核酸檢測(cè)技術(shù)在獻(xiàn)血者血液篩查中的應(yīng)用

周陸

（欽州市中心血站，廣西 欽州 535000）

血液和血液制品是輸血性傳染疾病得以傳播的重要載體，雖然積極檢測(cè)輸血相關(guān)病毒的抗體或抗原能在很大程度上降低廣大人民群眾所面臨的輸血傳播疾病感染風(fēng)險(xiǎn)，但事實(shí)上該風(fēng)險(xiǎn)依舊存在，輸血傳播疾病發(fā)生事件仍時(shí)有發(fā)生，這是因?yàn)镠BV、HCV、HIV血清學(xué)檢測(cè)具有較長(zhǎng)的“窗口期”，因而單純對(duì)抗體或抗原進(jìn)行檢測(cè)是無(wú)法從根本上保證血液和血液制品安全性的[1]。本研究旨在對(duì)核酸檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于獻(xiàn)血者血液篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值展開分析與探討，研究詳情如下。

1 資料和方法

1.1 資料來(lái)源 選擇2017年1月-2018年12月我站采集的54575份無(wú)償性獻(xiàn)血者所提供血液樣本納入本次研究（其中26003份為我站2017年1月-2017年12月所采集血液樣本數(shù)；28572份為2018年1月-2018年12月我站所采集血液樣本數(shù)），全部無(wú)償性獻(xiàn)血者中31483例男性、23092例女性，年齡最大的55歲，年齡最小的18歲，年齡均數(shù)（34.76±4.51）歲。所有無(wú)償性獻(xiàn)血者相關(guān)情況均符合獻(xiàn)血標(biāo)準(zhǔn)，且全部納入研究血液樣本均經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA法）檢測(cè)項(xiàng)目確認(rèn)合格后進(jìn)入核酸檢測(cè)環(huán)節(jié)。

1.2 方法 研究中所有接受NAT檢測(cè)血液樣本的混合和檢測(cè)皆利用全自動(dòng)核酸提取、擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)及全自動(dòng)加樣儀完成：在6個(gè)無(wú)償獻(xiàn)血者血液樣本中各取167 μL血漿，由全自動(dòng)混樣儀加入一級(jí)混樣池；依據(jù)MGP磁珠分離技術(shù)原理，應(yīng)用全自動(dòng)核酸提取儀提取核酸，通過核酸擴(kuò)增檢測(cè)儀對(duì)血液樣本中HCV、HCV、HIV靶序列展開擴(kuò)增檢測(cè)，由系統(tǒng)自帶服務(wù)器對(duì)結(jié)果進(jìn)行自動(dòng)判讀，確保每組檢測(cè)均設(shè)有指控對(duì)照；當(dāng)某一一級(jí)混樣池中樣本經(jīng)全自動(dòng)核酸提取、擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)確認(rèn)為陽(yáng)性，則對(duì)組成該一級(jí)混樣池中血液樣本的6份原始血液樣本行單標(biāo)本檢測(cè)，若單標(biāo)本經(jīng)NAT檢測(cè)得出結(jié)果呈陽(yáng)性則認(rèn)定為NAT陽(yáng)性；若單標(biāo)本經(jīng)NAT檢測(cè)得出結(jié)果呈陰性則認(rèn)定為NAT陰性。對(duì)經(jīng)NAT檢測(cè)得出的NAT陽(yáng)性標(biāo)本行HBsAg、HBeAg、抗-HBe、抗HBs、抗HBc單標(biāo)本檢測(cè)，以對(duì)NAT檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性予以判定。

2 結(jié)果

表1顯示，54575份無(wú)償性獻(xiàn)血者所提供血液樣本中共檢出ELISA法陰性、NAT陽(yáng)性血液樣本49份，此49份血液樣本檢測(cè)報(bào)告均表明該血液樣本為HBV-DNA陽(yáng)性，無(wú)HCV-DNA和HIV-DNA血液樣本出現(xiàn)，ELISA檢測(cè)方法的漏檢率為0.0898%（49/54575）。

表1 2017-2018年我站無(wú)償性獻(xiàn)血血液樣本ELISA法陰性、NAT陽(yáng)性情況

3 討論

相關(guān)研究結(jié)果顯示，無(wú)償獻(xiàn)血者在病毒感染“窗口期”進(jìn)行獻(xiàn)血是輸血性傳染疾病傳播風(fēng)險(xiǎn)的主要來(lái)源，如HIV感染“窗口期”者、HBV隱匿性感染者等所獻(xiàn)出的處于病毒感染“窗口期”的血液和血液制品均是無(wú)法利用ELISA檢測(cè)方法有效檢測(cè)出來(lái)的，具有一定的漏檢可能[2]。為解決這個(gè)問題，越來(lái)越多的專家學(xué)者和行業(yè)內(nèi)人士均十分致力于推動(dòng)將NAT應(yīng)用于獻(xiàn)血者血液篩查中，以提升血液安全性。

NAT是一種可對(duì)病原體核酸進(jìn)行直接檢測(cè)的方法，現(xiàn)被許多國(guó)家與地區(qū)應(yīng)用于血液篩查工作的實(shí)際開展過程當(dāng)中[3]。ANT的敏感性與特異性均較高，即使受檢血液樣本中病毒濃度不高，甚至微量，其仍舊能夠?qū)⒉《竞怂釞z測(cè)出來(lái)，可大大縮短ELISA檢測(cè)方法的“窗口期”，還能使由隱匿性感染、病毒變異等原因所導(dǎo)致的ELISA漏檢情況的發(fā)生得到有效規(guī)避[4]。

為探究NAT在獻(xiàn)血者血液篩查中的應(yīng)用價(jià)值，本研究對(duì)我站2017年-2018年間所采集的54575份血液樣本實(shí)施了核酸檢測(cè)，所得結(jié)果顯示：全部血液樣本中共檢出ELISA法陰性、NAT陽(yáng)性血液樣本49份，ELISA檢測(cè)方法的漏檢率為0.0898%（49/54575），在很大程度上提示著NAT在獻(xiàn)血者血液篩查中應(yīng)用的必要性。

由此可見，核酸檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用可使輸血傳播疾病的發(fā)生得到有效規(guī)避，令臨床用血安全與臨床用血質(zhì)量得到更好保障。