沙棘總黃酮自微乳化制劑處方研究

王月茹 張 莉 張 建 謝 偉 陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院（咸陽(yáng) 712046）

沙棘黃酮類(lèi)化合物是沙棘的主要有效成分之一，藥理研究表明，其具有抗心肌缺血、抗心率失常、增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗衰老、抗腫瘤、抗菌等廣泛的作用[1]。但因沙棘總黃酮類(lèi)物質(zhì)在水中溶解度較小，導(dǎo)致藥物在胃腸道吸收差、生物利用度低等缺點(diǎn)。自微乳化釋藥系統(tǒng)（SMEDDS）是由油相、乳化劑和助乳化劑形成均一的透明藥液，在胃腸道或環(huán)境溫度37℃溫和攪拌的情況下，能自發(fā)乳化形成粒徑在100～500nm的乳劑[2]。

為了提高沙棘總黃酮口服生物利用度，本試驗(yàn)擬將成沙棘總黃酮制成自微乳化制劑。

1 儀器與試藥 UV-2450紫外－見(jiàn)分光光度計(jì)（日本島津公司）；RCZ-1A型溶出試驗(yàn)儀（上海黃海藥檢儀器廠）；粒徑分析儀（Brookhaven Instruments Corp）；蘆丁對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)100080-201103）；沙棘總黃酮（青?？灯丈锟萍脊煞萦邢薰?，批號(hào)：20110503）；Transcutol P （法國(guó) Gattefosse公司）；吐溫-80（廣州化學(xué)試劑廠）；油酸乙酯（上海飛祥化工廠）；其它試劑為分析醇。

2 方法與結(jié)果

2.1 偽三元相圖的繪制 經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇對(duì)沙棘總黃酮溶解度大及乳化能力較好的自乳化輔料，確定以吐溫-80作為乳化劑，以Transcutol P為助乳化劑，分別配制不同處方比例的自乳化液2g，攪拌混合均勻后，用蒸餾水稀釋50倍，攪拌均勻。以目測(cè)的方法進(jìn)行考察，以能形成澄清或藍(lán)白色乳液作為標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用Origin7.5軟件，其中以乳化劑、助乳化劑與油相各為一相，以油酸乙酯作為油相。繪制自微乳化區(qū)域，進(jìn)行處方比例的優(yōu)選[3，4]。

圖1 吐溫-80-TranscutolP-油酸乙酯

從圖1結(jié)果可以看出：形成自乳化區(qū)域面積的油酸乙酯含量為0%～50%，吐溫-80含量為20%～90%，Transcutol P含量為20%～90%，為了進(jìn)一步優(yōu)化自微乳化制劑處方配比提供參考依據(jù)。

2.2 處方比例優(yōu)選 A.平均粒徑測(cè)定：在自微乳化區(qū)域中，按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的處方比例配制自微乳液10g，并加入自微乳液重量5%的藥物，攪拌混合均勻后，用蒸餾水稀釋50倍后，測(cè)定其粒徑大小。B.自乳化時(shí)間的測(cè)定：取含藥的自微乳0.5mL，于200mL蒸餾水為溶出介質(zhì)，溫度為 （37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速為50r／min，待自微乳液接觸溶液開(kāi)始計(jì)時(shí)，測(cè)定完全形成均勻乳液的時(shí)間。

表1 自微乳化處方優(yōu)選

考慮處方中乳化劑用量過(guò)大，可能會(huì)刺激胃腸道，易產(chǎn)生毒副作用，以油相用量最多、乳化劑用量最少、粒徑較小及自乳化時(shí)間較短為評(píng)判原則，綜合比較后，確定吐溫80-Transcutol P-油酸乙酯50∶40∶10為最優(yōu)處方。

2.3 沙棘總黃酮SMEDDS的制備 按照優(yōu)選的自微乳化處方吐溫80-Transcutol P-油酸乙酯50∶40∶10，加入5%沙棘總黃酮原料藥，攪拌均勻，水浴37℃，放置8h，即得沙棘總黃酮SMEDDS。

2.4 粒 徑 取沙棘總黃酮SMEDDS 0.5mL滴入25mL蒸餾水中，輕輕搖勻，用粒徑分析儀測(cè)定，其粒徑大小及分布。結(jié)果表明，經(jīng)水稀釋?zhuān)榛蟮钠骄?11.2nm，PDI 0.201，粒徑分布均勻。

2.5 體外溶出度測(cè)定

2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱(chēng)取蘆丁對(duì)照品20.0mg，加乙醇適量，放冷，用乙醇定容，稀釋成12﹑24﹑36﹑48﹑60﹑72μg／mL系列濃度，加5%NaNO2溶液1mL，搖勻，靜置6min，再加入10%Al（NO3）3溶液1mL，搖勻，繼續(xù)靜置6min，加1mol／L NaOH溶液10mL，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，靜置15min，以相應(yīng)試劑為空白，測(cè)定510nm處吸光度。計(jì)算回歸方程為：A＝0.0108C-0.0059，r＝0.9992。

2.5.2 回收率實(shí)驗(yàn)：分別稱(chēng)取蘆丁對(duì)照品15mg、20mg、25mg于100mL容量瓶中，分別加入空白自乳化輔料，加乙醇至稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，吸取續(xù)濾液1mL，用蒸餾水定容至25mL，再照“標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定方法”，測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率，結(jié)果表明，低、中、高濃度的回收率分別為99.17%、101.26%、101.37%。

2.5.3 溶出度測(cè)定：參照中國(guó)藥典2010年版二部溶出度測(cè)定法（附錄XC第二法），分別稱(chēng)取沙棘總黃酮SMEDDS0.5g和等量的沙棘總黃酮25mg，以900mL蒸餾水為溶出介質(zhì)，溫度為（37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速為50r·min－1，依法操作，分別于5、10、20、30、45、60min取樣5mL，濾過(guò)后，精密量取濾液2mL，分別置于25mL容量瓶中，按照“標(biāo)準(zhǔn)曲線方法”測(cè)定510nm吸光度，計(jì)算樣品中總黃酮溶出量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知：沙棘總黃酮SMEDDS在30min溶出度達(dá)65.2%，而原料藥45min溶出度僅為17.5%，說(shuō)明SMEDDS可顯著提高水難溶性藥物沙棘總黃酮的溶出度。

3 討 論 乳劑的粒徑大小是影響藥物吸收的主要因素，乳滴的粒徑越小，生物利用度越好。本實(shí)驗(yàn)采用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)，該方法可用于測(cè)定自乳化藥液分散后所形成乳液粒子的粒徑的大小和分布狀況。多分散指數(shù)（PDI）是指粒徑分布大小的指數(shù)，數(shù)值越小，則粒徑分布范圍越窄，表明所制備的粒子大小越均勻。為了保證樣品粒徑檢測(cè)的準(zhǔn)確性，樣品濃度應(yīng)控制在一定范圍內(nèi)，本次試驗(yàn)稀釋倍數(shù)在50倍。對(duì)沙棘總黃酮自微乳化制劑進(jìn)行6個(gè)月常溫穩(wěn)定性考察，結(jié)果該制劑澄清透明，未出現(xiàn)分層或沉淀現(xiàn)象。在今后的研究中，應(yīng)進(jìn)一步研究沙棘總黃酮SMEDDS體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究。

[1]劉鳳云.沙棘總黃酮的藥理作用概況[J].中藥材，2004，27（2）：145-146.

[2]袁海建，陳 彥，賈曉斌.中藥自微乳傳遞系統(tǒng)的研究與應(yīng)用[J].中華中醫(yī)藥雜志，2008，23（6）：524-527.

[3]張 建，葉珍珍，崔升淼.山楂葉總黃酮固體自乳化顆粒的處方優(yōu)化和評(píng)價(jià)[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑藥學(xué)，2012，18（4）：15-16.

[4]雷 俊，吳正紅，平其能，等.靛玉紅自乳化釋藥系統(tǒng)的體外評(píng)價(jià)[J].中成藥，2008，30（7）：969-970.