惰性B淋巴瘤的臨床特征及預(yù)后分析

雷 秦 王 娟 許世娟

淋巴瘤可以分為霍奇金淋巴瘤與非霍奇金淋巴瘤，在非霍奇金淋巴瘤中，70%左右為B細(xì)胞淋巴瘤，其中進(jìn)展相對(duì)緩慢、惡性度相對(duì)較低的惰性淋巴瘤(indolent lymphoma)和進(jìn)展相對(duì)較快、惡性度相對(duì)較高的侵襲性淋巴瘤(aggressive lymphoma)[1-2]。惰性B淋巴瘤患者的臨床主要特征為病情反復(fù)，腫瘤生長(zhǎng)較緩慢，多數(shù)患者在就診時(shí)處于晚期，常累及外周血和骨髓[3-4]，治療上多采用化療，但是很多患者仍無(wú)法根治[5]。影響惰性B淋巴瘤患者預(yù)后的因素有很多，淋巴瘤國(guó)際預(yù)后指數(shù)(follicular lymphoma international prognostic index，F(xiàn)LIPI)能夠在一定程度上判斷患者的預(yù)后，但是多為主觀性，且臨床上不能僅僅依靠單一的指數(shù)進(jìn)行判斷[6-7]。已有研究顯示惰性B淋巴瘤的發(fā)生與發(fā)展涉及到細(xì)胞增殖、分化、凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和癌基因表達(dá)的蛋白、抑癌基因突變等[8-9]。本研究采用回顧性研究方法，探討了惰性B淋巴瘤臨床特征及預(yù)后的影響因子，為惰性淋巴瘤臨床治療選擇提供依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2015年8月到2018年2月選擇在我院接受化療的71例惰性B淋巴瘤患者作為惰性組，同期選擇彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤45例作為侵襲組，納入標(biāo)準(zhǔn)：全部患者均有病理組織石蠟標(biāo)本；所有患者均經(jīng)病理細(xì)胞形態(tài)學(xué)和免疫組化確診，都符合WHO關(guān)于B淋巴瘤的分類標(biāo)準(zhǔn)；所有患者接受4個(gè)療程的氟達(dá)拉濱為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療方案與CHOP樣方案；患者依從性好，都接受規(guī)范化治療；臨床病歷資料完整；醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)了此次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料缺乏；存在精神病、心腦血管疾病、呼吸系統(tǒng)疾病等；妊娠與哺乳期婦女。

1.2 IL-6與IL-10表達(dá)檢測(cè)

取所有患者的病理組織石蠟標(biāo)本，制成4 μm厚的組織切片，保存?zhèn)溆谩⑹灧謩e依次放入裝有不同濃度二甲苯的瓶子中0.25 h以除去組織中的石蠟。然后進(jìn)行酒精梯度洗脫，隨后將切片放入煮沸的檸檬酸緩沖液持續(xù)20 min。使用3%過(guò)氧化氫溶液對(duì)切片進(jìn)行孵育，在濕盒封閉15 min。在組織中央滴加恰當(dāng)?shù)囊豢?抗IL-6抗體與抗IL-10抗體)，4 ℃冰箱過(guò)夜。隨后滴加二抗生物素化山羊抗兔IgG，室溫放置30 min，滴加DAB顯色劑，鏡下觀察，蘇木精重新染色，蒸餾水沖洗，梯度脫水與透明，鏡下觀察染色的結(jié)果。判斷標(biāo)準(zhǔn)：IL-6與IL-10陽(yáng)性的判定標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞質(zhì)和/細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色的顆粒。根據(jù)腫瘤細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分比：4分：≥76%；3分：51%～75%；2分：26%～50%；1分：11%～25%；0分：≤10%。陽(yáng)性細(xì)胞的著色強(qiáng)度：3分為棕褐色；2分為棕黃色；1分為淺棕黃色；0分為黃色或淡黃色。將兩者積分相乘，≥5分表示為陽(yáng)性。

1.3 調(diào)查資料

調(diào)查所有患者的性別、年齡、臨床分期、體能狀態(tài)、結(jié)外受累、骨髓侵犯、FLIPI分級(jí)等。在化療后按照WHO實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、病情穩(wěn)定(SD)、病情進(jìn)展(PD)等4個(gè)級(jí)別，(完全緩解+部分緩解)/組內(nèi)例數(shù)×100.0%=總有效率。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

選擇SPSS 23.00軟件對(duì)計(jì)量數(shù)據(jù)與計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，對(duì)比采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)以百分比、率表示，對(duì)比采用卡方分析，采用單因素分析變量分析和Logistic回歸進(jìn)行二分類變量的多因素分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料對(duì)比

2組的性別、臨床分期、體能狀態(tài)、FLIPI分級(jí)等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2組的結(jié)外受累、骨髓侵犯、年齡等差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組一般資料對(duì)比

2.2 IL-6與IL-10陽(yáng)性率對(duì)比

惰性組的IL-6與IL-10陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于侵襲組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 2組IL-6與IL-10陽(yáng)性表達(dá)情況對(duì)比(例,%)

2.3 惰性組預(yù)后情況

在惰性組71例患者中，化療后完全緩解54例，部分緩解8例，病情穩(wěn)定5例，病情進(jìn)展4例，總有效率為87.3%。

2.4 惰性組預(yù)后影響因素分析

在惰性組71例患者中，以化療總有效率作為因變量，以結(jié)外受累、骨髓侵犯、年齡、IL-6與IL-10陽(yáng)性率作為自變量，二元Logistic回歸顯示結(jié)外受累、骨髓侵犯、IL-6與IL-10陽(yáng)性率均為影響預(yù)后的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 影響惰性B淋巴瘤患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素(n=71)

3 討論

惰性B淋巴瘤是一類臨床進(jìn)展相對(duì)緩慢、惡性程度較低的一種非霍奇金淋巴瘤，占非霍奇金淋巴瘤的1/4以上[10]?，F(xiàn)代研究表明惰性B淋巴瘤的可能誘因包括DNA修復(fù)機(jī)制異常、病毒和細(xì)菌的感染、免疫缺陷所致的凋亡等[11]。本研究顯示2組的性別、臨床分期、體能狀態(tài)、FLIPI分級(jí)等對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2組的結(jié)外受累、骨髓侵犯、年齡等對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明相對(duì)于侵襲性非霍奇金淋巴瘤，惰性B淋巴瘤患者年齡較大，少伴隨有結(jié)外受累、骨髓侵犯，但是在常規(guī)疾病危重程度分級(jí)上與侵襲性非霍奇金淋巴瘤無(wú)顯著差異。

淋巴瘤組織包括腫瘤細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞，間質(zhì)細(xì)胞能夠抑制腫瘤的擴(kuò)散，也能夠提供腫瘤生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而在腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移與擴(kuò)散中發(fā)揮重要作用[12-13]，特別是浸潤(rùn)的單核細(xì)胞衍生化細(xì)胞在T細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴增殖性疾病等相關(guān)疾病中均能夠表達(dá)，巨噬細(xì)胞中可見(jiàn)IL-6與IL-10有較強(qiáng)的表達(dá)，可能參與促進(jìn)淋巴瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[14]。IL-6是一種多效免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，在機(jī)體內(nèi)可參與促進(jìn)造血細(xì)胞的生成、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤生成、炎癥反應(yīng)等。IL-6也是一種多效免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，能夠抑制巨噬細(xì)胞依賴的T淋巴細(xì)胞的增殖與分化[15]。在非霍奇金淋巴瘤患者中，患者血清IL-6的水平顯著性升高，并且與患者預(yù)后較差有顯著相關(guān)性[16]。本研究顯示惰性組的IL-6與IL-10陽(yáng)性顯著低于侵襲組(P<0.05)，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與相關(guān)研究結(jié)果相一致[17]，說(shuō)明IL-6與IL-10可通過(guò)其腫瘤免疫的作用保護(hù)腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，為腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)提供良好的環(huán)境。當(dāng)前也有研究顯示IL-6與IL-10不僅在淋巴瘤細(xì)胞與組織中表達(dá)，在淋巴瘤組織中浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞中也有較強(qiáng)的表達(dá)，惡性程度相對(duì)較高、腫瘤進(jìn)展速度相對(duì)較快的侵襲性淋巴瘤組患者血清IL-6與IL-10水平顯著高于惰性淋巴瘤組[18]。

惰性B淋巴瘤尚無(wú)有效的標(biāo)準(zhǔn)治療方案，治療方法包括單純手術(shù)、化療、放療、手術(shù)加化療或放療、化療加放療等[19]。不過(guò)惰性B淋巴瘤基本失去了手術(shù)治療機(jī)會(huì)，CHOP方案曾經(jīng)被認(rèn)為是惰性B淋巴瘤患者的標(biāo)準(zhǔn)一線方案[20]。近年來(lái)，氟達(dá)拉濱以其所獲得的高緩解率已被廣泛應(yīng)用于惰性B淋巴瘤的治療，也取得了比較好的效果[21]。本研究顯示在惰性組71例患者中，化療后完全緩解54例，部分緩解8例，病情穩(wěn)定5例，病情進(jìn)展4例，總有效率為87.3%；二元Logistic回歸顯示結(jié)外受累、骨髓侵犯、IL-6與IL-10陽(yáng)性率均為影響預(yù)后的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。從機(jī)制上分析，IL-6與IL-10能夠通過(guò)受體系統(tǒng)發(fā)揮多種生物學(xué)功能，兩者的過(guò)度表達(dá)存在一種負(fù)反饋調(diào)節(jié)，可能是引起患者諸多并發(fā)癥狀的主要原因[22]。有研究顯示在侵襲性淋巴瘤組患者中，血漿IL-6與IL-10水平還與骨髓浸潤(rùn)顯著相關(guān)，并且IL-10作為危險(xiǎn)因素之一，與療效不佳也具有較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)度，另外若非霍奇金淋巴瘤患者IL-6水平較高，則其存活率就較低[23-24]。上述結(jié)果也可為淋巴瘤的治療提供新思路，即通過(guò)IL-6與IL-10來(lái)阻斷其體內(nèi)作用通路，達(dá)到治療惰性B淋巴瘤的目的。本研究也有一定的不足，惰性B淋巴瘤的臨床特征比較多，影響預(yù)后的因素也比較多，本研究樣本數(shù)量較少，為此可能存在研究偏倚性，將在后續(xù)研究中深入分析。

總之，惰性B淋巴瘤患者年齡較大，少伴隨有結(jié)外受累、骨髓侵犯，IL-6與IL-10表達(dá)量比較低，結(jié)外受累、骨髓侵犯、IL-6與IL-10陽(yáng)性率均為影響預(yù)后的危險(xiǎn)因素。