食品中修飾型真菌毒素及其同時檢測方法研究進(jìn)展

趙瓊暉,袁梓洢+,王宏菊,張建瑩

(深圳海關(guān)食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心,廣東深圳 518045)

食品在生產(chǎn)、貯存、運(yùn)輸、分配及加工過程中易被外源物污染,從而導(dǎo)致食品安全問題。真菌毒素是常見的污染物之一,它是真菌產(chǎn)生的有毒次級代謝產(chǎn)物,對人體和動物具有三致作用、免疫抑制作用和雌激素效應(yīng)等[1-2]。目前,很多國家和地區(qū)對食品中真菌毒素設(shè)定了限量。我國食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》(GB 2761-2017)規(guī)定了食品中黃曲霉毒素B1(aflatoxins B1,AFB1)、黃曲霉毒素M1(aflatoxins M1,AFM1)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)及玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)等限量[3]。

修飾型真菌毒素是真菌毒素在微生物[4]、植物[5]或動物[6]中經(jīng)代謝或修飾作用而生成的代謝或修飾產(chǎn)物,也包括食品加工過程中產(chǎn)生的各種產(chǎn)物。目前研究并未確證修飾型真菌毒素的毒性比原型毒素更大,但大量研究表明修飾型真菌毒素進(jìn)入人或動物體內(nèi)會被水解并釋放出原型毒素,成為潛在的風(fēng)險毒素[7-8]。一般地,食品更易受到多種修飾型真菌毒素或/和真菌毒素的侵染,而多種毒素共存可能會導(dǎo)致毒性附加或/和協(xié)同效應(yīng)[9-10]。

圖1 修飾型真菌毒素的分類Fig.1 The taxonomy of modified mycotoxins

因此對多種修飾型真菌毒素的同時檢測尤為必要。不過,修飾型真菌毒素比其原型毒素的極性強(qiáng),在常規(guī)的提取、凈化、檢測過程中易被漏檢[11],所以人們常低估食品中毒素的總含量。因此,監(jiān)測食品中修飾型真菌毒素的存在情況仍是確保食品安全和人及動物健康的重要任務(wù)。本文綜述了食品中修飾型毒素的形成和種類、毒性性質(zhì)及同時檢測方法,以期為進(jìn)一步研究食品中修飾型真菌毒素的存在情況、代謝特點(diǎn)和同時檢測技術(shù)提供一定的理論參考。

1 修飾型真菌毒素的形成及種類

修飾型毒素的來源之一是當(dāng)真菌毒素污染于動植物中,為了降低該毒素的毒害作用,受侵的動植物體會自發(fā)的發(fā)生脫毒反應(yīng)而形成修飾型真菌毒素[12]。以植物解毒代謝為例,植物解毒過程分為三個階段。第一階段又稱轉(zhuǎn)化階段,該階段主要是發(fā)生還原、氧化、乙?；退庾饔?生成對應(yīng)的一級代謝產(chǎn)物(修飾型);第二階段又稱結(jié)合階段,在相關(guān)酶的作用下,將第一階段的產(chǎn)物或母體真菌毒素與極性較強(qiáng)的物質(zhì)(如糖類[13]、硫酸鹽[14]和谷胱甘肽[15]等)相結(jié)合生成對應(yīng)的二級代產(chǎn)物(修飾型);第三階段是將上述的代謝產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)、貯存或沉積于細(xì)胞器中(如液泡、細(xì)胞壁等),實(shí)現(xiàn)空間上的隔離。目前公認(rèn)的修飾型真菌毒素分類見圖1[16]。真菌也能產(chǎn)生各種修飾型真菌毒素,如禾谷鐮刀菌,體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該菌能誘導(dǎo)ZEN的合成且伴隨著大量I和Ⅱ級代謝產(chǎn)物[17]。此外,修飾型毒素另一來源是各種食品加工技術(shù)所產(chǎn)生的真菌毒素相關(guān)代謝物[18-19]。

實(shí)際上,研究表明有超過400種不同化學(xué)結(jié)構(gòu)的真菌毒素,它們可由上述的途徑改性生成大量不同結(jié)構(gòu)的修飾型真菌毒素[20]。單端孢霉烯族毒素、伏馬毒素B(fumonisin B,FB)、ZEN和OTA的修飾型已被發(fā)現(xiàn)并鑒定,其分子結(jié)構(gòu)式見圖2[12,21-23]。目前在食品中發(fā)現(xiàn)的修飾型真菌毒素主要包括如下:

B型單端孢霉烯族毒素的修飾型,如DON的葡糖化產(chǎn)物(DON-3-葡萄糖苷(DON-3-glucoside,DON-3G)和DON-15-葡萄糖苷(DON-15G))[24]、雪腐鐮刀菌烯醇(nivalenol,NIV)的葡糖化產(chǎn)物(NIV-葡萄糖苷(NIV-G))、鐮刀菌酮X(fusarenone X,FUX)的葡糖化產(chǎn)物FUX-葡萄糖苷(FUX-G)[25]、DON的乙?；a(chǎn)物(3-乙?；?DON(3-acetyl-DON,3A-DON)和15-乙?；?DON(15A-DON)[24]、DON的硫酸鹽產(chǎn)物DON-3-硫酸鹽(DON-3S)和DON-15-硫酸鹽(DON-15S)[14]、去環(huán)氧-DON(Deepoxy-DON,DOM)[26]等。

ZEN的修飾型,如ZEN-4-葡萄糖苷(ZEN-4G)、ZEN-4-硫酸鹽(ZEN-4S)、α/β玉米赤酶烯醇(α/β-zearalenol,α/β-ZEL)、α/β-ZEL-葡萄糖苷(α/β-ZELG)等[24]。

A型單端孢霉烯族毒素的修飾型,如T-2-葡萄糖苷(T-2G)和HT-2-葡萄糖苷(HT-2G)[21]、3-乙?；?T-2(3A-T-2)和3-乙?；?HT-2(3A-HT-2)[27]等。

FB的修飾型,如水解FB1/FB2/FB3(hydrolyzed FB1/FB2/FB3,HFB1/HFB2/HFB3)、N-羧甲基FB1(N-carboxymethyl FB1,NCM-FB1)、N-脫氧果糖基FB1(N-deoxyfructosyl FB1,NDF-FB1)等[22]。

OTA的修飾型,如14R-OTA、14-脫羧酶-OTA、OTA-甲基-α-二氯吡喃酯、OTA-葡萄糖酯、OTA-纖維二糖酯等[23]。

圖2 食品中常見的修飾型真菌毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.2 Chemical structures of the most frequently occurring modified mycotoxins in food注:a:B型單端孢霉烯族毒素的修飾型;b:玉米赤霉烯酮類毒素的修飾型; c:A型單端孢霉烯族毒素的修飾型;d:水解伏馬毒素;e:赭曲霉毒素A的修飾型。

2 修飾型真菌毒素的毒性

目前對修飾型真菌毒素的毒理學(xué)性質(zhì)存在爭議和不確定性。從脫毒方面來看,一般認(rèn)為,修飾型真菌毒素的毒性比原型小,相關(guān)的報(bào)道也被證實(shí)。如在鐮刀菌污染的小麥中檢測到了植物的自然脫毒產(chǎn)物DON-硫酸酯,其毒性比原型小[14]。相似地結(jié)論也表明DON3G毒性偏低[28]。而且Lemmens等[29]發(fā)現(xiàn)DON能被葡萄糖糖基轉(zhuǎn)化酶催化生成DON-3G,同時也發(fā)現(xiàn)能將DON快速生成DON-3G能力的小麥品種通常對鐮刀菌有較高的抵抗性。另外,研究者通過烘烤和加熱處理制得的面包及其他谷物制品中發(fā)現(xiàn)了DON的異構(gòu)化代謝產(chǎn)物iso-DON和nor-DON,其毒性比原型DON低[30]。但與之相反的結(jié)論也被相繼報(bào)道。對于DON毒素代謝物,Broekaert等[31]報(bào)道DON及其修飾型毒素72 h暴露后的腸道上皮細(xì)胞毒性如下:DON3G?3A-DON

從修飾型真菌毒素的降解方面而言,大量研究稱在人和動物體內(nèi)修飾型真菌毒素能水解還原成原型真菌毒素。在體外模擬實(shí)驗(yàn)中,Dall’Erta等[33]首次證實(shí)了DON-3G、ZEN-4G和ZEN-4S可被人體消化道中腸道菌水解成原型及其他代謝產(chǎn)物(如DOM-1)。ZEN14G和ZEN16G也能在人體胃腸細(xì)胞內(nèi)發(fā)生脫糖基化反應(yīng)后生成母體毒素,增加總雌激素的負(fù)荷,且ZEN14G比ZEN16G更易水解,其原因可能是人體的細(xì)胞溶質(zhì)β-葡萄糖苷酶能裂解ZEN14G而無法裂解ZEN16G[34]。此外,人體和乳豬的喂食活體實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)了DON3G能在體內(nèi)消化系統(tǒng)中可快速水解成DON原型及其他代謝產(chǎn)物DOM-1和DON-葡萄糖醛酸[7,35]。所以,修飾型毒素可能具有直接的毒理學(xué)性質(zhì),實(shí)際上真實(shí)的毒素暴露水平會遠(yuǎn)大于目前檢測的量,故有必要將修飾型真菌毒素納入風(fēng)險評估研究中。FAO/WHO食品添加劑聯(lián)合專家委員會(JECFA)將DON-3G、3A-DON和15A-DON認(rèn)定為人體DON膳食暴露[36]。2016～2018年,歐洲食品安全局(EFSA)也相繼對ZEN[37]、DON[38]、NIV[39]、T-2、HT-2[40]和FB[41]及相關(guān)修飾型毒素的膳食暴露情況開展了相關(guān)風(fēng)險評估工作。

3 食品中修飾型真菌毒素的同時檢測

食品中修飾型真菌毒素的檢測過程一般包括取樣、均質(zhì)、提取、凈化、檢測和定量[1]。由于毒素的不同理化性質(zhì)和食品基質(zhì)的多樣性等,目前已發(fā)展出不同的提取方法、凈化方式和檢測技術(shù)。

3.1 提取方法

固-液體提取法(solid-liquid extraction,SLE)是使用溶劑的最傳統(tǒng)且最常用的食品樣品前處理技術(shù)之一。對極性較強(qiáng)的修飾型真菌毒素而言,常用的提取試劑為乙腈、甲醇、丙酮、二氯甲烷、氯仿和乙酸乙酯等有機(jī)溶劑。目前,有機(jī)溶劑與一定比例水或酸性緩沖溶液的混合提取液被大量應(yīng)用于修飾型真菌毒素的提取。水的加入可以充分浸潤樣品,促進(jìn)有機(jī)溶劑對樣品的滲透能力,尤其對易發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)的高淀粉、高蛋白樣品,如谷物及其制品等。乙腈和水(84∶16,v/v)[42]、甲醇和水(70∶30,v/v)[43]已用于提取谷物及其制品中多種毒素。pH對毒素的提取效率有影響[44]。一般加入適量的酸性溶液(乙酸或甲酸等)可以提高其回收率。如加入1%的乙酸可有效提取紅葡萄酒包括DON、ZEN及其隱蔽型在內(nèi)的36種毒素,回收率可高達(dá)120%[45]。FBs毒素屬酸性毒素,提取試劑為含0.1%甲酸的乙腈/水(99∶1,v/v)可使回收率提升至80%[46]。而對于脂肪含量較高的食品,推薦使用非極性溶劑如己烷和環(huán)己烷脫脂后再經(jīng)乙腈/水/乙酸(79∶20∶1,v/v/v)進(jìn)行提取[24]。另一方面,研究者也能通過間接法提取出食品基質(zhì)中的總毒素(母體和修飾型毒素)。Brya等[47]用氫氧化鉀堿水解玉米制品中的修飾型毒素后,再用二氯甲烷提取其中的總FBs毒素(母體和修飾型毒素)。

近年來,許多儀器自動溶劑提取方法在真菌毒素及修飾型毒素的分析中得到應(yīng)用。一般包括超臨界流體萃取(supercritical fluid extraction,SFE)、加速溶劑萃取和微波輔助提取等。與傳統(tǒng)方法相比,這些方法安全環(huán)保,效率高,但成本更高[1]。如Zougagh等[48]應(yīng)用SFE法對玉米粉中ZEN、α/β-ZEL毒素進(jìn)行提取。

3.2 凈化方式

為了更好的檢出目標(biāo)物,避免蛋白質(zhì)、脂類、有機(jī)酸、酚類和色素等基質(zhì)干擾成分的影響,通常會進(jìn)行凈化處理。目前,多功能凈化柱、固相萃取柱、免疫親和柱和凝膠滲透色譜凈化法在多種毒素凈化環(huán)節(jié)上的研究較多。Sun等[46]曾對比了多功能凈化柱、吸附粉和固相萃取柱對25種真菌毒素及其修飾型真菌毒素的凈化效果,結(jié)果顯示C18和氨基固相萃取柱更適用于多種毒素的同時凈化,但氨基柱不適用弱極性FBs和OTA兩種毒素的凈化。DON免疫親和柱對DON及其修飾型毒素(DON3G、15A-DON和3A-DON)有良好的交叉性,能有效評估樣品中DON的總含量(原型及修飾型)[49]。宮小明等[50]利用凝膠滲透色譜凈化法(層析柱:30 mm×210 mm,填料:Bio-Beads SX-3填料,流動相:乙酸乙酯/環(huán)己烷)成功凈化花生和玉米油中DON、3A-DON、15A-DON等18種真菌毒素,回收率達(dá)到80%～96%。

此外,QuEChERS技術(shù)是快速、簡單、便宜、有效、可靠、安全的前處理技術(shù),已被大量應(yīng)用于谷物及其制品[51]、堅(jiān)果[52]、啤酒[53]和芝麻醬[54]等不同食品基質(zhì)中多種毒素的同時提取和凈化。QuEChERS技術(shù)的提取凈化效果受樣品基質(zhì)、提取劑、鹽析劑、凈化劑等多個因素的影響[55]。C18是常使用的凈化劑,它通過非極性相互作用可以有效去除糖類和脂類物質(zhì)。但C18固相萃取柱對啤酒的凈化效果優(yōu)于花生等含脂高的食品[52-53]。不同凈化劑可以組合使用。C18和乙二胺-N-丙基硅烷(primary secondary amine,PSA)有效吸附綠茶中的有機(jī)酸、酚類和脂類[44]。與C18和Z-Sep+結(jié)合吸附劑相比,增強(qiáng)型脫脂吸附劑對堅(jiān)果食品凈化后基質(zhì)效應(yīng)更小,大多毒素基質(zhì)效應(yīng)小于±20%[52,56]?？傊?凈化方式的選擇和使用可根據(jù)具體食品基質(zhì)的特點(diǎn)和目標(biāo)毒素的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。但實(shí)際上目前的凈化方法很難完全去除干擾物,基質(zhì)效應(yīng)仍然存在,可能對方法的靈敏度和選擇性有一定的影響。

3.3 檢測技術(shù)

修飾型真菌毒素一般無法用常規(guī)檢測技術(shù)檢出,人們易低估其風(fēng)險和暴露水平。所以,建立一套能實(shí)現(xiàn)對其準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)和定性的檢測技術(shù)非常重要。如今研究者已成功報(bào)道了修飾型真菌毒素同時檢測的方法,其主要包括液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)和酶聯(lián)免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。

3.3.1 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 LC-MS是最常見的分析多種真菌毒素及其修飾型毒素的檢測方法。質(zhì)譜儀根據(jù)檢測器不同工作原理可分為三重四級桿-串聯(lián)質(zhì)譜儀(triple quadruole-mass spectrometry,QqQ-MS)、離子阱質(zhì)譜儀(iron trap-mass spectrometry,IT-MS)、飛行時間質(zhì)譜儀(time of flight-mass spectrometry,TOF-MS)和靜電場軌道阱質(zhì)譜儀(Orbitrap-mass spectrometry,Orbitrap-MS)。表1匯總了LC-MS同時檢測不同食品基質(zhì)中多種毒素的情況。

表1 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時檢測不同食品基質(zhì)中原型及修飾型真菌毒素Table 1 Simultaneous determination of mycotoxins and their modified metabolites in different food matrices by liquid chromatography-tandem mass spectrometry

注:-代表該值文獻(xiàn)中未提供。

QqQ-MS是日常真菌毒素檢測工作法定的標(biāo)準(zhǔn)方法[57],電噴霧正離子多反應(yīng)監(jiān)測模式(multiple reaction monitoring,MRM)能實(shí)現(xiàn)同步定量和定性,靈敏度高、選擇性強(qiáng),目前應(yīng)用較多。Blesa等[58]利用LC-QqQ-MS/MS檢測了80個小麥樣品中包括DON、3A-DON和15A-DON等在內(nèi)的18種毒素,所有分析物在20 min內(nèi)均有良好的色譜分離,定量限為1.0～250 μg/kg。Yang等[59]建立了UPLC-MS/MS快速測定雞肉、豬肉、雞肝和豬肝中單端霉烯族毒素及其主要代謝產(chǎn)物的分析方法。加標(biāo)樣品的平均回收率為74%～97%,方法的檢測限和定量限分別為3.0～15.0和10.0～50.0 μg/kg。UPLC-MS/MS適用于紅葡萄酒中36種真菌毒素和200種殺蟲劑的檢測,其中35種毒素的回收率為70%～120%[45]。

IT-MS是另一常見的低分辨儀器,因其特有的空間限定特點(diǎn),能實(shí)現(xiàn)多級質(zhì)譜分析,具有很強(qiáng)的物質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定能力。QqQ-MS與IT-MS復(fù)合質(zhì)譜系統(tǒng)可提高檢測靈敏度,因此LC-QTrap-MS/MS技術(shù)的使用較為常見。LC-QTrap-MS/MS適用于DON和ZEN原型及相關(guān)修飾型毒素的鑒定和檢測。小麥中發(fā)現(xiàn)兩種DON新型代謝產(chǎn)物DON-3S和DON-15S,該方法DON-3S和DON-15S檢出限可達(dá)到0.003和0.002 mg/kg[14]。它也適用于伏馬毒素類修飾型毒素的檢測。如Dall’Asta等[43]使用LC-QTrap-MS/MS方法在無麩質(zhì)食品中均檢測到HFBs(HFB1、HFB2和HFB3),其中零食食品中檢出的HFBs中位值高達(dá)1430 μg/kg。

但是上述兩種MS屬低分辨率,通常僅適用少量目標(biāo)化合物的分析。而且標(biāo)準(zhǔn)品的缺乏制約了大量修飾型真菌毒素的定量和檢測。為了減小食品基質(zhì)效應(yīng),一般通過同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)法或基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線解決,不過目前商業(yè)化的產(chǎn)品主要集中于DON、T-2和HT-2的修飾型毒素。

近年來,全掃描技術(shù)的發(fā)展彌補(bǔ)了低分辨質(zhì)譜技術(shù)的劣勢。高分辨質(zhì)譜(high resolution mass spectrometers,HRMS),如TOF-MS和Orbitrap-MS利用全掃描模式獲得高靈敏度,高分辨率(可達(dá)100000 FWHM),高質(zhì)量數(shù)精確度(<5 ppm)。與QqQ方法相比,LC-HRMS串聯(lián)法能進(jìn)行目標(biāo)分析、未知組分鑒定和數(shù)據(jù)分析溯源等[60]。LC-HRMS已被成為食品中多組分分析的利器[61]，已大量應(yīng)用于DON[62-63]和FUX[25]的修飾型毒素、ZEN的硫酸鹽[64]、H-2/HT-2的糖苷物[65]、FBs的水解產(chǎn)物[47]、OTA的多糖酯類[23]。同時,HRMS仍存在基質(zhì)效應(yīng),導(dǎo)致離子抑制或增強(qiáng)現(xiàn)象。不過,即使存在離子抑制現(xiàn)象,研究者也聲稱HRMS能通過寬的儀器動態(tài)范圍對不同理化性質(zhì)的55種真菌毒素、323種農(nóng)藥和11種植物毒素進(jìn)行高選擇性和高靈敏性的檢測[66]。此外,與Orbitrap/MS相比,TOF/MS更容易受到復(fù)雜基質(zhì)啤酒的干擾[67]。在實(shí)際應(yīng)用過程中,人們常將HRMS質(zhì)譜與其他質(zhì)量分析器質(zhì)譜聯(lián)用。HRMS與QqQ-MS結(jié)合能提高檢測準(zhǔn)確性和靈敏度。LC-Q-TOF/MS可快速篩查和確證小麥、玉米中13種毒素[68];UPLC-Q-Orbitrap-HRMS被應(yīng)用于谷物[69]、奶制品[26]和大豆食品[70]。另外,TOF-MS與IT-MS質(zhì)譜聯(lián)用時,可實(shí)現(xiàn)多級碎裂精確分析,提高真菌毒素結(jié)構(gòu)分析能力。如研究者利用LC-IT-TOF/MS方法發(fā)現(xiàn)了T-2、HT-2、DON、3A-DON和雪腐鐮刀菌醇(NIV)5種毒素的裂解規(guī)律。T-2和HT-2毒素使用[M+Na]+裂解模式,脫去異戊?；鸵宜峄瞧涑Ｒ姷牧呀馔緩?而DON、3A-DON和NIV使用[M-H]-模式,環(huán)氧裂解是三者的常見裂解途徑[71]。最后,TOF-MS與Orbitrap-MS結(jié)合能進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)高通量分析,它已被應(yīng)用于食品中3A-DON等200多種真菌毒素及代謝物的檢測[72]。

不過,高分辨質(zhì)譜在某些方面仍需提升。同量異位物的分離和鑒定存在難度,為了提高未知分子鑒定能力,離子遷移光譜法被推薦使用[73]。HRMS靈敏度低于QqQ法,檢出限偏高,少量樣品能被HRMS定量。此外,樣品經(jīng)HRMS方法檢測易出現(xiàn)較大未知的雜峰,檢測結(jié)果可能出現(xiàn)假陽性或假陰性。Kluger等[62]經(jīng)C13標(biāo)記內(nèi)標(biāo)法以鑒定小麥中各種新的未知脫毒產(chǎn)物。

3.3.2 酶聯(lián)免疫法 研究者也采用ELISA法來檢測修飾型毒素。相比LC-MS法,該法具有快速、易操作性、高特異性、高靈敏度和低成本等優(yōu)勢,更適宜大量樣品中修飾型毒素的快速定性篩查和現(xiàn)場檢測。Usleber等[74]通過免疫兔子獲得DON和3A-DON的抗體,并利用50%的抑制水平測定其交叉反應(yīng)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),DON抗體與3A-DON(100.0)和15A-DON(1.1)有較強(qiáng)的交叉反應(yīng)性(相對于DON=1.0),與NIV(0.063)和FUX(0.016)的交叉反應(yīng)性較小;3A-DON抗體對3A-DON具有明顯的特異性(3A-DON=1.0),與15A-DON(0.016)和DON(<0.001)僅有輕微的交叉反應(yīng)。在DON抗體基礎(chǔ)上,建立的直接ELISA檢測DON,3-A-DON和15-A-DON的檢出限分別為1.0、0.05和1.5 μg/mL;在3A-DON抗體基礎(chǔ)上,建立的直接ELISA法測定的3A-DON檢出限為0.1 μg/mL。但是,研究也指出制備的DON抗體一般會對3A-DON和15A-DON有不同程度的交叉反應(yīng),使得檢測的DON含量高于實(shí)際真實(shí)含量[75]。

綜上所述,因潛在的交叉反應(yīng),使得ELISA法測得的結(jié)果可能是母體毒素及多種修飾型毒素的總含量。因此ELISA法更適用毒素風(fēng)險的快速篩查,對陽性結(jié)果則需通過其他方法(如LC-MS/MS)進(jìn)行驗(yàn)證。

4 結(jié)論與展望

近年來,修飾型真菌毒素的“隱蔽性”愈發(fā)吸引研究者的關(guān)注和探究。目前食品中主要發(fā)現(xiàn)了五大類真菌毒素的相關(guān)修飾型毒素,其中單端孢霉烯族毒素和ZEN毒素在毒性和同時檢測方面研究最多,而經(jīng)葡糖化、酰基化和硫酸鹽作用產(chǎn)生修飾型毒素的研究最為明晰。不過,國內(nèi)外對修飾型真菌毒素的認(rèn)識不足,部分修飾型真菌毒素,甚至國內(nèi)外都缺乏檢測方法。而且由于其數(shù)量多、結(jié)構(gòu)多樣且商業(yè)化標(biāo)準(zhǔn)品缺乏等導(dǎo)致檢測技術(shù)有待提升。另外,大多修飾型毒素毒性研究偏少,如T-2和HT-2的糖苷類產(chǎn)物是否在動物體內(nèi)存在降解代謝仍存疑。從食品中毒素污染情況來看,目前仍集中于谷物及其制品中,對豆類等農(nóng)產(chǎn)品研究不多。而且對于加工類食品,其加工工藝的不同是否會影響修飾型毒素的產(chǎn)生或產(chǎn)生的組分種類和含量是否存在差異還未可知。綜上,修飾型毒素已廣泛存在于食品中,對人和動物的健康存在潛在的安全風(fēng)險。研究者已在修飾型毒素的來源、污染情況、毒理學(xué)性質(zhì)和檢測方法等方面取得了一定的成果,但是仍存在很多的挑戰(zhàn)。不過,相信經(jīng)過研究者的努力,人們可以更合理地評估隱蔽型真菌毒素的風(fēng)險及對該類毒素采取調(diào)控措施。