長(zhǎng)鏈非編碼RNA ITGB-1對(duì)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞侵襲、遷徙與增殖能力的影響*

張榮嘉，喬德輝，唐悅，鄧顯，程煉，楊輝

646000 四川 瀘州，西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 甲狀腺外科

甲狀腺癌是頭頸部最常見(jiàn)的內(nèi)分泌惡性腫瘤，甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是其最常見(jiàn)的病理類型。研究發(fā)現(xiàn)，PTC的發(fā)病率正呈逐年上升的趨勢(shì)[1]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)由 200多個(gè)核苷酸殘基組成，研究表明lncRNA參與了X染色體沉默、基因組印記以及染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄干擾、轉(zhuǎn)錄激活、核內(nèi)運(yùn)輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過(guò)程，并且lncRNA與腫瘤的關(guān)聯(lián)也越發(fā)引人關(guān)注[2-3]。ITGB-1是lncRNA家族中的一員，目前研究者們已經(jīng)在多種癌癥中發(fā)現(xiàn)其與癌細(xì)胞的侵襲、遷徙及增殖能力相關(guān)，但在PTC領(lǐng)域尚未見(jiàn)明確報(bào)道[4]。本文以PTC癌組織及癌旁正常組織、TPC-1細(xì)胞為研究基礎(chǔ)，探討ITGB-1在PTC中的表達(dá)情況，并分析下調(diào)ITGB-1對(duì)TPC-1細(xì)胞侵襲、遷徙及增殖能力的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 組織樣本 34例患者的組織標(biāo)本來(lái)源于2018年9月～2020年1月在西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院甲狀腺外科接受手術(shù)切除的PTC患者的癌組織以及對(duì)應(yīng)的癌旁正常組織(定義為與腫瘤的距離大于1cm以上)。本實(shí)驗(yàn)納入的所有患者均由2位本院病理科醫(yī)師明確診斷為PTC，所有患者術(shù)前均未接受其他治療。34例患者年齡在20～73歲之間，平均年齡為(41.88±12.97)歲；男性12例，女性22例，其中8例患者年齡大于55歲，20例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，6例患者存在多發(fā)癌灶，17例患者屬于微小乳頭狀癌，11例見(jiàn)被膜或腺體外侵犯。參考美國(guó)癌癥聯(lián)合會(huì)指南第8版，Ⅰ期患者30例，Ⅲ期和Ⅳ期患者各2例。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書(shū)。

1.1.2 細(xì)胞株及來(lái)源 人甲狀腺乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞株TPC-1和人正常甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞株Nthy-ori3-1均來(lái)自中國(guó)科學(xué)院干細(xì)胞庫(kù)。

1.1.3 主要試劑及來(lái)源 本研究使用的試劑和材料有：RPMI培養(yǎng)基1640(Hyclone)；Gibco胎牛血清、F12K培養(yǎng)基(Thermo Fisher)；RT試劑盒 ReverTra Ace qPCR RT Kit(TOYOBO)；QuantiNova SYBR Green PCR Kit購(gòu)(Qiagen)；細(xì)胞、動(dòng)物RNA提取試劑盒(成都福際生物公司)；siRNA序列、陰性對(duì)照序列、轉(zhuǎn)染試劑(廣州銳博公司)；lncRNA ITGB-1序列、內(nèi)參GAPDH序列(上海生工生物工程公司)；細(xì)胞消化胰酶、結(jié)晶紫溶液、組織固定液、CCK8(Cell Counting Kit-8)試劑盒(上海碧云天生物技術(shù)公司)。

1.2 方法

1.2.1 組織樣本 所有新鮮組織均于液氮中速凍24 h后，放入-80℃冰箱儲(chǔ)存。

1.2.2 組織樣本RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄及實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR) 采用動(dòng)物RNA提取試劑盒分別提取PTC組織和癌旁正常組織的總RNA，使用分光光度計(jì)檢測(cè)總RNA濃度及純度(A260/A280在1.8～2.0，RNA濃度在300～500 ng之間)，瓊脂凝膠電泳成像檢測(cè) RNA完整性；采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒對(duì)所提取的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA。利用QuantiNova SYBR Green PCR Kit將所得到的cDNA及目的基因ITGB-1、內(nèi)參GAPHDH配成實(shí)時(shí)熒光定量的反應(yīng)體系后，于qRT-PCR儀上檢測(cè)。所涉及的引物序列如下：ITGB-1上游引物：5’-CCTCTCAGCCTCCAGCGTTG-3’，下游引物：5’-TGCTCTTGCTCACTCACACTCC-3’；GAPDH上游引物：5’-CAAATGACCCCTTCATTGACC-3’，GAPDH下游引物：5’-GACAAGCTTCCCGTTCTCAG-3’。

1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng) TPC-1細(xì)胞采用10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，置于5% CO2、37℃恒溫培養(yǎng)箱；Nthy-ori3-1細(xì)胞采用10%胎牛血清的F12K培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，置于5% CO2、37℃恒溫培養(yǎng)箱。

1.2.4 細(xì)胞RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄及qRT-PCR 采用細(xì)胞RNA提取試劑盒分別提取TPC-1細(xì)胞、Nthy-ori3-1細(xì)胞的總RNA，余步驟同上述組織提取部分。

1.2.5 細(xì)胞分組及培養(yǎng)試劑差異 以TPC-1細(xì)胞設(shè)置空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組和目的基因組，于空白對(duì)照組加入常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基，陰性對(duì)照組加入含有無(wú)意義序列的siRNA的轉(zhuǎn)染體系培養(yǎng)基，目的基因組加入含siRNA序列的轉(zhuǎn)染體系培養(yǎng)基，每組均3個(gè)副孔。

1.2.6 轉(zhuǎn)染效率測(cè)定 消化培養(yǎng)瓶中均勻生長(zhǎng)且細(xì)胞密度大約為80%的TPC-1細(xì)胞后均勻種植于6孔板中，待細(xì)胞完全貼壁且密度大約為每孔面積50%左右進(jìn)行轉(zhuǎn)染，根據(jù)分組配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h提取細(xì)胞RNA，并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后行qRT-PCR檢測(cè)。所涉及的基因序列如下：siRNA靶序列為 5’-GCAGCTGTTTCCAGAATATTGC-3’，si-Ctrl的靶序列5’-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3’。

1.2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)侵襲能力 消化培養(yǎng)瓶中均勻生長(zhǎng)且細(xì)胞密度大約為80%的TPC-1細(xì)胞后均勻種植于24孔板中，待細(xì)胞完全貼壁且每孔密度約50%左右進(jìn)行轉(zhuǎn)染，根據(jù)分組配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h后經(jīng)消化、終止消化、洗滌、離心后，于每個(gè)transwell小室內(nèi)接種40 000個(gè)細(xì)胞，內(nèi)層加入無(wú)血清的培養(yǎng)基，外層加入含10%胎牛血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后取出，磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS)清洗小室內(nèi)外，棉簽輕柔擦拭小室內(nèi)層，重復(fù)3次，用組織固定液固定細(xì)胞10 min，0.1%的結(jié)晶紫染色10 min，PBS漂洗、晾干后于顯微鏡下拍照并計(jì)數(shù)穿過(guò)小室的細(xì)胞個(gè)數(shù)。

1.2.8 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遷徙能力 消化培養(yǎng)瓶中均勻生長(zhǎng)且細(xì)胞密度大約為80%的TPC-1細(xì)胞后均勻種植于已標(biāo)記觀察點(diǎn)的12孔板中，待細(xì)胞完全貼壁且每孔密度約50%左右進(jìn)行轉(zhuǎn)染，根據(jù)分組配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h后，用20 μL加樣槍尖在每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)孔內(nèi)劃痕(作為 0 h); 磷酸鹽緩沖液小心洗滌細(xì)胞三次清除劃下的細(xì)胞，加入無(wú)血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞24 h; 在顯微鏡下觀察細(xì)胞的劃痕愈合能力，計(jì)算劃痕愈合率，公式：(0 h劃痕距離-24 h劃痕距離)/ 0 h劃痕距離。

1.2.9 CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)增殖能力 消化培養(yǎng)瓶中均勻生長(zhǎng)且細(xì)胞密度大約為80%的TPC-1細(xì)胞后均勻種植于24孔板中，待細(xì)胞完全貼壁且每孔密度約50%左右進(jìn)行轉(zhuǎn)染，根據(jù)分組配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h后經(jīng)消化、終止消化后接種于96孔板中，每孔細(xì)胞數(shù)約3 000個(gè)，并于24 h、48 h、72 h分別向孔中加入10 μL CCK溶液和100 μL無(wú)血清培養(yǎng)基混合液，37℃避光孵育1.5 h后檢測(cè)吸光度(optical density,OD值)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)及圖片處理

用SPSS 23.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，S-W檢驗(yàn)測(cè)試數(shù)據(jù)是否符合正態(tài)分布，如果數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，兩組間運(yùn)用t檢驗(yàn)，多組間采用單因素方差分析；如數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，則使用非參數(shù)檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(*:P<0.05，**:P<0.01，***:P<0.001)。Graph PAD 8.0、Image J軟件輔助做圖。

2 結(jié) 果

2.1 ITGB-1在PTC組織和癌旁正常組織中的表達(dá)情況

通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)分析，我們發(fā)現(xiàn)ITGB-1在PTC組織中的表達(dá)水平高于癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(圖1)。

圖1 ITGB-1在PTC組織和癌旁正常組織中的表達(dá)差異(*:P<0.05)

Figure 1. Relative Expression of ITGB-1 in PTC Tissues and Adjacent Normal Tissues (*:P<0.05)

PTC:Papillary thyroid carcinoma.

2.2 ITGB-1的表達(dá)與PTC組織的臨床病理相關(guān)性

與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者相比，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者癌組織中ITGB-1的表達(dá)顯著更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；與無(wú)被膜或腺體外侵犯的患者相比，有被膜或腺體外侵犯的患者癌組織中ITGB-1的表達(dá)水平也顯著更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。另外，ITGB-1的表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤大小、是否為多灶癌無(wú)確切關(guān)系(表1)。

表1 臨床病理特征與甲狀腺乳頭狀癌中ITGB-1的表達(dá)關(guān)系

Table 1. Relationship between Clinicopathological Features of Patients and Expression of ITGB-1 in Papillary Thyroid Carcinoma

Clinicopathological featureNExpression level(interquartile range)PGender0.200 Male121.21(2.21-0.65) Female221.36(1.80-0.55)Age0.310 <55261.08(1.71-0.55) ≥5581.86(2.21-0.96)Multiple foci0.700 Yes61.28(1.99-0.47) No281.36(1.87-0.65)Microcarcinoma0.770 Yes170.91(1.86-0.48) No171.55(2.06-0.83)

(Table 1 continues on next page)

(Continued from previous page)

Clinicopathological featureNExpression level(interquartile range)PLymph node metastasis<0.001 Yes201.74(2.24-1.29) No140.67(0.96-0.46)Membrane/ex-traglandular inva-sion<0.01 Yes 111.87(2.45-1.55) No230.84(1.58-0.48)

2.3 ITGB-1在TPC-1細(xì)胞和Nthy-ori3-1細(xì)胞中的表達(dá)情況

通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)分析，我們發(fā)現(xiàn)ITGB-1在TPC-1細(xì)胞中的表達(dá)水平高于Nthy-ori3-1細(xì)胞，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(圖2)。

圖2 ITGB-1在TPC-1和Nthy-ori3-1細(xì)胞中的表達(dá)差異(*:P<0.05)

Figure 2. Relative Expression of ITGB-1 in TPC-1 and Nthy-ori3-1 Cells (*:P<0.05)

2.4 轉(zhuǎn)染效率的測(cè)定

通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)，加入無(wú)意義序列的siRNA的陰性對(duì)照組相比，加入針對(duì)ITGB-1序列的siRNA的目的基因組中ITGB-1的表達(dá)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),故siRNA可促使ITGB-1在TPC-1中表達(dá)降低(圖3)。

圖3 檢測(cè)siRNA的轉(zhuǎn)染效率(**:P<0.01)

Figure 3. Ralative Expression of ITGB-1 in Target Gene Group and Negative Control Group (**:P<0.01)

2.5 Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力

目的基因組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組中，TPC-1細(xì)胞個(gè)數(shù)分別為(171.33±20.79)個(gè)、(471.33±24.09)個(gè)、(514.67±41.79)個(gè)。目的基因組與陰性對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，目的基因組與空白對(duì)照組的差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，而陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組的差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.124)，故下調(diào)ITGB-1可抑制TPC-1細(xì)胞的侵襲能力(圖4)。

圖4 Transwell實(shí)驗(yàn)三組細(xì)胞數(shù)目差異(結(jié)晶紫染色，40×10)

Figure 4. Number of Cells in Three Groups in Transwell Migration Assay (Crystal Violet Staining, 40×10)

Panel A: Target gene group; Panel B: Negative control group; Panel C: Blank control group; Panel D: The number of cells in three groups;***P<0.001.

2.6 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷徙能力

在目的基因組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組中，TPC-1細(xì)胞24 h的遷徙率分別為26.01%±2.29%、40.40%±2.88%、40.60%±4.07%。目的基因組與陰性對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，目的基因組與空白對(duì)照組的差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組的差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.942)，故下調(diào)ITGB-1可抑制TPC-1細(xì)胞的遷徙能力(圖5)。

圖5 劃痕實(shí)驗(yàn)中三組細(xì)胞遷徙率的差異(**:P<0.01)

Figure 5. Migration Rate of TPC-1 Cells in Three Groups in Scratch Assay (**:P<0.01)

Panel A, C and E show results of the target gene group, the negative control group and the blank control group at 0h respectively; Panel B, D and F show results of the target gene group, the negative control group and the blank control group at 24h respectively; Panel G: The migration rate of TPC-1 cells;**:P<0.01.

2.7 CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力

在目的基因組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組中，TPC-1細(xì)胞24 h的OD值分別為0.30±0.01、0.50±0.05、0.63±0.05；48 h的OD值分別為0.71±0.02、0.97±0.04、1.05±0.01；72h的OD值分別為1.36±0.06、2.04±0.21、2.02±0.01。24 h時(shí)，目的基因組與陰性對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，目的基因組與空白對(duì)照組的差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組的差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.127)；48 h時(shí)，目的基因組與陰性對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，目的基因組與空白對(duì)照組的差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組的差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.126)；72 h時(shí)，目的基因組與陰性對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，目的基因組與空白對(duì)照組的差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組的差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.925)。可見(jiàn)，下調(diào)ITGB-1可抑制TPC-1細(xì)胞的增殖能力(圖6)。

圖6 CCK8實(shí)驗(yàn)中3組在24、48、72 h下的OD值差異

Figure 6. OD450 Values in Three Groups at 24, 48, and 72 Hours in CCK8 Assay

3 討 論

近年來(lái)，隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展及人類健康意識(shí)的增強(qiáng)，甲狀腺癌發(fā)病檢出率逐年遞增，有報(bào)告指出其可能成為全球第四大癌癥[5]，并且呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)[6]。PTC是最常見(jiàn)的甲狀腺癌類型，約占85%～90%[7]。根據(jù)研究報(bào)道，30%～70%的PTC患者會(huì)出現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，且預(yù)后相對(duì)較差[8]；而癌灶突破甲狀腺包膜生長(zhǎng)或形成腺體外侵犯，其預(yù)后也相對(duì)較差[9-10]。故而對(duì)PTC侵襲、遷移和增殖能力的調(diào)控就頗顯重要。

目前分子標(biāo)記物已被廣泛用于多種疾病的臨床診斷和預(yù)后判斷過(guò)程。作為近幾年的腫瘤與分子生物學(xué)的研究熱點(diǎn)[11-12]，越來(lái)越多研究表明lncRNA與PTC的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[13]。比如,Xia等[14]發(fā)現(xiàn)CCND2-AS1促進(jìn)PTC的增殖，遷移和侵襲；Wang等[15]發(fā)現(xiàn)PTCSC3通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)影響PTC的增殖和遷移；Zhang等[16]發(fā)現(xiàn)RGMB-AS1被E2F1激活并促進(jìn)PTC增殖和侵襲。與此同時(shí)，ITGB-1已經(jīng)被驗(yàn)證在諸多癌癥的發(fā)展過(guò)程中起一定作用。例如，Huang等[17]發(fā)現(xiàn)ITGB-1可通過(guò)上調(diào)ROCK1促進(jìn)人肝癌細(xì)胞增殖，遷移和侵襲；Shang等[18]發(fā)現(xiàn)ITGB-1能促進(jìn)人肝癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖和遷移；Dai等[19]發(fā)現(xiàn)ITGB-1可通過(guò)調(diào)節(jié)microRNA-10a表達(dá)促進(jìn)膀胱癌的發(fā)展；Zheng等[20]發(fā)現(xiàn)ITGB-1通過(guò)下調(diào)Mcl-1促進(jìn)透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌的遷移和侵襲。

本研究通過(guò)檢測(cè)34對(duì)PTC組織及相應(yīng)的癌旁正常組織標(biāo)本中ITGB-1的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)ITGB-1在PTC組織中呈現(xiàn)相對(duì)較高的表達(dá)水平，提示ITGB-1或許參與了PTC的發(fā)生發(fā)展，這種差異性可為今后PTC與正常甲狀腺組織的初步鑒別提供另一種可能性。局部侵犯及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤常見(jiàn)的特征。PTC雖然被公認(rèn)為“惰性”的惡性腫瘤，常常表現(xiàn)出輕度的臨床行為及良好的預(yù)后，但目前手術(shù)切除仍舊是治療PTC的主要手段[21]。病灶突破甲狀腺被膜向腺體外生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致周圍結(jié)構(gòu)受侵，如嵌入氣管、食道，包繞頸部大血管，累及喉返神經(jīng)、甲狀旁腺等，常常增加手術(shù)難度，甚至無(wú)法全部切除；而術(shù)前已經(jīng)存在局部轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，往往需要面臨擴(kuò)大手術(shù)范圍及存在術(shù)中未切凈轉(zhuǎn)移灶導(dǎo)致術(shù)后易出現(xiàn)復(fù)發(fā)可能；術(shù)前評(píng)估發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，如肺、腦、骨等情況，至今尚無(wú)公認(rèn)的有效治療方案。目前很多專家學(xué)者將淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及被膜或腺體外侵犯視為評(píng)估PTC的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。術(shù)前良好的評(píng)判有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或被膜及腺體外侵犯能夠更好行術(shù)前準(zhǔn)備，提高手術(shù)成功率。術(shù)后利用有效的手段對(duì)存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或被膜及腺體外侵犯的患者的監(jiān)控能夠及時(shí)評(píng)估復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)。結(jié)合臨床病理分析，ITGB-1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或存在被膜及腺體外侵犯的PTC患者中的表達(dá)顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或不存在被膜及腺體外侵犯的PTC患者。ITGB-1可能可以作為示警淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或被膜及腺體外侵犯的PTC的分子標(biāo)記物。目前對(duì)于一些常見(jiàn)的、惡性程度高、臨床分期較晚的惡性腫瘤，在細(xì)胞分子水平上，針對(duì)已經(jīng)明確的致癌位點(diǎn)進(jìn)行特異性的靶向治療已經(jīng)逐漸增多。雖然由于PTC被視“惰性”腫瘤，且遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生率極少，靶向治療的研究尚有欠缺，但精確化的靶向治療仍舊是目前及未來(lái)所需要的治療手段。本研究依托TPC-1細(xì)胞為基礎(chǔ)，在細(xì)胞學(xué)功能實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)通過(guò)下調(diào)ITGB-1的表達(dá)可以顯著抑制TPC-1細(xì)胞的侵襲、遷徙和增殖能力。這提示ITGB-1在PTC細(xì)胞層面抑制了其生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)。我們推測(cè)通過(guò)下調(diào)ITGB-1的基因治療手段，也許未來(lái)可能成為PTC靶向治療的一項(xiàng)潛在選擇。

綜上所述，本研究通過(guò)臨床與基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的結(jié)合，初步探討了ITGB-1在PTC組織和TPC-1細(xì)胞中的作用，結(jié)合結(jié)果推測(cè)ITGB-1能很可能在PTC的發(fā)生發(fā)展中起著正性調(diào)控，且ITGB-1對(duì)PTC細(xì)胞的遷移、增殖能力具有促進(jìn)效應(yīng)。其更進(jìn)一步作用機(jī)制是我們下一步的研究重點(diǎn)。

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