芬太尼類新精神活性物質(zhì)及其檢驗(yàn)方法進(jìn)展

王繼芬，呂昱帆，范琳媛，董 澤，馮 源

(1.中國(guó)人民公安大學(xué)偵察與刑事科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 102600；2.公安部物證鑒定中心，北京 100038；3.中國(guó)人民公安大學(xué)治安與交通管理工程學(xué)院，北京 102600)

芬太尼是一類藥理、生理作用與嗎啡類似的新型人工合成阿片受體激動(dòng)劑[1-4]，屬短時(shí)間強(qiáng)效麻醉性鎮(zhèn)痛藥，其不依賴于罌粟種植，合成工藝簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉。該類物質(zhì)屬脂溶性藥物[5]，易透過(guò)血-腦屏障，主要作用于μ阿片受體[6]，從而在體內(nèi)產(chǎn)生與嗎啡相似甚至更強(qiáng)的生理藥理作用，其效應(yīng)遠(yuǎn)高于嗎啡和哌替啶[7]。最初由世界知名化學(xué)家和藥學(xué)家保羅·楊森于1960年首次合成，用于臨床鎮(zhèn)痛，后迅速蔓延，成為繼傳統(tǒng)毒品、合成毒品后全球流行的第三代毒品，即新精神活性物質(zhì)[8]。芬太尼類物質(zhì)在歐美發(fā)達(dá)國(guó)家的濫用日趨嚴(yán)重，已有替代海洛因等傳統(tǒng)阿片類毒品的趨勢(shì)，加之生產(chǎn)加工工藝的不斷發(fā)展，一系列活性更高的芬太尼類衍生物也相繼誕生，如瑞芬太尼、舒芬太尼和硫代芬太尼等[9-13]，以N-[1-(2-苯乙基哌啶)]-N-苯基酰胺為母體結(jié)構(gòu)，在此基礎(chǔ)上通過(guò)多個(gè)位置的取代，從而成為效用更強(qiáng)、成本更低、利潤(rùn)更大的化學(xué)成品。

目前，在全球范圍內(nèi)芬太尼類物質(zhì)制造、走私和濫用問(wèn)題越來(lái)越突出，國(guó)內(nèi)外已發(fā)生多例因服用芬太尼類新精神活性物質(zhì)中毒、致死的案例[14-17]。2016年，美國(guó)在8個(gè)州發(fā)現(xiàn)400多起與劇毒化學(xué)品卡芬太尼相關(guān)的案件[18]。O’Donnell等[19]對(duì)美國(guó)、哥倫比亞等32個(gè)地區(qū)芬太尼類似物致死案例進(jìn)行了匯總和梳理，發(fā)現(xiàn)在2016年7月—2017年6月，11 045名阿片類藥物致死中，2 275名(20.6%)死者檢測(cè)出芬太尼類似物陽(yáng)性，與2016年下半年(764例)相比，2017年上半年(1 511例)死亡人數(shù)幾乎翻了一番，其中俄亥俄州死亡人數(shù)增加最多且最大幅度增加。在此期間，任何芬太尼類似物或卡芬太尼的死亡比例幾乎翻了一番。鑒于此，聯(lián)合國(guó)毒品和犯罪問(wèn)題辦公室在2018年3月12日至16日的會(huì)議上把卡芬太尼列入國(guó)際控制麻醉藥物目錄。中國(guó)在2013年版《麻醉藥品和精神藥品目錄》[20]中列管了乙酰-α-甲基芬太尼、阿芬太尼和α-甲基芬太尼等13種芬太尼類物質(zhì)；在2015年10月1日發(fā)布的《非藥用類麻醉藥品和精神藥品列管辦法》[21]中增補(bǔ)了乙酰芬太尼、β-羥基硫代芬太尼和異丁酰芬太尼等6種芬太尼物質(zhì)為列管藥物；在2017年2月16日增補(bǔ)了卡芬太尼、呋喃芬太尼、丙烯酰芬太尼和戊酰芬太尼4種物質(zhì)；2018年增補(bǔ)了四氟異丁酰芬太尼和四氫呋喃芬太尼。在2019年5月1日起，中國(guó)將芬太尼類物質(zhì)全部列入《非藥用類麻醉藥品和精神藥品管制品種增補(bǔ)目錄》。研究發(fā)現(xiàn)人若吸食芬太尼，會(huì)導(dǎo)致呼吸抑制、肌肉僵硬、癲癇發(fā)作和低血壓等[22]，嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起呼吸衰竭而死亡。

通過(guò)查閱大量有關(guān)芬太尼類新精神活性物質(zhì)研究的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)其藥理毒理學(xué)性質(zhì)、體內(nèi)代謝情況、檢測(cè)方法和前處理方法展開(kāi)綜述。

1 常見(jiàn)芬太尼類新精神活性物質(zhì)

芬太尼常以枸櫞酸鹽形式存在，其枸櫞酸鹽外觀為白色結(jié)晶粉末，味苦，親水性好，水溶液呈酸性，易溶于熱異丙醇，溶于甲醇，略溶于水或氯仿。芬太尼類物質(zhì)易被皮膚吸收，通常被偽裝成海洛因或者處方藥如羥考酮[23]進(jìn)行出售販賣，常見(jiàn)的有芬太尼、瑞芬太尼、舒芬太尼和卡芬太尼等6種。目前報(bào)道的芬太尼類新精神活性物質(zhì)已有60余種。中國(guó)已將芬太尼類物質(zhì)全部列入《非藥用類麻醉藥品和精神藥品管制品種增補(bǔ)目錄》，涵蓋國(guó)際禁毒公約管制的全部芬太尼類物質(zhì)，表1為其中25種芬太尼新精神活性物質(zhì)。藥用劑型主要有用于麻醉和急性疼痛治療的多種濃度注射液[24-25]、慢性疼痛的透皮貼劑[26-27]、口服片劑和錠劑[28]以及鼻腔噴霧劑[29]。

表1 25種芬太尼新精神活性物質(zhì)

續(xù)表1

中文名分子式化學(xué)名稱結(jié)構(gòu)式CAS號(hào)奧芬太尼C22H27N2O2FN-(2-氟苯基)-2-甲氧基-N-{1-[2-苯基乙基]-4-哌啶基}乙酰胺101343-69-5乙酰α甲基芬太尼C22H28N2O1-(α-甲基苯乙基)-4-(N-乙酰苯胺基)哌啶101860-00-8阿芬太尼C21H32N6O3N-{1-[2-(4-乙基-4,5-二氫-5-氧代-1H-四唑-1-基)乙基]-4-(甲氧基甲基)-4-哌啶基}-N-苯基丙酰胺71195-58-9α甲基芬太尼C23H30N2ON-苯基-N-[1-(1-(1-苯基-2-丙烷基)-4-哌啶基]丙酰胺79704-88-4α甲基硫代芬太尼C21H28N2OSN-苯基-N-[1-(1-噻吩-2-基丙-2-基)哌啶-4-基]丙酰胺103963-66-2β羥基芬太尼C22H28N2O2N-[1-(2-羥基-2-苯基-乙基)-哌啶-4-基]-N-苯基-丙酰胺78995-10-5β羥基-3-甲基芬太尼C24H32N2O2N-[1-(2-羥基-2-苯基乙基)-3-甲基哌啶-4-基]-N-苯基丙酰胺78995-14-9芬太尼C22H28N2ON-苯基-N-[1-(2-苯基乙基)-4-哌啶基]丙酰胺437-38-73-甲基芬太尼C23H30N2ON-(3-甲基-1-苯乙基-哌啶-4-基)-N-苯基-丙酰胺42045-86-33-甲基硫代芬太尼C21H28N2OSN-[3-甲基-1-(2-噻吩-2-基乙基)哌啶-4-基]-N-苯基丙酰胺86052-04-2

續(xù)表1

中文名分子式化學(xué)名稱結(jié)構(gòu)式CAS號(hào)對(duì)氟芬太尼C22H27FN2ON-(4-氟苯基)-N-[1-(2-苯基乙基)-哌啶-4-基]丙酰胺90736-23-5瑞芬太尼C20H28N2O54-(甲氧羰基)-4-[(1-氧丙基)苯氨基]-1-哌啶丙酸甲酯132875-61-7舒芬太尼C22H30N2O2SN-[4-(甲氧基甲基)-1-(2-噻吩-2-基乙基)哌啶-4-基]-N-苯基丙酰胺56030-54-7硫代芬太尼C20H26N2OSN-苯基-N-[1-(2-噻吩-2-基乙基)哌啶-4-基]丙酰胺1165-22-6卡芬太尼C24H30N2O31-(2-苯乙基)-4-[苯基(丙?；?氨基]哌啶-4-羧酸甲酯59708-52-0呋喃芬太尼C24H26N2O2N-(1-苯乙基哌啶-4-基)-N-苯基呋喃-2-羧酰胺101345-66-8丙烯酰芬太尼C22H26N2ON-(1-苯乙基哌啶-4-基)-N-苯基丙烯酰胺82003-75-6戊酰芬太尼C24H32N2ON-(1-苯乙基哌啶-4-基)-N-苯基戊酰胺122882-90-04-氟異丁酰芬太尼C23H29FN2ON-(4-氟苯基)-N-(1-苯乙基哌啶-4-基)異丁酰胺244195-32-2四氫呋喃芬太尼C24H30N2O2N-苯基-N-(1-苯乙基哌啶-4-基)四氫呋喃-2-羧酰胺2142571-1-3

2 芬太尼類新精神活性物質(zhì)藥理和毒理學(xué)性質(zhì)及體內(nèi)代謝過(guò)程

2.1 藥理和毒理學(xué)性質(zhì)

攝入芬太尼后的主要毒理學(xué)效應(yīng)包括眩暈、低血壓、視覺(jué)模糊及喉痙攣、膽道括約肌痙攣等，快速推注可引起胸壁、腹壁肌肉僵硬，大劑量使用時(shí)會(huì)出現(xiàn)呼吸抑制、窒息、肌肉僵直及心臟停搏，甚至死亡。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，芬太尼鎮(zhèn)痛效力約為嗎啡的100～180倍，哌替啶的550～1 000倍[30]。鎮(zhèn)痛作用產(chǎn)生快，但持續(xù)時(shí)間較短，靜脈注射后1 min起效，4 min達(dá)到高峰，維持作用30～60 min。肌內(nèi)注射后7～8 min起效，維持1～2 h，肌內(nèi)注射生物利用度67%，蛋白結(jié)合率80%。舒芬太尼屬于苯基哌啶類，是芬太尼 N-4位取代的衍生物，同時(shí)也是一種特異性m-阿片受體激動(dòng)劑，對(duì)m-受體的親合力比芬太尼強(qiáng)5～10 倍[31]。其化學(xué)結(jié)構(gòu)中有獨(dú)特的酯鍵，易被血和組織中的非特異酯酶代謝，與血漿蛋白結(jié)合率達(dá)92.5%，與α 1-酸性糖蛋白結(jié)合率為84%，血漿游離分?jǐn)?shù)與α 1-酸性糖蛋白、白蛋白呈負(fù)相關(guān)[32]。代謝清除率0.84 L/min，消除半衰期為389 min。攝入舒芬太尼則會(huì)引起呼吸抑制、胸壁僵硬等，與芬太尼相比，其作用時(shí)間較長(zhǎng)。阿芬太尼是芬太尼的四唑衍生物，作用效力約為芬太尼的 1/8，起效速度約為芬太尼的3倍，靜脈注射后1.5～2 min達(dá)高峰，維持約10 min。與血漿蛋白結(jié)合率達(dá)92%，消除半衰期為 64～129 min。攝入阿芬太尼會(huì)引起高血壓，心動(dòng)過(guò)速，惡心和嘔吐，過(guò)量攝入則會(huì)引起緩慢性心律失常，心律失常，低血壓，胸壁僵硬，呼吸暫停和呼吸抑制等。瑞芬太尼是一種μ受體激動(dòng)劑，與舒芬太尼一樣，其化學(xué)結(jié)構(gòu)中有獨(dú)特的酯鍵，易被血和組織中的非特異酯酶代謝[33]。與血漿蛋白結(jié)合率為 70%～90%，消除半衰期為8.8～40 min，攝入瑞芬太尼會(huì)引起惡心嘔吐、血壓降低和心動(dòng)過(guò)緩等。

2.2 體內(nèi)代謝過(guò)程

芬太尼類新精神活性物質(zhì)進(jìn)入人體的主要途徑有皮膚吸收、口服和靜脈注射等，主要在肝臟和十二指腸中進(jìn)行代謝活動(dòng)，肝臟是主要的代謝場(chǎng)所，平均代謝速度約為十二指腸代謝的兩倍[34-35]。芬太尼類物質(zhì)的代謝途徑包括哌啶N-脫烷基化成去甲芬太尼、酰胺水解成去甲硫基芬太尼、末端甲基羥基化成羥基芬太尼和羥基去甲芬太尼，酰胺N-脫烷基化成N-苯基丙酰胺[34]。在這些代謝途徑中，哌啶N-脫烷基化成去甲芬太尼是代謝的主要途徑，去甲芬太尼是代謝的主要產(chǎn)物，占芬太尼代謝的99%以上。這些代謝過(guò)程主要受細(xì)胞色素CYP3A4和CYP3A5影響，CYP3A4和CYP3A5是身體藥物代謝中兩種重要的酶，主要存在于肝臟和小腸[36]。其中，CYP3A4是人體含量最豐富的CYP酶，約占人肝 CYP總含量的30%，參與體內(nèi)上50%以上的藥物代謝，包括苯二氮卓類、吡喹酮、卡馬西平、醋氨酚等及某些致癌物等[36-37]。CYP3A5占人肝 CYP總含量的20%～50%[38-39]，與CYP3A4具有84%的氨基酸序列同源性，這使得二者代謝活性具有諸多共同點(diǎn)[40]。

人體內(nèi)突變型基因CYP3A4*1B和CYP3A5*3會(huì)導(dǎo)致CYP3A酶的遺傳變異，表現(xiàn)為CYP3A4和CYP3A5酶活性降低甚至不存在[35]。其在白種人中的等位基因頻率非常高，在亞洲人中的等位基因頻率低，這使得大多數(shù)白種人在攝入芬太尼類物質(zhì)后，無(wú)法有效地代謝該類物質(zhì)，從而導(dǎo)致其體內(nèi)芬太尼毒性增加，嚴(yán)重時(shí)引起死亡。

3 芬太尼類新精神活性物質(zhì)的檢驗(yàn)方法

3.1 常用的芬太尼類物質(zhì)的檢測(cè)方法

目前，常用于檢測(cè)芬太尼類物質(zhì)的方法有高效液相色譜法、反向離子對(duì)色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法、放射免疫法等。

3.1.1 高效液相色譜法

高效液相色譜又稱為高速液相色譜，其以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析[41]，其分離效能好，分離度可達(dá)到1.5，即相鄰兩色譜峰分離程度達(dá)99.7%以上；分析速度快，通常分析一個(gè)樣品需用15～30 min，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成；檢測(cè)靈敏度高，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)；適用范圍廣，高效液相色譜法可用于分析70%以上的有機(jī)化合物，對(duì)于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性化合物更具備優(yōu)勢(shì)。

林長(zhǎng)賦等[42]借助高效液相色譜法成功測(cè)定了人血漿中芬太尼的濃度，該方法采用外標(biāo)法，色譜柱為Shim-Pack CLC-ODS(6.0 mm×150 mm, 5 μm)，流動(dòng)相為0.015 mol/L NaH2PO4的乙腈-水溶液(30:70，V/V)，流速1.5 mL/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)195 nm，靈敏度0.002 AUFS。結(jié)果表明標(biāo)準(zhǔn)曲線在 2.0～100 ng/mL線性關(guān)系良好(r=0.999)，最低檢測(cè)濃度為1 ng/mL，方法回收率為91.70%±4.70%，提取回收率為97.38%±3.69%，日內(nèi)日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為6.50%±2.79%和6.70%±3.04%。該方法選用NaOH溶液堿化血漿，最大限度地減少了血漿中有機(jī)物的提取量和干擾，對(duì)血樣離心靜置后分兩次轉(zhuǎn)移濃縮了進(jìn)樣液的濃度，提高了進(jìn)樣量，有效地提高了檢測(cè)精度。

3.1.2 反向離子對(duì)色譜法

反向離子對(duì)色譜法最早由Schill等于20世紀(jì)60年代發(fā)明，其把離子對(duì)試劑加入到含水流動(dòng)相中，被分析的組分離子在流動(dòng)相中與離子對(duì)試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子，從而增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用，使分配系數(shù)增加，改善分離效果[43]。

張燕婉等[44]借助反向離子對(duì)色譜建立了測(cè)定人血漿中芬太尼濃度的方法，該方法采用內(nèi)標(biāo)法，以阿芬太尼為內(nèi)標(biāo)物，色譜柱為μ-Bondapak C18柱(3.9 mm×250 mm)，流動(dòng)相為水(含0.005 mol/L辛烷磺酸鈉，0.01 mol/L磷酸)-乙腈(69:31，V/V)，流速1.2 mL/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm，靈敏度0.000 5 AUFS。結(jié)果發(fā)現(xiàn)芬太尼濃度為10～200 ng/mL線性關(guān)系良好，r=0.999 6，最低檢測(cè)濃度為5 ng/mL，芬太尼平均回收率為99.97%，日內(nèi)日間的差異值均小于8%。該方法改變?nèi)苜|(zhì)的保留時(shí)間，調(diào)整了流動(dòng)相中水與乙腈的比例讓芬太尼和內(nèi)標(biāo)物在最佳時(shí)間出峰,既保證了兩者的分離度,又提高了芬太尼的檢測(cè)靈敏度。

3.1.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

氣相色譜-質(zhì)譜法利用了氣相色譜優(yōu)良的分離性和質(zhì)譜鑒定的高選擇性，可實(shí)現(xiàn)復(fù)雜體系中有機(jī)物的定性及定量測(cè)定，是司法鑒定中檢測(cè)毒物毒品最常用的方法。氣相色譜-質(zhì)譜法具有分析速率快、分離效果好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，適合熱穩(wěn)定性好、易氣化物質(zhì)的檢測(cè)，對(duì)于熱穩(wěn)定性差、揮發(fā)性低的物質(zhì)則需要借助硅烷化、酰化、烷基化等衍生化方法處理后再進(jìn)行檢測(cè)，衍生化可以改善樣品的熱穩(wěn)定性，增加樣品的揮發(fā)度，提高檢測(cè)靈敏度，從而得到更準(zhǔn)確的分析結(jié)果。

Akira等[45]建立了使用氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜定量全血和尿樣中乙酰芬太尼的分析方法。檢出限為0.1～1.0 ng/g，全血中乙酰芬太尼的回收率不低于88.3%，日內(nèi)日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別小于3.2%和8.6%，尿液中乙酰芬太尼的回收率不低于88.9%，日內(nèi)日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別小于5.8%和8.6%。該方法準(zhǔn)確、靈敏、特異性好，可用于藥物濫用人員全血和尿樣中乙酰芬太尼的定量分析。

3.1.4 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜是一種分析復(fù)雜有機(jī)混合物的有效手段，其結(jié)合了液相色譜儀有效分離熱不穩(wěn)性及高沸點(diǎn)化合物的分離能力與質(zhì)譜儀很強(qiáng)的組分鑒定能力，能夠準(zhǔn)確鑒定和定量血液，血漿，尿液和口腔液等復(fù)雜樣品基質(zhì)中的微量化合物，液相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜或四極桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜是目前法庭科學(xué)研究領(lǐng)域儀器分析方法的主要發(fā)展方向之一[46-47]。

鄭海珍等[48]建立了測(cè)定人血漿中瑞芬太尼的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法。實(shí)驗(yàn)用萃取液(乙酸乙酯:正己烷=4:1，V/V)提取健康志愿者靜脈注射瑞芬太尼不同時(shí)間血漿中的瑞芬太尼，選用卡馬西平為內(nèi)標(biāo)，流動(dòng)相為甲醇-0.1%甲酸水溶液(80:20，V/V)。結(jié)果表明瑞芬太尼血藥濃度為1.0～50.0 μg/L線性關(guān)系良好(r=0.998 9)，最低檢測(cè)限為0.5 μg/L，相對(duì)回收率均在85%～115%，絕對(duì)回收率大于75%，日內(nèi)和日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%。方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、精密度好。錢振華等[49]采用氣相色譜-質(zhì)譜和超高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)2015—2016年國(guó)內(nèi)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)的8種芬太尼類新精神活性物質(zhì)進(jìn)行分析和檢測(cè)。氣相色譜-質(zhì)譜選用DB-5MS石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)，柱溫60 ℃，以20 ℃/min升至280 ℃,保持20 min，再以10 ℃/min升至300 ℃,保持10 min，載氣(He)流速1 mL/min，分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μL，分流比20:1，超高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜進(jìn)樣口溫度280 ℃，質(zhì)量掃描為 m/z 35～500，色譜柱選擇UPLCCSHC18柱(100 mm×2.1 mm×1.7 μm),流動(dòng)相A為0.1%甲酸水溶液，B為乙腈，進(jìn)樣量1 μL。氣相色譜-質(zhì)譜分析中8種芬太尼類新精神活性物質(zhì)都出現(xiàn)了豐度較高的[M-91]峰和豐度較低的[M-134]峰，多數(shù)化合物出現(xiàn)m/z146、m/z158、m/z189、m/z105、m/z77峰；超高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜分析中發(fā)現(xiàn)8種芬太尼類新精神活性物質(zhì)的一級(jí)質(zhì)譜均只出現(xiàn)1個(gè)峰，即準(zhǔn)分子離子峰(M+H)+，二級(jí)質(zhì)譜圖中，多數(shù)化合物出現(xiàn)m/z105、m/z134、m/z146、m/z188峰。通過(guò)總結(jié)8類物質(zhì)在兩種模式下獲得的碎片離子與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系，推測(cè)其可能的碎裂途徑，并歸納通過(guò)譜圖推導(dǎo)未知芬太尼類新精神活性物質(zhì)結(jié)構(gòu)的方法，結(jié)果可為該類物質(zhì)的鑒定提供參考。

3.1.5 放射免疫法

放射免疫法由美國(guó)醫(yī)學(xué)物理學(xué)家雅洛于1959年發(fā)明[50]，主要原理是利用同位素標(biāo)記的與未標(biāo)記的抗原，同抗體發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)的方法，研究機(jī)體對(duì)抗原物質(zhì)反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)化規(guī)律, 該方法靈敏度高，檢出限為10-18～10-9g；特異性好，能識(shí)別化學(xué)結(jié)構(gòu)上非常相似的物質(zhì)；應(yīng)用范圍廣，操作簡(jiǎn)便易行等。

Henderson等[51]放射免疫分析技術(shù)測(cè)定了18種非法芬太尼類似物的粉末樣品，經(jīng)測(cè)定，其中11個(gè)樣品呈陽(yáng)性，發(fā)現(xiàn)含有芬太尼、α-甲基芬太尼、氟呋喃基、順式-和反式-3-甲基芬太尼、噻吩基芬太尼、順式-和反式-3-甲基噻吩基芬太尼，其余七個(gè)陰性樣本含有咖啡因、可待因和海洛因。該方法提供了一種簡(jiǎn)單，快速，可靠的篩選方法。表2歸納整理了芬太尼類新精神活性物質(zhì)檢測(cè)方法。

表2 芬太尼類新精神活性物質(zhì)檢測(cè)方法

3.2 生物樣品中芬太尼類物質(zhì)的前處理方法

生物樣品中芬太尼類物質(zhì)的前處理方法主要包括蛋白質(zhì)沉淀法、液液萃取法、固相萃取法、干血點(diǎn)法、蛋白質(zhì)沉淀聯(lián)合液液萃取法法、中空纖維液-液-液微萃取、分散液-液微萃取等。

其中，蛋白質(zhì)沉淀法具有成本低、操作簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)，但是樣品濃度被稀釋，檢測(cè)限低，對(duì)儀器靈敏度要求較高[54]；液液萃取法分離效果好，但是有機(jī)溶劑用量大，污染環(huán)境，易發(fā)生乳化現(xiàn)象；固相萃取法適用于大多數(shù)液體生物樣品的前處理，分析速度快，自動(dòng)化程度高，回收率較高，但是由于固相萃取柱截面積小，流量低，生物樣品易發(fā)生堵塞，導(dǎo)致提取效率降低、重復(fù)性較差；干血點(diǎn)法干血點(diǎn)法系將全血樣品收集在卡紙上，方便血樣采集及存儲(chǔ)運(yùn)輸、簡(jiǎn)化樣品前處理，但是要求采集時(shí)血樣均勻，對(duì)點(diǎn)樣工具、點(diǎn)樣溫度、點(diǎn)樣體積要求比較高；中空纖維液-液-液微萃取極少量的有機(jī)溶劑即能有效去除基質(zhì)中的復(fù)雜成分，方法的抗干擾能力強(qiáng)、萃取效率高；分散液-液微萃取提高了有機(jī)萃取劑在水相中的分散，增加了水相和萃取劑之間的接觸表面，使目標(biāo)化合物在樣品溶液和萃取劑之間實(shí)現(xiàn)了快速轉(zhuǎn)移[51]，該方法集萃取及富集于一體，有機(jī)溶劑用量少，萃取時(shí)間短，具有較高的萃取效率和富集倍數(shù)[52]。表3歸納整理了文獻(xiàn)報(bào)道的生物樣品中芬太尼類物質(zhì)分析的前處理方法。

表3 芬太尼類物質(zhì)的前處理方法

3 展望

通過(guò)介紹芬太尼類新精神活性物質(zhì)檢測(cè)方法及其生物樣品中此類物質(zhì)分析的前處理方法。免疫法常用于現(xiàn)場(chǎng)的快速檢驗(yàn)，氣相色譜/質(zhì)譜和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜是最可靠和最有效的檢測(cè)方法，前處理方法則要根據(jù)檢材特點(diǎn)并結(jié)合后期的檢測(cè)方法選擇最佳的方法。目前，已成為世界各國(guó)重點(diǎn)關(guān)注的突出問(wèn)題，在全球治理的非傳統(tǒng)安全領(lǐng)域中，已被定性為對(duì)國(guó)際安全構(gòu)成挑戰(zhàn)的威脅客體[59-61]。地下非法制毒工廠以芬太尼為先導(dǎo)化合物，通過(guò)結(jié)構(gòu)改造和構(gòu)效關(guān)系研究，設(shè)計(jì)合成并篩選出越來(lái)越多的一系列活性更高的芬太尼類衍生物，對(duì)其檢驗(yàn)研究工作任重道遠(yuǎn)，工作者重視其在生物檢材的前處理和檢測(cè)技術(shù)等方面的改進(jìn)以及新型分析儀器在此方面的應(yīng)用，以期實(shí)現(xiàn)對(duì)芬太尼類新精神活性物質(zhì)的準(zhǔn)確、快速、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。