超高效液相色譜柱后衍生裝置測(cè)定飲用水中的草甘膦

陳 穎 王珍妮 宋 月 白 欣

（大連市疾病預(yù)防控制中心理化技術(shù)檢驗(yàn)所，遼寧 大連 116021）

草甘膦（glyphosate）是一種非選擇性、無(wú)殘留滅生性除草劑[1]，對(duì)多年生根雜草非常有效[2]，廣泛用于橡膠、桑、茶、果園及甘蔗地。目前對(duì)草甘膦檢測(cè)多采用液相色譜－質(zhì)譜法（HPLC-MS）[3-4]和高效液相色譜柱后衍生法[5-6]。本次研究選用超高效液相色譜柱后衍生裝置，以生活飲用水中殘留的草甘膦為研究對(duì)象，建立分析的方法，并得到了滿意的結(jié)果，可以滿足對(duì)生活飲用水中殘留草甘膦測(cè)定的要求。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品：生活飲用水源水、二次加壓水。

1.1.2 儀器與試劑：Waters超高效液相色譜柱后衍生裝置（H-class型）；超高速低溫離心機(jī)（HITACHI cf16RXⅡ，10000r/min）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（國(guó)產(chǎn)）；氮吹儀（國(guó)產(chǎn)）；多功能濾膜（孔徑0.22μm，Waters）。草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品（純度均≥98.0%，Dr.公司）；甲醇（德國(guó)Merck，均為色譜純）；鄰苯二醛（阿拉?。沪?巰基乙醇（天津福晨化學(xué)品廠）；磷酸、磷酸二氫鉀、EDTA、氯化鈉、氫氧化鈉、硼酸、氫氧化鉀（均為國(guó)藥集團(tuán)，分析純）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱取草甘膦固體標(biāo)準(zhǔn)品0.01000 g溶于水并定容至10 mL，可得1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，存放于-20 ℃的聚丙烯管中。

1.2.2 樣品前處理

1.2.2.1 樣品濃度≥100 μg/L時(shí)，不需要濃縮，取9.9 mL樣品和0.1 mL 0.1 mol/L的EDTA，經(jīng)0.22 μm濾膜后，取50 μL進(jìn)樣測(cè)定。

1.2.2.2 樣品低于檢出限時(shí)需要對(duì)水樣進(jìn)行濃縮，取700 mL水樣，分三次（250、250、200 mL）加入500 mL圓底燒瓶進(jìn)行旋蒸，并每次加入適量鹽酸（5、5、4 mL），待蒸干后，用1 mL流動(dòng)相進(jìn)行溶解并過0.22 μm濾膜，取50 μL進(jìn)樣測(cè)定。

1.2.3 添加回收實(shí)驗(yàn)：取直接測(cè)定濃度≤100 μg/L的水樣700 mL，加入2 μg/mL的草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL，依據(jù)1.2.2.2進(jìn)行前處理并測(cè)定。

1.2.4 實(shí)驗(yàn)條件。色譜條件：色譜柱：Waters IC-PakTM Ion Exclusion（7.8 mm×150 mm）；進(jìn)樣量：50 μL；流動(dòng)相：陽(yáng)離子交換流動(dòng)相。

2 結(jié)果

2.1 檢出限：進(jìn)樣量為5ng絕對(duì)量的譜圖S/N＞3，本方法的檢出限為0.1 μg/mL。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線：標(biāo)準(zhǔn)系列見表1、圖1、圖2。

表1 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)系列

圖1 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)系列的譜圖

2.3 儀器精密度：見表2、圖3。

2.4 添加回收實(shí)驗(yàn)：見表3。

3 討 論

3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液保存與儲(chǔ)存：準(zhǔn)確稱取草甘膦標(biāo)準(zhǔn)樣品0.01000 g 4份，分別溶于水并定容至100 mL，1號(hào)于玻璃標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶中4 ℃保存，2號(hào)于聚丙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶中4 ℃保存，3號(hào)于玻璃標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶中-20 ℃保存，4號(hào)于聚丙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶中-20 ℃保存。在1個(gè)月后和2個(gè)月后分別稀釋成標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)在第1個(gè)月后的測(cè)定中，于聚丙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶中-20 ℃保存的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液響應(yīng)值就已經(jīng)降低很多，其他3支管中稀釋的標(biāo)準(zhǔn)系列低濃度端幾乎無(wú)響應(yīng)。在第2個(gè)月后的測(cè)定中，于聚丙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶中-20 ℃保存的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋的標(biāo)準(zhǔn)系列低濃度端幾乎無(wú)響應(yīng)。因此對(duì)于0.1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液只能在聚丙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶中-20 ℃保存1個(gè)月。

3.2 離子柱和對(duì)應(yīng)流動(dòng)相的選擇：本實(shí)驗(yàn)選用的是Waters 公司生產(chǎn)的IC-PakTM Ion Exclusion（7.8 mm×150 mm）色譜柱，為陽(yáng)離子交換柱，因此使用陽(yáng)離子流動(dòng)相。

表2 草甘膦儀器精密度測(cè)定

圖3 絕對(duì)量為20 ng和200 ng精密度

表3 草甘膦回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.3 流動(dòng)相比例的選擇：陽(yáng)離子交換流動(dòng)相為0.68g磷酸二氫鉀溶于1L甲醇水（2/98）溶液，用磷酸調(diào)節(jié)pH為2.1。離子交換柱的流動(dòng)相應(yīng)為純水溶液，但實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)峰形和保留時(shí)間均不理想。加入甲醇（2/98）后，峰形和保留時(shí)間有明顯改善，因此實(shí)驗(yàn)中雖然選擇離子交換柱，但仍需要加入一定比例的甲醇作為流動(dòng)相。

3.4 衍生試劑配制時(shí)的注意事項(xiàng)：衍生化試劑不穩(wěn)定，需現(xiàn)用現(xiàn)配，且鄰苯二醛有劇毒，配制時(shí)要做好防護(hù)。

4 結(jié) 論

本次實(shí)驗(yàn)建立的測(cè)定生活飲用水中草甘膦的方法，靈敏度、回收率高，重現(xiàn)性好，完全符合我國(guó)對(duì)草甘膦的監(jiān)管要求。