• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    響應(yīng)面分析優(yōu)化熒光衍生法測定硫熏黨參及其飲片二氧化硫殘留量的研究

    2020-05-21 11:51:52,*
    食品工業(yè)科技 2020年9期
    關(guān)鍵詞:磷酸氫二鈉乙酸銨緩沖溶液

    ,*

    (1.甘肅中醫(yī)藥大學藥學院,甘肅蘭州 730000; 2.中國科學院蘭州化學物理研究所,甘肅蘭州 730000)

    黨參為桔??浦参稂h參(Codonopisispilosula(Franch.)Nannf.)、素花黨參(CodonopisispilosulaNannf.var.modesta(Nannf.)L. T. Shen)或川黨參(CodonopisispilosulaOliv.)的干燥根,具有健脾益肺、養(yǎng)血生津的功效,用于脾肺氣虛、食少倦怠、咳嗽虛喘、氣血不足、面色萎黃、心悸氣短、津傷口渴、內(nèi)熱消渴等癥[1]。2018年國家衛(wèi)健委將黨參列入藥食同源目錄[2],其具有增強人體免疫功能、耐疲勞、降血壓、抗?jié)兊缺=∽饔?可用于開發(fā)保健產(chǎn)品[3]。由于其含糖量較高,在貯藏過程中易生蟲和霉變,因此在產(chǎn)地加工中常使用硫磺熏蒸。硫熏作為一種傳統(tǒng)的產(chǎn)地加工方法,在中藥材的加工和貯藏中有重要的作用,但過度硫熏嚴重影響中藥材的品質(zhì)和藥效[4-8]。近些年報道,中藥材中的SO2殘留物有神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等方面的毒性[9]。2015版藥典中收載的酸堿滴定法、氣相色譜法和離子色譜法分別作為SO2測定的第一法、第二法和第三法[1],但存在前處理繁瑣和操作復雜等問題。亞硫酸鹽可與鄰苯二甲醛溶液和乙酸銨溶液反應(yīng)生成熒光化合物1-磺酸基-異吲哚,其熒光強度與亞硫酸鹽的濃度成正比[10-13],根據(jù)此原理Peng等[14]建立了熒光衍生法用于檢測山藥中SO2的殘留量,此外還有熒光衍生法檢測人參及浙貝母SO2殘留量研究的報道[15-16],結(jié)果均表明熒光衍生法具有操作簡單、靈敏度高等優(yōu)點。

    本實驗以熒光強度為指標,用響應(yīng)面法對磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH及其用量、鄰苯二甲醛用量及乙酸銨濃度四個影響熒光強度的因素進行優(yōu)化,確定最佳熒光衍生條件,建立熒光衍生法檢測黨參SO2殘留量的方法;將黨參硫熏不同時間,并加工炮制為不同規(guī)格飲片,測定SO2殘留量,研究硫熏時間及加工炮制對黨參SO2殘留量的影響。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    黨參藥材 采自甘肅省隴西縣雙泉鎮(zhèn)何家溝村,經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學楊扶德教授鑒定為桔??浦参稂h參(Codonopisispilosula(Franch.)Nannf.);蜂蜜 桂林周氏順發(fā)食品有限公司;亞硫酸鈉 天津市科密歐化學試劑有限公司;乙酸銨 上海三友試劑廠;鄰苯二甲醛 上海中秦化學試劑有限公司;磷酸氫二鈉 天津市科密歐化學試劑有限公司;磷酸二氫鉀 西隴化工股份有限公司;無水乙醇 天津醫(yī)藥化學有限公司;以上試劑 均為分析純。

    Fluorolog-3穩(wěn)態(tài)/瞬態(tài)熒光光譜儀 HORIBA公司;元素型1860d超純水機 上海摩勒科學儀器有限公司;WB-2000型恒溫水浴鍋 鄭州長城科工貿(mào)有限公司;H1650臺式高速離心機 長沙湘儀離心機儀器有限公司;FW100型高速萬能粉碎機 天津市泰斯特儀器有限公司。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 樣品處理 將黨參藥材硫熏后,加工炮制為節(jié)子貨、厚片[17]、米炒[18]、蜜制[19]四個規(guī)格的飲片,晾干后用密封袋密封,置陰涼處保存,用時將樣品粉碎,取過40目篩的粉末測定二氧化硫殘留量。

    1.2.1.1 硫熏黨參原藥材制備 將黨參藥材用硫磺分別熏蒸0、30、60、90 min(硫磺∶藥材=1∶150)后晾干備用。

    1.2.1.2 飲片樣品制備 將硫熏黨參原藥材用少量清水悶濕后,切制成為0.2~0.4 cm的厚片和5~6 cm的節(jié)子貨,晾干;蜜制黨參:煉蜜:蜂蜜用量為25%,稱取蜂蜜于炒制容器中,武火加熱燒開后,加入蜂蜜用量三分之一的熱水,小火燒開即可;悶潤:將煉蜜加入黨參厚片,攪拌均勻,過夜,使蜂蜜被完全吸收;炒制:將炒制容器預(yù)熱后,倒入悶潤后的黨參片,文火加熱,炒制表面黃棕色,不粘手時取出放涼,即可;米炒黨參:將大米置預(yù)熱的炒制容器內(nèi),用量為黨參25%,用中火加熱炒至冒煙時,投入黨參厚片拌炒,至黨參表面呈黃色,米呈焦黃時,取出,篩去米,放涼。

    1.2.2 供試品溶液制備 稱取硫熏黨參藥材或其飲片樣品粉末1.0 g于100 mL錐形瓶中,加入0.7%的NaOH溶液40 mL,超聲提取30 min,8000 r/min離心3 min,取上清液1.0 mL定容于25 mL容量瓶即得[15]。

    1.2.3 衍生化溶液制備 參考文獻[14]方法,取1 μg/mL亞硫酸鈉對照品溶液或供試品溶液于10 mL容量瓶中,依次加入磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液、1 mmol/L鄰苯二甲醛溶液及乙酸銨溶液,用水定容至刻度,水浴反應(yīng)后靜置,即得衍生化溶液。

    1.2.4 激發(fā)與發(fā)射波長確定 取亞硫酸鈉對照品溶液,按“1.2.3”項下方法制備衍生化溶液,用Fluorolog-3穩(wěn)態(tài)/瞬態(tài)熒光光譜儀掃描激發(fā)和發(fā)射波長。

    1.2.5 熒光衍生條件優(yōu)化單因素實驗 考察磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH與用量、鄰苯二甲醛溶液用量、乙酸銨溶液濃度與用量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間及靜置時間對熒光強度的影響[20-23]。

    1.2.5.1 緩沖溶液pH考察 于10 mL容量瓶中加入亞硫酸鈉對照品溶液0.5 mL,分別加入pH為5.8、6.0、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液2 mL、鄰苯二甲醛溶液2 mL和5 mmoL/L的乙酸銨溶液2 mL,用蒸餾水定容,50 ℃水浴反應(yīng)5 min,冷卻后靜置50 min,檢測熒光其強度。

    1.2.5.2 緩沖溶液用量考察 在磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH為6.6,其它條件不變的情況下,考察磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL時對熒光強度的影響。

    1.2.5.3 鄰苯二甲醛用量考察 pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量1.5 mL,其它條件不變的情況下,考察鄰苯二甲醛溶液用量分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL對熒光強度的影響。

    1.2.5.4 乙酸銨濃度考察 pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量1.5 mL,鄰苯二甲醛溶液用量2 mL,其它條件不變的情況下,考察濃度為0.5、1.0、2.5、5.0、7.5、10.0、15.0 mmoL/L的乙酸銨溶液對熒光強度的影響。

    1.2.5.5 乙酸銨用量考察 pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量1.5 mL,鄰苯二甲醛溶液用量2 mL,其它條件不變的情況下,考察5 mmol/L乙酸銨溶液用量分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL對熒光強度的影響。

    1.2.5.6 反應(yīng)溫度對熒光強度的影響 pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量1.5 mL,鄰苯二甲醛溶液用量2 mL,5 mmoL/L的乙酸銨溶液用量2 mL,其它條件不變,分別考察水浴溫度為30、35、40、45、50、55、60 ℃對熒光強度的影響。

    1.2.5.7 反應(yīng)時間對熒光強度的影響 pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量1.5 mL,鄰苯二甲醛溶液用量2 mL、5 mmoL/L的乙酸銨溶液用量2 mL,其它條件不變,分別考察50 ℃水浴反應(yīng)1、3、5、7、10、13、15 min對熒光強度的影響。

    1.2.5.8 靜置時間對熒光強度的影響 pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量1.5 mL,鄰苯二甲醛溶液2 mL,5 mmoL/L的乙酸銨溶液用量2 mL,50 ℃下水浴反應(yīng)5 min,分別考察靜置5、10、15、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120 min對熒光強度的影響。

    1.2.6 響應(yīng)面優(yōu)化試驗 為得到最佳熒光衍生條件,在單因素實驗的基礎(chǔ)上,參考文獻[15]采用響應(yīng)面分析法研究磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH(A)及其用量(B)、鄰苯二甲醛用量(C)及乙酸銨濃度(D)四個因素對熒光強度的影響。根據(jù)Box-Behnken實驗設(shè)計原理,取單因素實驗最優(yōu)結(jié)果為中心,上下各取一水平作為響應(yīng)面設(shè)計因素水平[24-25],用Design-Expert 10.0設(shè)計實驗,實驗因素及水平見表1。

    表1 Box-Behnken實驗設(shè)計因素及水平Table 1 Factors and levels of the Box-Behnken design

    1.2.7 方法學考察

    1.2.7.1 線性關(guān)系及檢測限考察 精密吸取亞硫酸鈉對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5、2.0 mL于10 mL容量瓶中,根據(jù)優(yōu)化后的衍生條件制備衍生化溶液,測定熒光強度,以亞硫酸鈉濃度與熒光強度繪制標準曲線,并對其檢測限進行考察(檢測限=3σ/k,σ為空白測量的標準差,k為標準曲線斜率)。

    1.2.7.2 精密度試驗 取硫熏90 min黨參樣品粉末,平行制備供試品溶液3份,衍生后連續(xù)測定6次,計算SO2殘留量RSD值。

    1.2.7.3 重復性試驗 取硫熏90 min的黨參原藥材粉末,平行制備供試品溶液6份,衍生化后檢測SO2殘留量,計算RSD值。

    1.2.7.4 穩(wěn)定性試驗 取硫熏90 min的黨參原藥材粉末,按“1.2.2”項下方法平行制備供試品溶液3份,分別在0、0.5、1、1.5、2、2.5、3 h測定熒光強度,計算SO2殘留量RSD值。

    1.2.7.5 加樣回收試驗 稱取硫熏30 min的黨參原藥材(編號1、2、3)與米炒(編號4、5、6)、蜜制(編號7、8、9)飲片粉末各3份,分別加入濃度為120 μg/mL的亞硫酸鈉對照品溶液0.8、1.0與1.2 mL,按“1.2.2”項下方法制備供試品,衍生后測熒光強度,計算回收率。

    1.2.8 樣品測定 取硫熏黨參原藥材及其飲片樣品粉末,按“1.2.2”項下供試品制備方法制備供試品溶液,衍生后測定熒光強度,計算SO2殘留量。酸堿滴定法測定方法參照《中國藥典》2015版第四部通則目次“2331項”二氧化硫檢測方法[1]檢測SO2殘留量。其中熒光衍生法測得最終結(jié)果為亞硫酸鈉的含量,將亞硫酸鈉折算為SO2,計算公式:

    試中:c為供試品溶液衍生化后測得的亞硫酸鈉濃度,μg/mL;10為溶液體積,mL;1000為供試品稀釋倍數(shù);0.5075為每g亞硫酸鈉相當?shù)腟O2的質(zhì)量;m為供試品的質(zhì)量,g。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    實驗數(shù)據(jù)以平均值(Mean)±標準差(SD)表示,應(yīng)用SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析(ANOVA),P<0.05認為具有顯著差異。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 激發(fā)發(fā)射波長

    激發(fā)與發(fā)射波長掃描結(jié)果見圖1,激發(fā)波長(λEx)為320 nm,發(fā)射波長(λEm)為385 nm,最終確定測定衍生溶液熒光強度的條件為λEx/λEm=320/385。

    圖1 激發(fā)發(fā)射圖譜Fig.1 Excitation and emission spectrum

    2.2 單因素實驗結(jié)果

    2.2.1 緩沖溶液pH對熒光強度的影響 由圖2可知,隨磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH的增大,熒光強度先增大后減小,pH為6.6時熒光強度為681755.24,此時熒光強度最大。根據(jù)方差分析結(jié)果可得pH6.6與pH6.5、6.7對熒光強度的影響有顯著性差異(P<0.05),因此選擇磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液最佳pH為6.6。

    圖2 磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH對熒光強度的影響Fig.2 Effect of pH of disodium hydrogen phosphate-potassiumdihydrogen buffer solution on the fluorescence intensity注:不同小寫字母代表差異顯著(P<0.05);圖3~9同。

    2.2.2 緩沖溶液用量對熒光強度的影響 由圖3可知,隨磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量的增加,熒光強度先增大后減小,磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量為1.5 mL時,熒光強度最大,為674537.77。根據(jù)方差分析結(jié)果,磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量1.5 mL與用量1.0和2.0 mL對熒光強度的影響有顯著差異(P<0.05),因此選擇磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液最適用量為1.5 mL。

    圖3 磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量對熒光強度的影響Fig.3 Effect of dosage of disodium hydrogenphosphate-potassium dihydrogen buffersolution on the fluorescence intensity

    2.2.3 鄰苯二甲醛用量對熒光強度的影響 由圖4可得,隨鄰苯二甲醛用量的增加,熒光強度先增大后減小,當鄰苯二甲醛溶液用量為2.0 mL時,熒光強度最大,為589218.52。鄰苯二甲醛溶液用量2.0 mL與用量1.5和2.5 mL對熒光強度的影響有顯著差異(P<0.05),因此選擇鄰苯二甲醛最適用量為2.0 mL。

    圖4 鄰苯二甲醛用量對熒光強度的影響Fig.4 Effect of dosage of o-phthalaldehydesolution on the fluorescence intensity

    2.2.4 乙酸銨濃度對熒光強度的影響 由圖5可知,隨乙酸銨濃度的增大,熒光強度先增大后減小,當乙酸銨濃度為5 mmol/L時,熒光強度最大,為776035.51。乙酸銨濃度為5 mmol/L與濃度為2.5和7.5 mmol/L對熒光強度的影響有顯著性差異(P<0.05),因此選擇乙酸銨最適濃度為5 mmol/L。

    圖5 乙酸銨濃度對熒光強度的影響Fig.5 Effect of ammonium acetate concentrationon the fluorescence intensity

    2.2.5 乙酸銨用量對熒光強度的影響 由圖6可知,隨乙酸銨用量的增加,熒光強度先增大后減小,當乙酸銨用量為2.0 mL時,熒光強度最大,為616380.16,。根據(jù)方差分析,乙酸銨用量2.0、1.5 mL對熒光強度的影響無顯著差異(P>0.05),根據(jù)熒光強度測定結(jié)果最終選擇乙酸銨用量為2.0 mL。

    圖6 乙酸銨用量對熒光強度的影響 Fig.6 Effect of ammonium acetate dosageon the fluorescence intensity

    2.2.6 反應(yīng)溫度對熒光強度的影響 由圖7可知,隨反應(yīng)溫度的升高,熒光強度先增大后減小,當反應(yīng)溫度為50 ℃時,熒光強度最大,為768253.66。根據(jù)方差分析,反應(yīng)溫度為50 ℃與45、55 ℃時的熒光強度之間無顯著性差異(P>0.05),根據(jù)熒光強度測定結(jié)果選擇反應(yīng)溫度為50 ℃。

    圖7 反應(yīng)溫度對熒光強度的影響Fig.7 Effect of reaction temperatureon the fluorescence intensity

    2.2.7 反應(yīng)時間對熒光強度的影響 由圖8可知,隨反應(yīng)時間延長,熒光強度先增大后減小,反應(yīng)時間為5 min時,熒光強度最大,為748425.61。反應(yīng)5 min與反應(yīng)3、7 min時的熒光強度之間無顯著性差異(P>0.05),根據(jù)熒光強度測定結(jié)果選擇反應(yīng)時間為5 min。

    圖8 反應(yīng)時間對熒光強度的影響Fig.8 Effect of reaction timeon the fluorescence intensity

    2.2.8 靜置時間對熒光強度的影響 由圖9可知,隨靜置時間的增長,熒光強度逐漸降低,在40~120 min之間其熒光強度降低了4.28%,變化較小。根據(jù)方差分析,靜置40、50 min時熒光強度之間無顯著性差異(P>0.05),從時間角度考慮選擇靜置時間為40 min。

    圖9 靜置時間對熒光強度的影響Fig.9 Effect of static reaction timeon the fluorescence intensity

    2.3 響應(yīng)面優(yōu)化試驗結(jié)果

    2.3.1 響應(yīng)面結(jié)果及方差分析 響應(yīng)面試驗設(shè)計方案及結(jié)果見表2,用Design-Expert 10.0對結(jié)果分析,方差分析見表3,由表3可知回歸模型極顯著(P<0.01),表明該回歸模型有意義;模型R2=0.9691,說明該模型可解釋絕大部分實驗數(shù)據(jù),失擬項P>0.05,無顯著差異,表明擬合度良好。從表3中可知,模型中一次項A不顯著(P>0.05),B、D極顯著(P<0.01),C顯著(P<0.05),二次項中A2、B2、C2均極顯著(P<0.01),D2不顯著(P>0.05),交互作用均不顯著(P>0.05)。得到磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH(A)、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量(B)、鄰苯二甲醛溶液用量(C)及乙酸銨濃度(D)與反應(yīng)體系熒光之間的回歸方程為:

    表2 響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果Table 2 Design and results of response surface experiment

    表3 方差分析結(jié)果Table 3 Results of variance analysis

    R1=8.877E+005+4384.21A+15628.02B+12710.29C-70302.88D-10836.69AB+4293.95AC-5984.64AD-1310.17BC+2241.47BD-14992.68CD-69171.06A2-63970.07B2-49685.91C2-11443.15D2。

    2.3.2 響應(yīng)面分析 響應(yīng)面的坡度越大,表明因素對響應(yīng)值的影響越大;響應(yīng)面坡度越小,表明因素改變對響應(yīng)值的影響也越小[26]。磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液pH及用量、鄰苯二甲醛溶液用量及乙酸銨溶液濃度對熒光強度的影響如圖10所示,結(jié)合方差分析結(jié)果可知,四個因素之間的交互作用均不顯著。

    圖10 各因素相互作用對熒光強度影響的響應(yīng)面圖Fig.10 Response surface plots of interaction of factors affecting the fluorescence intensity

    2.3.3 驗證試驗及結(jié)果 根據(jù)Design Expert 10.0軟件預(yù)測的最佳結(jié)果,確定最佳衍生條件為:pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量為1.5 mL,鄰苯二甲醛溶液用量為2.1 mL,2.5 mmol/L乙酸銨用量2.0 mL,反應(yīng)溫度為50 ℃,反應(yīng)時間為5 min,靜置時間為40 min,預(yù)測結(jié)果為951516.78。根據(jù)最佳衍生條件對預(yù)測結(jié)果進行驗證,實際測得平均熒光強度為955865.21,經(jīng)方差分析,預(yù)測結(jié)果與實際測得結(jié)果無顯著差異(P>0.05),誤差為0.46%。因此,用Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化熒光衍生法的結(jié)果可靠。

    2.4 方法學考察結(jié)果

    2.4.1 線性關(guān)系考察結(jié)果 以亞硫酸鈉濃度與熒光強度繪制標準曲線,得方程Y=1.37064E7X+288776,R2=0.9991,表明亞硫酸鈉濃度在0.01~0.2 μg/mL之間線性關(guān)系良好,見圖11,檢測限為1.89×10-3μg/mL。

    圖11 亞硫酸鈉線性關(guān)系Fig.11 Standard curve of sodium sulfite

    2.4.2 精密度試驗 熒光強度RSD為0.76%,表明儀器精密度良好,結(jié)果見表4。

    2.4.3 重復性試驗 二氧化硫殘留量RSD為1.59%,說明該方法重復性良好,結(jié)果見表5。

    2.4.4 穩(wěn)定性試驗 在3 h內(nèi)熒光強度RSD為4.13%,在3 h內(nèi)穩(wěn)定性良好,結(jié)果見表6。

    表6 穩(wěn)定性考察結(jié)果Table 6 Stability test results of experimental methods

    2.4.5 加樣回收試驗 平均回收率為98.61%,回收率RSD為4.89%,表明該方法回收率較好,結(jié)果見表7。

    表7 加樣回收考察結(jié)果Table 7 Addition standard recycling inspection results

    圖12 專屬性考察結(jié)果Fig.12 Results of specificity inspection

    2.5 樣品測定結(jié)果與分析

    2.5.1 不同硫熏時間對黨參藥材SO2殘留量的影響 藥典規(guī)定黨參藥材及飲片SO2殘留量不得超過400 μg/g[27],圖13~圖16中熒光衍生法測定結(jié)果顯示:硫熏0、30 min原藥材SO2殘留量未超出藥典規(guī)定的400 μg/g的標準,而硫熏60、90 min原藥材SO2殘留量均超出藥典規(guī)定的400 μg/g的標準。其中,硫熏0 min原藥材也檢測出SO2殘留,但含量較低,可能有以下兩個因素:一是在黨參生長過程中從自然界中吸收的少量SO2,二是在貯藏過程中被污染而有SO2殘留。SO2可以殺死蟲卵,其與水結(jié)合后產(chǎn)生的亞硫酸可以抑制細菌滋生;黨參樣品在貯存兩個月時,硫熏0、30、60 min原藥材均出現(xiàn)發(fā)霉現(xiàn)象,貯存六個月后硫熏0、30 min原藥材生蟲現(xiàn)象嚴重,硫熏60 min原藥材生蟲現(xiàn)象較輕,而硫熏90 min原藥材在貯存1年內(nèi)未出現(xiàn)生蟲和發(fā)霉現(xiàn)象。雖然黨參硫熏90 min可以防止生蟲發(fā)霉,但SO2殘留量超出藥典標準,影響用藥安全。黨參的產(chǎn)地加工中應(yīng)盡量避免硫磺熏蒸,近些年有文獻報道了熱風干燥、紅外干燥、微波干燥[28-30]等取代硫熏的加工方法,可以起到防蟲、防霉的作用,為替代黨參硫熏提供新的發(fā)展思路。

    圖13 硫熏0 min樣品二氧化硫殘留量變化Fig.13 Change of sulfur dioxide residualin sulfur fumigation sample for 0 min注:顯著性在相同測定方法結(jié)果內(nèi)比較,不同字母表示差異顯著,P<0.05;圖14~16同。

    圖14 硫熏30 min樣品二氧化硫殘留量變化Fig.14 Change of sulfur dioxide residualin sulfur fumigation sample for 30 min

    圖15 硫熏60 min樣品二氧化硫殘留量變化Fig.15 Change of sulfur dioxide residualin sulfur fumigation sample for 60 min

    圖16 硫熏90 min樣品二氧化硫殘留量變化Fig.16 Change of sulfur dioxide residualin sulfur fumigation sample for 90 min

    2.5.2 加工炮制對黨參SO2殘留量的影響 黨參經(jīng)加工炮制為飲片(節(jié)子貨、厚片、米炒和蜜制)后,SO2殘留量測定結(jié)果見圖13~圖16,熒光衍生法測定結(jié)果顯示:原藥材與飲片之間SO2殘留量均有顯著差異(P<0.05),蜜制飲片與其它樣品SO2殘留量也均有顯著差異(P<0.05),說明硫熏黨參經(jīng)加工炮制后,飲片較原藥材SO2殘留量明顯降低,而蜜制飲片的SO2殘留量最低;其中硫熏0、30、60 min飲片與硫熏90 min蜜制飲片SO2殘留量符合藥典標準,硫熏90 min節(jié)子貨、厚片及米炒飲片SO2殘留量均超出藥典標準;與原藥材相比節(jié)子貨SO2殘留量平均降低49.75%,厚片SO2殘留量平均降低約42.73%,米炒后SO2殘留量平均降低50.2%,蜜制后SO2殘留量平均降低61.08%,可能是在樣品處理過程中用水將黨參悶濕后,再進行切片的過程中SO2殘留量降低較大,其次米炒與蜜制飲片較厚片SO2殘留量低,可能是因為在炒制過程中,高溫加熱使部分SO2揮發(fā),且高溫使SO2與黨參成分發(fā)生反應(yīng),轉(zhuǎn)化為含硫衍生物[31-32],從而使SO2殘留量殘留量降低。

    2.5.3 熒光衍生法與酸堿滴定法結(jié)果比較 熒光衍生法測得結(jié)果較酸堿滴定法測得結(jié)果平均高24.87%,因為酸堿滴定法在酸性條件下測得的SO2留量僅為游離態(tài)亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化為SO2的量,而可逆結(jié)合態(tài)的亞硫酸鹽在酸性條件下穩(wěn)定;而熒光衍生法采用NaOH溶液提取,可將可逆結(jié)合態(tài)的亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化為游離的亞硫酸鹽[33],其測得結(jié)果要比酸堿滴定法測得結(jié)果略高。

    3 結(jié)論

    本文用響應(yīng)面法對熒光衍生法的衍生條件進行優(yōu)化,建立回歸模型,經(jīng)方差分析證明該模型可靠,根據(jù)響應(yīng)面分析結(jié)果確定最佳熒光衍生件為:pH為6.6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液用量為1.5 mL,鄰苯二甲醛溶液用量為2.1 mL,2.5 mmol/L乙酸銨用量2.0 mL,反應(yīng)溫度為50 ℃,反應(yīng)時間為5 min,靜置時間為40 min,在此條件下測得平均熒光強度為955865.21;方法學考察結(jié)果顯示:亞硫酸鈉濃度在0.01~0.2 μg/mL之間,熒光強度有較好的線性關(guān)系,檢測限為1.89×10-3μg/mL,精密度、穩(wěn)定性、重復性、加樣回收及專屬性考察結(jié)果較好;熒光衍生法可作為黨參SO2殘留量的測定方法,其測得結(jié)果與酸堿滴定法測定結(jié)果相比平均高24.87%。

    黨參硫熏0、30 min原藥材SO2殘留量未超出藥典標準,而硫熏60、90 min原藥材SO2殘留量超出藥典標準;加工炮制可以降低硫熏黨參的SO2殘留量,硫熏黨參經(jīng)加工炮制后,飲片較原藥材SO2殘留量均明顯降低,蜜制飲片SO2殘留量最低;硫熏0、30、60 min飲片與硫熏90 min蜜制飲片SO2殘留量符合藥典標準,硫熏90 min節(jié)子貨、厚片及米炒飲片SO2殘留量均超出藥典標準。

    猜你喜歡
    磷酸氫二鈉乙酸銨緩沖溶液
    ADC發(fā)泡劑副產(chǎn)十水碳酸鈉制取磷酸氫二鈉的技術(shù)研究
    流動相組分及比例對苯甲酸、山梨酸、糖精鈉保留時間的影響
    幾種緩沖溶液簡介及應(yīng)用*
    化學與粘合(2020年6期)2020-03-08 09:06:30
    不同土壤陽離子交換量測定方法的對比分析
    Na2HPO4·12H2O與聚丙烯酸鈉復合相變材料的制備及性能
    快速檢測土壤陽離子交換量的方法優(yōu)化
    基礎(chǔ)化學緩沖溶液教學難點總結(jié)
    科技視界(2017年25期)2017-12-11 20:30:32
    農(nóng)用低溫相變蓄熱材料磷酸氫二鈉的制備與性能研究
    二氮雜菲分光光度法測定水中總鐵試劑空白的討論
    緩沖溶液法回收置換崗位中二氧化硫尾氣
    河南科技(2014年15期)2014-02-27 14:12:29
    青春草国产在线视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产一区有黄有色的免费视频| 在线天堂中文资源库| 岛国毛片在线播放| 一级黄片播放器| 久久久国产一区二区| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 久久97久久精品| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲一区中文字幕在线| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品久久久久久精品古装| 日本91视频免费播放| 久久毛片免费看一区二区三区| 不卡视频在线观看欧美| 成人亚洲欧美一区二区av| 免费高清在线观看日韩| 久久鲁丝午夜福利片| 性高湖久久久久久久久免费观看| 日本av免费视频播放| 久久ye,这里只有精品| 99久国产av精品国产电影| 99久久人妻综合| www.av在线官网国产| 香蕉国产在线看| 国产高清国产精品国产三级| 成人二区视频| 国产成人一区二区在线| 波多野结衣一区麻豆| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 欧美+日韩+精品| freevideosex欧美| 韩国av在线不卡| 午夜福利视频在线观看免费| 男女免费视频国产| 国产精品人妻久久久影院| 精品国产国语对白av| 欧美成人午夜免费资源| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲四区av| 在线观看一区二区三区激情| 边亲边吃奶的免费视频| 久久ye,这里只有精品| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 亚洲综合精品二区| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 亚洲成人av在线免费| 亚洲国产av新网站| 最近手机中文字幕大全| 国产野战对白在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 日韩av免费高清视频| 五月天丁香电影| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 亚洲成色77777| 国产国语露脸激情在线看| 国产成人免费无遮挡视频| 一区二区三区激情视频| 午夜福利视频在线观看免费| 女的被弄到高潮叫床怎么办| www日本在线高清视频| 久久精品国产综合久久久| 精品少妇内射三级| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲精品一二三| 2022亚洲国产成人精品| 久久精品久久精品一区二区三区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲人成77777在线视频| 性少妇av在线| 婷婷色综合www| 亚洲第一av免费看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产一区二区 视频在线| 日韩中文字幕欧美一区二区 | tube8黄色片| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 一本色道久久久久久精品综合| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 看免费av毛片| 精品人妻一区二区三区麻豆| 中文天堂在线官网| 久久久久久久精品精品| 如何舔出高潮| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲欧洲日产国产| 国产精品久久久久久精品古装| 国产在线视频一区二区| 26uuu在线亚洲综合色| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲图色成人| 精品福利永久在线观看| 天堂8中文在线网| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产免费现黄频在线看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| av女优亚洲男人天堂| 成人午夜精彩视频在线观看| 午夜av观看不卡| 91精品国产国语对白视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 精品国产露脸久久av麻豆| 国产熟女欧美一区二区| 欧美成人午夜精品| 久久精品久久久久久久性| 99re6热这里在线精品视频| 99香蕉大伊视频| 大片免费播放器 马上看| 丁香六月天网| freevideosex欧美| 卡戴珊不雅视频在线播放| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 久久热在线av| 97在线人人人人妻| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产精品 欧美亚洲| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 在线精品无人区一区二区三| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 下体分泌物呈黄色| 蜜桃在线观看..| 日本av免费视频播放| 91精品伊人久久大香线蕉| 一个人免费看片子| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久精品国产综合久久久| 欧美97在线视频| 日韩一本色道免费dvd| 黄片播放在线免费| av在线老鸭窝| 久久99蜜桃精品久久| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 亚洲男人天堂网一区| 日韩中字成人| 人妻少妇偷人精品九色| 高清视频免费观看一区二区| 成人国语在线视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 黄色一级大片看看| www.精华液| 99久国产av精品国产电影| 看非洲黑人一级黄片| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 少妇人妻 视频| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲成人手机| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 日韩电影二区| 最新的欧美精品一区二区| 啦啦啦在线观看免费高清www| 成年人午夜在线观看视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 男女无遮挡免费网站观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 日韩中文字幕视频在线看片| 日本av手机在线免费观看| 最近的中文字幕免费完整| 欧美激情 高清一区二区三区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 成人国语在线视频| 又黄又粗又硬又大视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 欧美精品一区二区大全| 国产片内射在线| 日韩一区二区三区影片| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 欧美精品av麻豆av| 女性被躁到高潮视频| 18禁观看日本| 国产av码专区亚洲av| 日日撸夜夜添| 啦啦啦在线免费观看视频4| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久鲁丝午夜福利片| av片东京热男人的天堂| 老司机亚洲免费影院| 午夜免费男女啪啪视频观看| 中文欧美无线码| 午夜福利视频精品| 国产精品久久久久久久久免| 人妻 亚洲 视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一边亲一边摸免费视频| 日韩一区二区三区影片| 女人久久www免费人成看片| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 蜜桃国产av成人99| 成人免费观看视频高清| 99久久中文字幕三级久久日本| a 毛片基地| 丝瓜视频免费看黄片| 精品酒店卫生间| 亚洲精品乱久久久久久| 九色亚洲精品在线播放| 精品亚洲成国产av| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 一区二区三区四区激情视频| 成年人午夜在线观看视频| 日本91视频免费播放| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产成人91sexporn| 免费观看无遮挡的男女| 久久久久久久大尺度免费视频| 成年人免费黄色播放视频| 日韩伦理黄色片| 免费观看无遮挡的男女| 久久久久久人妻| videosex国产| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产爽快片一区二区三区| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 国产av国产精品国产| 日韩视频在线欧美| 七月丁香在线播放| 18禁动态无遮挡网站| 美女大奶头黄色视频| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产精品国产av在线观看| 性少妇av在线| 国产爽快片一区二区三区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 午夜91福利影院| 亚洲第一青青草原| 国产激情久久老熟女| 18禁观看日本| 欧美日韩视频精品一区| 国产乱来视频区| 老司机影院毛片| 中国三级夫妇交换| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 国产97色在线日韩免费| 黄片播放在线免费| 久久久久久人人人人人| 在线天堂中文资源库| 日韩不卡一区二区三区视频在线| videossex国产| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产av精品麻豆| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 精品一区在线观看国产| 日韩欧美精品免费久久| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产xxxxx性猛交| 1024视频免费在线观看| 久久青草综合色| 99久久人妻综合| 日本免费在线观看一区| 色播在线永久视频| 大香蕉久久网| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 成人国产av品久久久| 少妇精品久久久久久久| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 秋霞在线观看毛片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 免费日韩欧美在线观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 青春草视频在线免费观看| 亚洲美女视频黄频| 成年av动漫网址| 丝袜人妻中文字幕| 欧美日韩精品网址| 满18在线观看网站| 毛片一级片免费看久久久久| 九草在线视频观看| 免费观看性生交大片5| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 午夜久久久在线观看| 日日啪夜夜爽| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 三级国产精品片| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久国内精品自在自线图片| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 免费观看无遮挡的男女| 久久久久国产网址| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 午夜激情久久久久久久| 少妇精品久久久久久久| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 18禁观看日本| 精品国产乱码久久久久久小说| 丰满饥渴人妻一区二区三| 电影成人av| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 90打野战视频偷拍视频| 中文天堂在线官网| 热99国产精品久久久久久7| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 青青草视频在线视频观看| 久久久精品免费免费高清| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 91国产中文字幕| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲av中文av极速乱| a级毛片黄视频| 99国产综合亚洲精品| 国精品久久久久久国模美| 国产毛片在线视频| 综合色丁香网| 不卡视频在线观看欧美| 久久久久久久精品精品| 国产伦理片在线播放av一区| 男女边吃奶边做爰视频| 久热这里只有精品99| 777米奇影视久久| 涩涩av久久男人的天堂| 最近最新中文字幕免费大全7| 韩国精品一区二区三区| 久久这里只有精品19| 18禁动态无遮挡网站| 国产精品无大码| 亚洲精品第二区| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 久久精品国产综合久久久| 国产精品.久久久| 综合色丁香网| 看免费成人av毛片| 中文字幕av电影在线播放| 99re6热这里在线精品视频| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲欧美成人精品一区二区| 9色porny在线观看| 91精品三级在线观看| 两个人看的免费小视频| 亚洲在久久综合| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美精品av麻豆av| 久久av网站| 久久影院123| 国产成人午夜福利电影在线观看| 丰满迷人的少妇在线观看| 蜜桃在线观看..| 男女国产视频网站| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产片内射在线| 亚洲人成网站在线观看播放| 中国国产av一级| 宅男免费午夜| 我的亚洲天堂| 欧美日本中文国产一区发布| 在线观看免费高清a一片| 日本黄色日本黄色录像| 91精品伊人久久大香线蕉| 看十八女毛片水多多多| 国产精品久久久久久av不卡| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 精品国产国语对白av| 国产高清不卡午夜福利| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 天堂中文最新版在线下载| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久精品国产亚洲av高清一级| 日本欧美国产在线视频| 老鸭窝网址在线观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 电影成人av| 国产黄色视频一区二区在线观看| 免费高清在线观看视频在线观看| 蜜桃国产av成人99| 观看av在线不卡| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 视频区图区小说| 自线自在国产av| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 老熟女久久久| 色吧在线观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 男女国产视频网站| 国产精品二区激情视频| 高清不卡的av网站| 亚洲成人av在线免费| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 黑丝袜美女国产一区| 一级毛片我不卡| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 我要看黄色一级片免费的| 免费观看在线日韩| 下体分泌物呈黄色| 一区二区三区精品91| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 人妻 亚洲 视频| www.熟女人妻精品国产| 尾随美女入室| 一区二区三区四区激情视频| 色网站视频免费| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 久久99一区二区三区| 九色亚洲精品在线播放| 香蕉国产在线看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 一级毛片 在线播放| 国产成人精品一,二区| 在线观看三级黄色| 亚洲视频免费观看视频| 久久青草综合色| 国产成人精品在线电影| 黑人欧美特级aaaaaa片| 男人添女人高潮全过程视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 一二三四在线观看免费中文在| 国产在线视频一区二区| 国产精品 欧美亚洲| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩中字成人| 亚洲三区欧美一区| 永久免费av网站大全| 99九九在线精品视频| 在线天堂中文资源库| 搡老乐熟女国产| 精品国产一区二区三区四区第35| 精品国产一区二区久久| 热re99久久精品国产66热6| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 日韩中文字幕欧美一区二区 | 高清不卡的av网站| 日韩视频在线欧美| 亚洲综合色网址| 亚洲视频免费观看视频| 91精品国产国语对白视频| 免费看av在线观看网站| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 精品亚洲成a人片在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 免费看不卡的av| 日本爱情动作片www.在线观看| 色94色欧美一区二区| 99久久精品国产国产毛片| 久久免费观看电影| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 各种免费的搞黄视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 一区二区三区四区激情视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 日韩 亚洲 欧美在线| 大香蕉久久成人网| 亚洲国产精品国产精品| 国产精品三级大全| 精品少妇黑人巨大在线播放| 美国免费a级毛片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 欧美bdsm另类| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 久久ye,这里只有精品| 日本黄色日本黄色录像| 99久久精品国产国产毛片| 1024视频免费在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 少妇的丰满在线观看| 亚洲视频免费观看视频| 日日爽夜夜爽网站| 熟女电影av网| 亚洲五月色婷婷综合| 久久精品国产自在天天线| videos熟女内射| 国产激情久久老熟女| 在线精品无人区一区二区三| 国产在视频线精品| 亚洲精品视频女| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲精品乱久久久久久| 国产伦理片在线播放av一区| 午夜老司机福利剧场| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 精品午夜福利在线看| 免费在线观看完整版高清| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| a级毛片在线看网站| 亚洲av.av天堂| 成年动漫av网址| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲 欧美一区二区三区| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 欧美成人午夜精品| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲人成网站在线观看播放| av卡一久久| av网站免费在线观看视频| 晚上一个人看的免费电影| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产毛片在线视频| 亚洲欧美清纯卡通| 只有这里有精品99| 午夜福利视频在线观看免费| 国产一区二区 视频在线| 久久国产精品大桥未久av| 日韩 亚洲 欧美在线| 又大又黄又爽视频免费| 久久这里有精品视频免费| 国产av国产精品国产| 高清黄色对白视频在线免费看| 另类精品久久| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 午夜日韩欧美国产| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 99久久人妻综合| 激情五月婷婷亚洲| 国产高清不卡午夜福利| 一边摸一边做爽爽视频免费| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲,欧美精品.| 最近手机中文字幕大全| 日本av免费视频播放| 午夜影院在线不卡| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲第一区二区三区不卡| 妹子高潮喷水视频| 国产男人的电影天堂91| 免费大片黄手机在线观看| 女性被躁到高潮视频| 五月伊人婷婷丁香| 日韩一区二区视频免费看| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品 国内视频| 亚洲图色成人| 搡老乐熟女国产| 叶爱在线成人免费视频播放| 热re99久久精品国产66热6| 久久久久视频综合| 欧美人与善性xxx| 超碰成人久久| 99香蕉大伊视频| 久久这里有精品视频免费| 热re99久久国产66热| 男女边摸边吃奶| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 激情五月婷婷亚洲| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲精品中文字幕在线视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产片特级美女逼逼视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 91精品三级在线观看| 亚洲精品日本国产第一区| 日韩精品有码人妻一区| 18+在线观看网站| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 国产成人精品久久久久久| 晚上一个人看的免费电影| √禁漫天堂资源中文www| 波野结衣二区三区在线| 亚洲三区欧美一区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 免费大片黄手机在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 国产成人免费观看mmmm| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲av免费高清在线观看| 日韩伦理黄色片| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 最黄视频免费看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 大片免费播放器 马上看| 久久精品亚洲av国产电影网| 国产又爽黄色视频| 在线观看免费高清a一片| 亚洲av国产av综合av卡| 老女人水多毛片| 看免费av毛片| 日韩av在线免费看完整版不卡| 精品人妻一区二区三区麻豆| 校园人妻丝袜中文字幕| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 丁香六月天网| 久久97久久精品| 2022亚洲国产成人精品| 国产免费又黄又爽又色| 99久久综合免费| 国产精品成人在线| 男女无遮挡免费网站观看| 精品国产国语对白av| 波多野结衣一区麻豆| 考比视频在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 最新中文字幕久久久久| 黄片小视频在线播放| 国产片特级美女逼逼视频| 极品人妻少妇av视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲成国产人片在线观看|