人胃腺癌組織中S100A6的表達(dá)規(guī)律與化學(xué)治療影響因素及預(yù)后的相關(guān)性研究

邵潤東 孫 綱 劉子源

[摘要] 目的 探討人胃腺癌組織中S100A6的表達(dá)規(guī)律、患者的臨床病理情況以及經(jīng)過相同化學(xué)治療后患者預(yù)后生存期之間的相關(guān)性。 方法 應(yīng)用免疫組化方法對隨機(jī)選取的大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2008年8月～2013年9月胃癌根治術(shù)后，病理為胃腺癌，經(jīng)相同方案化學(xué)治療且隨診資料完整的患者70例病理標(biāo)本進(jìn)行檢測，進(jìn)一步收集胃腺癌組織中S100A6表達(dá)規(guī)律，將資料進(jìn)行總結(jié)并應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 入選人胃腺癌病例中S100A6總陽性表達(dá)率為85.7%，但與患者年齡、性別、腫瘤組織學(xué)分級、腫瘤臨床分期、CA19-9情況之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;S100A6陽性表達(dá)情況與患者相同化學(xué)治療后預(yù)后生存期之間存在負(fù)相關(guān)性（P<0.05）。結(jié)論S100A6在人胃腺癌組織普遍存在;S100A6陽性表達(dá)率與胃腺癌患者臨床、病理情況及腫瘤標(biāo)志物CA19-9無相關(guān)性;S100A6陽性低表達(dá)可能是胃腺癌術(shù)后化學(xué)治療預(yù)后生存的有利因素。

[關(guān)鍵詞] S100A6;人胃腺癌;化學(xué)治療;預(yù)后

[中圖分類號] R735.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2020）06-0018-03

[Abstract] Objective To investigate the relationship between the expression pattern of S100A6 in human gastric adenocarcinoma， the clinicopathology of patients and the prognosis of patients after the same chemotherapy. Methods 70 pathological specimens of gastric adenocarcinoma patients with the same chemotherapy and complete follow-up data after radical gastrectomy in the First Affiliated Hospital of Dalian Medical University from August 2008 to September 2013 were tested by using immunohistochemical method. The expression pattern of S100A6 in gastric adenocarcinoma was further collected. The data were summarized and SPSS software was used for statistical analysis. Results The total positive expression rate of S100A6 in selected patients with gastric adenocarcinoma was 85.7%， which was not statistically different from the age， sex， tumor histological grade， clinical stage of tumor and CA19-9（P>0.05）. There was a negative correlation between the positive expression and the prognosis survival after the same chemotherapy（P<0.05）. Conclusion S100A6 is prevalent in human gastric adenocarcinoma. The positive expression rate of S100A6 has no correlation with the clinical and pathological conditions and the tumor marker CA19-9 in human gastric adenocarcinoma tissue. The low expression of S100A6 may be a favorable factor for the prognosis of postoperative chemotherapy for gastric adenocarcinoma.

[Key words] S100A6; Human gastric adenocarcinoma; Chemotherapy; Prognosis

胃癌是我國發(fā)病率及死亡率很高的消化道惡性腫瘤，但治療效果及預(yù)后仍處于不佳水平，臨床中以病理類型為腺癌的胃癌較為多見[1]。相對于國內(nèi)已普遍推行的胃癌規(guī)范化手術(shù)，術(shù)后化學(xué)治療的效果可能影響患者的預(yù)后及生存期[2-4]。

S100A6是S100蛋白家族的一員，在細(xì)胞中廣泛離散分布，與鈣離子濃度及靶向目標(biāo)相互螯合并發(fā)揮生物效應(yīng)[5]。其在腫瘤中異常表達(dá)，與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，直接干預(yù)腫瘤的產(chǎn)生、進(jìn)展、轉(zhuǎn)移以及預(yù)后[6，7]。而其在胃癌中的表達(dá)規(guī)律以及與化學(xué)治療的關(guān)系有待進(jìn)一步擴(kuò)展研究。

綜上，本研究深入探討了人胃腺癌組織中S100A6的表達(dá)情況，結(jié)合患者的臨床情況、病理情況、腫瘤標(biāo)志物情況、相同方案化療后的預(yù)后生存期之間的聯(lián)系及規(guī)律，為研究S100A6的表達(dá)情況與化學(xué)治療預(yù)后影響因素提供新思路。

1 對象與方法

1.1 研究對象

隨機(jī)選取大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2008年8月～2013年9月胃癌根治術(shù)后患者，其手術(shù)前病理類型為腺癌，術(shù)中、術(shù)后證實(shí)處于T（3-4）NXM0狀態(tài)，手術(shù)過程順利，診治及隨診資料完整，手術(shù)后均以奧沙利鉑、亞葉酸鈣、5-Fu為中心的聯(lián)合方案行化學(xué)治療4～6個(gè)療程。

1.2 研究方法

將入選病例病理石蠟標(biāo)本切片處理后，采用MaxVision/HRP 免疫組化染色并進(jìn)行檢測。具體方法如下：石蠟切片脫蠟、脫水，蒸餾水沖洗;EDTA 抗原修復(fù)液（pH=9.0）進(jìn)行高壓抗原修復(fù) 2～3 min后，室溫下自然冷卻;3%過氧化氫孵育 5～10 min，消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性，阻斷過氧化物酶，PBS沖洗3次;滴加 S100A6抗體，室溫下孵育2 h，PBS沖洗3次;滴加 Max Vision/HRP試劑，室溫下孵育 15 min，PBS 沖洗 3 次;DAB 顯色、蘇木素復(fù)染，切片經(jīng)梯度乙醇脫水、二甲苯透明，中性樹膠封固。主要試劑為：鼠抗人S100A6單克隆抗體（10245-1-AP），免疫組化染色試劑盒（碧云天公司）。已知陽性平片作對照。

1.3判定標(biāo)準(zhǔn)

S100A6主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核，以上染色成棕黃色顆粒狀判定為陽性。陽性細(xì)胞比例大于75%判定為（+++）;位于25%～75%之間判定為（++）;位于5%～25%之間判定為（+）;小于5%判定為（-）[8]。CA19-9判定標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合臨床實(shí)驗(yàn)室區(qū)間，以大于27U/mL記作（+）。

1.4 觀察指標(biāo)

根據(jù)染色結(jié)果陽性細(xì)胞百分比統(tǒng)計(jì)S100A6的表達(dá)情況;收集各病例年齡、性別、腫瘤組織學(xué)分級及臨床分期情況;根據(jù)染色結(jié)果陽性細(xì)胞百分比統(tǒng)計(jì)表達(dá)CA19-9情況;收集化學(xué)治療后患者生存期（中位生存時(shí)間）情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，采用秩和檢驗(yàn)方法分析S100A6與患者年齡、性別、腫瘤組織學(xué)分級、腫瘤臨床分期、CA19-9表達(dá)情況之間的關(guān)系;采用Log-Rank法分析S100A6陽性表達(dá)情況與患者相同化學(xué)治療后預(yù)后生存期之間的關(guān)系。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α設(shè)定為0.05，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

共入選70例病例，其中男44例，女26例;入選病例中年齡區(qū)間為36～60歲，平均年齡40歲，中位年齡50歲。其中50歲以上患者32例，40～50歲患者26例，50歲以下患者12例。定期隨訪。

2.2 S100A6陽性表達(dá)情況

采用免疫組化法檢測S100A6的表達(dá)情況，其中陽性表達(dá)見封三圖2。

2.3 S100A6的陽性表達(dá)情況以及與患者臨床、病理情況之間的關(guān)系

組內(nèi)S100A6總陽性表達(dá)率為85.7%（60/70），經(jīng)秩和檢驗(yàn)可得出S100A6陽性率的分布與患者年齡、性別、腫瘤組織學(xué)分級、腫瘤臨床分期、CA19-9陽性情況均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性（P>0.05）（表1）。

2.4 S100A6陽性表達(dá)情況與相同化學(xué)治療后預(yù)后生存期之間的關(guān)系

經(jīng)Log-Rank單因素相關(guān)性分析，S100A6與患者化學(xué)治療后預(yù)后生存期有關(guān)（P<0.05），且S100A6陽性表達(dá)情況越低，患者相同化學(xué)治療后預(yù)后生存期越長（圖1），S100A6低表達(dá)可能是對腫瘤化學(xué)治療預(yù)后生存期的有利因素（表2）。

3討論

以病理分型為腺癌為主的胃癌在我國的發(fā)病率居高不下，且近年發(fā)病率有逐步上升趨勢[9]。因其早期缺乏典型的臨床特異性癥狀，易于被忽視或誤診。一旦確診多處于進(jìn)展階段。盡管規(guī)范化胃癌根治性手術(shù)及NCCN所倡導(dǎo)的綜合治療指南已取得了十足的發(fā)展，并且大量抗腫瘤治療新興技術(shù)不斷涌現(xiàn)，但胃癌的預(yù)后仍不樂觀[10-11]。

S100A6具有典型的EF-手型結(jié)構(gòu)，屬于小分子量酸性鈣結(jié)合蛋白S100家族。其在細(xì)胞中離散存在，分布規(guī)律受細(xì)胞分裂情況左右，同時(shí)鈣離子梯度也會導(dǎo)致S100A6的遷移[12]。這可能與S100A6具有特殊的鈣受體識別機(jī)制，其靶目標(biāo)主要與肌動蛋白結(jié)合蛋白及膜聯(lián)蛋白有關(guān)[13]。研究表明，S100A6在腫瘤中呈現(xiàn)異常表達(dá)并與細(xì)胞的生理分化周期相關(guān)，實(shí)際上，當(dāng)靜止細(xì)胞受到諸如生長因子、血清、視黃酸、缺血乏氧等內(nèi)外環(huán)境刺激時(shí)均可能出現(xiàn)S100A6的顯著升高[14]。而臨床上如乳腺癌、肺癌、消化道腫瘤、甲狀腺癌等也同時(shí)出現(xiàn)了S100A6高表達(dá)的情況[15]。本研究揭示了S100A6與胃腺癌臨床、病理分級無明顯相關(guān)性，然而與患者預(yù)后有明顯的相關(guān)性。

受困于胃癌根治性手術(shù)規(guī)范程度統(tǒng)計(jì)學(xué)角度的限制以及腫瘤術(shù)后化學(xué)治療不規(guī)范等因素，本研究仍不能直接闡述S100A6是否直接參與胃癌術(shù)后化學(xué)治療的影響，本研究得出S100A6在人胃腺癌組織普遍存在;S100A6陽性表達(dá)率與胃腺癌患者臨床、病理情況及腫瘤標(biāo)志物CA19-9無相關(guān)性;說明S100A6陽性低表達(dá)可能是胃腺癌化學(xué)治療預(yù)后生存期的有利因素，為今后相關(guān)領(lǐng)域的研究提供了一定的借鑒。

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（收稿日期：2019-07-30）