毛細(xì)管電泳技術(shù)在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應(yīng)用

常劍鋒，胡雅，梁燕媚，冼艷斌，劉文晴

（肇慶市第二人民醫(yī)院，廣東 肇慶 526000）

α-地中海貧血在臨床屬于一種較為罕見的貧血性疾病，還會因?yàn)橹榈鞍谆虿煌葑兂啥喾N類型的疾病，而且這一疾病表現(xiàn)形式也存在較大的差異性，病情不嚴(yán)重的患者，并不會受到這一疾病的影響，可是患病情況較為嚴(yán)重的患者，其生命健康也會受到威脅，更甚者還會出現(xiàn)胎死腹中等情況，而年齡較小的患者還會因此而喪命[1-3]。α-地中海貧血臨床發(fā)病機(jī)制十分特殊，有時候還會伴有并發(fā)癥情況，對于患者生活會造成較為顯著的影響，所以臨床十分重視臨床檢測，只有做好臨床檢測工作才能及時對其展開治療，從而有效提高治療效果[4]。毛細(xì)管電泳技術(shù)是近幾十年發(fā)展起來的一門高效分析技術(shù)，這一技術(shù)將經(jīng)典的電泳技術(shù)與代微柱技術(shù)兩者的優(yōu)勢有效的綜合了起來，在使用過程中具有高效、簡單、自動化、快速、敏感等特征，將其應(yīng)用于臨床篩查診斷中意義非常，屬于一項精準(zhǔn)性較高的檢測技術(shù)[5]。為此，本文也就毛細(xì)管電泳技術(shù)在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應(yīng)用效果進(jìn)行了研究，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 在本次研究過程中，按照隨機(jī)抽樣的方式來挑選研究對象，所有研究對象均來自于我院2019年1月-2019年9月所檢測的新生兒篩查標(biāo)本，共有631例，對631例新生兒進(jìn)行研究與篩查診斷。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材以及試劑 本次篩查診斷過程中使用到的儀器主要是全自動毛細(xì)管電泳儀（Capillarys 2，法國Sebia公司）及配套原裝試劑。深圳亞能公司的PCR基因擴(kuò)增儀及配套試劑。

1.3 方法 實(shí)驗(yàn)人員在對新生兒進(jìn)行篩查診斷的時候，需要使用毛細(xì)管電泳技術(shù)來對采集新生兒干血斑血作為樣本，對樣本統(tǒng)一進(jìn)行提取、然后定量分析，同時還需要對陽性樣本數(shù)量進(jìn)行詳細(xì)統(tǒng)計，血液呈現(xiàn)陽性則代表新生兒血液之中含有HB Bart's、HB E和Hb A2降低及異常血紅蛋白區(qū)帶等情況，分析血紅蛋白成分進(jìn)行判斷。

新篩中心則需要及時召回這些陽性患兒，然后對其進(jìn)行針對性PCR基因分析與研究。通過借助于毛細(xì)管電泳技術(shù)來對這些樣本進(jìn)行α-地中海貧血篩查，以此來評估毛細(xì)管電泳技術(shù)在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應(yīng)用效果。

1.4 檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) 在應(yīng)用毛細(xì)管電泳技術(shù)對新生兒α-地中海貧血情況進(jìn)行篩查診斷的時候，篩查人員需要及時記錄新生兒詳細(xì)的各項數(shù)據(jù)指標(biāo)，同時做好分類整理工作。在這一過程中，運(yùn)用綜合分析法進(jìn)行分析，HbA為2%-48%、HbF為60%-87%、HbA2＜1.0%的話，就表示標(biāo)本診斷結(jié)果為陰性，若出現(xiàn)了Bart's帶、異常血紅蛋白帶等情況的話，就表示標(biāo)本診斷結(jié)果為陽性。然后再根據(jù)HB Bart's含量進(jìn)行分型。

2 結(jié)果

在對631例新生兒血液干血斑陽性樣本進(jìn)行檢測后，結(jié)果顯示，有593例新生兒血液樣本檢測結(jié)果為陽性，陽性樣本檢測率為93.98%。在此之后，我們對這631例新生兒進(jìn)行了α-地中海貧血篩查診斷，篩查診斷結(jié)果顯示，靜止性α地貧132人，標(biāo)準(zhǔn)型α地貧327人，中間型α地貧9人，α地貧復(fù)合β地貧18人，正常人38人，β型地貧和其他異常血紅蛋白107人。

表1 各種α-地中海貧血類型情況分析

3 討論

地貧在臨床屬于一種較為嚴(yán)重的遺傳性疾病，對于人類健康造成較大的危害，我國多發(fā)于南方地區(qū)。臨床在對α-地中海貧血進(jìn)行診斷的時候，血常規(guī)法、紅細(xì)胞脆性法均可以用于篩查，可是α-地中海貧血類型較多，其中靜止型與標(biāo)準(zhǔn)型這兩種類型并不存在明顯的血常規(guī)變化以及臨床表現(xiàn)，所以這個時候這兩種常用篩查診斷方式也就不具備應(yīng)用價值，容易出現(xiàn)漏檢率[6]。眾所周知α-地中海貧血公認(rèn)的診斷方式就是聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及其延伸技術(shù)，可是這一技術(shù)在使用過程中需要較高的操作要求，所以也就限制了其在臨床篩查診斷中的應(yīng)用。

全自動毛細(xì)管電泳技術(shù)作為時代發(fā)展下的產(chǎn)物，是在充滿電泳液的石英管中進(jìn)行電泳的技術(shù)，在使用過程中，其會在溶血試劑之中有效稀釋紅細(xì)胞樣品，也會被直接注射到毛細(xì)管負(fù)極端，這個時候在高壓電的作用下就會競相電泳分離，然后Hb則會靠近正極端415 μm廣播檢測裝置檢測到[7]。這一檢測方式應(yīng)用于α-地中海貧血篩查診斷中具有較為顯著的優(yōu)勢，其結(jié)果顯示帶區(qū)間寬，能夠精準(zhǔn)的計算各個區(qū)帶的百分?jǐn)?shù)，然后將Hb Bart's進(jìn)行區(qū)分；而且在使用過程中也十分的高效，檢測一個樣品需要耗費(fèi)的時間僅為10 min；并且自動化程度也較高，并不需要人工制備血紅蛋白液，也無需人工修改基線，所以在使用過程中也有效避免了認(rèn)為因素而引發(fā)的檢測結(jié)果不準(zhǔn)確等情況；此外，穩(wěn)定、精確、診斷結(jié)果與PCR基因分析法結(jié)果符合度也較高，是一種較為有效的篩查診斷手段[8-10]。在本次研究過程中，在對于1000例新生兒進(jìn)行血液樣本采集與檢查的時候，診斷結(jié)果顯示，有360例新生兒血液樣本檢測結(jié)果為陽性，陽性樣本檢測率為36.00%。在對631例新生兒血液干血斑陽性樣本進(jìn)行檢測后，結(jié)果顯示，有593例新生兒血液樣本檢測結(jié)果為陽性，陽性樣本檢測率為93.98%。從這一結(jié)果我們能夠發(fā)現(xiàn)，毛細(xì)管電泳技術(shù)在新生兒α-地中海貧血篩查診斷之中的效果較為良好，所以在對新生兒進(jìn)行診斷與篩查的時候，最好是按照α-地中海貧血攜帶者亦或者是患兒在出生48-72 h采集的干血斑之中出現(xiàn)的Hb成分，來應(yīng)用毛細(xì)管電泳技術(shù)來對其進(jìn)行篩查與診斷，這種診斷方式在取材方面十分的便捷，同時也能有效檢查出新生兒究竟是不是α-地中海貧血攜帶者，然后再基于此對新生兒進(jìn)行針對性處理與分析。輕型α-地中海貧血雖然在成年期也并不存在任何臨床癥狀，可是輕型α-地中海貧血攜帶者自身亦或者是和靜止型α-地中海貧血患者婚育的話，有25%的可能性會分娩下致死性疾病的Hb Bart's水腫胎和嚴(yán)重影響生存質(zhì)量的HbH病，從而促使患者家庭遭受較大的打擊。為此，對新生兒進(jìn)行α-地中海貧血患者攜帶篩查與診斷意義顯著，能夠在一定程度上指導(dǎo)婚育、優(yōu)生優(yōu)育、提高人口素質(zhì)等工作。但是，在本次研究中我們也能發(fā)現(xiàn)其診斷率雖然高，但是也并不是100%，所以如果有條件的地區(qū)亦或者是單位，最好還是將基因診斷作為α-地中海貧血患者篩查診斷補(bǔ)充亦或者是確診手段。

綜上所述，毛細(xì)管電泳技術(shù)在新生兒α-地中海貧血篩查診斷中的應(yīng)用價值較為顯著，能夠具有較高的診斷符合率，同時在操作過程中也十分的簡便、迅速且經(jīng)濟(jì)，能夠有效實(shí)現(xiàn)早期診斷，值得推廣應(yīng)用。