番茄與黃瓜遠(yuǎn)緣嫁接愈合口形成過程的組織解剖分析

吳 燁 劉雯倩 胡 茜 高麗紅 張文娜

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院/設(shè)施蔬菜生長發(fā)育調(diào)控北京市重點(diǎn)實驗室，北京 100193)

園藝作物廣泛利用嫁接以保持良種品質(zhì)、快速繁育、調(diào)整長勢、提高抗性、增加產(chǎn)量和改善品質(zhì)[1-3]。前人多從激素水平、解剖學(xué)層面和營養(yǎng)運(yùn)輸?shù)葘用嫜芯窟h(yuǎn)緣嫁接砧穗間互作的生理機(jī)理[4-5]，但其分子機(jī)理尚不明確。隨著分子生物學(xué)研究不斷深入，研究發(fā)現(xiàn)嫁接砧穗間及愈合口處存在激素、RNA、蛋白質(zhì)和脂類等信號分子的韌皮部長距離、細(xì)胞間短距離運(yùn)輸[6]及DNA水平轉(zhuǎn)移[7]。這些信號分子構(gòu)成了砧穗交流互作的主要信息物質(zhì)，運(yùn)輸過程中它們可調(diào)控轉(zhuǎn)錄、參與基因表達(dá)及蛋白翻譯，導(dǎo)致DNA甲基化、基因沉默和基因激活[8-9]，進(jìn)而調(diào)控后期植物體生長發(fā)育及對逆境脅迫的適應(yīng)性[10]，因此，明確砧穗間運(yùn)輸?shù)木唧w信號分子，解析其運(yùn)輸如何調(diào)控砧穗互作成為了研究中首要函待解決的問題。但由于目前生產(chǎn)中常使用近緣種嫁接，砧木和接穗分別產(chǎn)生的信號分子同源性極高，其運(yùn)輸性鑒定存在著一定困難，如果能夠使用不同科、種、屬或親緣關(guān)系更遠(yuǎn)的物種分別作為砧木和接穗進(jìn)行遠(yuǎn)緣嫁接，如大豆與南瓜[11]、綠豆與甘薯[12]、大豆與番茄[13]等，不僅可獲得近緣或種內(nèi)雜交不能獲得的優(yōu)良特性，如提高植物觀賞價值和產(chǎn)量、抗逆抗病蟲性強(qiáng)、生長快和改進(jìn)果實品質(zhì)等[14]，由于遠(yuǎn)緣嫁接砧穗親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，性狀差異較大，能產(chǎn)生各自物種特異性的信號分子，還便于使用分子生物學(xué)等方法鑒定信號分子的砧穗間運(yùn)輸性，為砧穗互作研究的奠定了堅實的基礎(chǔ)。

眾所周知，嫁接口的愈合是嫁接苗成活的關(guān)鍵，與近緣親和性嫁接相比，遠(yuǎn)緣嫁接由于砧穗的解剖結(jié)構(gòu)和生長特性以及遺傳特性不同, 引起嫁接接口無法愈合，維管束無法成功連通而嫁接失敗[15-16]。因此，為了建立成功的茄科及葫蘆科作物的遠(yuǎn)緣嫁接體系，便于探究二者間砧穗互作及信息交流的分子機(jī)理，以推進(jìn)未來遠(yuǎn)緣嫁接技術(shù)體系的優(yōu)化和應(yīng)用，本研究首先針對遠(yuǎn)緣嫁接愈合及維管束連通過程的解剖結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，以黃瓜‘新泰密刺’、黑籽南瓜和番茄‘中雜9號’為試驗材料，下胚軸斜靠接方法嫁接番茄/黃瓜，近緣嫁接的黃瓜/南瓜和黃瓜/黃瓜作為對照，觀測嫁接苗生長形態(tài)和嫁接口愈合過程變化，旨在明確遠(yuǎn)緣嫁接番茄/黃瓜愈合口形成過程中的細(xì)胞分裂及分化、細(xì)胞融合及維管束組織連通和砧穗間物質(zhì)交流等過程，初步解釋二者嫁接不親和的解剖學(xué)機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗材料包括黃瓜品種‘新泰密刺’(CucumissativusL.)，南瓜為黑籽南瓜(CucurbitaficifoliaBouché.)和番茄品種‘中雜9號’(LycopersiconesculentumMill.)，為北京市重點(diǎn)實驗室中國農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院設(shè)施蔬菜生長發(fā)育調(diào)控研究室保存種子。

1.2 試驗方法

1.2.1種子處理與播種

黃瓜、南瓜及番茄種子放入56 ℃溫水中玻璃棒攪拌15 min，換上25 ℃常溫浸泡4～6 h后放置28±2 ℃黑暗條件下催芽，種子露白1～2 mm后，播種至50孔基質(zhì)穴盤(54 cm×28 cm，草炭∶蛭石∶珍珠巖體積比=2∶1∶1混合基質(zhì))中，覆蓋保鮮膜放入光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)(相對濕度:85%)。為保證嫁接苗粗度一致，便于下胚軸嫁接成活，播種順序為番茄子葉展平期，開始播種黃瓜，再一周后播種南瓜。

1.2.2下胚軸嫁接

當(dāng)番茄幼苗第三片真葉長出，株高5.0～6.0 cm，黃瓜幼苗第一片真葉展開至直徑2 cm，株高為4.0～5.0 cm，南瓜幼苗兩片子葉完全展開，株高為2.5～3.5 cm，此時三者莖粗一致，約為0.3～0.5 cm。嫁接組合為番茄/黃瓜、黃瓜/黃瓜、黃瓜/南瓜(接穗/砧木)。用刀片將接穗子葉下方斜向上切出上斜仰角約60°斜面，同時保留接穗苗下胚軸長2.0～3.0 cm，斜面長度1.0 cm左右，同時用刀片在砧木子葉下方斜切，保留砧木下胚軸長3.0～4.0 cm，下斜俯角約60°，切面長度與接穗一致，然后將接穗與砧木切面對齊貼緊并用嫁接夾固定。

1.2.3嫁接苗管理

嫁接苗放置育苗套裝中，透明塑料蓋子上用噴壺充分濕潤，育苗基質(zhì)澆透水，保持育苗裝置內(nèi)小環(huán)境的濕度；將育苗裝置用保鮮膜密封后放入28±2 ℃ 培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)2～3 d(相對濕度：95%～100%)，然后轉(zhuǎn)入弱光培養(yǎng)3～4 d(相對濕度:100%;16 h 28 ℃光培養(yǎng)/8 h 18 ℃暗培養(yǎng);光強(qiáng)為100～150 μmol/(m2·s))，期間適當(dāng)通風(fēng)，之后進(jìn)行正常光照培養(yǎng)。使用塑料罩保濕并放入28 ℃培養(yǎng)箱暗培養(yǎng)，3 d后揭開塑料罩取下固定夾，之后轉(zhuǎn)入正常光照度繼續(xù)培養(yǎng)(相對濕度:100%;16 h 28 ℃ 光培養(yǎng)/8 h 18 ℃暗培養(yǎng);光強(qiáng):300～600 μmol/(m2·s))。

1.2.4嫁接苗形態(tài)變化觀察與成活率統(tǒng)計

嫁接后每天觀察接穗生長狀況，并對嫁接未成活苗的剔除和統(tǒng)計，分別于嫁接后第2、5、8和15 天作為時間點(diǎn)進(jìn)行拍照，于第8和15天統(tǒng)計嫁接成活率。試驗為2018年重復(fù)3次的統(tǒng)計結(jié)果。

1.2.5嫁接愈合處石蠟切片制作與觀察

每種嫁接組合分別于第2、5、8、15 天作為時間點(diǎn)進(jìn)行取樣，每個組合每次取樣隨機(jī)選取嫁接成活苗8株，截取嫁接口上下1 cm長莖段，使用FAA溶液固定，50%、70%、85%、95%和100%乙醇系列脫水，二甲苯透明置換，石蠟包埋，切片，莖段切片厚度8 μm。甲苯胺藍(lán)染色，中性樹膠封片制成永久切片觀察，光學(xué)顯微鏡(Olympus, CX41)，體式顯微鏡(Leica, M205A)觀測嫁接口組織細(xì)胞融合及維管束連通情況。

1.2.6嫁接苗維管束連通檢測

嫁接15 d后，取嫁接成活苗(接穗頂端有新葉長出)，根系浸入0.1% 酸性品紅溶液，6 h后使用體式顯微鏡檢測嫁接口，觀測莖木質(zhì)部及地上真葉葉脈、新葉葉脈品紅染色情況，方法參考Marsch-Martiínez 方法[17]；參照HPTS染色方法[18-19], 嫁接苗地上部分葉片浸入1 mmol/L HPTS(8-hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid, 8-羥基芘1,3,6-三磺酸)溶液，12 h后制作徒手切片，CLSM(Leica, SP8)觀測嫁接口下方的熒光情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同組合嫁接苗形態(tài)變化與成活率

黃瓜分別與番茄、南瓜、黃瓜嫁接，嫁接后第2天砧穗接合在一起，成活率均為80%以上；5 d后嫁接口愈合完成，番茄/黃瓜成活率下降至50%左右；15 d后黃瓜與番茄異嫁接苗由于遠(yuǎn)緣嫁接的不親和性逐漸死亡，存活率為17%左右；而黃瓜與南瓜，黃瓜、南瓜和番茄自嫁接始終成活，對照黃瓜自嫁接與黃瓜/南瓜除了部分萎蔫失水外，成活率保持在85%以上。初步摸清了嫁接口愈合的時間點(diǎn)變化(圖1和圖2)。

2.2 3種組合的嫁接口細(xì)胞分化及愈合

黃瓜/黃瓜和黃瓜/南瓜2種組合呈現(xiàn)嫁接親和狀態(tài)，嫁接后第2天黃瓜/黃瓜自嫁接的愈傷細(xì)胞薄壁細(xì)胞正常連接分化(圖3(a)～(d))；嫁接后第5天愈傷組織繼續(xù)分裂增殖，建立新的形成層與維管束組織，接穗與砧木間的空隙已經(jīng)被逐漸填滿，砧木接穗二者細(xì)胞相互交錯生長，愈傷組織薄壁細(xì)胞互相連接，成為一體(圖3(e)～(h))；嫁接后第8天砧穗接口處的薄壁細(xì)胞已經(jīng)分化出新的形成層細(xì)胞，且由該形成層分化出新的韌皮部和方形的小口徑導(dǎo)管分子，導(dǎo)管篩管相互溝通，愈合過程基本結(jié)束(圖3(i)～(l))；嫁接15 d后嫁接口分化出新的維管束輸導(dǎo)組織，砧穗連接為一體(圖3(m)～(p))。

異嫁接組合黃瓜/南瓜與黃瓜自嫁接組合基本一致，但黃瓜南瓜組合愈合進(jìn)展整體較慢。嫁接后第2天仍能清晰看到嫁接口邊界隔離層，但細(xì)胞由胼胝質(zhì)及愈傷組織連接，此時基本沒有薄壁細(xì)胞脫分化(圖4(a)～(d))；嫁接后第5天，愈傷組織開始增多，但砧穗愈傷組織并未完全連接，仍可看到顏色較深的嫁接口隔離層邊界染色線(圖4(e)～(h))；嫁接后第8天，愈傷組織已經(jīng)完全連接，維管束組織及薄壁細(xì)胞繼續(xù)融合分化，但從橫切面可以看到尚無新生的導(dǎo)管分子(圖4(i)～(l))；嫁接15 d后輸導(dǎo)組織連接，形成統(tǒng)一完整的嫁接體，邊界細(xì)胞基本消失(圖4(m)～(p))。

遠(yuǎn)緣嫁接組合黃瓜/番茄嫁接后第2天愈傷組織薄壁細(xì)胞靠在一起但未完全融合，邊界細(xì)胞依舊明顯，黃瓜與番茄的維管束呈現(xiàn)各自的顯著特征，即黃瓜的一套維管束由外韌、內(nèi)韌和木質(zhì)部細(xì)胞構(gòu)成，番茄的韌皮部和木質(zhì)部呈射線分布(圖5(a)～(d))。嫁接后第5天，雖然砧木與接穗在嫁接口正常脫分化出愈傷組織，但相互間不能融合，形成隔離層(圖5(e)～(h))。嫁接后第8天接穗與砧木木質(zhì)部與韌皮部薄壁細(xì)胞均各自產(chǎn)生有脫分化的大量細(xì)胞團(tuán)，且從縱切面可以看到導(dǎo)管分子縱向排列開始扭曲(圖5(i)～(l))；第15天，盡管有部分薄壁細(xì)胞分化，但不能真正愈合，未發(fā)生維管束輸導(dǎo)組織分化連通，愈傷組織邊界細(xì)胞依舊明顯(圖5(m)～(p))，并且番茄接穗有不定根發(fā)生，說明接穗急需吸取空氣中的水分及營養(yǎng)物質(zhì)來維持地上部生長(圖5(o))。

(a)、(d)、(g)和(j)為番茄/黃瓜嫁接苗生長情況，右側(cè)圖為嫁接口放大;(b)、(e)、(h)和(k)為黃瓜/黃瓜嫁接苗生長情況，右側(cè)圖為嫁接口放大;(c)、(f)、(i)和(l) 為黃瓜/南瓜嫁接苗生長情況，右側(cè)圖為嫁接口放大;黃色箭頭示嫁接口。

2.3 嫁接苗的維管束連通情況

為檢測嫁接15 d的番茄/黃瓜嫁接口木質(zhì)部是否真正連接，用1%的酸性品紅浸染砧木根部，檢測品紅隨著根壓和蒸騰拉力向地上部分的運(yùn)輸情況，黃瓜/南瓜嫁接苗作為對照。6 h后檢測到酸性品紅經(jīng)維管束尤其是木質(zhì)部由根部吸收，向上運(yùn)輸，在嫁接口處聚集(圖6(a)～(c)；圖7(a)～(c))。且接穗的輸導(dǎo)組織中均可以檢測到品紅染色，發(fā)現(xiàn)其定位于木質(zhì)部細(xì)胞(圖6(d)～(f)；圖7(d)～(e))。嫁接口處染色情況證明品紅溶液可通過二者木質(zhì)部連接而運(yùn)輸，且還可以通過愈傷組織連接處邊界的縫隙以及細(xì)胞融合的間隙擴(kuò)散至木質(zhì)部，擴(kuò)散進(jìn)入接穗的木質(zhì)部，并隨著蒸騰拉力作用向地上部分運(yùn)輸(圖6(g)～(j)；圖7(f)～(g))。

為檢測嫁接15 d的番茄/黃瓜嫁接口韌皮部是否真正連接，韌皮部共質(zhì)體運(yùn)輸?shù)奶禺愋詷?biāo)記HPTS浸染番茄接穗的葉片，在保證Confocal熒光參數(shù)不變的條件下，結(jié)果表明12 h后HPTS可以在番茄接穗的葉片經(jīng)共質(zhì)體運(yùn)輸至下胚軸(圖8(a)～(c))，但并不能通過嫁接口運(yùn)輸至黃瓜砧木(圖8(d)(木質(zhì)部為自發(fā)熒光)。但在黃瓜/黃瓜的自嫁接對照中，12 h后可檢測到HPTS從黃瓜接穗運(yùn)輸至黃瓜砧木(圖8(e)～(f))。

每種組合的平均嫁接株數(shù)分別為：番茄/黃瓜92～100，黃瓜/南瓜45～60，黃瓜/黃瓜35～40; 試驗為1個月內(nèi)3次嫁接統(tǒng)計結(jié)果

(a)、(e)、(i)和(m)為黃瓜/黃瓜嫁接口橫切面圖;(b)、(f)、(j)和(n)為(a),(e),(i)和(m)中白框的放大;(c)、(g)、(k)和(o)為黃瓜/黃瓜嫁接口縱切面圖;(d)、(h)、(l)和(p)為(c)、(g)、(k)和(o)中白框的放大;黑色箭頭指示嫁接口愈傷邊界細(xì)胞;X,木質(zhì)部；P,韌皮部；EP,外韌皮部；IP,內(nèi)韌皮部；Pa,薄壁細(xì)胞。

(a)、(e)、(i)和(m)為番茄/黃瓜嫁接口橫切面圖；(b)、(f)、 (j)和(n)為(a)、(e)、(i)和(m)中白框的放大；(c)、(g)、 (k) 和(o)為番茄/黃瓜嫁接口縱切面圖；(d)、(h)、(l)和(p)為(c)、(g)、(k)和(o)中白框的放大；紅色箭頭指示黃瓜砧木，藍(lán)色箭頭指示番茄接穗，黑色箭頭指示嫁接口愈傷邊界細(xì)胞;X，木質(zhì)部；P，韌皮部；EP,外韌皮部；IP,內(nèi)韌皮部；Pa,薄壁細(xì)胞。

3 討 論

園藝作物生產(chǎn)中廣泛利用嫁接技術(shù)，砧木和接穗的親和性直接影響了植株的生長發(fā)育和開花結(jié)果、抗性及產(chǎn)品品質(zhì)[20-21]，同時嫁接也是研究植物體內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸、成花機(jī)制、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞識別機(jī)制等基礎(chǔ)理論的重要方法和手段[22-24]。砧穗間的互作關(guān)系一直是一個熱點(diǎn)研究問題[25-26]，近年來研究發(fā)現(xiàn)嫁接作物的韌皮部含有一系列蛋白質(zhì)和RNA 分子，可由源器官長距離傳遞至庫，調(diào)控根、頂端分生組織、葉片、地下塊莖發(fā)育，如CmNACP、SHR、GAI、KNOTTED1、StBEL5、PFP-Let6[27-30]；調(diào)控接穗的頂端分生組織細(xì)胞命運(yùn)，如CmSTM、PbWoxT1[31-32]；提高植物抗逆性，如miRNA399、CmGAI、CmWRKYP、CmPP2、Cmlec17、CmPP16、SlSSI[33-35]；調(diào)控植株開花，如siRNA、FT、CO、TFL、LEAFY等[19,36]。這為砧穗互作的機(jī)理研究提供了理論依據(jù)，對解決生產(chǎn)中的砧穗不親和問題及有針對性地園藝作物育種具有重要意義[37-39]。

(a)、(e)、(i)和(m)為番茄/黃瓜嫁接口橫切面圖；(b)、(f)、 (j)和(n)為(a), (e), (i) and (m) 中白框的放大；(c)、(g)、 (k)和(o)為番茄/黃瓜嫁接口縱切面圖；(d)、(h)、(l)和(p)為(c), (g), (k) 和 (o) 中白框的放大；紅色箭頭指示黃瓜砧木，藍(lán)色箭頭指示番茄接穗，黑色箭頭指示嫁接口愈傷邊界細(xì)胞，橙色箭頭指示番茄接穗的不定根; X，木質(zhì)部；P，韌皮部；EP,外韌皮部；IP,內(nèi)韌皮部；Pa,薄壁細(xì)胞；C.形成層。

與近緣嫁接相比，遠(yuǎn)緣嫁接由于砧穗親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，基因組序列差異性較大，更利于DNA、RNA及蛋白質(zhì)等信號物質(zhì)的砧穗間運(yùn)輸性鑒定，對砧穗間信息互作的機(jī)理研究非常有利，以往研究發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)緣嫁接起源的基因沉默信號長、短距離運(yùn)輸均可引起DNA甲基化及表觀遺傳變化，如控制影響植株光合能力、葉片性狀、逆境脅迫響應(yīng)等母性遺傳的數(shù)量性狀等砧穗間葉綠體基因組遺傳物質(zhì)交換等[40-41]，遠(yuǎn)緣嫁接更容易導(dǎo)致新的嫁接雜種出現(xiàn)[42]，這也為探索有關(guān)遠(yuǎn)緣嫁接產(chǎn)生雜種機(jī)制提供了新思路。

遠(yuǎn)緣嫁接的研究基礎(chǔ)首先是需要砧穗完全愈合[43]，接合口的融合過程涉及到接穗和砧木之間細(xì)胞分裂及分化、胞間連絲形成、形成層分化和連接、木質(zhì)部及維管束組織重建等過程，廣泛應(yīng)用于近緣同科屬植物嫁接[44-46]。本研究中發(fā)現(xiàn)黃瓜自嫁接和黃瓜/南瓜親和性嫁接的嫁接苗嫁接口愈合在解剖學(xué)層面上的愈合過程大致為：嫁接后1～3 d形成隔離層，4～6 d愈傷組織出現(xiàn)并增殖，7～9 d愈傷組織分化連接，并開始建成形成層與輸導(dǎo)組織，第15天則嫁接部位維管束完全建成，嫁接苗正常生長存活。遠(yuǎn)緣的番茄與黃瓜嫁接組合在嫁接后呈現(xiàn)不親和狀態(tài)，其主要表現(xiàn)為砧木與接穗在切口正常產(chǎn)生愈傷組織并分裂增殖，但薄壁愈傷細(xì)胞不融合，這也就導(dǎo)致后期愈傷細(xì)胞無法分化，盡管木質(zhì)部有部分連接，可以保證接穗吸取一定的水分和離子，保證其不萎蔫，但實際中韌皮部輸導(dǎo)組織不能形成，接穗的光合同化產(chǎn)物及營養(yǎng)物質(zhì)不能完全運(yùn)輸，不能維持正常的生命生長活動。在番茄黃瓜的嫁接口愈合過程觀察中，從切片上可以看到接口邊緣始終存在的深色染色層，初步推斷這一隔離層即為砧木與接穗各自愈傷細(xì)胞不能正常融合連接的重要原因。

(a)番茄/黃瓜的嫁接口，虛線指示(b)、(d)和(g)的橫切部位；(b)黃瓜砧木橫切面；(c)黃瓜砧木的縱切面；(d)番茄接穗橫切面；(e)和(f)為(d)圖黑框的放大；(g)和(i)嫁接口橫切面；(h)為(g)黑框的放大,(j)為(i圖黑框的放大。Ep，表皮細(xì)胞；X,木質(zhì)部；Ca，愈傷組織。橙色箭頭指示酸性品紅染色的維管束。

(a)黃瓜/南瓜的嫁接口，虛線指示(b)、(d)和(g)的橫切部位；(b)南瓜砧木橫切面；(c)南瓜砧木橫切面放大；(d)黃瓜接穗橫切面；(e)為(d)圖黑框的放大；(f)嫁接口橫切面；(g)為(f)黑框的放大。X,木質(zhì)部;Ca,愈傷組織。藍(lán)色箭頭指示酸性品紅染色的維管束。

(a)番茄/黃瓜中的番茄接穗橫切，虛線框指示(b)的位置；(c)番茄接穗橫切放大；(d)番茄/黃瓜中的黃瓜砧木橫切面；(e)黃瓜/黃瓜中黃瓜接穗橫切；(f)黃瓜/黃瓜中黃瓜砧木橫切。EP.外韌皮部；X,木質(zhì)部；IP，內(nèi)韌皮部。白色箭頭指示HPTS在韌皮部的共質(zhì)體運(yùn)輸途徑。

酸性品紅可通過根部吸收，在蒸騰拉力和根壓作用下經(jīng)木質(zhì)部向地上部運(yùn)輸，常用于檢測木質(zhì)部的連通情況[17]。結(jié)果中番茄/黃瓜嫁接體的嫁接口處只是愈傷組織的融合連接，并未完全分化建成木質(zhì)部細(xì)胞，部分品紅溶液通過愈傷組織連接處邊界的縫隙擴(kuò)散進(jìn)入番茄的木質(zhì)部，并隨著蒸騰拉力作用通過莖木質(zhì)部向接穗運(yùn)輸(圖6)；HPTS(8-hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid, 8-羥基芘1,3,6-三磺酸)分子包含3個磺酸鹽基團(tuán)，在pH<0.7生理條件下攜帶電性而無法進(jìn)入細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的不透水性，HPTS常用于共質(zhì)體及質(zhì)外體運(yùn)輸?shù)臉?biāo)記，檢測韌皮部的連通情況[18]，番茄/黃瓜嫁接體顯然韌皮部細(xì)胞未能夠分化連接(圖8)，初步探明了番茄/黃瓜遠(yuǎn)緣嫁接體接口愈合的形態(tài)解剖學(xué)機(jī)理。

綜上所述，通過本研究的初步結(jié)果，建立適當(dāng)?shù)倪h(yuǎn)緣嫁接體系，研究其當(dāng)代及后代植株的遺傳及變異規(guī)律，探索變異來源及方向性；并探索嫁接誘變的機(jī)制，找出影響嫁接誘變的影響因素及其作用方式；將來可提供更多關(guān)于遠(yuǎn)緣嫁接誘變分子水平的證據(jù)，開拓遠(yuǎn)緣嫁接誘變的應(yīng)用領(lǐng)域，對園藝作物種質(zhì)資源的創(chuàng)制及揭示砧穗間互作的分子機(jī)制均具有重要意義。