梁愛明
(百色市隆林各族自治縣人民醫(yī)院,廣西 百色 533400)
目前,對于肺結(jié)核病病患的初期診斷和治療以及結(jié)核病的流行病學(xué)調(diào)查,痰涂片找抗酸桿菌查驗是一種簡便、快速、廉價的實驗方法,也是世界衛(wèi)生組織(WHO)結(jié)核病流調(diào)的一種方法[1-2]。肺結(jié)核病痰涂片鏡檢表明,肺結(jié)核病是實施DOTS策略的關(guān)鍵,在結(jié)核病管控中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。本研究選擇我院1200例肺結(jié)核病患進行痰涂片熒光染色顯微鏡鏡檢查驗,分析痰標本性質(zhì)與陽性檢出率之間的關(guān)系?,F(xiàn)報告如下。
1.1 一般資料 挑選本院于2017年1月-2019年7月期間收治的肺結(jié)核病患1200例痰液樣品作為研究對象。1200例病患,年齡12-75歲。納入標準:所有研究對象均為肺結(jié)核病患;所有研究對象及其家屬均知情,并許可此次調(diào)查。排除標準:伴隨其他嚴重病癥者;不能夠配合此次調(diào)查者。此次研究將運用熒光染色(珠海貝索生物技術(shù)有限公司的熒光金胺O法染色)、手工涂片。鏡檢運用生物顯微鏡EX30。電源輸入為180-240VAC 50/60 Hz;電源輸出為5V/2A;使用期限:5年;生產(chǎn)許可證號:浙藥監(jiān)械生產(chǎn)許20130052號;產(chǎn)品注冊證號:浙食藥監(jiān)械(準)字2014第2220588號;產(chǎn)品技術(shù)要求編號:浙食藥監(jiān)械(準)字2014第2220588;生產(chǎn)廠家:寧波舜宇儀器有限公司生產(chǎn)。
1.2 查驗方法
1.2.1 試劑 (1)染色劑:金胺“O”0.1 g溶于10 mL 95%乙醇內(nèi),加5%石碳酸90 mL。(2)脫色劑:3%鹽酸乙醇液。(3)復(fù)染劑:0.5%高錳酸鉀水溶液。
1.2.2 涂片制作 挑取痰標本中干酪樣、膿樣或可疑部份約0.05-0.1 mL,于玻片正面右側(cè)2/3處均勻涂抹成10 mm×20 mm的卵圓形痰膜,自然干燥,染色前加熱固定(在5 s內(nèi)將玻片置于火焰上來回烤4次)。(1)痰涂片固定后,滴加金胺O染液染色15 min,水洗。(2)加脫色劑脫色1-2 min至沒有黃色,水洗。(3)加復(fù)染劑復(fù)染1-2 min,水洗,等待干燥后鏡檢。
1.2.3 熒光染色鏡檢標準 在暗色的背景之下,抗酸桿菌呈明亮的橘黃色或黃綠色桿狀略彎曲。物鏡20×查驗結(jié)果按下列標準報告:(1)AFB陰性(-):未見AFB/50視野。(2)報告AFB菌數(shù):1-9條/50視野。(3)AFB陽性+:10-99條/50視野。(4)AFB陽性++:1-9條/視野。(5)AFB陽性+++:10-99條/視野。⑥AFB陽性++++:≥100條/視野。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 此次研究當中的所有數(shù)據(jù)均運用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件予以處置,計量資料運用均數(shù)±標準差(Mean±SD)表示,以t查驗,P<0.05表示差別擁有統(tǒng)計學(xué)意義。計數(shù)資料運用率(%)表示,以卡方查驗,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 不同性狀痰樣品的構(gòu)成比 1200份痰樣品中,唾液(D)占據(jù)600份,為總樣本數(shù)目的50.00%,血痰標本的數(shù)目最少,為50份,僅占樣本總量的4.16%。見表1。
表1 不同性狀痰樣品的構(gòu)成比
2.2 痰樣品查驗結(jié)果 唾液(D)與粘液痰(C)涂陽數(shù)率對照P<0.01,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義,唾液(D)與干酪痰(A)、血痰(B)對照,P值均<0.01,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。
表2 痰樣品查驗結(jié)果
2.3 不同性狀痰樣品AFB數(shù)目檢出結(jié)果 FB菌量在++以上的涂陽痰樣品占比例最高為干酪痰(A),最低為唾液(D),唾液(D)菌量++以上與血痰(B)對照P<0.01,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。見表3。
表3 不同性狀痰樣品AFB數(shù)目檢出結(jié)果
本研究對我院收治的肺結(jié)核病患的痰標本進行傳統(tǒng)痰涂片查驗,并對鏡檢結(jié)果進行分析。結(jié)果表明,1200份樣本中,唾液(D)600份,占總樣本的50.0%,血痰(B)50份,僅占總樣本的4.16%。這與相關(guān)的報道比例是不同的,存在著一些差異。這種差異其實可以理解,由于大部分病患在門診康復(fù),一些初來確診的病患仍不能掌握正確的咳痰方法。他們無法將下呼吸道的痰液咳出,固不能留下痰液標本進行查驗。通過分析不同性質(zhì)痰標本的AFB數(shù),發(fā)覺各性質(zhì)標本均有部分的菌量小于++,大部分AFB菌量++以上。各性質(zhì)痰標本涂片陽性率不同,但以干酪痰(A)最高為33.33%,血痰為40.00%,這與唾液(D)之間的差異,存在統(tǒng)計學(xué)意義。
AFB細胞壁富含脂類,是誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)、結(jié)核結(jié)節(jié)形成和干酪樣壞死的物質(zhì)基礎(chǔ)。干酪痰來源是肺分離的干酪樣壞死組織,它是抗酸桿菌的濃縮成分,它來源疾病的活動期或感染病患的下呼吸道[3-5]。在測試因素的影響下,對樣品的質(zhì)量進行了測試,這個比率是最高的。部分血痰(B)是干咳引起的支氣管裂開,未必是真正的病灶出血。此外,血痰(B)也會影響染色背景,因此,檢出率不高。粘液痰(C)混合有更多上呼吸道分泌物,檢出率相對較低;唾液(D)的主要成分是口腔分泌物,含有較多的扁平上皮細胞,AFB的陽性率最低,但依然存在9.16%的陽性率,這可能是結(jié)核病病患排出病菌較多的時期。致使分泌物留在口腔里。因此,痰標本的質(zhì)量不僅影響AFB涂片鏡檢的陽性率,而且也影響AFB涂片的菌量檢出。為了提升痰標本涂片陽性率,特別是結(jié)核病工作人員應(yīng)耐心細致,使病患積極配合,盡可能留取符合病情的痰標本,提升標本AFB涂片鏡檢陽性率。
肺結(jié)核病病患痰涂片查驗,是尋找感染源的關(guān)鍵途徑。為肺結(jié)核病確診和堅定確診、預(yù)防及診治效果評價提供可靠依據(jù)。因此,留取符合病情的痰標本具有關(guān)鍵意義。應(yīng)做好痰涂片查驗前痰標本質(zhì)量保證工作,協(xié)調(diào)配合,提升痰標本的涂片陽性檢出率。