白菜凍干粉降糖作用的初步藥效學(xué)研究

劉鈺瑩，王 宏，段玉樺，湯凌燕，陳曉青，黃 文，凌智群*

（1.江漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢 430056；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北 武漢 430070）

《食療本草》：“菘菜，治消渴”，“菘菜”是指十字花科蕓薹屬白菜類蔬菜中的青菜（Brassica chineninL.）和結(jié)球白菜（B.pekinensisRupr.）[1-2]。文獻(xiàn)顯示在地中海飲食中，十字花科蔬菜（其中包含white cabbage）在防治慢性疾病如糖尿病、肥胖等中扮演著重要的角色[3-4]。

糖尿病屬于中醫(yī)“消渴病”的范疇，中醫(yī)藥在治療消渴病方面有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和療效。糖尿病前期是介于糖尿病與正常糖代謝之間的一種狀態(tài)，中醫(yī)學(xué)提倡“防未病”理念，在糖尿病前期這個(gè)階段若能及時(shí)運(yùn)用具有中醫(yī)特色的干預(yù)措施，如藥食同源的食療，不僅能夠減少糖尿病進(jìn)一步發(fā)展以及相關(guān)不良作用的產(chǎn)生，還能減輕社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[5]。鑒于國(guó)內(nèi)沒有大白菜、卷心菜等白菜類蔬菜對(duì)糖尿病前期血糖影響的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，本文初步探討自制白菜類作物凍干粉（Chinese Cabbage Freeze-Dried Powder，CCFDP）對(duì)高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠血糖、血脂的影響。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 材料與試劑

新鮮白菜類蔬菜：市售白菜；無特定病原體（Specific Pathogen Free，SPF）級(jí)試驗(yàn)動(dòng)物雄性昆明小鼠（華中科技大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK（鄂）2016-0009）。

總膽固醇（T-CHO）、甘油三酯（TG）、高密脂蛋白（HDL-C）、低密脂蛋白（LDL-C）試劑盒（酶標(biāo)儀法）：均來自南京建成生物工程研究所；高糖高脂滅菌全價(jià)飼料（萬千佳興生物科技有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：190001104），配方如下：基礎(chǔ)料（47.71%），蔗糖（14.31%），豬油（10.50%），蛋黃粉（20.04%），膽固醇（1.43%），膽酸鈉（0.286%），酪蛋白（0.954%），進(jìn)口魚粉（4.77%）；普通維持飼料（華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.1.2 試驗(yàn)儀器

OneTouch Verio Flex血糖儀和血糖試紙（強(qiáng)生中國(guó)醫(yī)療器材有限公司）；萬分之一電子計(jì)數(shù)天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 CCFDP的制備方法

CCFDP制備程序依次為：新鮮白菜類蔬菜去掉蟲癭腐爛葉→清洗干凈→切成丁條狀→粉碎成粉末漿→快速冷凍至白菜粉漿中心溫度為-20 ℃以下→真空冷凍干燥→產(chǎn)品4 ℃密閉干燥保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物條件和分組

SPF級(jí)雄性昆明小鼠，體重18～22 g，室溫（20±2）℃，相對(duì)濕度45%～55%，光照時(shí)間7：00—19：00，自由飲食和飲水。適應(yīng)環(huán)境5 d后，測(cè)其空腹血糖和餐后2 h的血糖，篩掉血糖過高或過低的小鼠，且剩余合格小鼠餐后2 h血糖值沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

將合格的90只小鼠隨機(jī)分為6組：正常對(duì)照組、高糖高脂飼料飼養(yǎng)造模對(duì)照組、造模+同時(shí)口服灌胃CCFDP低劑量水溶液組（150 mg/（kg·d））、造模+同時(shí)口服灌胃CCFDP高劑量水溶液組（1 500 mg/（kg·d））、造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP低劑量水溶液組（150 mg/（kg·d））、造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP高劑量水溶液組（1 500 mg/（kg·d）），見表1。各口服灌胃CCFDP組每天口服灌胃1次，正常對(duì)照組及造模對(duì)照組灌胃等體積生理鹽水。

1.2.3 血糖采集和測(cè)定

在連續(xù)口服灌胃CCFDP水溶液45 d或30 d后的第2天，在各組小鼠餐后2 h，取小鼠的尾端靜脈血檢測(cè)血糖值。其后，摘眼球采血后脫臼處死，4 ℃靜置1 h后3 000 r/min離心5 min，收集血清，-20 ℃貯藏備用。并在采樣后2 d內(nèi)，參照試劑盒說明書指導(dǎo)檢測(cè)血清中T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C等指標(biāo)。

表1 造模及口服灌胃方法

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

試驗(yàn)結(jié)果采用X±SD表示，采用Excel進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較組間差異，P＜0.01為具有極顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 CCFDP對(duì)高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠餐后2 h血糖的影響

表2中數(shù)據(jù)顯示：與正常對(duì)照組相比，高糖高脂飼料飼養(yǎng)造模對(duì)照組小鼠餐后2 h血糖值顯著升高，符合糖尿病前期血糖值的范圍要求。造模+同時(shí)高、低口服灌胃CCFDP水溶液45 d組小鼠餐后2 h血糖值顯著低于造模組；造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP高、低劑量30 d組的餐后血糖值與造模小鼠餐后值有顯著差異。數(shù)據(jù)結(jié)果還提示：口服灌胃CCFDP水溶液，不僅可以降低糖尿病前期血糖值，而且可以使得造模給藥小鼠血糖值比正常對(duì)照組小鼠血糖值還低，與造模前小鼠（正常小鼠，7周前）餐后血糖值相似，在6.0～7.3 mmol/L左右的區(qū)間范圍。

2.2 CCFDP對(duì)高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠餐后2 h血脂的影響

表2中數(shù)據(jù)顯示：與正常對(duì)照組相比，高糖高脂飼料飼養(yǎng)造模對(duì)照組小鼠餐后2 h血清T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C值升高顯著。與造模對(duì)照組比較，造模+同時(shí)高、低口服灌胃CCFDP水溶液45 d組小鼠餐后2 h血清TG值顯著降低，相應(yīng)的低劑量組LDL-C值顯著降低；造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP高、低劑量30 d組的餐后血清LDL-C值與造模小鼠餐后值顯著降低，相應(yīng)的高劑量組TG值顯著降低，T-CHO、HDL-C這2個(gè)指標(biāo)變化不明顯。從表2中數(shù)據(jù)來看，低劑量口服CCFDP 30 d對(duì)TG沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)影響，高劑量口服CCFDP 45 d對(duì)LDL-C沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)影響，因此可以說明：在一定的給藥濃度范圍內(nèi)能影響血清TG、LDL-C值。

3 結(jié)論與討論

餐后血糖是早期診斷糖尿病的重要指標(biāo)，代表著葡萄糖負(fù)荷后的血糖水平，也對(duì)預(yù)防糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生有著重要作用。本次試驗(yàn)造模所采用的方法是通過長(zhǎng)時(shí)間高糖高脂飼料飼養(yǎng)引起小鼠的血糖升高，模擬平時(shí)飲食偏愛高熱量高甜度的人群習(xí)慣，因而導(dǎo)致早期糖尿病血糖變化。盡管試驗(yàn)結(jié)果顯示150 mg/（kg·d）CCFDP同時(shí)口服灌胃45 d或1 500 mg/（kg·d）CCFDP在高糖高脂飼料飼養(yǎng)15 d后再同時(shí)口服灌胃30 d都能有效降低高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠的餐后血糖值以及血清總甘油三酯和低密脂蛋白，但似乎沒有量效關(guān)系，提示其作用機(jī)理可能與傳統(tǒng)的降糖化合物的作用機(jī)制不同[8-10]，相關(guān)機(jī)制尤其是涉及鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2的研究還有待進(jìn)一步深入研究。此外，CCFDP對(duì)總膽固醇血清值似乎沒有影響，可能是因?yàn)樵贑CFDP水溶液中纖維素的溶解性低所致。

表2 各組小鼠的餐后2 h血糖值以及血清T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C值 mmol/L

綜上所述，低劑量CCFDP能顯著降低高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠的餐后血糖，對(duì)于早期糖尿病餐后血糖有一定的防治效果，為糖尿病早期防治提供參考。若能對(duì)藥食同源白菜類蔬菜中化學(xué)成分如膳食纖維、維生素、多酚類化合物、硫代葡萄糖苷等諸多成分的活性或活性協(xié)同作用進(jìn)一步深入系統(tǒng)研究，無論在種植還是在后期加工的過程中，都可以為構(gòu)建類似中藥全程質(zhì)量控制體系標(biāo)準(zhǔn)提供一定的數(shù)據(jù)參考和理論基礎(chǔ)。