• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    線粒體調(diào)控NLRP3炎性復(fù)合體活化的機(jī)制及中藥有效成分干預(yù)作用

    2020-04-01 02:00:58南鳳尾景光嬋張孟仁
    醫(yī)學(xué)研究雜志 2020年2期
    關(guān)鍵詞:復(fù)合體前體磷脂

    南鳳尾 景光嬋 張孟仁

    固有免疫應(yīng)答是宿主抵抗病原微生物入侵的第一道防線,能夠啟動和參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答。固有免疫細(xì)胞表面存在模式識別受體(pattern recognition receptors, PRRs),PRRs感受到病原體入侵或內(nèi)源性損傷時(shí),可與病原微生物表面的病原體相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular patterns, PAMPs)或內(nèi)源性損傷來源的損傷相關(guān)分子模式(damage associated molecular patterns, DAMPs)發(fā)生相對特異性的結(jié)合,啟動即時(shí)免疫效應(yīng)。核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體家族[nucleotide-binding oligomerization domain (NOD)-like receptors, NLR]是存在胞質(zhì)中的一類重要的PRR,NLR家族中最大的亞家族是含有NACHT-LRR-PYD[NACHT,LRR-and pyrin-domain (PYD)-containing protein, NALP]或稱含NLR家族熱蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白(NLR family pyrin domain containing protein, NLRP)的受體家族。大部分NLRP在識別胞質(zhì)中不同的PAMP或DAMP后,能夠形成炎性復(fù)合體。炎性復(fù)合體也稱炎性小體,是由胞質(zhì)中的多種PRR參與組裝的一類多蛋白復(fù)合物,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的主要有4種,即NLRP1炎性復(fù)合體、NLRP3炎性復(fù)合體、IPAF(或稱NLRC3)炎性復(fù)合體和AIM2炎性復(fù)合體。其中,NLRP3炎性復(fù)合體由于可被多種結(jié)構(gòu)不同的配體激活,進(jìn)而參與到痛風(fēng)、腸炎、糖尿病、阿爾茲海默病、動脈粥樣硬化、感染和腫瘤等多種疾病的發(fā)生過程,故而成為目前關(guān)注最多、研究最為深入的一類炎性復(fù)合體[1]。

    一、NLRP3炎性復(fù)合體的組成和活化

    NLRP3炎性復(fù)合體由3部分構(gòu)成(圖1):(1)NLRP3蛋白:由3個(gè)結(jié)構(gòu)域構(gòu)成:①C端富含亮氨酸的重復(fù)序列(leucine-rich repeats, LRRs),負(fù)責(zé)探測和識別PAMPs/DAMPs;②中央是核酸寡聚化結(jié)構(gòu)域(nucleotide-binding and oligomerization domain, NOD),也稱為NACHT結(jié)構(gòu)域,負(fù)責(zé)參與NLR的寡聚體化和活化;③熱蛋白結(jié)構(gòu)域(pyrin domain,PYD),位于N端,負(fù)責(zé)結(jié)合接頭分子和效應(yīng)蛋白。(2)凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(apoptosis-associated speck-lilke protein containing a caspase recruitment domain, ASC),為接頭蛋白。ASC又分為:①caspase募集結(jié)構(gòu)域(caspase-recruitment domain,CARD),可連接caspase-1前體蛋白;②PYD結(jié)構(gòu)域,以連接NLRP3的同源結(jié)構(gòu)域PYD。(3)caspase-1前體蛋白,為效應(yīng)蛋白。當(dāng)NLRP3識別到PAMPs/DAMPs時(shí),發(fā)生寡聚化,并與ASC結(jié)合,招募caspase-1前體蛋白,形成NLRP3炎性復(fù)合體,進(jìn)而激活caspase-1,caspase-1屬于促炎蛋白酶,活化的caspase-1通過剪切的方式活化白細(xì)胞介素1β前體(pro-interleukin 1β, pro-IL-1β)和白細(xì)胞介素IL-18前體(pro-interleukin 18, pro-IL-18),從而釋放大量成熟的IL-1β和IL-18。近年來的研究表明,caspase-1還可介導(dǎo)細(xì)胞焦亡。細(xì)胞焦亡是一種致炎性的程序性的細(xì)胞死亡,可釋放出大量的炎性物質(zhì),誘發(fā)嚴(yán)重的炎性反應(yīng)[1]。目前研究者認(rèn)為NLRP3炎性復(fù)合體的活化需要兩條信號通路依次激活:(1)啟動步驟:Toll樣受體(Toll-like receptors, TLRs)和其配體相互作用,造成NLRP3 和IL-1β前體被核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)轉(zhuǎn)錄,以完成NLRP3炎性復(fù)合體活化的準(zhǔn)備過程。(2)活化步驟:在持續(xù)的PAMPs或DAMPs刺激下,NLRP3通過NACHT結(jié)構(gòu)域發(fā)生寡聚化,進(jìn)而激活NLRP3炎性復(fù)合體組裝,最終活化效應(yīng)蛋白caspase-1。此外,另一假說認(rèn)為,持續(xù)的鈣離子內(nèi)流可刺激胞內(nèi)鈣離子升高,環(huán)腺甘酸AMP(cyclic AMP,cAMP)降低,介導(dǎo)NLRP3炎性復(fù)合體活化[2]。

    圖1 NLRP3炎性復(fù)合體結(jié)構(gòu)示意圖PAMPs. 病原體相關(guān)分子模式;DAMPs. 損傷相關(guān)分子模式; LRRs. 模式識別受體; NOD.NOD樣受體蛋白 3; PYD. 熱蛋白結(jié)構(gòu)域; CARD.caspase募集結(jié)構(gòu)域

    二、線粒體在NLRP3炎性復(fù)合體活化中的作用

    長期以來,線粒體一直被視為能量工廠,可提供細(xì)胞生命活動所需的能量。研究發(fā)現(xiàn)線粒體還是固有免疫反應(yīng)最基本的信號平臺之一,在NLRP3炎性復(fù)合體的活化過程中發(fā)揮著重要的作用[3](圖1)。

    1.NLRP3炎性復(fù)合體活化時(shí)NLRP3的線粒體定位:靜息狀態(tài)下NLRP3位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜,受到NLRP3炎性復(fù)合體激活劑作用后,NLRP3和其配體ASC聚集到細(xì)胞核周圍,分布于線粒體外膜與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜形成的偶聯(lián)部位。而且已有研究證明,線粒體相關(guān)適配蛋白(mitochondria-associated adaptor protein, MAVS)不僅可介導(dǎo)NLRP3募集到線粒體,而且在NLRP3促進(jìn)IL-1β產(chǎn)生的過程中也發(fā)揮功能,是NLRP3 炎性復(fù)合體發(fā)揮其最佳活性的關(guān)鍵因素[4]。此外,線粒體特有的心磷脂也是NLRP3炎性復(fù)合體活化必須的因子,受到利奈唑胺刺激后,NLRP3直接與心磷脂結(jié)合,而后NLRP3炎性復(fù)合體活化;反之,心磷脂合成受阻則會造成NLRP3炎性復(fù)合體活化受到干擾[5]。

    2.ROS在NLRP3炎性復(fù)合體活化中的作用:機(jī)體受到感染時(shí),天然免疫細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞)就會發(fā)起防御,并產(chǎn)生活性氧(reactive oxygen, ROS),ROS的主要來源是線粒體。損傷的線粒體釋放線粒體DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)和線粒體ROS(mitochondrial ROS,mtROS),這被認(rèn)為是內(nèi)源性損傷信號。在尼日利亞菌素、尿酸和ATP刺激引起mtROS水平升高的細(xì)胞中,mtROS清除劑可明顯減輕NLRP3炎性復(fù)合體的活化。同樣地,在臭氧誘導(dǎo)的小鼠慢性阻塞性肺氣腫模型中,mtROS清除劑也可有效抑制肺組織中NLRP3炎性復(fù)合體的表達(dá),說明mtROS是NLRP3炎性復(fù)合體的上游信號[6]。在尼日利亞菌素感染的細(xì)胞內(nèi),氧化的mtDNA可特異性結(jié)合NLRP3,介導(dǎo)NLRP3炎性復(fù)合體活化,從而導(dǎo)致IL-1β釋放增多[7]。而且, mtROS釋放后,線粒體電子傳遞鏈破壞,進(jìn)一步引起NLRP3炎性復(fù)合體活化[8]。大部分研究支持ROS介導(dǎo)了NLRP3炎性復(fù)合體組裝和活化,其作用機(jī)制有待于進(jìn)一步明確。然而,Bauernfeind等的研究卻表明,ROS僅僅參與了其組件NLRP3的引發(fā)階段,與NLRP3炎性復(fù)合體的活化無關(guān)。此外,以利奈唑胺、流感病毒、腦心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)處理巨噬細(xì)胞,均能激活NLRP3炎性復(fù)合體,且不需要ROS的參與[7]。

    3.鈣信號調(diào)節(jié)NLRP3炎性復(fù)合體的活化:線粒體內(nèi)的鈣離子濃度對于ATP合成、線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔的開放及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣信號的調(diào)節(jié)具有重要影響。線粒體內(nèi)鈣離子水平過高會導(dǎo)致線粒體功能障礙,進(jìn)而促進(jìn)NLRP3炎性復(fù)合體的活化。胞外鈣離子濃度升高可刺激G蛋白偶聯(lián)鈣敏感受體,然后活化NLRP3炎性復(fù)合體和caspase-1。六型分泌系統(tǒng)(T6SS)的效應(yīng)分子EvpP能夠通過降低細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平,抑制MAPK-JNK通路進(jìn)而抑制NLRP3炎性復(fù)合體的激活[9]。線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔持續(xù)開放是線粒體損傷的另一特征。有研究者提出持續(xù)的鈣離子內(nèi)流和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的貯存鈣釋放,可刺激線粒體鈣離子負(fù)荷增多和線粒體穩(wěn)態(tài)破壞,引起mtROS水平升高和線粒體通透性增加。這種模型也被用來解釋鈣離子信號在NLRP3炎性復(fù)合體活化中的作用[10]。

    4.線粒體分裂蛋白和融合蛋白調(diào)節(jié)NLRP3炎性小體活化:正常情況下,哺乳動物的線粒體通過不斷地分裂、融合維持其形態(tài)結(jié)構(gòu)完整,保障正常功能。線粒體動員相關(guān)蛋白1(dynamin-related protein 1,DRP1)和線粒體分裂蛋白1(mitochondrial fission protein 1,Fisl)通過相互作用來促進(jìn)線粒體的分裂。線粒體融合蛋白1(Mitofusin 1,Mfn1)和線粒體融合蛋白2(Mitofusin 2,Mfn2)是線粒體外膜相關(guān)蛋白,是線粒體融合的關(guān)鍵蛋白。在DRP1基因敲除小鼠的巨噬細(xì)胞,線粒體異常分裂導(dǎo)致NLRP3依賴的caspase-1激活和IL-1β分泌增加。其機(jī)制可能是增強(qiáng)細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信號,介導(dǎo)NLRP3分布于線粒體,從而促進(jìn)NLRP3炎性子體的組裝[11]。

    水皰性口腔炎病毒引起絲氨酸-蘇氨酸激酶RIP1和RIP3激活時(shí),RIP1和RIP3可刺激DRP1,引起線粒體異常分裂,造成胞質(zhì)內(nèi)ROS水平升高,導(dǎo)致NLRP3炎性復(fù)合體活化[12]??屏_索酸可通過促使內(nèi)皮細(xì)胞DRP1 Ser637位點(diǎn)發(fā)生磷酸化,阻止氧化應(yīng)激造成的線粒體分裂,進(jìn)而阻斷NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2, NOX2)信號,抑制NLRP3炎性復(fù)合體的活化[13]。在RNA病毒感染的細(xì)胞中,Mfn2可以和NLRP3 相互作用,誘導(dǎo)NLRP3炎性復(fù)合體活化。更直接的證據(jù)顯示,以流感病毒或EMCV處理Mfn2基因敲除的細(xì)胞后,細(xì)胞中caspase-1以及IL-1β表達(dá)水平顯著降低[14]。以上表明, DRP1功能穩(wěn)定可維持線粒體分裂正常,抑制NLRP3炎性復(fù)合體的活化;而Mfn2則可促進(jìn)NLRP3炎性復(fù)合體的活化,導(dǎo)致炎性反應(yīng)。

    5.線粒體自噬抑制NLRP3炎性復(fù)合體的活化:細(xì)胞自噬是細(xì)胞通過溶酶體降解變性的蛋白質(zhì)和功能失調(diào)的細(xì)胞器的過程,在細(xì)胞保持動態(tài)平衡過程中起關(guān)鍵作用。目前,將通過細(xì)胞自噬降解線粒體的途徑稱為線粒體自噬,主要是指在ROS增多、營養(yǎng)缺乏和細(xì)胞衰老等刺激下,線粒體發(fā)生去極化損傷,損傷的線粒體被特異性包裹入自噬體,并與溶酶體融合,從而降解損傷的線粒體。線粒體自噬可防止NLRP3炎性復(fù)合體過度活化造成的炎性反應(yīng)。在沒有炎性復(fù)合體激活物的情況下,1-磷脂酰肌醇3-激酶(1-phosphoinosmde-3-kinase/protein kinase B/the mammalian target of rapamycin,PI3K)抑制劑6-氨基-3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA)能夠抑制自噬,并引起mtROS增加,造成NLRP3依賴的IL-1β分泌的增多[15]。在結(jié)核桿菌感染的細(xì)胞中,3-MA同樣可以可抑制自噬體形成,從而促進(jìn)IL-1β分泌。與此一致,自噬蛋白微管相關(guān)蛋白1輕鏈-3(autophagy protein microtubule-associated protein 1 light chain-3,LC3)基因敲除小鼠骨髓來源的巨噬細(xì)胞中,線粒體損傷增加以及mtROS水平升高,caspase-1活性增強(qiáng)。這一現(xiàn)象也出現(xiàn)在膜突蛋白樣Bcl-2作用蛋白1(moesin-like BCL2-interacting protein,Beclin1)基因敲除的小鼠。而且,自噬相關(guān)基因16L1(autophagy gene 16L1,Atg16L1)敲除后,小鼠NLRP3炎性復(fù)合體活化增多,對葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的結(jié)腸炎更為敏感[15]。此外,sestrin(SESN2)是一種應(yīng)激誘導(dǎo)蛋白,可通過誘導(dǎo)自噬清除損傷的線粒體,進(jìn)而抑制NLRP3炎性復(fù)合體的活化[16]。作為炎癥的主要激活因子,NF-κB也能夠促進(jìn)自噬受體蛋白p62/SQSTM1積累,介導(dǎo)線粒體自噬,促進(jìn)線粒體清除,抑制NLRP3炎性復(fù)合體活化[17]。這些研究表明線粒體自噬可以抑制NLRP3炎性復(fù)合體的活化。

    6.其他:腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1(adenine nucleotide translocator 1,ANT1)是線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運(yùn)的中心分子。在NLRP3炎性復(fù)合體刺激物的作用下,Src同源-2結(jié)構(gòu)域蛋白酪氨酸磷酸酶(Src homology 2 domain-containing protein tyrosine phosphatase 2, SHP2)轉(zhuǎn)位到線粒體,與ANT1結(jié)合并使得ANT1去磷酸化。這一機(jī)制能夠阻止線粒體膜電位的降低,并抑制mtDNA和mtROS的釋放,因此可以阻止NLRP3炎性復(fù)合體的過度活化[18]。雙磷脂酰甘油是線粒體內(nèi)膜上的一種特異性磷脂,在線粒體功能發(fā)生障礙時(shí),雙磷脂酰甘油可作為一種PAMP被NLRP3識別,進(jìn)而激活NLRP3炎性復(fù)合體。而且,通過siRNA抑制雙磷脂酰甘油合酶后,caspase-1的激活受到明顯抑制,這表明雙磷脂酰甘油可促進(jìn)NLRP3炎性復(fù)合體活化,但具體機(jī)制尚未完全闡明[7]。

    三、中藥活性成分的干預(yù)作用

    圖2 線粒體調(diào)控NLRP3炎性復(fù)合體活化示意圖MAVs. 線粒體相關(guān)適配蛋白;Drp1. 線粒體動員相關(guān)蛋白1; Mfn2. 線粒體融合蛋白2;ANT1. 腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1;mtDNA. 線粒體DNA;mtROS.線粒體ROS;pro-IL-1β.白細(xì)胞介素1β前體;pro-IL-18.白細(xì)胞介素IL-18前體;IL-1β. 白細(xì)胞介素1β; IL-18. 白細(xì)胞介素IL-18

    許多中藥活性成分能夠通過調(diào)節(jié)線粒體功能抑制多種細(xì)胞模型中NLRP3炎性復(fù)合體的活化。這些中藥活性成分能夠抑制ROS過度產(chǎn)生,減輕線粒體損傷,激活自噬,進(jìn)而抑制NLRP3炎性復(fù)合體,減少IL-1β和caspase-1的釋放,減輕病理?xiàng)l件下的炎性反應(yīng),發(fā)揮對細(xì)胞的保護(hù)作用[17-33]。目前的研究大多限于對藥效的評價(jià),而對具體的調(diào)控機(jī)制研究不夠深入。能夠通過線粒體調(diào)控NLRP3炎性復(fù)合體的活化的中藥活性成分詳見表1,其中以黃酮類最多。黃酮類化合物具有良好的抗氧化活性,這可能是其發(fā)揮作用的基礎(chǔ)之一。從這些成分所屬的中藥分析,清熱藥最多,其次是補(bǔ)虛藥?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,清熱藥具有抗感染、抗炎和影響機(jī)體免疫功能的作用,補(bǔ)虛藥也具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、增強(qiáng)內(nèi)分泌功能和抗衰老等活性作用。這兩類藥可能存在更多抑制NLRP3炎性復(fù)合體活化的成分,值得深入挖掘。

    四、展 望

    作為天然免疫的重要成員之一,NLRP3炎性復(fù)合體活化對于保護(hù)細(xì)胞免受病原體損傷十分重要,但其過度活化可能會引發(fā)炎性反應(yīng),造成組織損傷和器官衰竭。通過影響NLRP3及其配體的線粒體定位,以及線粒體自噬、分裂和融合及通透性等多個(gè)環(huán)節(jié),線粒體在NLRP3炎性復(fù)合體的組裝和活化中發(fā)揮關(guān)鍵作用。在不同的病理?xiàng)l件及活化刺激條件下,線粒體對NLRP3炎性復(fù)合體活化的調(diào)節(jié)作用也有差異。線粒體損傷并釋放損傷信號以及線粒體調(diào)節(jié)自身穩(wěn)態(tài)的過程,貫穿于線粒體對NLRP3炎性復(fù)合體的調(diào)控之中。線粒體的膜蛋白能夠與NLRP3結(jié)合,在NLRP3炎性復(fù)合體組裝階段起重要作用;同時(shí)這些蛋白也可以影響線粒體分裂和融合,從而調(diào)節(jié)NLRP3炎性復(fù)合體的活化。線粒體自噬可抑制NLRP3過度活化造成的損傷,對機(jī)體起到保護(hù)作用。

    表1 能夠通過調(diào)節(jié)線粒體功能抑制NLRP3炎性復(fù)合體活化的中藥活性成分及作用機(jī)制

    綜上所述,線粒體結(jié)構(gòu)及功能的正常對于抑制NLRP3炎性復(fù)合體過度活化十分關(guān)鍵,維持線粒體穩(wěn)態(tài)可能是調(diào)節(jié)NLRP3炎性復(fù)合體上游信號的重要策略。深入研究NLRP3炎性復(fù)合體的線粒體調(diào)控機(jī)制,有助于更好地認(rèn)識天然免疫和炎性疾病的生理病理過程,能夠?yàn)榕R床治療提供新靶點(diǎn)。中藥有效成分在抑制NLRP3炎性復(fù)合體活化方面的研究取得了一定進(jìn)展,今后尋找更多能調(diào)節(jié)NLRP3炎性復(fù)合體的中藥有效成分并進(jìn)一步研究其作用機(jī)制,有望發(fā)現(xiàn)理想的NLRP3炎性復(fù)合體抑制劑。

    猜你喜歡
    復(fù)合體前體磷脂
    N-末端腦鈉肽前體與糖尿病及糖尿病相關(guān)并發(fā)癥呈負(fù)相關(guān)
    大黃酸磷脂復(fù)合物及其固體分散體的制備和體內(nèi)藥動學(xué)研究
    中成藥(2019年12期)2020-01-04 02:02:24
    柚皮素磷脂復(fù)合物的制備和表征
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:18
    辣椒堿磷脂復(fù)合凝膠的制備及其藥動學(xué)行為
    中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:31
    白楊素磷脂復(fù)合物的制備及其藥動學(xué)行為
    中成藥(2017年5期)2017-06-13 13:01:12
    N-端腦鈉肽前體測定在高血壓疾病中的應(yīng)用研究
    CoFe2O4/空心微球復(fù)合體的制備與吸波性能
    茶葉香氣前體物研究進(jìn)展
    茶葉通訊(2014年2期)2014-02-27 07:55:40
    3種多糖復(fù)合體外抗腫瘤協(xié)同增效作用
    日本西南部四國增生復(fù)合體中的錳礦分布
    熟妇人妻久久中文字幕3abv| tocl精华| 51午夜福利影视在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 老汉色∧v一级毛片| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 免费看日本二区| 可以在线观看的亚洲视频| 久久九九热精品免费| 制服丝袜大香蕉在线| 黄色视频不卡| 免费av毛片视频| 美女免费视频网站| 男女午夜视频在线观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 中文亚洲av片在线观看爽| www日本在线高清视频| 国产熟女xx| 精品高清国产在线一区| 精品一区二区三区av网在线观看| 伦理电影免费视频| 国产片内射在线| 成人三级做爰电影| 在线av久久热| 国产视频内射| bbb黄色大片| 高清毛片免费观看视频网站| 一级片免费观看大全| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧美午夜高清在线| 黄色女人牲交| 国产在线观看jvid| 人人妻人人澡欧美一区二区| 午夜福利在线在线| 老司机靠b影院| 国产成人欧美| 妹子高潮喷水视频| 国产视频一区二区在线看| av免费在线观看网站| 欧美性长视频在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 亚洲熟女毛片儿| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 不卡一级毛片| 午夜两性在线视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 婷婷精品国产亚洲av| 国语自产精品视频在线第100页| 国产免费男女视频| 成人永久免费在线观看视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 欧美日本视频| 欧美日本视频| 搡老熟女国产l中国老女人| 热re99久久国产66热| 国产1区2区3区精品| 久久热在线av| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲精品国产一区二区精华液| 久久久久国产一级毛片高清牌| 成年女人毛片免费观看观看9| 十分钟在线观看高清视频www| 十分钟在线观看高清视频www| 成年女人毛片免费观看观看9| 狂野欧美激情性xxxx| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| aaaaa片日本免费| 精品一区二区三区四区五区乱码| 日韩有码中文字幕| 人人妻人人澡人人看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 女警被强在线播放| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 欧美激情高清一区二区三区| 叶爱在线成人免费视频播放| 黑丝袜美女国产一区| 91成年电影在线观看| 香蕉丝袜av| 精品免费久久久久久久清纯| 国产成人精品无人区| 久久久久久久精品吃奶| 69av精品久久久久久| 国产精品 国内视频| av超薄肉色丝袜交足视频| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 女性被躁到高潮视频| 精品福利观看| 91成年电影在线观看| 两个人视频免费观看高清| 人成视频在线观看免费观看| 国产精品 国内视频| 日韩大码丰满熟妇| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 麻豆成人午夜福利视频| 久9热在线精品视频| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 一进一出抽搐动态| 欧美黄色淫秽网站| 人妻久久中文字幕网| 日本在线视频免费播放| 男女那种视频在线观看| 国产激情欧美一区二区| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 啦啦啦观看免费观看视频高清| 黄色毛片三级朝国网站| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 国产av在哪里看| www日本黄色视频网| 黄色女人牲交| АⅤ资源中文在线天堂| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲七黄色美女视频| 视频在线观看一区二区三区| 国产精华一区二区三区| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲成国产人片在线观看| svipshipincom国产片| 亚洲在线自拍视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| av电影中文网址| 老司机在亚洲福利影院| 一边摸一边做爽爽视频免费| 不卡一级毛片| 久久精品人妻少妇| 午夜影院日韩av| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品,欧美在线| 一二三四社区在线视频社区8| 国产亚洲欧美在线一区二区| 99国产综合亚洲精品| 日日干狠狠操夜夜爽| a级毛片在线看网站| 大香蕉久久成人网| 一进一出抽搐动态| 狂野欧美激情性xxxx| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 91老司机精品| 波多野结衣巨乳人妻| 一本大道久久a久久精品| 亚洲色图av天堂| 女同久久另类99精品国产91| 动漫黄色视频在线观看| 日本免费一区二区三区高清不卡| 午夜影院日韩av| 婷婷六月久久综合丁香| 深夜精品福利| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产成人精品无人区| 91国产中文字幕| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 婷婷丁香在线五月| 我的亚洲天堂| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国语自产精品视频在线第100页| 不卡一级毛片| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| www.999成人在线观看| 亚洲九九香蕉| 两性夫妻黄色片| 欧美丝袜亚洲另类 | 亚洲第一电影网av| 国产激情欧美一区二区| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 少妇粗大呻吟视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 岛国视频午夜一区免费看| 精品久久久久久久毛片微露脸| 1024视频免费在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 久久草成人影院| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲一区中文字幕在线| 亚洲一区二区三区色噜噜| 欧美在线黄色| 深夜精品福利| 久久精品国产亚洲av高清一级| 1024手机看黄色片| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 日韩欧美国产在线观看| 精品国产国语对白av| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲真实伦在线观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 一级片免费观看大全| bbb黄色大片| 制服人妻中文乱码| 99精品在免费线老司机午夜| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品久久久av美女十八| 十八禁网站免费在线| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产精品久久久久久人妻精品电影| 欧美色视频一区免费| 色av中文字幕| 成人精品一区二区免费| 国产视频一区二区在线看| 91成人精品电影| 日韩欧美三级三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久99久视频精品免费| 国产激情久久老熟女| 亚洲中文日韩欧美视频| 少妇 在线观看| 波多野结衣高清无吗| 久久中文看片网| а√天堂www在线а√下载| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 成人国语在线视频| 一级毛片精品| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产男靠女视频免费网站| 丰满的人妻完整版| 听说在线观看完整版免费高清| 国产成人影院久久av| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲男人天堂网一区| 国产成人精品久久二区二区91| 黄色片一级片一级黄色片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 中文字幕精品免费在线观看视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 日本 av在线| 欧美激情高清一区二区三区| 国产真实乱freesex| 黑人欧美特级aaaaaa片| 日本熟妇午夜| 亚洲精品在线观看二区| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国产欧美日韩一区二区精品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲午夜理论影院| 亚洲精品国产区一区二| 黄色女人牲交| 搡老妇女老女人老熟妇| 99热6这里只有精品| 久久人妻av系列| 精品福利观看| 丁香欧美五月| 久久久久久大精品| 欧美成狂野欧美在线观看| 91麻豆av在线| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 男人舔女人的私密视频| 亚洲男人天堂网一区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产亚洲欧美98| 日日夜夜操网爽| 黑人操中国人逼视频| 亚洲一区中文字幕在线| 午夜福利在线在线| 亚洲熟妇熟女久久| 极品教师在线免费播放| 国产高清有码在线观看视频 | 波多野结衣高清无吗| 亚洲精品美女久久av网站| av超薄肉色丝袜交足视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 香蕉久久夜色| 自线自在国产av| 久久香蕉国产精品| 亚洲精品久久国产高清桃花| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 99国产精品一区二区三区| av天堂在线播放| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 中亚洲国语对白在线视频| 婷婷丁香在线五月| 超碰成人久久| 在线视频色国产色| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲欧美激情综合另类| 国产精品野战在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产精品久久久人人做人人爽| 99久久无色码亚洲精品果冻| 特大巨黑吊av在线直播 | 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 又大又爽又粗| 亚洲男人的天堂狠狠| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 无遮挡黄片免费观看| av有码第一页| bbb黄色大片| 波多野结衣巨乳人妻| 嫩草影视91久久| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲五月色婷婷综合| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 免费搜索国产男女视频| 99久久综合精品五月天人人| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产在线观看jvid| 51午夜福利影视在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 极品教师在线免费播放| 亚洲人成伊人成综合网2020| 男男h啪啪无遮挡| 日韩精品青青久久久久久| videosex国产| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲国产欧美网| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产一区二区在线av高清观看| 国产av又大| 高潮久久久久久久久久久不卡| 日本黄色视频三级网站网址| 深夜精品福利| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 日日爽夜夜爽网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 淫秽高清视频在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲中文日韩欧美视频| 日韩免费av在线播放| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美日韩福利视频一区二区| 99国产精品99久久久久| 亚洲精品在线观看二区| 香蕉丝袜av| 精品午夜福利视频在线观看一区| 美女国产高潮福利片在线看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 女警被强在线播放| 亚洲中文日韩欧美视频| 日韩精品青青久久久久久| 免费高清在线观看日韩| 夜夜夜夜夜久久久久| 99国产精品一区二区三区| 一a级毛片在线观看| 亚洲黑人精品在线| 亚洲男人的天堂狠狠| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 精品乱码久久久久久99久播| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产成人av激情在线播放| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产成人欧美在线观看| 亚洲色图av天堂| 久久精品国产清高在天天线| 精品欧美国产一区二区三| 久久国产亚洲av麻豆专区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 日本a在线网址| 国产精品永久免费网站| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲男人天堂网一区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 看片在线看免费视频| 亚洲精品一区av在线观看| 久久中文字幕一级| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 在线免费观看的www视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲av片天天在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 两人在一起打扑克的视频| av电影中文网址| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产精华一区二区三区| 人人妻人人看人人澡| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲国产欧美一区二区综合| 日本一本二区三区精品| 大型黄色视频在线免费观看| 99国产综合亚洲精品| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 一级a爱视频在线免费观看| 久久精品国产清高在天天线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 波多野结衣巨乳人妻| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 成年女人毛片免费观看观看9| 国产精品一区二区精品视频观看| 精品乱码久久久久久99久播| av福利片在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 制服诱惑二区| 99久久99久久久精品蜜桃| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 精品一区二区三区四区五区乱码| 天天一区二区日本电影三级| 久久久久久久久久黄片| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品免费视频内射| 长腿黑丝高跟| 性欧美人与动物交配| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 欧美激情 高清一区二区三区| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国内精品久久久久久久电影| 手机成人av网站| 天堂√8在线中文| 久久草成人影院| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 一级a爱片免费观看的视频| 久久久久国内视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 一区福利在线观看| 欧美色视频一区免费| 欧美性长视频在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲av五月六月丁香网| 老汉色av国产亚洲站长工具| 老司机午夜福利在线观看视频| 动漫黄色视频在线观看| or卡值多少钱| 国产高清videossex| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产精品久久久久久人妻精品电影| www国产在线视频色| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 免费av毛片视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 99精品欧美一区二区三区四区| 在线av久久热| 欧美三级亚洲精品| 51午夜福利影视在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 神马国产精品三级电影在线观看 | 欧美日韩乱码在线| 精品第一国产精品| 久久国产乱子伦精品免费另类| 在线观看免费日韩欧美大片| 在线观看舔阴道视频| 国产91精品成人一区二区三区| 精品一区二区三区四区五区乱码| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 久久伊人香网站| 神马国产精品三级电影在线观看 | 日本a在线网址| 99精品在免费线老司机午夜| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产真实乱freesex| 免费无遮挡裸体视频| a级毛片a级免费在线| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| 91国产中文字幕| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲精品粉嫩美女一区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 神马国产精品三级电影在线观看 | 99国产精品一区二区蜜桃av| 成人一区二区视频在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 三级毛片av免费| 成人特级黄色片久久久久久久| 日韩欧美免费精品| 看片在线看免费视频| 国产精品久久久久久精品电影 | 12—13女人毛片做爰片一| 久久亚洲真实| 韩国av一区二区三区四区| 88av欧美| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 日韩精品青青久久久久久| 一本久久中文字幕| 欧美精品啪啪一区二区三区| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 天堂影院成人在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 中文字幕人妻熟女乱码| 日本成人三级电影网站| 国产伦人伦偷精品视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲av电影不卡..在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精华一区二区三区| 欧美不卡视频在线免费观看 | 在线天堂中文资源库| 亚洲国产精品久久男人天堂| 一级a爱片免费观看的视频| 无人区码免费观看不卡| 熟女电影av网| 夜夜爽天天搞| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产一区二区激情短视频| 精品久久久久久久久久免费视频| 美女午夜性视频免费| 夜夜夜夜夜久久久久| 老司机靠b影院| a在线观看视频网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 黄色视频,在线免费观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 午夜福利一区二区在线看| 成年女人毛片免费观看观看9| 大型黄色视频在线免费观看| 黄片大片在线免费观看| 欧美精品亚洲一区二区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 一级毛片高清免费大全| 亚洲国产欧洲综合997久久, | 亚洲欧美日韩无卡精品| 99久久国产精品久久久| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 老鸭窝网址在线观看| netflix在线观看网站| 国产一区二区在线av高清观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产高清激情床上av| 成人国语在线视频| 男女午夜视频在线观看| 国产成人av教育| 午夜两性在线视频| 在线观看午夜福利视频| 欧美日韩精品网址| 一夜夜www| 9191精品国产免费久久| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久人妻av系列| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| bbb黄色大片| 午夜视频精品福利| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲电影在线观看av| 99riav亚洲国产免费| 少妇 在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 不卡av一区二区三区| 制服丝袜大香蕉在线| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲人成77777在线视频| 午夜日韩欧美国产| 国产一卡二卡三卡精品| 欧美国产日韩亚洲一区| 久热这里只有精品99| 亚洲国产中文字幕在线视频| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美色欧美亚洲另类二区| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产国语露脸激情在线看| 国产精品综合久久久久久久免费| 大香蕉久久成人网| 精品国产亚洲在线| 国产精华一区二区三区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲电影在线观看av| 给我免费播放毛片高清在线观看| 动漫黄色视频在线观看| 香蕉国产在线看| 国产成人欧美| 久99久视频精品免费| 自线自在国产av| 99热6这里只有精品| 国产av在哪里看| 国产亚洲欧美98| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产97色在线日韩免费| 国产野战对白在线观看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 韩国精品一区二区三区| 国内精品久久久久久久电影| 国产男靠女视频免费网站| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲自拍偷在线| 特大巨黑吊av在线直播 | e午夜精品久久久久久久| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲免费av在线视频| 亚洲自拍偷在线| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久久国产成人精品二区| 美女大奶头视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 啦啦啦免费观看视频1| 亚洲男人的天堂狠狠| 他把我摸到了高潮在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 国产黄色小视频在线观看| 免费av毛片视频| 欧美久久黑人一区二区| 变态另类丝袜制服| 久久久久久久久中文| 日韩欧美免费精品| 久久久久国产精品人妻aⅴ院|