實(shí)驗(yàn)室鏡檢，協(xié)力診斷隱球菌性腦膜炎

劉朝志

最近兩個(gè)月，常州市民陳女士反復(fù)頭痛、頭暈，自以為是“貧血”，服用大量“補(bǔ)血藥”后病情不但不見好轉(zhuǎn)，甚至出現(xiàn)嘔吐和視物模糊的癥狀。于是，陳女士來到醫(yī)院就診，接受一系列檢查后，醫(yī)生在其腦脊液中找到了新型隱球菌，診斷其患有“隱球菌性腦膜炎”。

新型隱球菌分布廣泛，是土壤、鴿類、牛乳、水果等的腐生菌，其中鴿糞中大量存在。有數(shù)據(jù)顯示，在我國52%～76%的鴿糞中能分離到新生隱球菌。而隱球菌腦膜炎是由新型隱球菌引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，其早期癥狀及體征不典型，容易發(fā)生誤診，常表現(xiàn)為頭痛、低熱等癥狀并逐漸加重，數(shù)周內(nèi)出現(xiàn)顱高壓癥狀，包括惡心和/或嘔吐、抽搐、視物模糊，甚至昏迷或出現(xiàn)頸強(qiáng)直、Kernig征陽性等腦膜刺激征。因此，及早發(fā)現(xiàn)隱球菌性腦膜炎尤為重要，其主要手段就是實(shí)驗(yàn)室鏡檢。

隱球菌性腦膜炎的實(shí)驗(yàn)室檢查，首先就是對病原菌的直接鏡檢，如果能在標(biāo)本中找到新生隱球菌的存在，對于診斷的結(jié)果就有著決定性的作用。操作方法為：取少許的腦脊液標(biāo)本放在玻璃片上，加上一滴墨汁之后進(jìn)行混勻，加蓋上玻璃片后就可以直接進(jìn)行鏡檢。新生隱球菌在鏡下表現(xiàn)為圓形或者是橢圓形的雙層厚壁孢子，并且外邊有一層寬闊的莢膜，并具有清晰完整的邊緣，菌體內(nèi)有單個(gè)出芽。如果新生隱球菌有變種現(xiàn)象，菌體就會呈現(xiàn)出針形、棒形、瓢形、棒形以及圓球形的出芽現(xiàn)象。在上述操作中，腦脊液與墨汁的比例非常有講究，而這個(gè)比例又和墨汁的濃度有著一定關(guān)聯(lián)，通?？刂圃?：0.5～0.8之間。墨汁過多會遮擋菌體而影響觀察，而墨汁過少的話染色又不會成功，最終會導(dǎo)致漏檢。

在標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)菌體之后，還應(yīng)該對菌體進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)的目的是為日后的治療提供依據(jù)，也是判斷病情預(yù)后的重要指標(biāo)。具體操作為：將腦脊液標(biāo)本搖勻，然后用吸管吸取一定量放在小試管中，加入染液后搖勻，放在低倍顯微鏡下觀察，以血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

如果在首次腦脊液制片標(biāo)本中沒有發(fā)現(xiàn)菌體，也不能貿(mào)然下結(jié)論判斷不存在新型隱球菌感染，而應(yīng)該在經(jīng)過離心沉淀之后重復(fù)檢查。離心沉淀過程一定要注意時(shí)間，通常是3000轉(zhuǎn)/分，離心15分鐘。因?yàn)槿绻可?，離心時(shí)間過短，就有可能造成漏檢。在離心之后，有些技術(shù)人員會直接用無菌吸管吸取沉淀物，這樣操作會因?yàn)槲∩蟻淼某恋砦锉簧锨逡合♂尪斐陕z。所以，最好先倒掉上清液，再吸取沉淀物。

此外，隱球菌性腦膜炎檢查項(xiàng)目中還包括著腦脊液常規(guī)檢查、抗原檢查以及抗體檢查等。腦脊液常規(guī)中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱球菌腦脊液壓力會增高，從外觀上來看，會有著乳白、淡黃以及紅色等多種顏色出現(xiàn)，并且白細(xì)胞數(shù)會明顯增高，蛋白的含量在病情中后期有著明顯增高。在抗體檢測中，常用凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、間接熒光試驗(yàn)以及間接血凝試驗(yàn)等方法，其檢查結(jié)果有利于對病情變化進(jìn)行判斷，如果抗體滴度升高則表明病情有著明顯的好轉(zhuǎn)。

患有糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病等基礎(chǔ)疾病及其他有免疫缺陷者如艾滋病患者，在感染新型隱球菌后更容易發(fā)生隱球菌性腦膜炎。所以，當(dāng)這部分患者出現(xiàn)上呼吸道感染，如畏寒、發(fā)熱、乏力、輕度咳嗽、咳痰，以及頭昏、頭痛等癥狀后，如果應(yīng)用一般抗生素治療無效，且病情逐漸加重，要警惕是隱球菌性腦膜炎，一定要積極接受相關(guān)檢查。