰咪唑可改善GD病患者的甲狀腺功能,血清相關(guān)細(xì)胞因子及miRNAs可作為GD病臨床診療的輔助指標(biāo)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]Burch HB,Cooper DS.Management of Graves Disease:A Review[J].The Journal of the American Medical Association,2015,314(23):2544-2554.

    [2]Bartalena L.Diagnosis and management of Graves disease:a global overview[J].Nature Reviews Endocrinology,2013,9(12):724-734.

    [3]Naik V,Khadavi N,Naik MN,et al.Graves' disease:clinical manifestations, immune pathogenesis (cytokines and chemokines)and therapy[J].Best Pract Res Clin Endocrinol Metab,2008,18(9):967-971.

    [4]Qin Q,Wang X,Yan N,et al.Aberrant expression of miRNA and mRNAs in lesioned tissues of Graves'disease[J].Cell Physiol Biochem,2015,35(5):1934-1942.

    [5]Merrill SJ,Minucci SB.Thyroid autoimmunity: an interplay of factors[M].Vitamins and hormones.Academic Press,2018(106):129-145.

    [6]操偉慶,季榕.白細(xì)胞介素17及其與多種疾病的關(guān)系[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué),2017,43(4):246-250.

    [7]Czarnywojtek A,Owecki M,Zgorzalewicz-Stachowiak M,et al.The Role of Serum C-Reactive Protein Measured by High-Sensitive Method in Thyroid Disease[J].Archivum Immunologiae Et Therapiae Experimentalis,2014,62(6):501-509.

    [8]Hiratsuka I,Yamada H,Munetsuna E,et al.Circulating microRNAs in Graves' disease in relation to clinical activity[J].Thyroid,2016,26(10):1431-1440.

    [9]Yamada H,Itoh M,Hiratsuka I,et al.Circulating micro RNA s in autoimmune thyroid diseases[J].Clinical Endocrinology,2014,81(2):276-281.

    [10]Chen X,Huang F,Qi Y,et al.Serum and thyroid tissue level of let-7b and their correlation with TRAb in Gravesdisease[J].Journal of Translational Medicine,2018,16(1)188.

    [11]Zheng L,Zhuang C,Wang X,et al.Serum miR‐146a,miR‐155,and miR‐210 as potential markers of Gravesdisease[J].Journal of Clinical Laboratory Analysis,2018,32(2):e22266.

    收稿日期:2020-03-03;修回日期:2020-03-17

    編輯/李國(guó)苗

    猜你喜歡
    甲巰咪唑細(xì)胞因子
    成人HPS臨床特征及多種細(xì)胞因子水平與預(yù)后的相關(guān)性
    抗GD2抗體聯(lián)合細(xì)胞因子在高危NB治療中的研究進(jìn)展
    咖啡酸片治療甲巰咪唑所致白細(xì)胞減少臨床觀察
    甲巰咪唑配合雷公藤多苷片治療甲亢的效果分析
    甲巰咪唑治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥患者的臨床效果與安全性探討
    甲巰咪唑聯(lián)合左甲狀腺素治療兒童甲狀腺功能亢進(jìn)癥的臨床療效觀察
    急性心肌梗死病人細(xì)胞因子表達(dá)及臨床意義
    甲巰咪唑和丙硫氧嘧啶治療甲亢不良反應(yīng)臨床對(duì)比研究
    細(xì)胞因子在慢性腎缺血與腎小管-間質(zhì)纖維化過程中的作用
    抗甲狀腺藥物治療甲狀腺功能亢進(jìn)合并慢性乙型肝炎的療效及安全性
    免费av不卡在线播放| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲精品色激情综合| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲成色77777| 成人午夜精彩视频在线观看| 高清av免费在线| 国产精品无大码| 99视频精品全部免费 在线| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 少妇人妻一区二区三区视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 草草在线视频免费看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 日日啪夜夜撸| 亚洲乱码一区二区免费版| eeuss影院久久| 国产精品精品国产色婷婷| av在线播放精品| 男人和女人高潮做爰伦理| 在线免费观看不下载黄p国产| 免费黄网站久久成人精品| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 99久久精品一区二区三区| 赤兔流量卡办理| 三级国产精品片| 一级黄片播放器| 国产久久久一区二区三区| 国产精品99久久久久久久久| 国产不卡一卡二| 国产黄片视频在线免费观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产一区二区三区av在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 日本五十路高清| 国产不卡一卡二| 免费观看性生交大片5| 成人二区视频| 精品酒店卫生间| 欧美日韩在线观看h| 成人漫画全彩无遮挡| 韩国av在线不卡| 青春草视频在线免费观看| 秋霞伦理黄片| 看片在线看免费视频| 免费人成在线观看视频色| 久久久久免费精品人妻一区二区| 高清午夜精品一区二区三区| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲三级黄色毛片| 国产一级毛片在线| 亚洲精品一区蜜桃| 国产激情偷乱视频一区二区| 我要搜黄色片| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产不卡一卡二| 国产亚洲91精品色在线| 亚洲av.av天堂| 成人国产麻豆网| 校园人妻丝袜中文字幕| 卡戴珊不雅视频在线播放| 综合色丁香网| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 女人久久www免费人成看片 | 村上凉子中文字幕在线| 精品久久久久久久久亚洲| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲人成网站高清观看| 人人妻人人看人人澡| 久久精品国产亚洲av涩爱| 中文字幕av在线有码专区| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲最大成人手机在线| 国产单亲对白刺激| 啦啦啦韩国在线观看视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 身体一侧抽搐| 亚洲伊人久久精品综合 | 最后的刺客免费高清国语| 成年免费大片在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 丝袜喷水一区| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日本熟妇午夜| 亚洲成人精品中文字幕电影| 欧美成人一区二区免费高清观看| 免费人成在线观看视频色| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 一级毛片电影观看 | 天堂中文最新版在线下载 | 午夜福利高清视频| 舔av片在线| 久久久国产成人精品二区| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 国产 一区 欧美 日韩| 高清午夜精品一区二区三区| 淫秽高清视频在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 九色成人免费人妻av| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 真实男女啪啪啪动态图| 欧美又色又爽又黄视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 精品人妻一区二区三区麻豆| 日韩一本色道免费dvd| 中文字幕熟女人妻在线| 99久国产av精品| 色综合色国产| 亚洲伊人久久精品综合 | 少妇高潮的动态图| 国产精品一区二区三区四区久久| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲欧美清纯卡通| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 91久久精品电影网| 日本wwww免费看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产成人aa在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 亚洲综合色惰| 99热全是精品| 国语自产精品视频在线第100页| 日日撸夜夜添| 少妇熟女欧美另类| 精品酒店卫生间| 日韩大片免费观看网站 | 黄色配什么色好看| 午夜日本视频在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 深爱激情五月婷婷| 高清毛片免费看| 国产成人精品久久久久久| 欧美性猛交黑人性爽| 一级av片app| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 毛片女人毛片| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产私拍福利视频在线观看| 午夜激情福利司机影院| av天堂中文字幕网| 青春草亚洲视频在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 我的老师免费观看完整版| 听说在线观看完整版免费高清| 日本欧美国产在线视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲av.av天堂| 国产麻豆成人av免费视频| 国产成人freesex在线| 亚洲av男天堂| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 日韩精品有码人妻一区| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 九色成人免费人妻av| 久久草成人影院| 九九在线视频观看精品| 国产亚洲最大av| 亚洲国产成人一精品久久久| 在线观看av片永久免费下载| 久久6这里有精品| 久久久精品大字幕| 黄片wwwwww| 亚洲四区av| 国产精品不卡视频一区二区| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产麻豆成人av免费视频| 九草在线视频观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲美女搞黄在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 日本欧美国产在线视频| 看十八女毛片水多多多| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 免费黄网站久久成人精品| 午夜福利网站1000一区二区三区| av卡一久久| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 爱豆传媒免费全集在线观看| a级毛色黄片| 波野结衣二区三区在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产真实伦视频高清在线观看| 18禁在线播放成人免费| 国产淫语在线视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 成年版毛片免费区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 如何舔出高潮| 国产爱豆传媒在线观看| 午夜免费激情av| 91精品一卡2卡3卡4卡| 婷婷六月久久综合丁香| 国产精品一区www在线观看| 黄色配什么色好看| 听说在线观看完整版免费高清| 在线播放国产精品三级| 哪个播放器可以免费观看大片| 精品欧美国产一区二区三| 欧美人与善性xxx| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产精品国产三级国产专区5o | 国产人妻一区二区三区在| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品人妻久久久影院| 成人二区视频| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产熟女欧美一区二区| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品一二三区在线看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 中文字幕免费在线视频6| 国产老妇伦熟女老妇高清| 麻豆一二三区av精品| 欧美最新免费一区二区三区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 如何舔出高潮| 一个人看的www免费观看视频| 国产男人的电影天堂91| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久久久久久亚洲中文字幕| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久精品综合一区二区三区| 91精品国产九色| 全区人妻精品视频| 在线免费观看的www视频| 在现免费观看毛片| 欧美潮喷喷水| 三级国产精品欧美在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 日韩制服骚丝袜av| 免费观看的影片在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲怡红院男人天堂| 韩国高清视频一区二区三区| 大话2 男鬼变身卡| 国产在视频线精品| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 亚洲精品影视一区二区三区av| 日韩欧美在线乱码| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产精品久久久久久久久免| 欧美日韩综合久久久久久| av免费在线看不卡| 熟女人妻精品中文字幕| 欧美日本视频| 久久这里只有精品中国| 桃色一区二区三区在线观看| 午夜福利高清视频| 国产淫片久久久久久久久| 欧美不卡视频在线免费观看| 91在线精品国自产拍蜜月| 看黄色毛片网站| 97超视频在线观看视频| 国产在视频线在精品| 日本色播在线视频| 国产69精品久久久久777片| 欧美精品一区二区大全| 99久久精品国产国产毛片| 伦理电影大哥的女人| 国产高清国产精品国产三级 | 一级毛片久久久久久久久女| 成人午夜精彩视频在线观看| 有码 亚洲区| 观看免费一级毛片| 我的女老师完整版在线观看| 日本三级黄在线观看| 国产一区二区三区av在线| 亚洲人与动物交配视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 搞女人的毛片| 国产黄色小视频在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| www.色视频.com| 国产视频内射| 国产精品国产三级专区第一集| 国内精品宾馆在线| 精品熟女少妇av免费看| 丰满少妇做爰视频| 在线a可以看的网站| 欧美性感艳星| 尾随美女入室| 亚洲最大成人av| 国产淫语在线视频| 亚洲内射少妇av| 久久久久久久亚洲中文字幕| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 91久久精品国产一区二区成人| 秋霞伦理黄片| 国国产精品蜜臀av免费| 亚洲丝袜综合中文字幕| 床上黄色一级片| 男女那种视频在线观看| 亚洲精品色激情综合| 精品人妻一区二区三区麻豆| 七月丁香在线播放| 观看免费一级毛片| 日韩欧美三级三区| 一级爰片在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 免费电影在线观看免费观看| 久久人妻av系列| 精品一区二区免费观看| 天堂影院成人在线观看| 亚洲av.av天堂| 国产久久久一区二区三区| 欧美日韩精品成人综合77777| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 综合色av麻豆| 少妇的逼水好多| 色哟哟·www| 国产成人精品一,二区| 99久久中文字幕三级久久日本| av线在线观看网站| 久久久久久久久大av| 欧美高清性xxxxhd video| 美女大奶头视频| 国产精品一二三区在线看| 波多野结衣高清无吗| 午夜爱爱视频在线播放| 中文字幕av成人在线电影| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产精品久久久久久av不卡| 波野结衣二区三区在线| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚洲av二区三区四区| 久久6这里有精品| 亚洲最大成人中文| 久久韩国三级中文字幕| 久久久久免费精品人妻一区二区| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲综合精品二区| 尾随美女入室| 97超视频在线观看视频| 国产乱来视频区| 网址你懂的国产日韩在线| 长腿黑丝高跟| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品一区二区性色av| 狠狠狠狠99中文字幕| 成人一区二区视频在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲欧美日韩东京热| 97在线视频观看| 国产探花在线观看一区二区| 欧美一区二区国产精品久久精品| 免费av观看视频| 最近视频中文字幕2019在线8| 波多野结衣巨乳人妻| 男女国产视频网站| 麻豆成人av视频| 天美传媒精品一区二区| 久久久久国产网址| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 最近手机中文字幕大全| 三级国产精品欧美在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| av在线观看视频网站免费| 最近2019中文字幕mv第一页| 只有这里有精品99| 99久国产av精品| 久久精品国产自在天天线| 国产精品久久电影中文字幕| 久久久久久久久大av| 丝袜喷水一区| 精品久久国产蜜桃| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 日本爱情动作片www.在线观看| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 在线a可以看的网站| 国产在视频线精品| 中文天堂在线官网| 青春草国产在线视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 精品国产露脸久久av麻豆 | 热99在线观看视频| 国产精品一二三区在线看| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 午夜视频国产福利| 久久久久久伊人网av| 国产一级毛片在线| 男人舔奶头视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 2021天堂中文幕一二区在线观| 色视频www国产| 国产真实伦视频高清在线观看| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲怡红院男人天堂| 久久久a久久爽久久v久久| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 免费一级毛片在线播放高清视频| av在线天堂中文字幕| 伊人久久精品亚洲午夜| 国模一区二区三区四区视频| 1000部很黄的大片| 青春草国产在线视频| 日本午夜av视频| 久久久久久久国产电影| 国产精品一及| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品女同一区二区软件| 少妇高潮的动态图| 国产亚洲精品久久久com| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产乱来视频区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲内射少妇av| 久久亚洲国产成人精品v| 国产高清有码在线观看视频| 人体艺术视频欧美日本| 午夜爱爱视频在线播放| 深夜a级毛片| 亚洲图色成人| 国产成人精品婷婷| 国产精品人妻久久久久久| 久久99热这里只频精品6学生 | 精品人妻熟女av久视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| a级毛色黄片| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产在视频线在精品| 天堂√8在线中文| 97超碰精品成人国产| 观看美女的网站| 国产精品.久久久| 午夜免费激情av| 22中文网久久字幕| 极品教师在线视频| 日韩大片免费观看网站 | 亚州av有码| 国产在线男女| 久久99热这里只频精品6学生 | 岛国在线免费视频观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 欧美bdsm另类| 国产成人a区在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 色综合色国产| 久久久久网色| 精品人妻视频免费看| 国产久久久一区二区三区| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲无线观看免费| 卡戴珊不雅视频在线播放| 日本-黄色视频高清免费观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲av成人精品一区久久| 91久久精品国产一区二区三区| 久久鲁丝午夜福利片| 最近手机中文字幕大全| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久精品国产亚洲av天美| 国产高清视频在线观看网站| 伦精品一区二区三区| 一区二区三区免费毛片| 日韩欧美 国产精品| 韩国av在线不卡| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 99热这里只有是精品50| 免费大片18禁| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 免费在线观看成人毛片| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 99久久无色码亚洲精品果冻| 91久久精品电影网| 中文字幕亚洲精品专区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 伦精品一区二区三区| 最后的刺客免费高清国语| 日韩一本色道免费dvd| 中文字幕制服av| 国产精品人妻久久久影院| av在线亚洲专区| 久久午夜福利片| 欧美精品一区二区大全| 中文字幕亚洲精品专区| 国产av不卡久久| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产亚洲5aaaaa淫片| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产精品日韩av在线免费观看| www.av在线官网国产| 亚洲欧美日韩高清专用| 婷婷色综合大香蕉| 国产色婷婷99| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 91久久精品电影网| 亚洲人成网站在线播| 床上黄色一级片| 岛国毛片在线播放| 欧美色视频一区免费| 亚洲成人中文字幕在线播放| 日韩视频在线欧美| 免费观看性生交大片5| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美3d第一页| 国产精品人妻久久久影院| 国产免费男女视频| 日韩亚洲欧美综合| 久久国产乱子免费精品| 免费观看精品视频网站| 丝袜美腿在线中文| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产成人福利小说| 欧美不卡视频在线免费观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产精品av视频在线免费观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 一个人观看的视频www高清免费观看| 欧美一区二区精品小视频在线| 精品久久久久久成人av| 成人特级av手机在线观看| 国产精品一区二区在线观看99 | 午夜激情福利司机影院| 国产一区二区三区av在线| 欧美高清性xxxxhd video| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产高清国产精品国产三级 | 联通29元200g的流量卡| 爱豆传媒免费全集在线观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 男女国产视频网站| 搞女人的毛片| 国产精品久久久久久av不卡| 在线天堂最新版资源| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 99热6这里只有精品| 日本色播在线视频| 国产av一区在线观看免费| 亚洲国产欧美在线一区| 赤兔流量卡办理| 日本av手机在线免费观看| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲四区av| 亚洲精品亚洲一区二区| 嘟嘟电影网在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 一边亲一边摸免费视频| 国产亚洲精品av在线| 午夜老司机福利剧场| 亚洲自拍偷在线| 青春草视频在线免费观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 日日啪夜夜撸| 亚洲av成人精品一区久久| 久久6这里有精品| 午夜日本视频在线| 男女那种视频在线观看| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久欧美精品欧美久久欧美| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 校园人妻丝袜中文字幕| 午夜福利高清视频| videos熟女内射| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久热精品热| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 最后的刺客免费高清国语| 美女大奶头视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲综合精品二区| 日韩中字成人| 免费一级毛片在线播放高清视频| 最后的刺客免费高清国语| 精华霜和精华液先用哪个| 看黄色毛片网站| 大香蕉97超碰在线| 欧美日韩在线观看h| 99久久精品一区二区三区| 亚洲va在线va天堂va国产| 欧美日韩精品成人综合77777| 看黄色毛片网站| 国内精品宾馆在线| 国产精品av视频在线免费观看| 麻豆成人av视频| 国产成人aa在线观看| 美女黄网站色视频| 伦理电影大哥的女人| 美女高潮的动态|