溫膽湯對腦缺血/再灌注損傷大鼠行為學(xué)及海馬中5-HT、MDA、DA、β-EP表達(dá)的影響

張金霞 方芳

[摘要] 目的 觀察溫膽湯對腦缺血/再灌注損傷模型大鼠行為學(xué)、海馬中5-羥色胺（5-HT）、丙二醛（MDA）、多巴胺（DA）、β-內(nèi)啡肽（β-EP）表達(dá)的影響。 方法 將30只大鼠隨機分為空白組、模型組、尼莫地平組、溫膽湯高劑量組、溫膽湯低劑量組5組，每組各6只，空白組僅分離頸內(nèi)動脈，給予生理鹽水10 mL/kg灌胃;其余大鼠采用Longa法線栓建立缺血/再灌注模型，模型組給予生理鹽水10 mL/kg灌胃;尼莫地平組給予尼莫地平懸浮液20 mg/kg;溫膽湯高劑量組和低劑量組分別給予溫膽湯4 g/kg、2 g/kg，給藥體積及給藥頻率均相同。連續(xù)給藥14 d后對所有大鼠進(jìn)行Morris水迷宮測試。完成行為學(xué)檢測后，分離出大鼠雙側(cè)海馬，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定海馬組織中DA、5-HT、β-EP、MDA的表達(dá)。 結(jié)果 與空白組比較，各組動物水迷宮游泳總路線均明顯增加，與模型組比較，各給藥組水迷宮游泳總路線明顯縮短，其中溫膽湯高劑量組在D3、D5時差異顯著（P<0.05），在D4時有差異極顯著（P<0.01）;溫膽湯低劑量組在D4時差異顯著（P<0.05）。5-HT各給藥組較模型組有下降趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;DA各給藥組較模型組有上升趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;β-EP各給藥組較模型組有下降趨勢，且溫膽湯高劑量組差異顯著（P<0.05）;MDA各給藥組較模型組均有下降趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 缺血/再灌注可導(dǎo)致海馬神經(jīng)元損傷，溫膽湯能有效改善腦缺血/再灌注大鼠的神經(jīng)損傷癥狀，影響海馬組織中細(xì)胞因子及神經(jīng)遞質(zhì)的含量。

[關(guān)鍵詞] 溫膽湯;缺血/再灌注;認(rèn)知功能;海馬

[中圖分類號] R285.5? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2020）33-0038-05

[Abstract] Objective To observe the effect of Wendan Decoction on the ethology of rats with cerebral ischemia/reperfusion injury and the expressions of 5-hydroxytryptamine（5-HT）， malonaldehyde（MDA）， dopamine（DA） and β-endorphin（β-EP） in their hippocampi. Methods Thirty rats were randomly divided into five groups： blank group， model group， Nimodipine group， Wendan Decoction high-dose group and Wendan Decoction low-dose group， with 6 rats in each group. In the blank group， only internal carotid artery separation was performed and normal saline（10 mL/kg） was given to the rats by gavage. The rats in other groups were treated with Longa to establish the ischemia/reperfusion model. The rats in the model group were given normal saline（10 mL/kg） by gavage. Rats in Nimodipine group were given Nimodipine suspension liquid by 20 mg/kg. Rats in the Wendan Decoction high-dose and low-dose groups were given Wendan Decoction by 4 g/kg and 2 g/kg respectively. All the dosage volume and frequency were the same. All rats were given Morris water maze tests after 14 days of continuous administration. After completing the behavioral test， the rats' bilateral hippocampi were isolated， and the expressions of DA， 5-HT， β-EP and MDA in the hippocampus were determined by ELISA. Results Compared with the blank group， the total swimming routes of the other groups were significantly increased. Compared with the model group， the total swimming routes of drug administration groups were significantly shortened. There were significant differences between the Wendan Decoction high-dose group and the model group at D3 and D5（P<0.05）， and high statistically difference at D4（P<0.01）. There was significant difference between the model group and the Wendan Decoction low-dose group at D4（P<0.05）. Compared with the model group， 5-HT expression in each drug administration group showed a downward trend， but there was no significant difference（P>0.05）. Compared with the model group， DA expression in each drug administration group showed an upward trend， and there were significant differences between those groups and the model group（P<0.05）. Compared with the model group， β-EP expression in each drug administration group showed a downward trend， and β-EP expression in the Wendan decoction high-dose group was significantly less than that in the model group（P<0.05）. Compared with the model group， MDA expression in each drug administration group showed a downward trend， and there were significant differences between those groups and the model group（P<0.05）. Conclusion Ischemia/reperfusion can lead to hippocampal neuron injury. Wendan Decoction can effectively improve the symptoms of nerve injury in cerebral ischemia/reperfusion rats， and affect the content of cytokines and neurotransmitters in hippocampal tissues.

[Key words] Wendan Decoction; Ischemia/reperfusion; Cognitive function; Hippocampus

腦缺血/再灌注損傷可引起腦功能障礙而產(chǎn)生獲得性智能損害綜合征，即血管性癡呆。癡呆是一個全球性的問題，根據(jù)流行病學(xué)研究，在1980～2011年，我國社區(qū)≥55歲人群的血管性癡呆患病率呈緩慢上升趨勢，發(fā)病率隨年齡增長而升高[1]。其臨床上表現(xiàn)出非特異屬性，目前仍沒有最有效且持久的醫(yī)治方式[2]。中醫(yī)以辨證論治與整體觀念相結(jié)合，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)相比，對疾病的治療具有獨特性，但卻缺乏科學(xué)依據(jù)。溫膽湯出自南北朝的《集驗方》，全方苦辛、寒溫平調(diào)，從調(diào)理脾胃氣機入手，使樞軸旋轉(zhuǎn)而諸臟腑氣機調(diào)暢，則濁邪可祛。本研究以溫膽湯對腦缺血/再灌注損傷大鼠行為學(xué)及海馬中5-HT、MDA、DA、β-EP表達(dá)的影響為切入點，初步探討加減溫膽湯治療血管性癡呆的作用機制，為溫膽湯治療血管性癡呆的臨床實踐提供科學(xué)依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選用30只健康SD大鼠（雌雄各半），購入時體重為200～220 g，實驗時體重240～270 g，SPF級，購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司，許可證號：SCXK（滬）2017-0005，合格證號：032582。飲用水為滅菌二級超純水，飲用水質(zhì)量符合中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB5749-2006）的規(guī)定。維持飼料由江蘇協(xié)同生物工程有限公司提供，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)GB14924.3-2010《實驗動物配合飼料營養(yǎng)成分》。實驗動物房使用許可證號：SYXK（浙）2015-0008，飼養(yǎng)環(huán)境：溫度范圍20～25℃，相對濕度范圍40%～70%。大鼠試驗前在動物房環(huán)境中適應(yīng)6 d。

1.2 主要試劑及儀器

水合氯醛，購于上海展云化工有限公司，批號：160220;水迷宮，產(chǎn)家淮北正華，型號：ZH0065;5-羥色胺（5-HT）試劑盒（cat#H104）、多巴胺（DA）試劑盒（cat#H17）及丙二醛（MDA）試劑盒（cat#A003-1），均購于南京建成生物工程研究所;β-內(nèi)啡肽（β-EP）ELISA kit（cat#CEA806Ra）購于青島尤爾生生物有限公司;全波長酶標(biāo)儀，MD公司SpectraMax Plus384型。中藥溫膽湯：半夏6 g，茯苓4.5 g，竹茹6 g，枳實6 g，陳皮9 g，炙甘草3 g，加藥材量的8倍水浸泡30 min后沸騰煎40 min，過濾取汁，重復(fù)上述煎煮過程2次，合并水煎液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮為1.2 g（生藥）/mL，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 方法

1.3.1 實驗分組? 采用隨機數(shù)字表法將30只大鼠分為5組，每組各6只，雌雄各半?？瞻捉M取6只僅分離頸內(nèi)動脈，給予生理鹽水10 mL/kg灌胃;模型組建立缺血/再灌注模型，給予生理鹽水10 mL/kg灌胃;尼莫地平組建立缺血/再灌注模型后，給予尼莫地平懸浮液20 mg/kg;溫膽湯高劑量組和低劑量組在建立缺血/再灌注模型后，分別給予溫膽湯4 g/kg、2 g/kg，給藥體積及給藥頻率均相同。

1.3.2 缺血/再灌注動物模型的制備? 采用Longa法線栓制作大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型，10%水合氯醛300 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，仰臥位固定，頸部常規(guī)消毒備皮，取頸正中切口，分離右側(cè)頸總動脈、頸外動脈和頸內(nèi)動脈，結(jié)扎頸外動脈遠(yuǎn)心端，用血管夾暫時夾閉頸總動脈近心端、頸內(nèi)動脈。在頸外動脈靠近頸總動脈分叉處剪一小口，插入一端經(jīng)硅膠包被的特制線栓。松開頸內(nèi)動脈上的血管夾，將線栓輕輕由頸外動脈插入頸內(nèi)動脈，直至線栓堵塞大腦中動脈的起始部，線栓插入深度一般為18～20 mm，扎緊線栓，松開頸總動脈上的血管夾，縫合頸部皮膚。缺血2 h后，拔出線栓，恢復(fù)血流再灌注，造模后3 d內(nèi)肌注10萬U青霉素鈉抗感染。

1.3.3 神經(jīng)功能評分? 大鼠模型造模完成后，均出現(xiàn)神經(jīng)功能障礙，待大鼠蘇醒后依據(jù)Zea Longa 5分制標(biāo)準(zhǔn)[3]篩選，Longa評分為2分或3分。評分標(biāo)準(zhǔn)：0分：無神經(jīng)功能缺損癥狀，活動正常;1分：不能伸展對側(cè)前爪;2分：爬行時出現(xiàn)向左轉(zhuǎn)圈;3分：行走時身體向偏癱側(cè)傾倒;4分：不能自發(fā)行走，意識喪失。1～3分視為造模成功。

1.3.4 測試方法? 連續(xù)給藥14 d后對所有大鼠進(jìn)行Morris水迷宮測試，檢測大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。①定位航行試驗：第1天進(jìn)行可視平臺試驗，實驗前將大鼠籠放入測試房間適應(yīng)至少30 min，使大鼠適應(yīng)新的環(huán)境，期間避免其看到水池。試驗時，將大鼠從離平臺最遠(yuǎn)的象限入水，記錄大鼠找到平臺的潛伏期，時間為90 s。第2天至第5天，隱藏平臺試驗，每天固定時間進(jìn)行4次訓(xùn)練，每次90 s，每次間隔20 s，圖像采集系統(tǒng)及分析系統(tǒng)自動記錄保存大鼠的運動軌跡、找到站臺的潛伏期、游泳時間、游泳速度、游泳距離及尋找站臺的搜尋策略等信息。②空間探索試驗：第6天撤除平臺，從任一入水點將大鼠面向池壁放入水中，記錄90 s內(nèi)大鼠的游泳軌跡，并進(jìn)行分析。觀察大鼠停留目標(biāo)象限和其余各象限的游泳時間與路程等指標(biāo)。

1.3.5 檢測海馬組織中DA、5-HT、β-EP、MDA的表達(dá)? 完成行為學(xué)檢測后，斷頭處死大鼠，取出腦組織，于腦視交叉與視乳頭之間冠狀位處垂直切開腦組織，鈍性分離出的左右雙側(cè)海馬，迅速加入冰生理鹽水，制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的腦組織勻漿，采用ELISA法測定海馬組織中DA、5-HT、β-EP、MDA的含量。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用兩樣本t檢驗;非正態(tài)分布計量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M（P25，P75）]表示，兩組間比較采用Mann-Whitney U秩和檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 藥物對大鼠水迷宮隱藏平臺試驗游泳總路程的影響

結(jié)果顯示，與空白組比較，各組動物水迷宮游泳總路線均明顯增加，與模型組比較，各給藥組水迷宮游泳總路線明顯縮短，其中尼莫地平組在D3、D4、D5時差異顯著（P<0.05）;溫膽湯高劑量組在D3、D5時差異顯著（P<0.05），在D4時差異極顯著（P<0.01）;溫膽湯低劑量組在D4時差異顯著（P<0.05）。見表1。

2.2 DA、5-HT、β-EP、MDA在海馬組織中的含量

結(jié)果顯示，DA：模型組較空白組有下降趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;尼莫地平組及溫膽湯高劑量組較模型組均有上升趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。5-HT：模型組較空白組有上升趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;各給藥組較模型組均有下降趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。β-EP：模型組較空白組有上升趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;各給藥組較模型組有下降趨勢，且溫膽湯高劑量組差異顯著（P<0.05）。MDA：模型組較空白組有上升趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;各給藥組較模型組均有下降趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

以往研究表明，卒中后可引起血管性癡呆，且患病率較高[4-5]。其臨床表現(xiàn)主要為認(rèn)知功能減退、記憶障礙、日常生活能力下降及社會功能減退等，嚴(yán)重影響患者生命健康，增加家庭負(fù)擔(dān)[6-7]。以往臨床關(guān)注點更多的集中在卒中患者的運動功能，而忽略了認(rèn)知功能的管理。近年對血管性癡呆的認(rèn)識及研究越來越多，血管性癡呆是迄今為止唯一可以防治的癡呆，但因為缺乏特效藥物，所以除對患者的生活質(zhì)量會產(chǎn)生嚴(yán)重影響外，還會對家庭及社會經(jīng)濟(jì)產(chǎn)生極大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，尋找血管性癡呆有效的治療方法是臨床關(guān)注的熱點。腦缺血后恢復(fù)腦血流是治療腦缺血最關(guān)鍵的方法，但再灌注后可加重缺血腦組織的損傷，而腦缺血-再灌注損傷機制復(fù)雜，涉及能量代謝障礙、自由基作用、內(nèi)皮素作用、神經(jīng)元凋亡、興奮性氨基酸毒性作用及細(xì)胞內(nèi)鈣超載等諸多因素[8-13]。該研究證明，血管性癡呆發(fā)病機制與腦缺血-再灌注后細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)及腦神經(jīng)相關(guān)肽的減少有關(guān)。有臨床研究表明，溫膽湯及其加減方在早期血管性癡呆治療中有一定的療效，可以改善患者認(rèn)知功能[14-16]。但溫膽湯治療血管性癡呆的機制尚缺乏實驗依據(jù)。本實驗證明，溫膽湯可改善腦缺血-再灌注損傷后大鼠的認(rèn)知功能，可能與以下幾個機制有關(guān)，①提高單胺類神經(jīng)遞質(zhì)：在VD的發(fā)病過程中，大腦海馬部的神經(jīng)遞質(zhì)明顯減少，尤其是單胺類神經(jīng)遞質(zhì)減少與VD的智力下降密切相關(guān)。腦缺血時腦組織中單胺氧化酶活性升高，分解單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，使腦內(nèi)DA水平下降，影響學(xué)習(xí)記憶。本研究結(jié)果顯示，溫膽湯對腦缺血再灌注損傷大鼠海馬的DA有改善作用，但5-HT改善不明顯，可能與5-HT系統(tǒng)更多的是參與調(diào)節(jié)情緒、動機和食欲等有關(guān)[17]，而DA則與記憶相關(guān)。②自由基作用：大鼠腦缺血再灌注損傷后大量的自由基形成，攻擊腦細(xì)胞膜中多不飽和酸雙鍵造成腦細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的破壞，還可以繼續(xù)損傷蛋白與核酸，引起細(xì)胞凋亡，而MDA是自由基作用于細(xì)胞膜脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)后的氧化終產(chǎn)物，通過測定其含量可以了解氧自由基導(dǎo)致機體組織細(xì)胞損傷的程度。本研究結(jié)果顯示，模型組MDA含量升高，這與一些文獻(xiàn)報道一致[18]，溫膽湯低劑量組和高劑量組中MDA含量均顯著下降，說明溫膽湯可通過清除氧自由基，保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)。

本研究選取的β-EP是一種內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)，分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，與神經(jīng)損傷和修復(fù)密切相關(guān)，β-EP的過度表達(dá)可加重缺血性腦損傷，與其升高時引起超氧化物生成和細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放有關(guān)，其含量某種程度上反應(yīng)腦損傷的程度。本研究發(fā)現(xiàn)，溫膽湯高劑量組與模型組相比，β-EP在海馬中的含量下降，并有顯著性差異，這與既往一些文獻(xiàn)報道相一致[19-20]，說明溫膽湯對損傷的腦組織具有修復(fù)作用，但其作用機制目前尚不明確，且與此研究樣本量較小有關(guān)，還需要增大樣本量，做更細(xì)化的研究。

在本研究中分別使用溫膽湯高劑量組及低劑量組，這在過去的研究中尚未有先例，結(jié)果也證明不同劑量的藥物組在改善大鼠記憶能力及海馬組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量改善有差別，為以后尋找更適合劑量的藥物濃度，改善血管性癡呆患者認(rèn)知功能提供了一定的依據(jù)，在此后的研究中，可能需更細(xì)化劑量分組。從大量的實驗研究和本研究結(jié)果來看，尼莫地平及溫膽湯具有很多類似的腦保護(hù)作用，但作用機制不相同。尼莫地平為治療缺血性卒中患者認(rèn)知和行為能力減退的有循證醫(yī)學(xué)依據(jù)的藥物，其具有可選擇性擴張腦血管作用，從而達(dá)到對局部腦缺血的保護(hù)作用，也有研究證明[21]，尼莫地平可提高VD大鼠的記憶能力。本研究表明，尼莫地平同樣可以改善腦缺血-再灌注損傷后大鼠的認(rèn)知功能，提高海馬組織中DA水平，降低MDA含量。

血管性癡呆屬于祖國醫(yī)學(xué)中“癡呆”范疇，但其病因病機與阿爾茨海默病有所區(qū)別，阿爾茨海默病即老年癡呆，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是年高腎精虧虛，髓海不足，神明失其所養(yǎng)所致，治療從屬髓海不足，腎氣虧虛等虛癥較多[22-23]，而血管性癡呆在中風(fēng)病的基礎(chǔ)上形成，久病入絡(luò)，痰瘀內(nèi)阻，敗壞腦髓形體而致神明不得所用，多從痰從瘀論治，《石室秘錄》有曰：“呆病如癡，……實亦胸腹之中，無非痰氣。故治呆無奇法，治痰即治呆也。然而痰氣最盛，呆氣最深……”，說明癡呆與痰氣有關(guān)，且癡呆的程度與痰濁的輕重有關(guān)，可見化痰祛濁可為臨床治療血管性癡呆常用的方法。溫膽湯最早記載于《集驗方》，但后代醫(yī)家常習(xí)用陳無擇《三因極一病證方論》所載方。原文記載：“治心膽虛怯……遂致心驚膽懾，氣郁生涎，涎與氣搏，變生諸證，……。”，具有理氣化痰，和胃利膽之功效，主治膽郁痰擾之證。方中君藥半夏燥濕化痰，降逆和胃;臣以竹茹清膽和胃，止嘔除煩;枳實、橘皮理氣化痰，使氣順則痰自消;茯苓健脾滲濕，濕祛則痰不生;甘草益脾和中，調(diào)和諸藥。諸藥合用，可使痰濁得去則膽無邪擾，氣通血行則腦竅得養(yǎng)。臨床上亦常以溫膽湯治療痰氣所致的諸多怪癥，此研究為溫膽湯治療血管性癡呆提供一定的理論依據(jù)，為臨床上抗VD藥物的篩選提供實驗依據(jù)。

綜上所述，溫膽湯和尼莫地平可以通過清除氧自由基、提高海馬區(qū)部分單胺類神經(jīng)遞質(zhì)來改善缺血再灌注大鼠模型的記憶功能，這可能是溫膽湯治療血管性癡呆的機制之一。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 曲艷吉，卓琳，王華麗，等. 1980-2011年中國社區(qū)55歲及以上人群中血管性癡呆流行病學(xué)的Meta分析[J]. 中國卒中雜志，2013，8（7）：533-543.

[2] 魏常娟. 血管性癡呆治療的現(xiàn)狀及進(jìn)展[J]. 飲食保健，2016，3（8）：247-248.

[3] Zea-Longa EL，Weinstein PR，Carlson S，et a1. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J]. Stroke，1989，20（1）：84.

[4] 儲新娟，涂志蘭，金芃芃，等. 缺血性腦卒中患者血管性認(rèn)知功能障礙的現(xiàn)狀及影響因素分析[J]. 中國臨床醫(yī)生雜志，2017，45（1）：43-44.

[5] 廖張元. 血管性癡呆的研究進(jìn)展[J]. 中國實用神經(jīng)疾病雜志，2019，22（2）：224-227.

[6] 王凌玲，雷夢覺，胡杰，等. H型高血壓患者M(jìn)THFR基因型分布與血管性癡呆的關(guān)系[J].中國老年學(xué)雜志，2018，38（23）：5633-5636.

[7] 張會利. 養(yǎng)血清腦顆粒聯(lián)合丁苯酞軟膠囊對血管性癡呆患者認(rèn)知功能及ADL評分的影響[J]. 現(xiàn)代診斷與治療，2019，30（12）：1989-1990.

[8] 王敏，李瑜，王士累，等. 線粒體分裂抑制劑改善大鼠海馬神經(jīng)元缺血再灌注損傷時的能量代謝障礙[J]. 中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志，2016，13（6）：562-567.

[9] 張迪，任長虹，吉訓(xùn)明，等. 腦缺血-再灌注損傷后的炎性反應(yīng)過程及機制的研究進(jìn)展[J]. 中國腦血管病雜志，2013，10（7）：383-386.

[10] 張建榮，潘強，柏江鋒，等. 復(fù)方桂枝茯苓丸對腦缺血再灌注損傷大鼠TNF-OL、ET的影響[J]. 中國中醫(yī)急癥，2013，22（11）：1841-1843.

[11] 孫亞蒙，張燕，莫云，等. 缺血后處理抑制神經(jīng)元凋亡減輕大鼠腦缺血再灌注損傷[J].中國臨床神經(jīng)科學(xué)，2018， 26（3）：241-249.

[12] Padosch SA，B？觟Ttiger BW. Neuronal apoptosis following cerebral ischaemia：Pathophysiology and possible therapeutic implications.[J]. Current Opinion in Anaesthesiology，2003，16（5）：439.

[13] 魏麗娜，鐘鏑，陳洪蘋，等. 血管性認(rèn)知功能障礙發(fā)病機制的研究進(jìn)展[J]. 中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2019，36（3）：286-288.

[14] 張二煒，杜輝，馬莉. 溫膽湯加減配伍多奈哌齊治療血管性癡呆患者45例療效觀察[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，33（8）：769-771.

[15] 楊華，潘智琴，張江濤，等. 溫膽湯聯(lián)合茴拉西坦膠囊治療痰濁阻竅型血管性癡呆30例觀察[J]. 浙江中醫(yī)雜志，2012，47（5）：326.

[16] 盧要強. 柴芩溫膽湯治療腦小血管性認(rèn)知功能障礙的臨床觀察[J]. 光明醫(yī)學(xué)，2017，32（21）：3094-3096.

[17] 劉廣玉，劉曉楓. 自擬補腎活血湯對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志，2011，5（10）：3024-3026.

[18] Ishimura M，Maeda T，Kataoka S，et a1. Effects of KP-496，a novel dual antagonist for cysteinyl leukotriene receptor 1 and thromboxane A2 receptor，on sephadex-induced airway inflammation in rats[J]. Biol Pharm Bull，2009，32（6）：1057-1061.

[19] 邵瑛，賴新生，宮育卓，等. 電針對血管性癡呆大鼠血漿和腦組織生長抑素、β-內(nèi)啡肽含量及學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J]. 針刺研究，2008，33（2）：98-102.

[20] 孫衛(wèi)亞. 腦脊液中SS、AVP、β-EP、NSE與血管性癡呆的相關(guān)性研究[J]. 神經(jīng)損傷與功能重建，2007，2（1）：33-35.

[21] 張泓波，高維娟，錢濤. 尼莫地平對血管性癡呆大鼠海馬CAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白、轉(zhuǎn)錄因子CCAAT增強子結(jié)合蛋白DNA結(jié)合活性的影響[J]. 中華行為醫(yī)學(xué)與腦科學(xué)雜志，2012，21（6）：518-520.

[22] 董洪濤. 老年性癡呆腎虛髓空的病因病機探討[J]. 中醫(yī)文獻(xiàn)雜志，2002，1：22-23.

[23] 何靜. 老年癡呆癥的中醫(yī)病因病機研究及治療思路[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2012，23（11）：2933-2944.

（收稿日期：2020-04-01）