王曉艷,林廣宇,張 宇,楊 靜*
1.遼源市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,吉林遼源 136200;2.吉林省牧業(yè)信息中心,吉林長春 130062
近年來,隨著養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展,禽類細(xì)菌性疾病感染現(xiàn)象日趨增多。雞大腸桿菌作為養(yǎng)禽過程中常見的一種致病菌,血清型多達(dá)200余種。在養(yǎng)殖實(shí)踐中,由于抗生素類藥物使用不規(guī)范,耐藥菌株不斷產(chǎn)生,耐藥性不斷增強(qiáng),導(dǎo)致治療難度不斷加大。雞大腸桿菌病特別是敗血型大腸桿菌病,具有發(fā)現(xiàn)難、發(fā)病快、治療難、死亡率高的特點(diǎn),所以在診療過程中,藥敏實(shí)驗(yàn)尤為重要。正確的藥敏實(shí)驗(yàn),不僅可以快速、精準(zhǔn)的指導(dǎo)我們選擇出抗菌效果好的抗生素,更能減少養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失,達(dá)到更好的禽群治療效果。
吉林省磐石市六和鄉(xiāng)養(yǎng)殖戶吳某家中飼養(yǎng)了80日齡海蘭褐青年蛋雞14 000只,在2020年10月中旬,雞群有輕微呼吸道癥狀,采食量飲水量均正常,雞只陸續(xù)出現(xiàn)急性死亡,死亡雞只身體僵硬,羽毛整齊。初期發(fā)病時(shí),每天死亡1~3只,吳某沒有在意。發(fā)病5 d后,每天死亡多達(dá)30余只。雞群無明顯病狀,每間隔數(shù)小時(shí)就會(huì)發(fā)現(xiàn)死亡雞只。
通過解剖發(fā)現(xiàn),雞心臟和肝臟表面有一層淡黃色纖維素性滲出物,形成心包炎和肝周炎,肺臟輕微淤血,第一只氣管有少量分泌物,個(gè)別雞只腹膜有半熟蛋黃樣滲出,形成腹膜炎。雞嗉囊、肌胃內(nèi)均有未消化飼料,初步診斷為敗血型大腸桿菌感染。采集心臟、肝臟、脾臟等數(shù)個(gè)病料,做下一步診斷。
無菌采集病禽的心、肝、脾等實(shí)質(zhì)性器官,涂片革蘭氏染色,可見大量革蘭氏陰性小桿菌,故對病料做麥康凱培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)12~15 h后,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上有紅色菌落出現(xiàn),確定該病菌為大腸桿菌,結(jié)合臨床出現(xiàn)的敗血癥狀,確定為敗血型大腸性桿菌病。
事先制作完成的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,將病料表面滅菌后無菌切開,取將切開的病料均勻涂布于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基表面,涂層要均勻,且不易過厚,再將涂完病料的培養(yǎng)皿倒置備用。
按藥品使用說明劑量的比例,取20 mL蒸餾水配制藥品溶液(濃度為正常使用量的30倍),將50片相同大小的空白試紙片放入溶液中混勻,再以35~37 ℃烘干。上述過程重復(fù)操作2次后,把自制藥敏試紙片封裝備用。
取出自制藥敏實(shí)驗(yàn)試紙片,有序粘貼在涂完病料的培養(yǎng)皿上,每個(gè)平皿粘貼5~7個(gè)自制藥敏實(shí)驗(yàn)試紙片,每兩個(gè)試紙片之間的距離應(yīng)在24~26 mm之間,同時(shí)作好記錄。
將制作完成的培養(yǎng)皿倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中10~12 h,期間要注意保持恒溫培養(yǎng)箱的濕度在35%~40%之間,如果沒有濕度計(jì),可以將培養(yǎng)皿放入濕盒中,再放入培養(yǎng)箱。6 h以后,每隔2 h觀察一次細(xì)菌繁殖情況,并做好相關(guān)記錄。
細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)束后,測量抑菌環(huán)的大小,記錄相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。氨基糖甙類和喹諾酮類抑菌環(huán)直徑16 mm, 為高度敏感。氯霉素類抑菌環(huán)直徑10 mm,屬中度敏感?;前奉愐志h(huán)2 mm,屬不敏感藥物。
因該戶雞群為14 000只80日齡的青年蛋雞,根據(jù)氨基糖甙類和喹諾酮類高敏的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇用10%的恩諾沙星15袋(每袋100 g)治療,方法是:每天飲水1次,每次集中飲水2~3 h,5 d為一個(gè)療程。同時(shí),為了進(jìn)一步加快治療進(jìn)程,增強(qiáng)雞體抵抗力,我們在飼料中大劑量拌入益生菌,連續(xù)拌料5 d。通過此種治療方法,雞群在用藥2 d后,死亡率迅速下降;在用藥第5天,再未發(fā)現(xiàn)有死亡雞只出現(xiàn),雞群基本痊愈。