抗核抗體及抗核抗體譜檢測(cè)在自身免疫性疾病中的臨床應(yīng)用價(jià)值探討

陳良東 江文倩

（江蘇省江陰市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇 江陰 214400）

臨床診斷自身免疫性疾病的一個(gè)重要標(biāo)志為自身抗體，隨著分子生物學(xué)等各種技術(shù)水平提高，臨床對(duì)自身免疫性疾病相關(guān)抗體的研究也不斷深入，自身免疫性疾病確診率也明顯提高[1]。在自身免疫性疾病臨床鑒別診斷中，抗核抗體結(jié)果及其熒光模型屬于重要篩選試驗(yàn)，但因抗核抗體靶抗原包含細(xì)胞分裂周期蛋白、細(xì)胞骨架、細(xì)胞漿以及細(xì)胞核等全部細(xì)胞及其成分，從理論上來(lái)說(shuō)，如果抗核抗體檢測(cè)結(jié)果為陰性，那么抗核抗體譜同樣也應(yīng)該為陰性[2,3]。但在臨床實(shí)踐過程中，通常會(huì)發(fā)現(xiàn)采用間接免疫熒光法對(duì)抗核抗體進(jìn)行初篩時(shí)，檢測(cè)結(jié)果顯示為陰性，但之后采用免疫印跡法對(duì)抗核抗體譜進(jìn)行測(cè)定時(shí)，結(jié)果卻顯示為陽(yáng)性，這會(huì)對(duì)自身免疫性疾病的臨床診斷產(chǎn)生極大影響[4]。鑒于此，本研究主要針對(duì)自身免疫性疾病中抗核抗體及抗核抗體譜檢測(cè)的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探討，報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

將2019 年1 月—2020 年2 月在我院診治的158 例自身免疫性疾病患者，男性70 例，女性88 例，年齡5～90 歲，平均（59.98±8.88）歲。所有患者均知情同意，且獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

均抽取3～5mL 清晨空腹靜脈血，保持30min 靜置狀態(tài)后，按照3000r/min 的速度行10min 離心處理，置于-20℃的冰箱中待檢。采用間接免疫熒光法檢測(cè)抗核抗體，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，試劑盒提供方為歐蒙（杭州）醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司，每次試驗(yàn)均需設(shè)置陽(yáng)性、陰性對(duì)照，檢測(cè)結(jié)果采用BX43熒光顯微鏡進(jìn)行觀察（日本生產(chǎn)），所有樣本均以1:80 稀釋，陽(yáng)性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為HP2 細(xì)胞和猴肝片中有特異性熒光出現(xiàn)，陽(yáng)性樣本再按4個(gè)滴度進(jìn)行測(cè)定，分別為1:160、1:320、1:640、1:1280最終確定其為陽(yáng)性樣本的滴度[5]。采用免疫印跡法檢測(cè)抗核抗體譜，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，試劑盒提供方為歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司，可用來(lái)對(duì)AMA M2、核糖體P 蛋白、組蛋白、核小體、dsDNA、PCNA、CENP B、Jo-1、PM-Scl、Scl-70、SS-B、Ro-52、SS-A、Sm、抗-nRNP 等15 種抗體進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定儀器為EUROBLotOne 全自動(dòng)免疫印跡儀（德國(guó)歐盟生產(chǎn)）。

1.3 觀察指標(biāo)

分析抗核抗體、抗核抗體譜檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)分析兩者聯(lián)合檢測(cè)的診斷準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究中所有數(shù)據(jù)均納入SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量、計(jì)數(shù)資料分別經(jīng)t、χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 抗核抗體測(cè)定結(jié)果分析

研究共采集158 份血樣，共有18 份抗核抗體測(cè)定結(jié)果顯示為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為11.39%，抗核抗體滴度＜1：80、≥1:80 且＜1:160、≥1:160 且＜1:320、≥1:320 且＜1:640、≥1:640且＜1:1280、≥1:1280 陽(yáng)性分別占0.00%、11.11%、22.22%、38.89%、22.22%、5.56%，見表1。

表1 抗核抗體測(cè)定結(jié)果分析

2.2 抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果分析

158 份血樣中，共有16 份抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果顯示為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為10.13%，抗核抗體滴度＜1：80、≥1:80 且＜1:160、≥1:160 且＜1:320、≥1:320 且＜1:640、≥1:640且＜1:1280、≥1:1280 陽(yáng)性分別占6.25%、6.25%、18.75%、37.50%、25.00%、6.25%，見表2。

表2 抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果分析

2.3 抗核抗體及抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果相關(guān)性分析

18 例抗核抗體測(cè)定結(jié)果為陽(yáng)性的患者中，5 例抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果顯示為陽(yáng)性（2 例臨床最終確診自身免疫性疾?。购丝贵w、抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果均為陽(yáng)性共14 例（13 例臨床最終確診自身免疫性疾?。?；抗核抗體測(cè)定結(jié)果為陽(yáng)性的18例患者中，15 例最終被確診為自身免疫性疾病，占83.33%；抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果顯示為陽(yáng)性的16 例患者中，14 例被確診為自身免疫性疾病，占87.50%，抗核抗體、抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果均為陽(yáng)性的14例患者中，13 例被確診為自身免疫性疾病，確診率為92.86%。

3.討論

臨床上，因自身免疫性疾病的臨床癥狀具有復(fù)雜、多樣的特點(diǎn)，且與感染性疾病、其他系統(tǒng)性疾病具有高度相似性，故其臨床診斷存在一定難度[6]。為了改善自身免疫性疾病患者預(yù)后，提高患者生活，需做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷與早治療。自身抗體為自身免疫性疾病的一個(gè)重要標(biāo)志，且每種自身免疫性疾病均有獨(dú)特的自身抗體譜[7]。存在于血液中的高效價(jià)自身抗體便為自身免疫性疾病的重要特征之一，同時(shí)也是臨床確診自身免疫性疾病的一個(gè)重要依據(jù)。抗核抗體是與自身免疫性疾病關(guān)系最為密切的自身抗體，屬于真核細(xì)胞細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)以及細(xì)胞核等各種組分自身抗體的總稱，且不同自身免疫性疾病的抗核抗體譜各異。間接免疫熒光法是臨床檢測(cè)抗核抗體的金標(biāo)準(zhǔn)，也是臨床應(yīng)用率較高的一種的自身抗體篩查試驗(yàn)。抗核抗體常見熒光模式包括細(xì)胞質(zhì)顆粒型、核著絲點(diǎn)型、核膜型、核仁型以及顆粒型等[8]。本次共采集158 份血樣，共有18 份抗核抗體測(cè)定結(jié)果顯示為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為11.39%，且18 例陽(yáng)性中，1:160～1:640 滴度患者居多。免疫印跡法是近年來(lái)出現(xiàn)的一項(xiàng)新型檢測(cè)技術(shù)，具有結(jié)果判讀方便、易自動(dòng)化、快速、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，可對(duì)和自身免疫性疾病相關(guān)的多種特異性自身抗體進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)，并且可長(zhǎng)期保存膜條結(jié)果。本文中，抗核抗體測(cè)定結(jié)果為陽(yáng)性的18 例患者中，15 例最終被確診為自身免疫性疾病，占83.33%，抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果顯示為陽(yáng)性的16 例患者中，14例被確診為自身免疫性疾病，占87.50%，抗核抗體、抗核抗體譜測(cè)定結(jié)果均為陽(yáng)性的14 例患者中，13 例被確診為自身免疫性疾病，確診率為92.86%，提示臨床為提高自身免疫性疾病確診率，可聯(lián)合測(cè)定抗核抗體與抗核抗體譜。

綜上所述，自身免疫性疾病診斷中，抗核抗體及抗核抗體譜檢測(cè)，對(duì)自身免疫性疾病的診斷具有重要價(jià)值，且兩者聯(lián)合檢測(cè)具有互補(bǔ)性，可減少臨床誤診或漏診。