豬圓環(huán)病毒2型與豬流行性腹瀉病毒混合感染診斷與防控

[摘 要] 豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）和豬流行性腹瀉病毒（PEDV）為重要傳染性病毒，在全世界各地區(qū)廣泛流行，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。PCV2感染豬群可導(dǎo)致斷奶仔豬出現(xiàn)多系統(tǒng)衰竭綜合征、豬皮炎與腎病綜合征等，導(dǎo)致患病豬群出現(xiàn)免疫抑制，以PCV2與其他病原混合感染較為常見?；诖耍院幽鲜∏遑S縣鳳翔養(yǎng)豬戶仔豬為例，介紹豬圓環(huán)病毒2型與豬流行性腹瀉病毒混合感染的診斷與防控措施。

[關(guān)鍵詞] 豬圓環(huán)病毒2型;豬流行性腹瀉病毒;混合感染;仔豬

[中圖分類號] S858.28 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1674-7909（2020）07-118-2

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）在我國豬場廣泛流行，其感染豬群可引起多種臨床癥狀，如豬皮炎腎病綜合征及斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。PCV2感染可使患畜出現(xiàn)免疫抑制，感染其他病原率增高，發(fā)病率和死亡率都相應(yīng)提高。豬流行性腹瀉病毒（PEDV）為常見腸道病毒，仔豬感染該病后可出現(xiàn)急性腹瀉、嘔吐等臨床癥狀，并伴隨高發(fā)病率和高死亡率。在生豬的養(yǎng)殖過程中，病原混合感染十分常見，混合感染導(dǎo)致疫病臨床癥狀復(fù)雜，容易造成漏診或誤診，延誤疫病的治療，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。基于此，以河南省清豐縣鳳翔養(yǎng)豬戶仔豬PEDV與PCV2混合感染案例為例，闡述其臨床、病理及實驗室診斷過程，旨在為該類混合感染疫病的診斷和防控提供借鑒。

1 發(fā)病情況

2019年4月初，河南省清豐縣鳳翔養(yǎng)豬戶仔豬發(fā)病，最初是2窩新生仔豬持續(xù)性腹瀉、嘔吐等，飼養(yǎng)員初以為仔豬受涼感冒所致，對豬群灌服抗生素，但效果不佳，部分仔豬死亡。幾日后，其他欄舍仔豬開始腹瀉、嘔吐、脫水等，發(fā)病率和死亡率都較高。截至2019年4月中旬，該養(yǎng)殖場已有百余頭仔豬死亡，死亡率達(dá)30%。據(jù)了解，該豬場已經(jīng)對豬群免疫接種過豬瘟、豬藍(lán)耳、偽狂犬等疫苗，但未對豬群免疫接種豬流行性腹瀉與豬傳染性胃腸炎二聯(lián)疫苗和圓環(huán)疫苗。

2 臨床癥狀與病理變化

為研究病因，進(jìn)入豬場觀察豬群發(fā)病情況，并對發(fā)病嚴(yán)重仔豬進(jìn)行病理解剖。發(fā)病仔豬主要表現(xiàn)水樣腹瀉，帶腥臭味，肛門松弛，尾部帶有糞污，少部分仔豬出現(xiàn)嘔吐、極度消瘦、精神萎靡、被毛粗亂等臨床癥狀。剖檢結(jié)果顯示，病豬腹股溝及頜下淋巴結(jié)腫大、充血，肝臟表面有白色壞死點，腎臟表面有針尖狀出血點;腸道充滿水樣、黃色內(nèi)容物，腸壁薄而透明，腸系淋巴結(jié)腫大等。

根據(jù)病豬發(fā)病表現(xiàn)及解剖病變情況，初步認(rèn)為為豬腸道腹瀉病毒感染所致，其中可能存在PCV2混合感染，但也無法排除是否存在豬偽狂犬病毒（PRV）、豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）和豬瘟（CSFV）病毒等常見病毒混合感染。

3 診斷方法

3.1 細(xì)菌分離鑒定

無菌采集病豬淋巴結(jié)、肺臟、肝臟和腸道內(nèi)容物，取適量組織液或內(nèi)容物上清分別涂布于鮮血瓊脂培養(yǎng)基和普通瓊脂培養(yǎng)基，將培養(yǎng)基均置于37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，分別于24 h和48 h后觀察培養(yǎng)基表面是否存在菌落，并對菌株種類進(jìn)行鑒定。同時，取組織液和內(nèi)容物直接涂片，采用革蘭氏染色法對樣品進(jìn)行處理，鏡檢是否存在細(xì)菌。結(jié)果顯示：培養(yǎng)后24 h和48 h培養(yǎng)基表面均未觀察到菌落生長情況，同時染色鏡檢未檢測到細(xì)菌存在。

3.2 血清抗體檢測

頸靜脈采集發(fā)病仔豬（5頭）血液樣品3～5 mL/頭，短暫離心獲得血清，采用ELISA診斷技術(shù)對血清中PCV2、PEDV、PRV（gE蛋白）、PRRSV和CSFV抗體進(jìn)行檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，5份血清樣品檢測為gE抗體陰性，PEDV和PCV2抗體陽性率分別為100.0%和80.0%，PRRSV和CSFV抗體陽性率均為100.0%。

3.3 病原檢測

無菌采集淋巴結(jié)、肺臟、肝臟及腸道組織樣品（2份），采用DNA/RNA提取試劑盒提取組織樣品核酸，將RNA反轉(zhuǎn)錄后獲得cDNA樣品，采用RT-PCR和PCR技術(shù)分別對樣品中PRRSV、PEDV、CSFV、傳染性胃腸炎病毒（TGEV）和輪狀病毒（PORV）和PCV2進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示，2份樣品均顯示PCV2和PEDV陽性，但其他病原均為陰性。

根據(jù)實驗室診斷結(jié)果可判定，導(dǎo)致該豬場發(fā)病的主要原因是PCV2和PEDV混合感染。

4 防治措施

4.1 緊急免疫接種

檢測結(jié)果顯示病豬為PCV2和PEDV混合感染，應(yīng)對發(fā)病豬群隔離，對瀕臨死亡的病豬進(jìn)行撲殺、無害化處理。對全部豬群免疫接種PCV2滅活疫苗（ZJ/C株），仔豬肌肉注射1 mL/頭，21 d后再次免疫接種，母豬、育肥豬和公豬肌肉注射2 mL/頭;對全群母豬免疫接種豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎二聯(lián)疫苗（ZJ08株和HB08株）免疫接種（2頭份/頭），仔豬肌肉注射1頭份/頭。

4.2 提高飼養(yǎng)管理水平

①建立完善的豬場生物安全體系，將消毒衛(wèi)生工作貫穿于養(yǎng)豬生產(chǎn)的各個環(huán)節(jié);降低豬場內(nèi)病原微生物，減少或杜絕豬群繼發(fā)感染。PCV2對一般的消毒劑抵抗力強(qiáng)，因此，在消毒劑的選擇上應(yīng)考慮使用廣譜消毒藥。

②加強(qiáng)豬群的飼養(yǎng)管理，降低豬群的應(yīng)激因素。很多應(yīng)激因素都可誘發(fā)豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征，加重發(fā)病豬群的病情，導(dǎo)致死亡率上升。因此，應(yīng)盡可能地減少豬群的應(yīng)激因素，避免飼喂發(fā)霉變質(zhì)或含有真菌毒素的飼料，做好豬舍的通風(fēng)換氣工作，改善豬舍的空氣質(zhì)量，降低氨氣濃度。同時，應(yīng)保持豬舍干燥，降低豬群的飼養(yǎng)密度。

③提高豬群的營養(yǎng)水平。PCV2感染可以導(dǎo)致豬群免疫功能下降，因此，營養(yǎng)是影響豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征的一個重要因素。通過提高豬群的蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素和微量元素等水平，提高飼料質(zhì)量，提高斷奶豬的采食量，給仔豬飼喂?jié)窳匣蛑嗔?，保證仔豬充足飲水，可以在一定程度上降低豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征的發(fā)生率及其造成的損失。

④采用完善的藥物預(yù)防方案，控制豬群的細(xì)菌性繼發(fā)感染。針對目前我國豬群中豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征的發(fā)病特點和在實際生產(chǎn)中的應(yīng)用效果，建議以下藥物用于預(yù)防方案。對全場進(jìn)行帶豬消毒，對糞污和墊料等進(jìn)行無害化處理，在走廊上撒5%～10%石灰乳進(jìn)行消毒;在母豬飼料中添加適量黃芪多糖，提高豬群免疫力;在仔豬飲水中添加葡萄糖、電解多維和食鹽，提高仔豬營養(yǎng)水平，防止腹瀉仔豬脫水死亡。

嚴(yán)格執(zhí)行以上措施30 d后回訪，該豬場疫情得到有效控制，豬場仔豬發(fā)病率明顯下降，無大規(guī)模仔豬死亡情況發(fā)生。

5 討論

在生豬養(yǎng)殖過程中，豬群病原混合感染情況十分常見，傳統(tǒng)的臨床與病理診斷已經(jīng)無法滿足對病原精確診斷的要求，需要實驗室診斷技術(shù)的參與。本次案例便是通過實驗室診斷技術(shù)確定仔豬腹瀉為PEDV和PCV2混合感染所致，將發(fā)病原因確診后，對豬群進(jìn)行緊急免疫接種PCV2和PEDV相關(guān)疫苗，然后采取相應(yīng)措施提高飼養(yǎng)管理水平，緩解疫病發(fā)生情況，從而減少養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失。

作者簡介：王社軒（1971—），男，大專，助理獸醫(yī)師，研究方向：動物疫病防控技術(shù)推廣應(yīng)用。