榆黃蘑母種培養(yǎng)基及栽培配方的優(yōu)化研究

林 鈴 張琪輝 金珊珊 俞穗珍 張燎原 鄭明鋒

（1.古田縣食用菌研發(fā)中心，福建 寧德352200；2.福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州350000；3.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州350000）

榆黃蘑（Pleurotus citrinopileatusSing.）隸屬真菌門、擔(dān)子菌綱、傘菌目、側(cè)耳科、側(cè)耳屬，又名金頂側(cè)耳、金頂蘑、玉黃蘑、黃金菇[1]。其色澤艷麗，形態(tài)優(yōu)美，氣味醇香，質(zhì)地脆嫩，口感細(xì)膩，富含蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)成分，屬高營(yíng)養(yǎng)、低熱量食品。經(jīng)驗(yàn)證，常食具有滋陰補(bǔ)腎，防治胃癌的功效[2]；有助于降低血壓、降低膽固醇含量，是心血管疾病患者和肥胖癥患者的理想保健食品[3]。榆黃蘑為木腐生菌，多生于榆樹、樺樹、櫟樹、楊樹等枯木的基部、倒木或樹樁上[4]。子實(shí)體呈金黃色，菌蓋喇叭狀、光滑，菌肉白色，菌柄淡黃色、有細(xì)毛，菌褶垂生。孢子無(wú)色、光滑，卵形或橢圓形[5]，寬2～12 cm，長(zhǎng)2～12 cm，粗0.5～1.5 cm，多數(shù)菌蓋呈分枝狀合生，菌柄基部相連。該菌生活力強(qiáng)，出菇多，產(chǎn)量高，生長(zhǎng)周期短，食用價(jià)值和觀賞價(jià)值高，是一個(gè)值得推廣的品種[6]。我國(guó)從1976年開始人工栽培。

榆黃蘑菌絲生長(zhǎng)發(fā)育溫度范圍5～35℃，最適為23～27℃；子實(shí)體生長(zhǎng)最適溫度17～23℃。菌絲生長(zhǎng)發(fā)育階段不需要光照，子實(shí)體生長(zhǎng)階段需要一定的散射光[7]，不需溫差刺激。榆黃蘑菌絲培養(yǎng)料含水量以60%～65%為宜，培養(yǎng)室空氣相對(duì)濕度65%左右；子實(shí)體發(fā)育階段空氣相對(duì)濕度90%～95%，生長(zhǎng)階段適宜的濕度為85%～90%[8]。榆黃蘑是好氧菌類，菌絲發(fā)育期需要一定的氧氣，子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育期更需要充足的新鮮空氣，菇房中二氧化碳濃度過高易造成菇體畸形，影響品質(zhì)和產(chǎn)量。在pH5～8 之間菌絲均能生長(zhǎng)，以pH6～7 為佳[9]。

菌種生產(chǎn)關(guān)系到榆黃蘑產(chǎn)量和質(zhì)量[10]，因此菌種培養(yǎng)配方的篩選至關(guān)重要。常見以棉籽殼為原料配制培養(yǎng)基，隨著棉籽殼價(jià)格上漲，亟需探索其他代替原料。以玉米芯替代棉籽殼，既可提高栽培效益，又可因地制宜促進(jìn)玉米芯資源的轉(zhuǎn)化，改善生態(tài)環(huán)境；以木屑替代棉籽殼，既可降低栽培成本，又可以提高產(chǎn)量，可在生產(chǎn)中廣泛推廣[11]。本文參照潘靜等[12]、金華春等[13]提出的榆黃蘑栽培管理方法，開展榆黃蘑優(yōu)良母種配方篩選和栽培配方研究，探討不同配方培養(yǎng)基對(duì)榆黃蘑菌絲長(zhǎng)勢(shì)及子實(shí)體產(chǎn)量的影響。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

本試驗(yàn)供試菌種榆黃蘑一級(jí)試管種，來(lái)源于廣西大學(xué)食用菌研究所。

1.2 試驗(yàn)方法

（1）母種培養(yǎng)基配方試驗(yàn)。設(shè)12個(gè)母種培養(yǎng)基配方：配方1，土豆100 g，葡萄糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL，為對(duì)照；配方2，紫薯100 g，葡萄糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方3，玉米粉100 g，葡萄糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方4，地瓜100 g，葡萄糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方5，紫薯100 g，蔗糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方6，土豆100 g，蔗糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方7，玉米粉100 g，蔗糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方8，地瓜100 g，蔗糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方9，紫薯100 g，麥芽糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方10，土豆100 g，麥芽糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方11，玉米粉100 g，麥芽糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL；配方12，地瓜100 g，麥芽糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL。

根據(jù)配方組分稱取所需的原料，按PDA 培養(yǎng)基制作方法制備各配方培養(yǎng)基。在超凈工作臺(tái)上將各配方培養(yǎng)基分別倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿裝15 mL，制成平板培養(yǎng)基。然后分別等量接入榆黃蘑菌種（5 mm 菌絲圓片），每種培養(yǎng)基設(shè)3次重復(fù)。置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

菌絲生長(zhǎng)情況比較：采用接種塊圓心劃“十”字方法測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度，每2天測(cè)量標(biāo)記1次菌絲生長(zhǎng)量，并觀察比較各配方培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)情況，待有一種菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿后停止試驗(yàn)。

（2）生產(chǎn)配方試驗(yàn)。參照楊儒欽[14]提出的榆黃蘑原種生產(chǎn)技術(shù)要點(diǎn)，以食用菌常用原種和栽培種配方（木屑78%，麩皮20%，石灰1%，蔗糖1%，含水量60%～65%，pH5.5～7.0）制作原種和栽培種培養(yǎng)基。均勻拌料直至手握成團(tuán)指縫間略見水珠，裝入11×23×0.005（cm）聚丙烯袋，每袋濕重350 g，滅菌接種置于21℃養(yǎng)菌房中暗培養(yǎng)。菌絲走滿袋便可使用。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)以玉米芯、麩皮為主的生產(chǎn)配方5個(gè)：配方a，玉米芯96%，石灰2%，石膏1%，蔗糖1%；配方b，玉米芯86%，麩皮10%，石灰2%，石膏1%，蔗糖1%；配方c，玉米芯76%，麩皮20%，石灰2%，石膏1%，蔗糖1%；配方d，玉米芯66%，麩皮30%，石灰2%，石膏1%，蔗糖1%；配方e，玉米芯56%，麩皮40%，石灰2%，石膏1%，蔗糖1%。各配方含水量60%～65%，pH5.5～7.0。

以木屑、麩皮為主的生產(chǎn)配方6個(gè)：配方A，木屑98%，石灰1%，石膏1%；配方B，木屑88%，麩皮10%，石灰1%，石膏1%；配方C，木屑78%，麩皮20%，石灰1%，石膏1%；配方D，木屑68%，麩皮30%，石灰1%，石膏1%；配方E，木屑58%，麩皮40%，石灰1%，石膏1%；配方F，木屑58%，麩皮20%，棉籽殼20%，石灰1%，石膏1%。各配方含水量60%～65%，pH5.5～7.0。

各配方按比例稱料，混勻，加適量水?dāng)嚢柚潦治粘蓤F(tuán)、指縫間略見水珠時(shí)進(jìn)行裝袋，聚丙烯袋規(guī)格為16×30×0.005（cm），每袋裝料濕重800 g，封口，置于121℃高壓鍋中滅菌3 h。冷卻至25℃以下于無(wú)菌接種室中接種，封口，置于21℃養(yǎng)菌房?jī)?nèi)暗培養(yǎng)。

菌絲生長(zhǎng)情況比較：采用劃線標(biāo)記法測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度，每2天測(cè)量標(biāo)記1次菌絲生長(zhǎng)量，定期觀察比較各配方培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)情況，并記錄菌絲滿袋的時(shí)間。

表1 不同母種培養(yǎng)基上的榆黃蘑生長(zhǎng)情況

子實(shí)體生長(zhǎng)狀況測(cè)定：選取不同生產(chǎn)配方菌袋15 袋，稱量記錄各配方每潮出菇產(chǎn)量，并計(jì)算前3潮生物學(xué)效率，用鮮菇產(chǎn)量與干料重的百分比表示。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用WPS Office 2019 11.1.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，運(yùn)用SPSS Statistics V17.0 軟件分析差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 母種培養(yǎng)基的優(yōu)化篩選

對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度的差異顯著性分析結(jié)果：與對(duì)照組相比，各配方菌絲生長(zhǎng)速度皆存在顯著差異，配方6 菌絲生長(zhǎng)速度較快，每日平均為6.20 mm，比對(duì)照組快2.26 mm，可以作為快速培養(yǎng)榆黃蘑母種的培養(yǎng)基配方。配方2 雖菌絲生長(zhǎng)速度較慢，但與其他配方相比，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較好，菌絲潔白、粗壯、濃密，活性強(qiáng)，可作為保持榆黃蘑母種較強(qiáng)活力的培養(yǎng)基配方。與以葡萄糖、麥芽糖作為碳源對(duì)比，蔗糖更有利于菌絲的生長(zhǎng)（表1、圖1）。

2.2 栽培配方的優(yōu)化篩選

（1）不同生產(chǎn)配方對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響。以玉米芯、麩皮為主的生產(chǎn)配方榆黃蘑菌絲生長(zhǎng)速度的差異顯著性分析結(jié)果：以配方b 菌絲生長(zhǎng)速度較快，日均5.93 mm，與其他配方的差異顯著，滿袋時(shí)間短，菌絲淺白、纖細(xì)、較密，活力較弱；配方e 麩袋時(shí)間更短，菌絲潔白、粗壯、濃密，活力更強(qiáng)，皮占比40%，菌絲生長(zhǎng)速度慢，滿袋時(shí)間長(zhǎng)，但菌絲潔白、粗壯、濃密，活力強(qiáng)（表2）。

以木屑、麩皮為主的生產(chǎn)配方榆黃蘑菌絲生長(zhǎng)速度的差異顯著性分析結(jié)果：以配方F 菌絲生長(zhǎng)速度較快，日均為5.45 mm，與配方B的差異不顯著，與其他配方的差異顯著；配方F 與配方B 比，滿長(zhǎng)勢(shì)更好。因此，加入棉籽殼有助于提高菌絲長(zhǎng)勢(shì)，縮短滿袋時(shí)間（表3）。

圖1 榆黃蘑在不同母種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況

表2 以玉米芯、麩皮為主的栽培配方的菌絲生長(zhǎng)情況

（2）不同配方對(duì)出菇的影響。在以玉米芯、麩皮為主的生產(chǎn)配方上，榆黃蘑初潮菇單袋平均產(chǎn)量以配方e 較高，為94.90 g，與配方c、d的差異不顯著；但前3潮單袋平均產(chǎn)量配方d 較高，為256.76 g，生物學(xué)效率103.72%?？梢姡浞絛 是榆黃蘑栽培出菇的較佳配方（表4）。

表4 以玉米芯、麩皮為主的栽培配方的出菇表現(xiàn)

在以木屑、麩皮為主的栽培配方，榆黃蘑初潮菇單袋產(chǎn)量以配方F 較高，為132.33 g（表5），與配方C、D、E 比，差異不顯著；而與配方A、B有顯著差異。說明增加麩皮有助于提高初潮菇產(chǎn)量。而前三潮菇單袋平均產(chǎn)量則以配方D 較高，為354.38 g，生物學(xué)效率112.86%?？梢姡瑧?yīng)用配方D栽培榆黃蘑能取得較高的產(chǎn)量和生物學(xué)效率。

3 小 結(jié)

榆黃蘑營(yíng)養(yǎng)豐富，味道鮮美、香味濃郁；富含蛋白質(zhì)、氨基酸、礦物質(zhì)、微量元素，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗疲勞、抗氧化、抗炎和抗衰老等生物活性[15]，深受國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者青睞[16]。開展榆黃蘑高產(chǎn)栽培技術(shù)研究具有重要意義。本研究所設(shè)計(jì)各母種培養(yǎng)基配方，以配方6（土豆100 g，蔗糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL，pH自然）表現(xiàn)菌絲生長(zhǎng)速度快，可作為母種快速培養(yǎng)基配方；配方2（紫薯100 g，葡萄糖10 g，瓊脂9 g，水500 mL，pH自然）雖然菌絲生長(zhǎng)速度較慢，但菌絲長(zhǎng)勢(shì)好，活力強(qiáng)，可作為維持母種活力的培養(yǎng)基配方。

表5 以木屑、麩皮為主的栽培配方的出菇表現(xiàn)

生產(chǎn)配方對(duì)榆黃蘑菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)量均有較大的影響。綜合考慮菌絲生長(zhǎng)速度、菌絲長(zhǎng)勢(shì)、產(chǎn)量等因素，在以玉米芯、麩皮為主的生產(chǎn)配方中，宜采用配方d（玉米芯66%，麩皮30%，石灰2%，石膏1%，蔗糖1%）；以木屑、麩皮為主的生產(chǎn)配方中，宜采用配方F（木屑58%，麩皮20%，棉籽殼20%，石灰1%，石膏1%）。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，以木屑為主和以玉米芯為主栽培榆黃蘑相比，以木屑為主的產(chǎn)量普遍較高；而以純木屑或純玉米芯為栽培料，生物學(xué)效率均較低。建議用棉籽殼與玉米芯、木屑等混合配料栽培榆黃蘑，若搭配得當(dāng)，則菌絲生長(zhǎng)速度快、滿袋時(shí)間短、子實(shí)體產(chǎn)量高、生物學(xué)效率也較高。

榆黃蘑在栽培過程中要因地制宜，充分利用生產(chǎn)資源，顧及經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益，優(yōu)化配方比例，應(yīng)用科學(xué)栽培技術(shù)，提高生產(chǎn)效益。