韓寶力
摘要:羊魏氏梭菌病是由于感染魏氏梭菌而發(fā)生的一種急性傳染病,病羊主要是發(fā)生毒血癥,如羊腸毒血癥、羊猝疽、羔羊痢疾等。通常在氣候寒冷的秋冬和初春時(shí)節(jié)發(fā)生,呈現(xiàn)明顯的季節(jié)性。該病主要通過消化道感染,當(dāng)羊感到寒冷、過于饑餓或者采食腐敗的飼草而導(dǎo)致抵抗力降低時(shí),則容易出現(xiàn)發(fā)病。病菌分泌的毒素會(huì)導(dǎo)致羊的消化道黏膜發(fā)炎、壞死,并造成中毒性休克,死亡率較高?,F(xiàn)概述羊魏氏梭菌病的臨床癥狀、剖檢變化、實(shí)驗(yàn)室診斷及防控。
關(guān)鍵詞:羊;魏氏梭菌病;臨床癥狀;剖檢變化;實(shí)驗(yàn)室診斷;疫情處理;藥物治療;免疫預(yù)防
中圖分類號(hào): S858.26 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):2095-9737(2020)03-0106-02
1 臨床癥狀
該病的特點(diǎn)是突然發(fā)生,病程持續(xù)時(shí)間短,病羊通常沒有表現(xiàn)出明顯的癥狀就突然死于牧場(chǎng)或者圈舍內(nèi)。病程持續(xù)略長(zhǎng)的病羊,可見軀體痙攣,肌肉顫抖,臥地抽搐,四肢不斷劃動(dòng),眼球轉(zhuǎn)動(dòng),口吐白沫,有混雜血液的泡沫流出,流涎、磨牙,體溫變化存在差異,往往經(jīng)過2~4 h后極度衰竭而死,死亡后腐敗較快。
2 剖檢變化
剖檢病死羊,主要是腸道發(fā)生典型病變,其中最明顯的是小腸發(fā)炎,腸道內(nèi)嚴(yán)重充血,內(nèi)部黏膜發(fā)生脫落,且實(shí)質(zhì)性臟器都發(fā)生嚴(yán)重的出血性炎癥。肝臟,呈鈍圓形,邊緣泛黃,存在出血點(diǎn);心臟,心內(nèi)外膜存在出血性斑點(diǎn),心包腫大,含有大量積液;肺臟伴有嚴(yán)重的出血癥狀,同時(shí)發(fā)生明顯水腫;脾臟散布有出血點(diǎn);腎臟被膜下存在明顯的出血點(diǎn);氣管、支氣管發(fā)生壞死性充血,里面存在紅色泡沫;胃部黏膜發(fā)生壞死并脫落,其中病變最嚴(yán)重的是瘤胃。
3 實(shí)驗(yàn)室診斷
3.1 涂片鏡檢
無(wú)菌條件下,取病死羊的腸管以及臟器等病料進(jìn)行涂片,經(jīng)過革蘭氏染色、顯微鏡觀察,能夠看到革蘭氏陽(yáng)性大桿菌,菌體兩端鈍圓。
3.2 培養(yǎng)特性
3.2.1 需氧培養(yǎng)
無(wú)菌條件下,取病死羊的心血、肝臟、肺臟、脾臟等病料組織分別以劃線方式在普通平板、血平板培養(yǎng)基上接種,置于37℃下培養(yǎng),經(jīng)過20 h沒有長(zhǎng)出菌落。
3.2.2 厭氧培養(yǎng)
將以上接種病料的培養(yǎng)基置于厭氧條件下培養(yǎng),可見普通培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落。在血平板培養(yǎng)基上生長(zhǎng)淡黃色的圓形菌落,直徑為2~4 mm,表面光滑,中央隆起,且周圍有溶血環(huán),個(gè)別菌落呈圓盤形,但邊緣呈鋸齒狀。
挑取單個(gè)菌落在牛乳培養(yǎng)基中接種,經(jīng)過8~10 h培養(yǎng),可見牛乳發(fā)生凝集,并產(chǎn)生氣體,出現(xiàn)劇烈發(fā)酵。
3.3 生化反應(yīng)
該菌可使葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、果糖、淀粉、棉籽糖分解,并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,無(wú)法使衛(wèi)矛醇、甘露醇、楊苷、枸椽酸鹽發(fā)酵。
3.4 尿中葡萄糖檢測(cè)
取膀胱內(nèi)尿液加熱至沸騰,接著進(jìn)行過濾,先在試管中加入5 mL本尼迪克氏試劑,再加入0.5 mL處理后的尿液,混合均勻后繼續(xù)加熱煮沸2 min,室溫靜置5 min,發(fā)現(xiàn)管底出現(xiàn)大量黃色沉淀,表明尿液中存在較多的葡萄糖。
3.5 腸毒素檢查
取一段病死羊腸內(nèi)容物放在1個(gè)干凈的三角瓶中,添加20 mL生理鹽水進(jìn)行稀釋,混合均勻后以3500 r/ min的速度進(jìn)行15 min離心沉淀,用微孔濾器對(duì)上清液過濾,分成3份做3組實(shí)驗(yàn)。
第一組為濾液直接注射組,即取病料濾液給2只健康小白直接注射,每只接種劑量為0.2 mL。
第二組為加熱處理組,即取病料濾液加熱至60℃,經(jīng)過30 min處理后給2只健康小白鼠注射,每只接種劑量為0.2 mL。
第三組為空白對(duì)照組,即取生理鹽水給2只健康小白鼠直接注射,每只接種劑量為0.2 mL,用于空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
試驗(yàn)結(jié)果表明:第一組小白鼠最終發(fā)生死亡;第二組小白鼠在大約0.5 h后表現(xiàn)出精神不振,呼吸加速,經(jīng)過4~5 h后恢復(fù);第三組小白鼠一切正常。說(shuō)明腸內(nèi)容物中含有足夠的毒素致死,而經(jīng)過加熱處理的癥狀輕微,可能是由于毒素在加熱時(shí)被破壞。
3.6 毒素定型試驗(yàn)
取腸內(nèi)容物上清液在健康小白鼠尾靜脈注射,設(shè)置4組,每組各3只,注射劑量分別為0.3 mL、0.2 mL、0.1 mL、0.05 mL,對(duì)于小白鼠在5 min內(nèi)都發(fā)生死亡的最小劑量作為該樣品的LD50。結(jié)果腸毒素的LD50為0.1 mL。
先取魏氏梭菌A、B、C、D 4種定型血清同腸毒素進(jìn)行中和試驗(yàn),然后再進(jìn)行動(dòng)物保護(hù)試驗(yàn)。要求取各型血清0.1 mL分別與2個(gè)最小致死量的腸毒素混合,這是給1只小鼠注射的用量;同時(shí),設(shè)置對(duì)照組,按0.1 mL生理鹽水與2個(gè)最小致死量腸毒素混合,均放在溫箱內(nèi)進(jìn)行40~60 min的中和,然后取出按組尾靜脈注射小鼠,對(duì)各組小鼠進(jìn)行觀察記錄,根據(jù)最終存活的小鼠即可判定菌型。
4 防控措施
4.1 疫情處理
只要發(fā)現(xiàn)病羊,要立即轉(zhuǎn)移至地勢(shì)高、干燥的草地進(jìn)行放牧,如果條件允許可采取轉(zhuǎn)場(chǎng)。同時(shí),用強(qiáng)力消毒靈對(duì)羊舍建筑物、場(chǎng)地、用具等進(jìn)行嚴(yán)格消毒。對(duì)于病死羊尸體,未經(jīng)獸醫(yī)技術(shù)人員允許禁止隨便剝皮,尸體要求采取焚燒或者深埋處理,避免疫情蔓延。
4.2 藥物治療
對(duì)于病程持續(xù)較長(zhǎng)的病羊,可口服100 mL 2%硫酸銅溶液,并配合使用鎮(zhèn)靜劑、強(qiáng)心劑以及大量的抗生素、磺胺類藥物,治療效果較好。
另外,病羊可服用呋喃唑酮,羔羊每次用量為0.05~0.1 g,成年羊用量適當(dāng)增加,每天2次,連續(xù)使用3~5天。
4.3 免疫預(yù)防
羊群可定期免疫接種魏氏梭菌鋁膠滅活苗免,使機(jī)體形成特異性免疫。常用疫苗為羊快疫、腸毒血癥、猝疽(羔羊痢疾)三聯(lián)四防滅活干粉疫苗和羊梭菌病四防滅活疫苗。
由于新生羔羊很快就可發(fā)病,即使剛出生就接種疫苗,但由于疫苗需要較長(zhǎng)的時(shí)間(7~15天)才可建立堅(jiān)強(qiáng)的免疫力,部分羔羊還未等疫苗發(fā)揮作用就已經(jīng)死亡。因此,要求母羊在配種前1~2個(gè)月或者配種后1個(gè)月接種疫苗,這樣可提高母乳的抗體滴度,提高后代羔羊抵抗該病的能力,在一定程度上預(yù)防發(fā)病,減少死亡。