吲哚菁綠在肝癌行精準(zhǔn)肝切除術(shù)中的應(yīng)用

孫良權(quán) 曹坤 綜述 左石 審校

(貴州醫(yī)科大學(xué)，貴州 貴陽(yáng) 550004)

肝癌是指發(fā)生于肝臟的惡性腫瘤，包括原發(fā)性肝癌和繼發(fā)性肝癌，本文所指肝癌為原發(fā)性肝癌。原發(fā)性肝癌(PLC)主要為肝細(xì)胞肝癌(HCC)和肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌(ICC)。目前對(duì)肝癌的治療主要有肝切除、肝移植、介入治療、局部消融等，肝切除仍是目前肝癌的主要治療手段[1]。肝臟外科經(jīng)過(guò)百余年的發(fā)展，在醫(yī)療技術(shù)越來(lái)越精準(zhǔn)化的推動(dòng)下，進(jìn)入以“精準(zhǔn)”為特征的新時(shí)代，形成以旨在追求最小的創(chuàng)傷侵襲、最大的臟器保護(hù)、獲得最佳的康復(fù)效果為目標(biāo)的精準(zhǔn)肝切除外科理念[2]。要做到精準(zhǔn)肝切除，就必須做到精確術(shù)前評(píng)估及精密手術(shù)規(guī)劃、術(shù)中精工手術(shù)操作及術(shù)后精良的管理[3]。吲哚菁綠(indocyanine green,ICG)清除試驗(yàn)長(zhǎng)期以來(lái)被用于肝功能定量檢測(cè)，可以在術(shù)前對(duì)肝臟儲(chǔ)備功能進(jìn)行精確的評(píng)估。ICG近紅外熒光特性的成像技術(shù)能夠?qū)Ω文[瘤、肝段、膽道系統(tǒng)進(jìn)行熒光顯像，可在肝臟手術(shù)中影像導(dǎo)航，指導(dǎo)肝臟的精準(zhǔn)切除。

1 ICG的特性

ICG是一種紅外感光深藍(lán)綠色的三碳菁碘化物染料，無(wú)毒，可在pH 6.5的水溶液中重構(gòu)，用于靜脈注射；是美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局唯一批準(zhǔn)的體內(nèi)應(yīng)用染料，靜脈注射入人體后，在血管內(nèi)ICG與血漿白蛋白及脂蛋白等蛋白結(jié)合并局限在血管內(nèi)，直到肝臟攝取并直接以游離的形式排泄到膽汁中，隨膽汁排泄至腸，以糞便的形式排出體外。ICG在體內(nèi)15 min后即有97%自血液排出，既不參與體內(nèi)化學(xué)反應(yīng)，也無(wú)腸肝循環(huán)、無(wú)淋巴逆流、不從腎等其他肝外臟器排泄[4]。ICG注入體內(nèi)迅速與血清蛋白結(jié)合后可被波長(zhǎng)750～810 nm的外來(lái)光所激發(fā)，發(fā)射出波長(zhǎng)840 nm左右的近紅外光，這種紅外光線能透過(guò)5～10 mm的結(jié)締組織，被ICG熒光顯像系統(tǒng)接收后，可在顯像設(shè)備中顯示[5]。

2 ICG在精準(zhǔn)肝切除術(shù)前評(píng)估肝臟儲(chǔ)備功能的應(yīng)用

目前肝癌手術(shù)患者圍手術(shù)期死亡的主要原因還是術(shù)后肝功能衰竭，尤其是在HCC患者大多合并有肝硬化，肝臟的創(chuàng)傷修復(fù)及再生能力較差，術(shù)后更容易出現(xiàn)肝臟功能不全或衰竭。在術(shù)前進(jìn)行精確的肝臟儲(chǔ)備功能評(píng)估，以指導(dǎo)患者可否耐受手術(shù)，能耐受何種類型的手術(shù)，以最小化手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)至關(guān)重要[6]。臨床上常用肝功能檢查指標(biāo)有，靜態(tài)檢驗(yàn)的血膽紅素、白蛋白、轉(zhuǎn)氨酶、凝血酶原時(shí)間等生化檢查；另外還有child-Pugh評(píng)分、終末期肝病模型評(píng)分(MELD)、99mTc-半乳糖基人血清白蛋白(99mTc-GSA)試驗(yàn)、ICG清除試驗(yàn)等[7]。但上述肝功能靜態(tài)指標(biāo)雖有助于評(píng)估術(shù)前肝臟功能，但不具有特異性。99mTc-GSA試驗(yàn)雖然能定量的評(píng)估肝臟組織的功能，但尚未用于臨床[8]。在其它檢測(cè)方法中ICG清除試驗(yàn)在預(yù)測(cè)肝臟儲(chǔ)備功能上比Child-Pugh評(píng)分及MELD更精確[9]，且罕見(jiàn)有病例出現(xiàn)ICG不明原因清除異常[10]，因此ICG清除試驗(yàn)作為一種對(duì)肝臟儲(chǔ)備功能進(jìn)行精確量化的可靠檢驗(yàn)指標(biāo)廣泛用于臨床。通過(guò)ICG代謝情況可知，在肝臟血流通暢及膽道無(wú)梗阻的情況下，ICG的清除取決于功能性肝細(xì)胞數(shù)量，通過(guò)測(cè)定血流中ICG的代謝情況，即可反應(yīng)正常功能的肝細(xì)胞數(shù)量即肝臟儲(chǔ)備功能。目前多采用脈動(dòng)式ICG分光光度儀分析法測(cè)定，在術(shù)前以ICG按0.5 mg/kg用注射用水配成10 mL經(jīng)外周靜脈注射，以注射后 15 min血液中ICG滯留率(ICG R15)為指標(biāo)來(lái)量化肝臟儲(chǔ)備功能。

2.1ICG清除試驗(yàn)指導(dǎo)肝切除的實(shí)踐 S.T.Fan報(bào)道[11]，當(dāng)ICG R15<14%時(shí)，可安全的施行兩個(gè)以上肝段切除；當(dāng)ICG R15在14%～22%時(shí)，可安全施行兩個(gè)及兩個(gè)以下肝段切除；當(dāng)ICG R15在22%～40%時(shí)，則只能行限制性肝切除。L.T.Hoekstra等[7]評(píng)估肝臟功能時(shí)，ICG清除試驗(yàn)在高膽紅素病人、存在肝內(nèi)膽管分流及肝血竇阻塞時(shí)測(cè)定結(jié)果不可靠，另外術(shù)前ICG清除實(shí)驗(yàn)包括擬切除部分肝實(shí)質(zhì)的功能。故為了更準(zhǔn)確的反映肝臟功能，常采用ICG清除實(shí)驗(yàn)結(jié)合血生化、術(shù)前影像等指標(biāo)組成的決策系統(tǒng)，以指導(dǎo)手術(shù)的開(kāi)展。

我國(guó)臨床推薦的是董家鴻等人將“ICG R15、Child評(píng)分、肝實(shí)質(zhì)及脈管病變的影像學(xué)評(píng)估與肝臟體積測(cè)量相結(jié)合”建立肝臟切除安全限量的評(píng)估決策系統(tǒng)[12]。推薦對(duì)于Child A級(jí)肝硬化患者，若ICG R15<10%，預(yù)留肝臟功能性體積須不小于標(biāo)準(zhǔn)肝臟體積(SLV)的40%；若ICG R15為10%～20%，預(yù)留肝臟功能性體積須不小于SLV的60%；若ICG R15為21～30%，預(yù)留肝臟功能性體積須不小于SLV的80%；若ICG R15為3l%～40%，只能行限量肝切除；若ICG R15>40%，只能行腫瘤剜除術(shù)。在其所在臨床中心曾報(bào)道[13]，符合該決策系統(tǒng)的629例肝癌肝切除后20例出現(xiàn)術(shù)后肝衰，不符合該決策系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)的21例肝癌肝切中4例出現(xiàn)肝衰，兩者有顯著的差異。

國(guó)際上常用的有日本的 “makuuchi標(biāo)準(zhǔn)”[14]，將“腹水、總膽紅素、ICG R15”作為決策樹(shù)，當(dāng)沒(méi)有腹水或者腹水可以控、總膽紅素水平正常，若ICG R15<10%，可行三葉肝切除或半肝切除；若ICG R15為10%～19%，可行左半肝切除或右半肝部分切除；若ICG R15為20%～29%，可行肝段切除術(shù)；若ICG R15為30%～39%，只能行限制性肝切除；若ICG R15≥40%，只能行腫瘤剜除術(shù)。

3 ICG熒光特性在肝臟手術(shù)中的導(dǎo)航應(yīng)用

按照精準(zhǔn)肝切除的觀念，應(yīng)個(gè)性化的規(guī)劃手術(shù)方案。對(duì)于肝癌患者病變局限，肝臟儲(chǔ)備功能良好的條件下，精準(zhǔn)解剖性肝段切除應(yīng)作為外科治療的首選。因?yàn)榫珳?zhǔn)解剖性肝切除遵從解剖結(jié)構(gòu)，可以避免將剩余肝臟的血管、膽管等損傷，保持殘余肝臟的解剖結(jié)構(gòu)完整，保護(hù)殘余肝臟的功能，減少術(shù)后肝衰、膽漏等并發(fā)癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)[15]；也有報(bào)道[16]肝癌行精準(zhǔn)解剖性肝切除能提高肝癌術(shù)后的總體生存率及無(wú)瘤生存率。但要做到精準(zhǔn)的肝切除，就必須對(duì)病灶范圍、肝段間分界、以及有無(wú)膽管的損傷做到科學(xué)精準(zhǔn)的識(shí)別。

目前在術(shù)前對(duì)肝臟病灶的評(píng)估，主要依賴于影像資料，如超聲、CT、MRI及基于CT的三維可視化技術(shù)等，但超聲、CT、MRI等只能幫助術(shù)者在術(shù)前基本掌握肝臟病灶范圍與受累血管，不能精準(zhǔn)、立體地把握肝內(nèi)管道的走形及其與病灶的解剖關(guān)系[17]。三維可視化技術(shù)可以在術(shù)前精準(zhǔn)的、立體地把握肝內(nèi)管道的走形及其與病灶的解剖關(guān)系，但由于肝臟在手術(shù)過(guò)程中可以自由移動(dòng)并改變其形狀，使得手術(shù)醫(yī)生根據(jù)術(shù)前靜態(tài)的三維可視化技術(shù)去精確定位腫瘤部位或肝臟內(nèi)部的血管解剖結(jié)構(gòu)還是很困難。也有報(bào)道[18]在術(shù)中采用注射靛藍(lán)或者亞甲基藍(lán)染色，但由于術(shù)中成功染色困難及很快被洗脫，在實(shí)際手術(shù)時(shí)無(wú)法通過(guò)染色有效的區(qū)分相鄰肝端的界限。術(shù)中缺血線的應(yīng)用也是比較普遍的方法，但在肝硬化及嚴(yán)重黏連的病人，術(shù)中肉眼并不能很好的識(shí)別缺血線，且由于肝段或肝葉相互間的分界線是呈凹凸不平的界面，因此術(shù)中缺血線在指導(dǎo)深部肝切除時(shí)，并不能做到真正意義上的精準(zhǔn)解剖性肝切除術(shù)。ICG 經(jīng)門(mén)靜脈入肝后可快速被肝細(xì)胞攝取，在激發(fā)光的照射下肝臟顯示熒光，隨著 ICG排泄入膽道，膽道也可顯示熒光。膽汁內(nèi)含有與 ICG 結(jié)合的蛋白質(zhì)如白蛋白和脂蛋白，通過(guò)膽道內(nèi)注射ICG也能獲得膽道的熒光影像。成像技術(shù)的改進(jìn)使得ICG熒光影像可以實(shí)時(shí)可視化肝段，從而能夠精準(zhǔn)地指導(dǎo)解剖性肝切除[19]。

3.1術(shù)中熒光影像定位腫瘤 術(shù)前將ICG經(jīng)外周靜脈注射，術(shù)中熒光影像能較好定位近肝臟表面的原發(fā)性肝癌灶，使其呈現(xiàn)熒光，對(duì)于肝臟深部腫瘤灶的識(shí)別存在欠缺。目前關(guān)于腫瘤熒光形成的具體機(jī)制尚不清楚，可能是因?yàn)楦伟┙M織的膽管損害以及肝癌進(jìn)展造成微環(huán)境變化引起，使得肝癌組織的ICG攝取功能被保留，而排泄功能被破壞，腫瘤組織ICG殘留從而顯示熒光，而正常組織由于ICG排泄正常，不顯示熒光[20]。

3.2術(shù)中熒光影像實(shí)時(shí)標(biāo)記肝段分界 成功實(shí)施解剖性肝切除的基礎(chǔ)是對(duì)目標(biāo)肝段的精確辨認(rèn)，當(dāng)在術(shù)中注射ICG后，熒光影像能持續(xù)6 h左右，清晰地顯示擬切除或擬保留的肝段,其肝段熒光影像分界不僅在肝臟表面的存在，在肝實(shí)質(zhì)離斷的過(guò)程中，也能清晰的識(shí)別肝段邊界熒光影像，真正實(shí)現(xiàn)肝段的實(shí)時(shí)引導(dǎo)和精準(zhǔn)切除。肝段染色需術(shù)中進(jìn)行，分為“正染”和“反染”兩種方法。“正染”是指通過(guò)擬切除目標(biāo)肝段門(mén)脈穿刺注射ICG后對(duì)擬切除的肝段進(jìn)行熒光染色；“反染”是指阻斷擬切除目標(biāo)肝段流入血流后，外周靜脈注射ICG對(duì)擬保留的肝段進(jìn)行染色。王宏光等[21]推薦單一肝段或者亞肝段切除，盡量采用正染色法；聯(lián)合肝段、肝區(qū)或半肝切除時(shí)應(yīng)選用鞘外染色的反染色法。

3.3術(shù)中檢查有無(wú)膽漏 膽漏是肝切除術(shù)后的嚴(yán)重并發(fā)癥，術(shù)中及時(shí)發(fā)現(xiàn)膽漏是降低術(shù)后膽漏發(fā)生率的關(guān)鍵。利用ICG經(jīng)膽道排泄這一特性，在肝切除中，ICG可以高敏感性地檢測(cè)膽漏。對(duì)于肝外膽管成像，術(shù)中通過(guò)外周靜脈注射ICG，靠經(jīng)膽道自然排泄的ICG即可清晰顯示肝外膽管。如需使用ICG對(duì)肝臟斷面進(jìn)行膽漏檢測(cè)，可在術(shù)中夾閉膽總管遠(yuǎn)端后向肝內(nèi)膽道注射。術(shù)中如發(fā)現(xiàn)肝外膽管存在明顯綠色熒光滲漏，往往提示肝外膽道損傷；肝臟斷面處明顯的斑點(diǎn)狀強(qiáng)熒光往往提示膽道斷端，需要重點(diǎn)檢查；如較大范圍肝切除，可以嘗試夾閉膽總管遠(yuǎn)端后向膽總管注射ICG，仔細(xì)檢查斷面有無(wú)膽漏[22]。M.V.Marino等[23]報(bào)道ICG熒光影像引導(dǎo)下機(jī)器人肝切除，其應(yīng)用可以提高機(jī)器人肝臟手術(shù)的腫瘤完整切除率、降低術(shù)后膽漏發(fā)生率。

4 結(jié) 語(yǔ)

ICG清除試驗(yàn)?zāi)茌^好的反映肝臟儲(chǔ)備功能，聯(lián)合影像檢查、生化檢查組成決策系統(tǒng)時(shí)，可較好的指導(dǎo)肝癌手術(shù)方式制定及預(yù)測(cè)肝切除術(shù)后肝功能衰竭的發(fā)生。ICG熒光影像在肝膽外科中的使用，能夠在術(shù)中精準(zhǔn)的熒光標(biāo)記目標(biāo)腫瘤、很好的對(duì)肝段進(jìn)行染色分界及檢測(cè)有無(wú)膽漏，指導(dǎo)術(shù)中徹底的去除病灶及精準(zhǔn)肝切除。但由于ICG熒光影像技術(shù)開(kāi)展時(shí)間比較短，熒光影像系統(tǒng)的使用不夠完善，ICG的注射時(shí)間、途徑、劑量在各醫(yī)學(xué)中心存在差異，因此ICG熒光影像尚未常規(guī)在臨床應(yīng)用。