治傷巴布劑對急性軟組織損傷患者血清TNF-α、IL-6水平的影響

劉永利 邵先舫 李前 敖雪 伍秋福 高大林

〔摘要〕 目的 觀察治傷巴布劑對急性軟組織損傷（soft tissue injury，STI）患者體內(nèi)血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）含量水平的影響，并初步探討分析其活血化瘀、消腫止痛功效的作用機(jī)制。方法 選取湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬常德醫(yī)院骨傷科2018年6月至2019年6月住院的急性STI患者102例，按照隨機(jī)、對照的原則分成觀察組50例、對照組52例。對照組在入院第1 d開始予常規(guī)治療，觀察組在對照組基礎(chǔ)上于第1 d開始加用治傷巴布劑外敷，1次/d，連續(xù)治療14 d。分別在治療前及治療后7 d、14 d測定患者血清TNF-α、IL-6含量水平。結(jié)果 治療前兩組患者血清TNF-α、IL-6水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;治療后7 d、14 d，對比兩組患者血清TNF-α、IL-6含量水平，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 治傷巴布劑能改善急性STI患者血清TNF-α、IL-6含量水平。

〔關(guān)鍵詞〕 軟組織損傷;治傷巴布劑;腫瘤壞死因子-α;白細(xì)胞介素-6

〔中圖分類號〕R264 ? ? ? 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕B ? ? ? 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2020.03.026

〔Abstract〕 Objective To observe the effects of curing-injury cataplasma on serum levels of tumor necrosis factor-α （TNF-α） and interleukin-6 （IL-6） in patients with acute soft tissue injury （STI）， and to initially study the mechanism of promoting blood circulation and removing blood stasis， reducing swelling and relieving pain. Methods A total of 102 patients with acute STI admitted to Changde Hospital Affiliated to Hunan University of Chinese Medicine from June 2018 to June 2019 were selected and divided into 50 patients in the observation group and 52 patients in the control group according to principle of randomization and control. After admission， the control group received conventional treatment. On the basis of the control group， curing-injury cataplasma was added to the observation group for external application， once a day and continuous treatment for 14 days. Serum TNF-α and IL-6 levels were detected before the treatment and the 7th and 14th day after treatment. Results Before the treatment， serum TNF-α and IL-6 levels in the two groups showed no statistically significant difference （P>0.05）. On the 7th and 14th day after treatment， serum TNF-α and IL-6 levels in the two groups were decreased （P<0.05）， and the observation group was lower than the control group （P<0.05）. Conclusion The serum TNF-a and IL-6 levels in patients with acute STI can be improved by curing-injury cataplasma.

〔Keywords〕 soft tissue injury; curing-injury cataplasma; tumor necrosis factor α; interleukin-6

急性軟組織損傷（soft tissue injury，STI）發(fā)病率非常高，在社會工業(yè)、交通業(yè)的不斷發(fā)展的同時，逐步增加的各種意外傷害事故也隨之而來，無疑，急性STI的患者也日漸增多，如治療不及時，將給患者日常學(xué)習(xí)與工作造成極為不良的影響[1]，甚至可對患者的功能活動帶來極為不利的影響，對人類健康構(gòu)成威脅[2]。治傷巴布劑為湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬常德醫(yī)院外用秘方“治傷散”通過不斷改良工藝制備而成，主要由中藥血殼、虎杖、見風(fēng)消組成，尤功于活血化瘀、消腫止痛。前期研究[3]證實，治傷巴布劑治療急性STI療效顯著，但關(guān)于治傷巴布劑如何干預(yù)急性STI的機(jī)制還不明確，筆者近1年來，研究并總結(jié)了治傷巴布劑對急性STI患者體內(nèi)腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α， TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6， IL-6）水平的影響，現(xiàn)總結(jié)報道如下。

1 資料與方法

1.1 ?一般資料

選取2018年6月至2019年6月在湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬常德醫(yī)院骨傷科住院部符合急性STI診斷標(biāo)準(zhǔn)的102例患者為研究對象。按照隨機(jī)、對照的原則分成觀察組50例、對照組52例。觀察組男30例，女20例;年齡18～65（40.0±4.1）歲;病程0.5～47（17.2±13.7）h;病情分級[4]：輕16例，中20例，重14例。對照組男33例，女19例;年齡19～64（39.6±4.3）歲;病程0.4～48（17.4±13.5）h;病情分級：輕15例，中21例，重16例。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 ?病例選擇

1.2.1 ?診斷標(biāo)準(zhǔn) ?按照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中急性STI診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]進(jìn)行制定。

1.2.2 ?納入標(biāo)準(zhǔn) ?（1）年齡18～65歲;（2）符合急性STI診斷標(biāo)準(zhǔn)者;（3）無治傷巴布劑、塞來昔布膠囊過敏患者;（4）未進(jìn)行內(nèi)服、外敷藥物及針對于急性STI的其他治療且病程未超過48 h者;（4）自愿作為試驗對象，且不排斥試驗藥物劑型，能確保完成整個試驗過程者;（5）患者簽署知情同意書。

1.2.3 ?排除標(biāo)準(zhǔn) ?（1）病程在48 h以上者;（2）年齡在18歲以下和65歲以上者;（3）使用了其他干預(yù)本病的藥物者;（4）對治傷巴布劑已知成分及塞來昔布膠囊過敏者;（5）合并有肝、腎等重要器官及心腦血管、血液系統(tǒng)等嚴(yán)重基礎(chǔ)性疾病;（6）合并有骨折、脫位、重要血管、神經(jīng)損傷者;（7）合并有皮膚破損、濕疹或感染因素致疼痛、紅腫、青紫等癥狀者;（8）肌腱、韌帶損傷需手術(shù)干預(yù)者。

1.2.4 ?剔除標(biāo)準(zhǔn) ?（1）受試者在入組后被證實與納入標(biāo)準(zhǔn)不符者;（2）納入后未曾用藥的病例;③無使用藥物后任何可評價記錄的病例。

1.3 ?治療方法

對照組于入院第1天開始常規(guī)給予0.9% NaCl注射液250 mL+七葉皂苷鈉20 mg（山東綠葉制藥有限公司，批號：1905060308）靜滴，1次/d;塞來昔布膠囊（輝瑞制藥有限公司，批號：T94878）口服，200 mg/次，1次/d。連續(xù)14 d。

觀察組在對照組基礎(chǔ)上，于入院第1天開始，患處外敷治傷巴布劑（由湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬常德醫(yī)院藥劑科統(tǒng)一制備與提供，批號120907。藥物組成：血殼60 g，虎杖30 g，見風(fēng)消20 g），8 h/次，1次/d，持續(xù)治療14 d。

1.4 ?檢測指標(biāo)

檢測兩組患者在治療前及治療后7 d、14 d體內(nèi)血清TNF-α、IL-6含量水平。分別在治療前及治療后7 d、14 d凌晨07：00抽取患者5 mL靜脈血，將抽血樣品以3 000 r/min離心10 min，分離血清，后放置于-80 ℃低溫箱中保存?zhèn)錂z，用ELISA法測定血清TNF-α、IL-6含量水平。

1.5 ?統(tǒng)計學(xué)分析

運(yùn)用SPSS 18.0進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)處理，計量資料采用t檢驗，以“x±s”表示;在兩組間比較時，首先運(yùn)用Kolmogorov-Sminmov法檢驗是否符合正態(tài)分布，如符合則運(yùn)用方差后LDS-t檢驗，否則運(yùn)用Mann-Whitney U秩和檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

治療前，兩組患者體內(nèi)血清TNF-α、IL-6含量水平對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;治療后7 d、14 d兩組患者體內(nèi)血清TNF-α、IL-6含量水平均較治療前下降（P<0.05），且觀察組低于對照組（P<0.05）。見表1和表2。

3 討論

急性STI發(fā)病率非常高，且隨著社會不斷發(fā)展，發(fā)病率日漸升高，如不及時處理，將給患者日常學(xué)習(xí)與工作帶來極為不利影響。由于其發(fā)病機(jī)制的不明確性，使得目前仍無特異性治療，主要以非甾體類藥物口服及外用抗炎鎮(zhèn)痛為主，但弊端也日漸明顯，中醫(yī)藥外治法因其獨樹一幟的理論體系在干預(yù)急性STI方面有著顯著的優(yōu)勢，具有簡單、經(jīng)濟(jì)、適應(yīng)癥廣、身心兼治、總有效率高的特點，能夠更廣泛而有效地開展并運(yùn)用于急性STI的防治。急性STI是一種以骨骼肌組織損傷為主要病理表現(xiàn)的無菌性炎癥反應(yīng)性疾病[5]。其局部組織壞死、毛細(xì)血管擴(kuò)張、炎性細(xì)胞膨脹、炎癥介質(zhì)釋放、組織水腫等為急性STI的主要病理過程[6]。病變的進(jìn)程與進(jìn)行性微循環(huán)和炎癥反應(yīng)均有關(guān)，損傷微血管會導(dǎo)致膜損傷、內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、廣泛的血管出血和不受控制的血栓形成，導(dǎo)致局部缺血，進(jìn)而導(dǎo)致膜磷脂進(jìn)一步降解，自由基積累，炎癥性氧化應(yīng)激[7-8]。隨著損傷過程的持續(xù)，損傷部位膠原纖維增生會明顯出現(xiàn)、大量炎性細(xì)胞浸潤、間質(zhì)淤積等嚴(yán)重的肌纖維變性壞死，造成不可逆轉(zhuǎn)的組織結(jié)構(gòu)改變[9]。綜上所述，無菌性炎癥反應(yīng)為急性STI中最重要的病理反應(yīng)[10]。國內(nèi)外學(xué)者通過研究證實[11]，急性STI的病理反應(yīng)進(jìn)程，主要為無菌性炎癥反應(yīng)引發(fā)的各種炎性介質(zhì)和多種致炎細(xì)胞因子分泌與釋放，如IL-6和TNF-α等。各種炎性因子及促炎細(xì)胞因子分泌與釋放，促使痛閾降低，局部組織對疼痛極為敏感，致痛因子亦可促使血管收縮，致缺血、缺氧、滲出水腫加重，形成惡性循環(huán)[11-12]。TNF-α是TNF家族的重要成員，亦是一類擁有多種生物效能的炎性介質(zhì)[13]，作為引發(fā)細(xì)胞層次一連串反應(yīng)中的關(guān)鍵介質(zhì)，在細(xì)胞、亞細(xì)胞層次引發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng)，且可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，使得血管壁通透性出現(xiàn)異常，并促使局部缺血和血栓生成;通過誘導(dǎo)并激活炎性細(xì)胞，增加黏附分子、一氧化氮和氧自由基等介質(zhì)使得損傷局部組織的目標(biāo)得以實現(xiàn)[14]。相關(guān)研究表明[11]，TNF-α可誘導(dǎo)引發(fā)炎癥反應(yīng)與誘導(dǎo)形成IL-1、IL-6等各類炎性因子，誘發(fā)和擴(kuò)大炎癥反應(yīng)，通過刺激、生成超氧化物，釋放出溶酶體而損傷組織細(xì)胞，使炎性介質(zhì)聚集，故TNF含量水平與損傷嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。IL-6具有多種生物活性，由多種細(xì)胞反應(yīng)生成，可以誘導(dǎo)急性期蛋白的合成，在機(jī)體炎癥反應(yīng)中扮演非常重要的角色[15]。創(chuàng)傷、手術(shù)及術(shù)后感染等因素，均可導(dǎo)致骨折患者血清炎癥因子水平顯著上升[16]，且TNF-α、IL-6兩種炎性介質(zhì)之間存在著相互作用與影響[17]。本研究證實，研究組治療后第7天和14天血清TNF-α、IL-6含量明顯較對照組低，提示治傷巴布劑可以改善急性STI患者體內(nèi)TNF-α、IL-6因子水平，改善急性STI綜合療效。

急性STI在中醫(yī)學(xué)屬“筋傷”范疇，傳統(tǒng)及現(xiàn)代中醫(yī)臨床研究已表明，氣滯血瘀是急性STI的基本病機(jī)[18]?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》提及“氣傷痛，形傷腫”。《正法心法要旨》認(rèn)為：“如皮尚未破，內(nèi)有損傷，多為瘀血存留。視其傷處，不管上下輕重淺深程度之異，經(jīng)絡(luò)氣血盛衰之別，首當(dāng)祛除瘀血，和血定痛，每獲良效?！薄镀諠?jì)方·折傷門》載：“但凡傷折，損及筋肉經(jīng)絡(luò)，脈絡(luò)暢通受阻，瘀停不去，故引發(fā)腫痛，治宜祛除惡瘀，宣通脈道，暢通氣血，則病可愈?！蓖鈧钊?，使得脈道受損，血不循經(jīng)，溢出脈外，離經(jīng)之血瘀滯于局部出現(xiàn)血腫，泛溢于肌膚出現(xiàn)局部青紫;局部氣血流通失暢，不通則痛，瘀血結(jié)聚，不能消散，久則郁而生熱，局部出現(xiàn)紅、腫、發(fā)熱;氣血郁滯不通，筋脈失于濡養(yǎng)，活動功能受限則隨之出現(xiàn)。綜上，其病機(jī)為“氣滯”與“血瘀”共存，其治法應(yīng)以活血化瘀、消腫止痛為要。治傷巴布劑為湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬常德醫(yī)院用于治療筋骨損傷的外用秘方“治傷散”通過不斷改良工藝制備而成，主要由中藥血殼、虎杖、見風(fēng)消組成，功于活血化瘀通絡(luò)、消腫定痛。方中血殼味苦，性寒，功于祛瘀止痛，提膿化腐生肌，長于瘡癤癰腫，筋骨傷折;虎杖味微苦，性微寒，歸厥陰肝、少陽膽、太陰肺經(jīng)，功于祛瘀止痛，除濕退黃，善治傷折、血瘀不散;見風(fēng)消味辛，性溫，散風(fēng)勝濕，行氣祛寒，消腫散結(jié)，善治風(fēng)濕痹證，跌打損傷，并佐制虎杖、血殼之苦寒。三藥寒熱相互制約，以防寒熱太過。治傷巴布劑緊緊圍繞“氣滯、血瘀”疾病發(fā)病的本質(zhì)，具有活血祛瘀通絡(luò)、消腫定痛、驅(qū)風(fēng)勝濕之功。本研究只是進(jìn)行了治傷巴布劑對改善急性STI患者體內(nèi)血清TNF-α、IL-6水平的初步觀察，至于治傷巴布劑如何調(diào)控炎性因子釋放以調(diào)控?zé)o菌性炎癥反應(yīng)，進(jìn)而干預(yù)急性STI的確切分子機(jī)制還有待進(jìn)一步研究與分析。

參考文獻(xiàn)

[1] DONG F， XUE C， WANG Y， et al. Hydroxysafflor yellow A attenuates the expression of inflammatory cytokines in acute soft tissue injury[J]. Scientific Reports， 2017，11（7）：40584.

[2] 孫 ?欣，尹 ?宏，錢衛(wèi)慶.中藥外用治療急性軟組織損傷的作用機(jī)制實驗研究進(jìn)展[J].中醫(yī)正骨，2014，26（11）：66-69.

[3] 邵先舫，劉志軍，陳紹軍，等.治傷散巴布劑治療急性閉合性軟組織損傷的臨床研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2010（11）：60-62.

[4] 鄭筱萸.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2002：245-248

[5] SHUDONG W， TAO L， WEI Q， et al. The Effects of Xiangqing Anodyne Spray on Treating Acute Soft-Tissue Injury Mainly Depend on Suppressing Activations of AKT and p38 Pathways[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine， 2016， 2016：1-11.

[6] MOHAMMAD M， SEYED A M， ARMIN A， et al. Injury to skeletal muscle of mice following acute and sub-acute pregabalin exposure[J]. Iranian Journal of Basic Medical Science， 2017， 20（3）：256-259.

[7] VUSSE G J V D， BILSEN M V， RENEMAN R S. Ischemia And Reperfusion Induced Alterations In Membrane Phospholipids： An Overview[J]. Annals of the New York Academy of Sciences， 1994， 723（1）：1-14.

[8] MUKHOPADHYAY S N. Cellular， Biochemical and Molecular Aspects of Reperfusion Injury[J]. Annals of the New York Academy of Sciences， 1994， 723（12）：13-16.

[9] SCHASER K D， VOLLMAR B， MENGER M D， et al. In vivo analysis of microcirculation following closed soft-tissue injury[J]. Journal of Orthopaedic Research Official Publication of the Orthopaedic Research Society， 1999，17（5）：678-685.

[10] GATES C， HUAR D J. Management of Skeletal Muscle Injuries in Military Personnel[J]. Operative Techniques in Sports Medicine， 2005，13（4）：247-256.

[11] MOHAMMAD M， SEYED A M， ARMIN A， et al. Injury to skeletal muscle of mice following acute and sub-acute pregabalin exposure[J]. Iranian Journal of Basic Medical Science， 2017， 20（3）：256-259.

[12] 程 ?延，全 ?健，竇群立，等.玄黃藥膏對小鼠急性軟組織損傷組織中IL-6、PGE2含量的影響[J].陜西中醫(yī)，2014，35（4）：506-507.

[13] HEHLGANS T， PFEFFER K. The intriguing biology of the tumour necrosis factor/tumour necrosis factor receptor superfamily： ?players， rules and the games[J]. Immunology， 2005， 115（1）：1-20.

[14] CUZZOCREA S， ESPOSITO E. TNF-Alpha as a Therapeutic Target in Inflammatory Diseases， Ischemia-Reperfusion Injury and Trauma[J]. Current Medicinal Chemistry， 2009， 16（24）：3152-3167.

[15] SOUZA A S R， PATRIOTA A F， MELO B C P D， et al. Evaluation of perinatal outcomes in pregnant women with preterm premature rupture of membranes[J]. Revista Da Associacao Medica Brasileira， 2016， 62（3）：269-275.

[16] 付紅英，李克群，李登鳳，等.五水頭孢唑林鈉預(yù)防骨科術(shù)后切口感染效果及患者血清炎性因子變化分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2017，27（22）：5183-5185.

[17] 李程豪，任春貞，劉永琦，等.黃芪多糖對IL-6和TNF-α模擬炎性微環(huán)境中BMSCs增殖及TAFs分化的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志， 2018，33（7）：3039-3042.

[18] 李 ?黎，孫 ?燕，廖懷章，等.活血化瘀利水方對大鼠急性軟組織損傷模型血清IL-6、組胺影響的實驗研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2016，36（3）：21-23.