住院患者尿路感染篩查中尿有形成分分析的價(jià)值

唐禎臻，范世珍，林 潔，于波海

(1.大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連116001；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)深圳醫(yī)院，廣東 深圳518034)

尿路感染(UTI) 好發(fā)于各年齡段女性和老年男性患者，由各種病原菌感染引起，少量為真菌感染[1]。中段尿定量培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)室診斷尿路感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但是該法一般需要3-4 d才能獲得檢驗(yàn)結(jié)果，存在一定的假陰性率，不利于尿路感染的快速早期診斷[2]。SysmexUF-1000i(簡稱UF-1000i)尿有形成分分析儀檢測(cè)細(xì)菌采用獨(dú)立通道，將細(xì)菌的核酸成分進(jìn)行特異染色并抑制參雜物的非特異染色，對(duì)尿液中的細(xì)菌進(jìn)行定量檢測(cè)，用于尿路感染的快速診斷和篩檢[3]。本研究對(duì)497例大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院住院疑似尿路感染的患者尿標(biāo)本進(jìn)行UF-1000i尿有形成分檢測(cè)，并與定量中段尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果對(duì)比，旨在評(píng)估UF-1000i的細(xì)菌聯(lián)合白細(xì)胞檢測(cè)在UTI篩查中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床提前預(yù)判診斷和治療UTI提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料選取2018年4月-2018年10月于我院住院疑似尿路感染的497例患者，清潔中段尿(或?qū)蚬芰裟?標(biāo)本10 ml于無菌管中。其中男140例，平均年齡78.56歲；女357例，平均年齡68.11歲。無菌管中尿標(biāo)本先進(jìn)行尿細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)，后迅速進(jìn)行尿有形成分分析，從標(biāo)本收集到完成接種及尿有形成分分析不得超過2 h。患者均有尿頻、尿急、尿痛等尿路感染癥狀。陽性標(biāo)準(zhǔn)為白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)>25個(gè)/μL和細(xì)菌(BACT)計(jì)數(shù)>380個(gè)/μL，并對(duì)陽性標(biāo)本做進(jìn)一步分析。

1.2 儀器與試劑日本Sysmex醫(yī)用電子有限公司生產(chǎn)的UF-1000i尿有形成分分析儀、配套試劑及質(zhì)控品。貝瑞特生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供的血瓊脂培養(yǎng)基、沙保羅瓊脂培養(yǎng)基和顯色培養(yǎng)基。全自動(dòng)微生物鑒定儀為西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品有限公司。

1.3 尿細(xì)菌培養(yǎng)，菌種鑒定一般菌培養(yǎng)采用接種環(huán)取無菌試管中尿標(biāo)本三區(qū)劃線血瓊脂培養(yǎng)基上。溫度為35℃培養(yǎng)18-24 h，肉眼觀察菌落并計(jì)數(shù)。革蘭陰性菌≥105cfu/ml，革蘭陽性菌≥104cfu/ml為尿定量細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陽性，出現(xiàn)兩種以上雜菌生長，且沒有優(yōu)勢(shì)菌時(shí)則被判為混合污染。培養(yǎng)陽性結(jié)果的菌株用全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行菌種鑒定。真菌培養(yǎng)采用接種環(huán)取尿標(biāo)本密集劃線于沙保羅瓊脂培養(yǎng)基生長并于顯色培養(yǎng)基上鑒定。

1.4 UF-1000i尿有形成分分析將接種完成后的無菌試管尿液標(biāo)本立即進(jìn)行UF-1000i尿有形成分分析儀檢測(cè)，詳細(xì)記錄白細(xì)胞和細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果。結(jié)果以WBC計(jì)數(shù)>25個(gè)/μL和BACT計(jì)數(shù)>380個(gè)/μL的標(biāo)本記為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS19．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。繪制白細(xì)胞和細(xì)菌計(jì)數(shù)的ROC曲線，記錄診斷的cut off值，并計(jì)算診斷試驗(yàn)各個(gè)相關(guān)評(píng)價(jià)指標(biāo)。

2 結(jié)果

2.1 住院患者尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果497例住院疑似尿路感染送檢尿標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果陽性278例，陽性率為55.94%。其中，革蘭陰性桿菌168例(60.43%)，革蘭陽性球菌65例(23.38%)，真菌33例(11.87%)。病原菌分布以大腸埃希菌(33.81%)為首，其次依次為肺炎克雷伯桿菌(15.47%)、屎腸球菌(15.11%)和糞腸球菌(4.68%)等致病菌；真菌以白色假絲酵母(6.47%)和熱帶假絲酵母(3.60%)為主。見表1。

表1 278份住院尿液標(biāo)本病原菌分布及構(gòu)成比﹝%﹞

2.2 UF-1000i WBC計(jì)數(shù)和BACT計(jì)數(shù)診斷住院患者尿路感染的ROC曲線下面積及cut off值以臨床診斷尿路感染中段尿定量培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)將UF-1000i尿有形成分分析儀檢測(cè)所得WBC、BACT結(jié)果繪制ROC曲線。WBC和BACT診斷住院患者尿路感染ROC曲線下面積(AUC)分別為0.860(95%CI：0.810-0.901)和0.917(95%CI：0.875-0.948)，見圖1。從SPSS輸出表中獲得WBC和BACT的cut off值分別為64個(gè)/μL和880.6個(gè)/μL。

圖1 WBC和BACT診斷住院患者尿路感染的ROC曲線圖

2.3 WBC計(jì)數(shù)和BACT計(jì)數(shù)診斷住院患者尿路感染的診斷性能評(píng)價(jià)以WBC 64個(gè)/μL和BACT 880.6個(gè)/μL為cut off值，計(jì)算兩者單獨(dú)診斷住院患者尿路感染的診斷性能和兩者聯(lián)合應(yīng)用的診斷性能指標(biāo)。單獨(dú)應(yīng)用時(shí)細(xì)菌計(jì)數(shù)具有較好的敏感性和特異性。兩試驗(yàn)并聯(lián)時(shí)敏感性為97.04%。兩試驗(yàn)串聯(lián)時(shí)特異度為97.9%。見表2。

表2 WBC和BACT計(jì)數(shù)診斷住院患者尿路感染的診斷性能評(píng)價(jià)

3 討論

UF-1000i尿有形成分分析儀不僅能定量檢測(cè)出尿中白細(xì)胞數(shù)量，還能精準(zhǔn)檢測(cè)出細(xì)菌數(shù)量。但其不能區(qū)分活菌與死菌，可能將其他有形成分如氣泡、灰塵、結(jié)晶、脂肪等誤認(rèn)為細(xì)菌，導(dǎo)致結(jié)果假陽性[4]。如標(biāo)本采集不合格有污染菌、放置時(shí)間過長細(xì)菌生長或采樣前患者已使用過抗菌藥物等，都會(huì)影響尿培養(yǎng)結(jié)果的陽性率。尿液定量培養(yǎng)方法通常使用普通營養(yǎng)瓊脂，其只能檢出腸桿菌屬和厚壁菌科的細(xì)菌，需氧菌和特殊營養(yǎng)的細(xì)菌不能在此培養(yǎng)基中發(fā)育[5,6]。白細(xì)胞作為診斷指標(biāo)時(shí)，腫脹、破裂或聚集成團(tuán)的白細(xì)胞易被儀器誤認(rèn)為其他成分，若尿液中白細(xì)胞吸附在黏液絲上，易造成漏檢[7]。

本研究住院患者定量尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陽性率為55.94%，大腸埃希菌33.81%、腸球菌19.79%(包括屎腸球菌和糞腸球菌)和肺炎克雷伯桿菌15.47%是尿路感染最常見的致病菌[8]；真菌以白色假絲酵母為主，感染率增加[9]，跟文獻(xiàn)報(bào)道相符。UF-1000i尿有形成分分析儀檢測(cè)住院患者尿液WBC計(jì)數(shù)和BACT計(jì)數(shù)ROC曲線下面積分別為0.860(95%CI：0.810-0.901)和0.917(95%CI：0.875-0.948)，說明WBC計(jì)數(shù)和BACT計(jì)數(shù)在住院患者尿路感染診斷中具有較高的診斷價(jià)值。該診斷試驗(yàn)通過ROC曲線所建的cut off值分別為WBC計(jì)數(shù)>64個(gè)/μL和BACT計(jì)數(shù)>880.6個(gè)/μL。單獨(dú)應(yīng)用于診斷時(shí)細(xì)菌計(jì)數(shù)的診斷效能高于白細(xì)胞計(jì)數(shù)。本研究中WBC計(jì)數(shù)的cut off值與文獻(xiàn)報(bào)道的WBC計(jì)數(shù)>68.5個(gè)/μL相符；但盧麗萍等研究得出門診及住院所有患者的BACT計(jì)數(shù)的cut off值為532.7個(gè)/μL，本研究中BACT計(jì)數(shù)的cut off值則高于文獻(xiàn)報(bào)道[10]。這種差異可能與實(shí)驗(yàn)納入的人群不同相關(guān)。本研究針對(duì)的是住院疑似尿路感染患者，住院患者的BACT計(jì)數(shù)高于門診患者；同時(shí)患者病情復(fù)雜多樣，常伴有基礎(chǔ)病，平均年齡偏高，抵抗力低容易受到病原菌入侵生長、增殖并發(fā)生感染，所以BACT計(jì)數(shù)會(huì)高一些。同時(shí)盧麗萍等研究又得出門診及住院女性患者的BACT計(jì)數(shù)的cut off值為863.1個(gè)/μL，與本研究以女性患者71.83%(357/497)為主，BACT計(jì)數(shù)的cut off值相符。

綜上所述，UF-1000i尿有形成分分析儀能夠快速檢測(cè)出患者尿液中WBC計(jì)數(shù)和細(xì)菌計(jì)數(shù)等信息，兩者可用于聯(lián)合分析尿路感染，預(yù)先給藥治療，減輕患者痛苦和縮短病程，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值，為臨床初步診斷及排除UTI提供可靠的依據(jù)。