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    大豆磷脂中α-生育酚的檢測方法學(xué)研究

    2020-05-15 10:16:24徐璠峰
    化工設(shè)計通訊 2020年4期
    關(guān)鍵詞:大豆磷脂刻度精密度

    徐璠峰,王 翠,時 晨

    (南京威爾藥業(yè)股份有限公司,江蘇南京 210042)

    大豆磷脂不僅具有較強的乳化、潤濕、分散作用,還在促進體內(nèi)脂肪代謝、肌肉生長、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和體內(nèi)抗氧化損傷等方面發(fā)揮很重要的作用。大豆磷脂可以抑制腸內(nèi)膽固醇的吸收,故能降低血液膽固醇和抗脂肪肝的作用。此外本品還能促進細胞增殖,使其活力旺盛。主要用于動脈粥樣硬化,急、慢性肝炎,脂肪肝,肝硬化,神經(jīng)衰弱等。制成軟膏可用于慢性潰瘍等。

    大豆磷脂作為藥用輔料目前已收錄于中國藥典2015版,EP9.0和USP40中,對相關(guān)質(zhì)量指標提出了更高的要求,但在這幾國藥典中,均未對大豆磷脂中的抗氧劑做出要求,抗氧劑的加入會對以大豆磷脂為輔料的制劑穩(wěn)定性和安全性產(chǎn)生未知的影響,所以增加抗氧劑的檢測是必不可少的。

    本文主要介紹一種抗氧劑α-生育酚的檢測方法,通過HPLC 的分析手段,能準確、迅速、簡便地分析出大豆磷脂中α-生育酚的含量。

    1 試驗樣品

    甲醇,ACS 公司,63Y1808AD,色譜級;乙醇,ACS 公司,43Y1803AT,色譜級;α-生育酚,阿拉丁,K1729039,分析純;大豆磷脂,上海太偉。

    2 方法驗證

    2.1 專屬性和系統(tǒng)適用性實驗

    分別取空白溶劑、α-生育酚對照溶液各10μL,分別注入液相色譜儀,結(jié)果空白溶劑在生育酚出峰位置沒有干擾。

    2.2 檢測限和定量限

    取α-生育酚對照溶液逐級稀釋至S/N 約為10作為定量限,S/N 約為3作為檢測限。結(jié)果分析:α-生育酚達到0.1226μg/ml(24.52×10-6)時可以被檢出,濃度達到0.306 5μg/mL(61.3× 10-6)時可以被定量。如表1所示:

    表1 α-生育酚檢測限和定量限

    2.3 線性范圍

    精密稱取α-生育酚對照品0.103 2g,置于100mL 容量瓶中,加乙醇溶解并稀釋至刻度作線性儲備液(α-生育酚1.032mg/ml),取此溶液適量,加乙醇分別稀釋至不同濃度的溶液,作為不同濃度的對照溶液,分別取不同濃度的混合對照溶液10μL 注入液相色譜儀,實驗結(jié)果顯示:y=1.021x-1.364,R2=0.999,表明線性良好。

    2.4 進樣精密度實驗

    精密稱取α-生育酚對照品0.1032g,置于100ml 容量瓶中,加乙醇溶解并稀釋至刻度作儲備液(α-生育酚1.032mg/ml),取α-生育酚對照品儲備液0.25ml 至50ml 容量瓶,加乙醇溶解并稀釋至刻度即得對照溶液(α-生育酚5.16μg/ml)。取對照溶液連續(xù)進樣6針,考察進樣精密度,結(jié)果表明α-生育酚進樣的相對標準偏差RSD 小于0.48%,說明測定數(shù)據(jù)間的波動性小,即本方法精密度試驗符合要求。如表2所示。

    表2 α-生育酚進樣精密度

    2.5 重復(fù)性

    取大豆磷脂(R161-150-1)樣品100mg,精密稱定,置20ml 量瓶中,加乙醇適量使溶解并稀釋至刻度,作為供試品溶液,按照測定方法進行測定,平行操作6份,計算α-生育酚的含量,均未檢出。結(jié)果表明,該方法重復(fù)性良好。

    2.6 回收率試驗

    精密稱取α-生育酚對照品0.106 0g,置于100mL 容量瓶中,加乙醇溶解并稀釋至刻度作儲備液(α-生育酚1.060mg/mL),取α-生育酚對照品儲備液1mL 至20mL 容量瓶,加乙醇溶解并稀釋至刻度即得對照溶液(α-生育酚53μg/mL)。取大豆磷脂(R161-150-1)樣品100mg,精密稱定,置20mL量瓶中,加溶劑適量使溶解,分別加入α-生育酚對照品溶液1.2、1.0、0.8mL,加溶劑稀釋至刻度,作為供試品溶液,按外標法以峰面積計算測得量,計算回收率,每個水平平行操作3份,計算回收量和回收率。如表3所示。

    表3 α-生育酚加樣回收率

    結(jié)果表明:相對標準偏差RSD 為1.17%,該方法測定α-生育酚,回收率良好。

    2.7 α-生育酚方法的建立

    2.7.1 供試品溶液的制備取本品100mg,精密稱定,置20mL 量瓶中,加乙醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。

    2.7.2 對照溶液的制備精密稱取α-生育酚對照品適量,加乙醇定量稀釋至α-生育酚濃度為5μg/mL,作為對照品溶液。

    2.7.3 限度

    按外標法以峰面積計算,α-生育酚不得過1 000×10-6。

    2.8 樣品檢測

    按已建立的方法檢測本品中的α-生育酚,檢測太偉和我司產(chǎn)品,結(jié)果顯示:太偉和我司產(chǎn)品Well(R161-150-1)中α生育酚均未檢出。

    3 結(jié)束語

    上述大豆磷脂中α-生育酚含量的檢測方法在專屬性、線性和范圍、檢測限、定量限、準確度、精密度等方面均表現(xiàn)良好。

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