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    蔬菜廢棄物蚯蚓肥料化處理

    2020-05-23 02:37:38張修順呼世斌高德明張素冰張玥
    關(guān)鍵詞:底料全鉀臭味

    張修順,呼世斌,高德明,張素冰,張玥

    (西北農(nóng)林科技大學(xué) 資源環(huán)境學(xué)院,陜西 楊凌 712100)

    隨著中國城鄉(xiāng)居民消費(fèi)結(jié)構(gòu)的變化,人們對(duì)蔬菜的需求迅速增加,2016年中國蔬菜播種面積為1.96×106hm2,蔬菜產(chǎn)量約8×108t[1],均居世界首位.與此同時(shí)也產(chǎn)生了大量的蔬菜廢棄物,傳統(tǒng)的處理方法以還田和焚燒為主,對(duì)土壤和大氣造成了嚴(yán)重的污染[2];資源化利用處理技術(shù)主要有好氧或厭氧堆肥[3-4]、加工飼料[5]等,但這些技術(shù)因工藝復(fù)雜、經(jīng)濟(jì)投入高等原因未在全國范圍內(nèi)廣泛應(yīng)用,很多蔬菜廢棄物仍被隨意堆棄,不僅污染環(huán)境,而且浪費(fèi)了大量的可回收資源.

    蚯蚓是環(huán)境友好型動(dòng)物,食量大、繁殖快、分解有機(jī)物能力強(qiáng),利用蚯蚓處理可腐有機(jī)廢棄物是目前國際上推陳出新的生物處理方法之一.該方法具有工藝簡單、不產(chǎn)生二次污染、投資靈活、維護(hù)方便等優(yōu)勢(shì),適用于經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平較低的城鎮(zhèn)以及廣闊的農(nóng)村地區(qū).國內(nèi)外對(duì)蚯蚓處理技術(shù)的報(bào)道較多,利用蚯蚓處理畜禽糞便[5]、污泥[6]、生活垃圾[7]等各種有機(jī)廢棄物,生產(chǎn)出具有較高利用價(jià)值的蚯蚓糞有機(jī)肥,已被證明是低成本規(guī)模化處理有機(jī)廢棄物的有效方法之一[8].但是,將蔬菜廢棄物與牛糞、豬糞按不同比例配合用于蚯蚓處理的研究并不多見,對(duì)處理產(chǎn)物的測定一般以常規(guī)理化指標(biāo)為主,較少有學(xué)者對(duì)產(chǎn)物中的微生物指標(biāo)進(jìn)行研究和分析.

    本研究以牛糞、豬糞、蔬菜廢棄物和秸稈為原料,按照不同原料組合和配比飼養(yǎng)蚯蚓,研究蚯蚓處理過程中物料的pH值、有機(jī)質(zhì)、養(yǎng)分(全氮、全磷和全鉀)含量的變化情況,同時(shí)對(duì)產(chǎn)物中的有效活菌(CFU)、微生物多樣性指數(shù)進(jìn)行分析,以期為蚯蚓處理蔬菜廢棄物、秸稈和畜禽糞便等有機(jī)廢棄物提供理論依據(jù).

    1 實(shí)驗(yàn)部分

    1.1 實(shí)驗(yàn)原料

    蔬菜廢棄物、畜禽糞便和秸稈(以麥糠為主)取自西安市云陽鎮(zhèn)蔬菜生產(chǎn)基地及附近畜牧養(yǎng)殖公司,其具體理化性質(zhì)見表1.本實(shí)驗(yàn)選用的蚯蚓——赤子愛勝蚓Eiseniafoetida,由陜西康運(yùn)盛達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司提供.

    表1 原料的基本理化性質(zhì)

    1.2 實(shí)驗(yàn)方案

    圖1 處理裝置模型Fig.1 Processing device model diagram

    實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)布置在陜西康運(yùn)盛達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司位于云陽鎮(zhèn)的農(nóng)業(yè)基地(34°63′N,108°77′E),氣候條件優(yōu)越.本次實(shí)驗(yàn)共設(shè)置了10個(gè)處理,牛糞組蔬菜廢棄物與牛糞的配比(質(zhì)量比)為3∶7、4∶6、5∶5、6∶4,分別命名為N1、N2、N3、N4;豬糞組蔬菜廢棄物與豬糞的配比(質(zhì)量比)為3∶7、4∶6、5∶5、6∶4,分別命名為Z1、Z2、Z3、Z4;設(shè)置2組添加秸稈的處理,分別為NJ(蔬菜、牛糞、秸稈的質(zhì)量比為4∶4∶2)和ZJ(蔬菜、豬糞、秸稈的質(zhì)量比為4∶4∶2),每個(gè)處理3次重復(fù).

    實(shí)驗(yàn)開始前,蔬菜廢棄物先通過破碎機(jī)(1 500 r/min)進(jìn)行破碎,根據(jù)設(shè)定的配比將蔬菜廢棄物和其他物料拌勻,水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)控制在55%~65%,之后將混合底料放置于長方體處理裝置中(容積0.144 m3),如圖1所示.先將混合底料進(jìn)行約15 d的自然發(fā)酵,待裝置內(nèi)溫度穩(wěn)定至40 ℃以下時(shí),接種體型均勻適中的赤子愛勝蚓,接種密度為500 g/m2,定期調(diào)節(jié)餌料的濕度以利于蚯蚓生長.在第0(接種蚯蚓前)、15、30、45、60天時(shí)采集樣品(蚯蚓糞),剔除雜物保存.

    1.3 指標(biāo)測定

    樣品基本理化性質(zhì)參照有機(jī)肥國家標(biāo)準(zhǔn)[9]中的測定方法;本實(shí)驗(yàn)中有效活菌數(shù)以5種有益菌的總數(shù)計(jì),分別為硅酸鹽細(xì)菌(Silicate bacteria)、有機(jī)磷細(xì)菌(Organophosphorus bacteria)、無機(jī)磷細(xì)菌(Inorganic phosphorus bacteria)、固氮菌(Azotobacter)和根瘤菌(Rhizobium),選擇培養(yǎng)基參照文獻(xiàn)[10]中的方法.

    樣品的DNA提取步驟參照試劑盒(MP Biomedicals)說明書,使用TruSeq構(gòu)建文庫,測序平臺(tái)為Hiseq 2500平臺(tái)的PE250模式,原始測序數(shù)據(jù)均已上傳至NCBI數(shù)據(jù)庫(查詢編號(hào):SRP173102).

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)使用Excel 2018,折線圖繪制使用Origin 2018軟件,通過Qiime軟件(1.7.0版本)計(jì)算Chao和Shannon指數(shù),方差統(tǒng)計(jì)和樣品間顯著性分析使用SPSS 18.0.

    2 結(jié)果與討論

    2.1 有機(jī)質(zhì)含量和pH值

    圖2a是混合底料在蚯蚓處理過程中pH值的動(dòng)態(tài)變化,蚯蚓處理混合底料過程中pH值為6.89~8.23,為蚯蚓及各種微生物保持良好的代謝提供了有利環(huán)境.隨著蚯蚓處理時(shí)間的延長,物料的pH值逐漸降低,主要原因是有機(jī)廢棄物在被微生物降解時(shí)會(huì)產(chǎn)生H2O和CO2,并生成不同種類的有機(jī)酸[11-12];同時(shí)蚯蚓在混合底料中的蠕動(dòng)可以提高堆體內(nèi)的透氣性,使得大量的氨氣揮發(fā)至外界環(huán)境[13].

    蚯蚓處理過程中有機(jī)質(zhì)含量的變化規(guī)律如圖2b所示,隨著蚯蚓處理時(shí)間的延長,混合底料的有機(jī)質(zhì)含量先降低后趨于穩(wěn)定,這一變化規(guī)律和國內(nèi)相關(guān)學(xué)者的研究相一致[12].蚯蚓處理前期,蚯蚓和各種微生物生命活動(dòng)會(huì)消耗一定的有機(jī)物質(zhì)[14],最終轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定腐殖酸[15];因堆料在裝置中沒有補(bǔ)充碳源,其有機(jī)質(zhì)含量在蚯蚓處理前期呈下降趨勢(shì);蚯蚓處理后期,隨著微生物活性的降低,有機(jī)質(zhì)含量會(huì)逐漸趨于穩(wěn)定.豬糞組和牛糞組的有機(jī)質(zhì)含量變化規(guī)律一致,60 d蚯蚓處理結(jié)束時(shí),牛糞組有機(jī)質(zhì)含量平均降低32.44%,豬糞組有機(jī)質(zhì)含量平均降低24.78%,牛糞組經(jīng)蚯蚓處理后有機(jī)質(zhì)含量顯著低于豬糞組(表2,P<0.05).相較于未添加秸稈的處理組,添加秸稈可以提高有機(jī)質(zhì)含量的下降速率,主要原因是在混合底料中添加秸稈能提高堆體內(nèi)的O2含量,調(diào)節(jié)C/N,增強(qiáng)蚯蚓和各種微生物的活性[16],促進(jìn)有機(jī)質(zhì)的分解.

    表2 混合底料中有機(jī)質(zhì)含量和pH值的變化

    不同字母表示同一指標(biāo)不同處理間差異顯著(同列),下同.

    2.2 全氮、全磷和全鉀

    圖3和表3是蚯蚓處理底料過程中全氮、全磷和全鉀含量的變化情況.由圖3可以看出,全氮含量在前45 d逐漸降低,各處理降幅為17.56%~34.74%,在45~60 d呈上升趨勢(shì).在蚯蚓處理前期,受微生物分解的影響,堆料中的部分氮素會(huì)直接轉(zhuǎn)變?yōu)镹H3,同時(shí)蚯蚓在裝置中不斷地蠕動(dòng),使得堆料透氣性提高,大量的NH3揮發(fā)至外界環(huán)境[17],是導(dǎo)致全氮含量在前45 d大幅降低的主要原因.當(dāng)蚯蚓堆肥進(jìn)入到后期階段時(shí),微生物的分解活動(dòng)減弱,固氮菌、硝化細(xì)菌等能夠固化大氣中的N2,生成硝酸鹽或亞硝酸鹽等穩(wěn)定于堆料之中,造成蚯蚓處理中后期物料的全氮含量升高[18].由表3可知,混合底料經(jīng)60 d蚯蚓處理后,牛糞組全氮含量平均降低了23.15%,顯著高于豬糞組(7.26%),表明在蚯蚓肥料化處理過程中,使用豬糞為底料更有助于減少氮素?fù)p失.

    圖3 蚯蚓處理底料過程中全氮(a)、全磷(b)、全鉀(c)含量的動(dòng)態(tài)變化Fig.3 Dynamic changes of TN,TP and TK contents during the process of vemicomposting

    表3 混合底料中全磷、全氮和全鉀的變化

    本研究中全氮的變化規(guī)律和相關(guān)報(bào)道的實(shí)驗(yàn)結(jié)果[19-20]相似,但也有很多學(xué)者提出了不同的觀點(diǎn)[21-23],導(dǎo)致結(jié)論存在差異的原因可能是:滲濾液造成部分氮素的損失,在蚯蚓處理有機(jī)廢棄物的過程中,需定期補(bǔ)充外源水來調(diào)節(jié)混合底料的濕度,因此產(chǎn)生較多的含氮滲濾液,流失至外界環(huán)境中.研究表明[24]:堆料中氮素的流失有多種途徑,全氮含量降低不僅與NH3等含氮?dú)怏w逸出有關(guān),隨滲濾液流失也是氮素?fù)p失的主要途徑之一.

    混合底料中全磷和全鉀的含量變化規(guī)律基本一致,均在蚯蚓處理初期升高并逐漸趨于穩(wěn)定.60 d蚯蚓處理結(jié)束時(shí),各處理全磷含量增幅為6.01%~22.47%;全鉀含量增幅最高為16.44%,最低為1.75%,與國內(nèi)外有機(jī)廢棄物堆肥的研究結(jié)論一致[25-26].混合底料中全磷和全鉀的這一變化規(guī)律主要是有機(jī)質(zhì)礦化過程中的“濃縮效應(yīng)”造成的,蚯蚓堆肥期間,微生物新陳代謝會(huì)分解有機(jī)質(zhì),造成混合底料的絕對(duì)質(zhì)量降低,而磷素和鉀素幾乎不會(huì)被分解,導(dǎo)致全磷和全鉀的含量相對(duì)升高.如表3所示,60 d蚯蚓處理結(jié)束時(shí),牛糞組的全磷含量顯著低于豬糞組,平均低37.83%,主要原因可能是原材料牛糞中的全磷含量遠(yuǎn)低于豬糞.

    2.3 生物指標(biāo)

    2.3.1 有效活菌

    研究表明,細(xì)菌是微生物中含量最多、豐富度最高的類群,在物質(zhì)循環(huán)方面發(fā)揮不可或缺的作用[27].圖4是60 d蚯蚓處理結(jié)束時(shí)混合底料有效活菌數(shù)的測定結(jié)果,10組處理產(chǎn)物的有效活菌總數(shù)均為107數(shù)量級(jí)(圖4a),達(dá)到了生物有機(jī)肥的標(biāo)準(zhǔn).

    處理產(chǎn)物中硅酸鹽菌、固氮菌的數(shù)量級(jí)分別為107、106(圖4a),在有效活菌總數(shù)中的占比超過80%.硅酸鹽菌不僅能促進(jìn)土壤中速效鉀轉(zhuǎn)化,還可以在一定程度提高作物對(duì)硅元素的吸收能力[28],增強(qiáng)作物的抗病性[29].固氮菌和根瘤菌這2種菌能夠起到固定氮元素的作用,將N2轉(zhuǎn)化為NH4+—N以便被植物所吸收;鄧天天等[30]的大田實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,根瘤菌浸提液對(duì)小麥種子進(jìn)行預(yù)處理后,其發(fā)芽率和產(chǎn)量均得到提高.

    無機(jī)磷細(xì)菌和有機(jī)磷細(xì)菌是土壤中重要的有益菌,它們可以將固化態(tài)磷分解為易被作物吸收的有效態(tài)磷,提高土壤中磷素的利用水平[31].由圖4b可以看出:牛糞組中無機(jī)磷細(xì)菌和有機(jī)磷細(xì)菌的數(shù)量級(jí)為105,而豬糞組中這2種解磷細(xì)菌的數(shù)量級(jí)高達(dá)106,造成這一差異的主要原因可能是原材料豬糞中全磷的含量遠(yuǎn)高于牛糞,為上述2種解磷細(xì)菌生長發(fā)育提供了更豐富的磷源;研究表明,豐富充足的磷源可以提高上述2種細(xì)菌的活性,使得細(xì)菌群落總數(shù)明顯增加[32].

    蔡琳琳等[33]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在畜禽糞便中加入適量的秸稈等輔料有助于改善蚯蚓的生存環(huán)境,促進(jìn)蚯蚓生長發(fā)育,可以顯著提高蚯蚓處理產(chǎn)物中的微生物含量;其原因可能是添加秸稈等輔料能夠調(diào)節(jié)堆體內(nèi)的透氣性,增強(qiáng)微生物的活性;但在此次實(shí)驗(yàn)中,添加和未添加秸稈的對(duì)照組對(duì)比發(fā)現(xiàn),5種有益菌在數(shù)量級(jí)上的差異均不顯著.

    a.處理產(chǎn)物中固氮菌、硅酸鹽菌數(shù)量和有效活菌總數(shù);b.處理產(chǎn)物中無機(jī)磷細(xì)菌、有機(jī)磷細(xì)菌和根瘤菌數(shù)量.不同字母表示同一指標(biāo)不同樣品間差異顯著.圖4 蚯蚓處理產(chǎn)物中有效活菌數(shù)的測定結(jié)果Fig.4 Determination of the number of effective viable bacteria in the treated product

    2.3.2 微生物多樣性指數(shù)

    圖5是采用高通量測序技術(shù)測定的微生物多樣性指數(shù),N2、Z2、NJ、ZJ是選取的4組經(jīng)60 d蚯蚓處理后的產(chǎn)物(蚯蚓糞),底料配比詳情見章節(jié)1.2;C1和C2是經(jīng)60 d常規(guī)堆肥處理后的產(chǎn)物,底料配比分別為蔬菜廢棄物與牛糞的質(zhì)量比4∶6,蔬菜廢棄物與豬糞的質(zhì)量比4∶6.

    從圖5可以看出,6組樣品的微生物多樣性指數(shù)存在一定的差異,4組蚯蚓處理產(chǎn)物的OTUs分別為4 331、4 393、3 927和4 170,之間差異不顯著,但均顯著高于2種常規(guī)堆肥產(chǎn)品(2 322和2 861,P<0.05);此外,蚯蚓處理產(chǎn)物的Shannon指數(shù)、Chao指數(shù)顯著高于2種常規(guī)堆肥產(chǎn)品(P<0.05),表明蚯蚓處理產(chǎn)物中微生物的多樣性和物種總數(shù)均優(yōu)于常規(guī)堆肥產(chǎn)物;相較于常規(guī)堆肥的方式,采用蚯蚓處理有機(jī)廢棄物可以得到微生物品質(zhì)更高的產(chǎn)品.

    鄭金偉等[34]在研究用不同方法處理牛糞時(shí)發(fā)現(xiàn),蚯蚓糞中細(xì)菌群落多樣性比堆肥處理的樣品中豐富,與本文研究結(jié)果一致;但有文獻(xiàn)表明,蚯蚓處理會(huì)比堆肥處理的微生物群落多樣性略小[35].蚯蚓體內(nèi)攜帶大量微生物種群,可以增加底料的微生物物種總數(shù)[36];同時(shí)蚯蚓在破碎和攝入底料時(shí)分泌的各類酶也會(huì)間接提高微生物對(duì)有機(jī)物的分解代謝能力,從而增強(qiáng)微生物活性[36],提高微生物群落結(jié)構(gòu)的多樣性.

    不同字母表示同一指標(biāo)不同樣品間差異顯著.圖5 微生物多樣性指數(shù)Fig.5 Microbial diversity index

    2.4 脫臭效果

    在蚯蚓處理混合底料的過程中,為保障蚯蚓的生存和發(fā)育,未密封實(shí)驗(yàn)裝置,加大了相關(guān)致臭氣體(CH4、H2S等)的采集難度,本文采用傳統(tǒng)的6級(jí)分類法對(duì)脫臭效果進(jìn)行評(píng)價(jià).評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)如下:Y0表示沒有臭味;Y1表示若仔細(xì)聞,可以聞到非常淡的臭味;Y2表示能夠聞到相對(duì)較淡的臭味;Y3表示能夠聞到臭味;Y4表示有很強(qiáng)的臭味;Y5表示臭味令人作嘔[29].

    圖6是混合底料臭味等級(jí)隨蚯蚓處理時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化,各處理混合底料初始臭度為Y4或Y5級(jí),臭味比較明顯;混合底料經(jīng)過15 d蚯蚓處理后,臭味變小,臭度為Y3~Y5級(jí);隨著蚯蚓處理時(shí)間的延長,臭味顯著減弱,45 d時(shí)各處理混合底料的臭味為Y0或Y1級(jí),臭味非常??;60 d時(shí)各處理混合底料的臭味均為Y0級(jí),幾乎聞不到臭味.如圖6所示:相較于牛糞組,豬糞組的臭味持續(xù)周期較長,可能是因?yàn)樨i糞中存在更多的臭氣物質(zhì);有研究表明:牛這種多胃動(dòng)物相較于豬等單胃動(dòng)物排出的糞便中臭氣化合物更少[37].有機(jī)廢棄物經(jīng)蚯蚓堆肥處理后有顯著的脫臭效果,在蚯蚓處理過程中,蚯蚓的吞食活動(dòng)可以激發(fā)細(xì)菌和放線菌等微生物的活性,促進(jìn)臭氣物質(zhì)進(jìn)一步的分解,同時(shí)蚯蚓的不斷蠕動(dòng)會(huì)加快致臭氣體(CH4、H2S等)揮發(fā),從而降低物料的臭味.

    圖6 混合底料臭味等級(jí)的動(dòng)態(tài)變化Fig.6 Dynamic change of mixed primer odor level

    3 結(jié)論

    1) 蔬菜廢棄物、畜禽糞便等混合底料在經(jīng)蚯蚓處理過程中,pH值和有機(jī)質(zhì)含量隨處理時(shí)間的延長均不斷降低;全氮含量在0~45 d降低,45~60 d緩慢升高,全磷和全鉀含量在0~60 d均逐漸升高.

    2) 相較于牛糞組,豬糞組處理產(chǎn)物中的有機(jī)質(zhì)和全磷含量更高,但全鉀含量偏低;混合底料經(jīng)蚯蚓處理后其臭味等級(jí)有顯著的降低.

    3) 60 d蚯蚓處理結(jié)束時(shí),10組處理產(chǎn)物的有效活菌總數(shù)的數(shù)量級(jí)均為107,硅酸鹽菌和固氮菌在有效活菌總數(shù)中的占比超過80%;豬糞組處理產(chǎn)物的無機(jī)磷細(xì)菌和有機(jī)磷細(xì)菌的含量顯著高于牛糞組.

    4) 4組(N2、Z2、NJ、ZJ)蚯蚓處理產(chǎn)物的OTUs、Shannon和Chao指數(shù)均顯著高于2組(C1、C2)常規(guī)堆肥產(chǎn)物.

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