分子檢測在甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性診斷中的研究進展

韓曉娜，羅曉茂

(昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院超聲醫(yī)學(xué)科，昆明 650118)

近年來全球范圍內(nèi)甲狀腺癌的發(fā)病率快速上升，根據(jù)美國國家癌癥研究所的調(diào)查顯示,1975年甲狀腺癌的發(fā)病率為4.85/10萬人，而2012年為14.90/10萬人[1]。中國甲狀腺癌的發(fā)病率也呈上升趨勢，特別是沿海地區(qū)[2]，根據(jù)2018年我國國家癌癥登記中心發(fā)表的截至2014年的數(shù)據(jù)顯示，甲狀腺癌在女性癌癥中居第四位，位于乳腺癌、肺癌及結(jié)直腸癌之后[3]。其發(fā)病率的增加在很大程度上歸因于超聲等影像學(xué)檢查設(shè)備的改進和體檢的普及，導(dǎo)致甲狀腺微小乳頭狀癌(腫瘤大小<1 cm)的檢出率增加。甲狀腺結(jié)節(jié)是臨床的常見病變，臨床醫(yī)師需對甲狀腺結(jié)節(jié)的惡性風(fēng)險進行分層，最主要的內(nèi)容就是區(qū)分結(jié)節(jié)的良惡性，進而指導(dǎo)患者的下一步診療(隨訪、活檢或手術(shù))。超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(fine needle aspiration，F(xiàn)NA)對甲狀腺結(jié)節(jié)診斷的作用甚至可以媲美甲狀腺活組織檢查，但仍有25%～30%的FNA樣本診斷不明確，這一部分為“不確定細(xì)胞學(xué)”，即意義不明的非典型或濾泡狀病變 (FNA Ⅲ類)和濾泡狀腫瘤或可疑濾泡狀腫瘤(FN/FNA Ⅳ類)，以上均有不能忽略的惡性風(fēng)險(10%～30%和25%～40%)[4-5]。在一項Meta分析中，在所有切除的結(jié)節(jié)中，1/3為惡性腫瘤，1/2為FNA不確定結(jié)節(jié)，其中67%的結(jié)節(jié)術(shù)后證實為良性[6]。而過度治療將導(dǎo)致患者面臨短期和長期的手術(shù)并發(fā)癥，部分患者面臨終身甲狀腺激素替代治療。以上情況為一些分子檢測技術(shù)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。近年來，對甲狀腺腫瘤的分子病理學(xué)研究已經(jīng)比較清楚，隨著下一代DNA和RNA測序技術(shù)的引入，分子病理學(xué)技術(shù)取得了重大進展。目前，分子檢測可以在FNA的基礎(chǔ)上提高甲狀腺結(jié)節(jié)術(shù)前診斷的準(zhǔn)確性，更準(zhǔn)確地劃分結(jié)節(jié)的惡性風(fēng)險，特別是能優(yōu)化FNAⅢ和FNAⅣ類結(jié)節(jié)的惡性風(fēng)險分層，以避免對良性結(jié)節(jié)進行不必要的手術(shù)處理，并防止惡性結(jié)節(jié)的再次手術(shù)。多分子聯(lián)合診斷可大大提高診斷的準(zhǔn)確率,為患者提供更好的預(yù)后管理?，F(xiàn)就目前分子檢測技術(shù)在甲狀腺結(jié)節(jié)診斷和預(yù)后方面的應(yīng)用予以綜述。

1 BRAF V600E突變

BRAF V600E是甲狀腺癌中最常見的基因突變。研究發(fā)現(xiàn)，BRAF突變發(fā)生在35%～65%的乳頭狀甲狀腺癌(papillary thyroid carcinoma，PTC)病例中[7-8]。BRAF V600E測試可以幫助明確不確定結(jié)節(jié)的性質(zhì)，為不確定結(jié)節(jié)的診斷提供一種更具成本效益的方法，尤其是在缺乏復(fù)雜分子測試的地區(qū)。有證據(jù)表明，BRAF V600E突變可能與預(yù)后較差和更有侵略性的腫瘤行為有關(guān)，如甲狀腺外浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)[9]。此外，BRAF V600E突變被證明是PTC復(fù)發(fā)的一個獨立預(yù)測因子，并與癌癥相關(guān)死亡率的增加有關(guān)[10]。該突變可指導(dǎo)PTC的診斷和治療方案的選擇[11]。有研究對BRAF V600E突變進行了評估，結(jié)果顯示，其對非典型或濾泡性病變、濾泡性腫瘤和可疑濾泡性腫瘤的陽性預(yù)測值(positive predictive value，PPV)分別為88%、87%和95%[12]。在一項包含581例BRAF陽性病例的薈萃分析中，580例為PTC，經(jīng)FNA檢測BRAF陽性結(jié)節(jié)的惡性率為99.8%[13]。盡管BRAF V600E具有較高的特異性，但單憑BRAF V600E突變不太可能提供甲狀腺癌變的全貌，因此BRAF V600E突變作為不確定結(jié)節(jié)的單一篩選指標(biāo)價值有限，與其他甲狀腺癌相關(guān)基因突變結(jié)果進行整合可能會提高診斷效能。

2 RAS突變

RAS突變在其他系統(tǒng)腫瘤中被認(rèn)為是致癌的，但在甲狀腺結(jié)節(jié)中的作用存在爭議，因為RAS突變在良惡性病變中均有發(fā)現(xiàn)。RAS突變是甲狀腺癌第二大常見突變，由于點突變引起RAS蛋白質(zhì)本構(gòu)激活會導(dǎo)致異常信號和途徑的活化，從而導(dǎo)致潛在的腫瘤形成，并向惡性轉(zhuǎn)化[14]。RAS突變(HRAS、NRAS和KRAS)常與濾泡狀甲狀腺癌(follicular thyroid carcinoma，F(xiàn)TC)相關(guān)，是FTC最常見的突變，在FTC中的發(fā)生率為40%～50%[15]。Lee等[16]的研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后確診為濾泡型甲狀腺乳頭狀癌(follicular variant of papillary thyroid carcinoma，F(xiàn)VPTC)的病例中，術(shù)前細(xì)胞學(xué)診斷為FNAⅡ類的結(jié)節(jié)RAS突變率為67%,FNAⅢ類為56%和FNAⅣ類為63%。以上數(shù)據(jù)表明，RAS突變分析可作為一個術(shù)前輔助測試以降低假陰性率。RAS突變可以鑒別風(fēng)險較低的結(jié)節(jié)，并可作為潛在惡性腫瘤的標(biāo)志物。大部分存在RAS突變體的惡性腫瘤為FVPTC，尤其是包膜性和非侵襲性濾泡型甲狀腺腫瘤，其惡性潛能非常低，通常在腺葉切除術(shù)后不建議行進一步的治療[15，17-19]。即使組織學(xué)檢查為良性濾泡型腺瘤，因RAS突變引起的潛在惡性轉(zhuǎn)化風(fēng)險也是接受手術(shù)治療的原因之一，因此對甲狀腺結(jié)節(jié)進行RAS分析可以為患者提供更個性化的治療建議。

3 RET/PTC重排

RET原癌基因編碼酪氨酸激酶受體蛋白，該蛋白僅存在于甲狀腺的癌旁C細(xì)胞，通常作用于細(xì)胞膜，使細(xì)胞表面受體蛋白不被甲狀腺濾泡細(xì)胞表達。當(dāng)一個基因的一個特定區(qū)域與另一個供體基因的一個區(qū)域互換時就會發(fā)生重排，RET基因與另一種不相關(guān)的基因融合形成RET/PTC重排。在10%～20%的PTC中可觀察到RET/PTC重排，目前已發(fā)現(xiàn)15種RET/PTC重排類型，包括RET和10種不同的基因，其中RET/PTC1和RET/PTC3與PTC的關(guān)系密切，并與是否存在放射性接觸密切相關(guān)[20-21]。Rabes等[22]對191例幼年時暴露于切爾諾貝利反應(yīng)堆的PTC患者進行研究發(fā)現(xiàn)，有62.3%的患者存在RET基因重排，其中PTC3明顯多于PTC1，輻射導(dǎo)致兒童PTC中RET基因重排比例很高。在癌癥基因組圖譜中發(fā)現(xiàn)，在484例PTC患者中有15.3%存在RET/PTC重排[23]。與RET/PTC重排陰性結(jié)節(jié)相比，RET/PTC陽性結(jié)節(jié)的生長速度更快；與其他突變的甲狀腺癌相比，PTC合并RET/PTC重排具有較高的局部延伸率和淋巴結(jié)累及率[24]。RET/PTC重排陽性影響促甲狀腺激素的治療效果，有可能成為一種可以評價促甲狀腺激素療效的指標(biāo)。甲狀腺髓樣癌(medullary thyroid carcinoma，MTC)占甲狀腺惡性腫瘤的2%～4%，在95%以上的病例中，髓樣癌常表現(xiàn)出RET/PTC易位，RET基因突變是MTC預(yù)后不良的重要指標(biāo)[25]?？紤]到RET/PTC重排在良性結(jié)節(jié)中也能觀察到，因而其并不是診斷PTC的特異性指標(biāo)，所以RET/PTC重排作為PTC預(yù)后標(biāo)志物仍存在爭議。

4 配對盒基因8抗體-過氧化物酶體增殖物激活受體

配對盒基因8抗體(pairing box gene 8 antibody,PAX8)基因編碼是一種有助于甲狀腺濾泡細(xì)胞形成的轉(zhuǎn)錄因子，PAX8驅(qū)動許多甲狀腺特異性基因的表達，如甲狀腺球蛋白、甲狀腺過氧化物酶。過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator activated receptor,PPAR)γ是核受體家族轉(zhuǎn)錄因子之一,是脂肪生成的主要調(diào)節(jié)因子，同時也是全身脂質(zhì)代謝和胰島素敏感性的有效調(diào)節(jié)因子[26]。PAX8與PPARγ基因的融合被認(rèn)為是FTC進展早期的一種突變[27-29]。PAX8-PPARγ融合基因在30%～35%的FTC以及一些濾泡性變異PTC中發(fā)現(xiàn)，也見于一些濾泡型腺瘤，該融合基因?qū)е翽AX8-PPARγ融合蛋白產(chǎn)生，陽性提示結(jié)節(jié)惡性風(fēng)險高且需要手術(shù)治療，其為FNA不確定結(jié)節(jié)的性質(zhì)及手術(shù)提供了證據(jù)[26]。年輕FTC患者PAX8-PPARγ陽性的特點是腫瘤呈實性，易侵犯血管。另外，在濾泡型腺瘤中雖然檢測到PAX8-PPARγ陽性率較低，但仍需要進行組織病理學(xué)檢查。因此，識別PAX8-PPAR融合蛋白(以及其他驅(qū)動突變)是改善甲狀腺結(jié)節(jié)活檢結(jié)果不確定患者臨床決策的一個有效方法。

5 基因組檢測

美國甲狀腺協(xié)會和歐洲甲狀腺協(xié)會指南均提出，術(shù)前FNA為Ⅲ、Ⅳ類者考慮檢測BRAF、RAS、RET/PTC、PAX8-PPARγ等基因[30-31]，BRAF、RAS、RET/PTC和 PAX8-PPARγ基因的改變可見于70%甲狀腺癌[32]，這已在組織學(xué)上證實。一項前瞻性研究比較了細(xì)胞學(xué)聯(lián)合RET/PTC、BRAF、PAX8-PPARγ和RAS等突變分子檢測，結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測使FNA對惡性甲狀腺結(jié)節(jié)的靈敏度從44%提高至80%[33]。另一項研究將細(xì)胞學(xué)與分子檢測(檢測細(xì)胞學(xué)上PAX8-PPARγ、BRAF、RAS和RET突變)相結(jié)合，診斷惡性腫瘤的靈敏度從60%提高至90%[34]。以上研究表明，突變的存在可以很好地預(yù)測惡性腫瘤的發(fā)生。甲狀腺結(jié)節(jié)的FNA檢測到PTC和FTC的幾種基因突變，可用于改善甲狀腺結(jié)節(jié)患者的癌癥診斷和治療，但是這些基因突變單獨診斷的價值有限，需要進行聯(lián)合測試以獲得更準(zhǔn)確的診斷和預(yù)后信息，因此衍生出了基因組檢測，這是目前對 FNA Ⅲ、Ⅳ類結(jié)節(jié)最有力的分子診斷，這些突變中的任何一個均可為甲狀腺惡性腫瘤的診斷提供強有力的指示，并幫助Ⅲ、Ⅳ類結(jié)節(jié)改善臨床管理。

6 The Afirma基因表達分類器

The Afirma基因表達分類器(gene expression classifier，GEC)是一種檢測142個特定基因相關(guān)信使RNA的表達以診斷不確定結(jié)節(jié)的專用測試[35]，這個測試對不滿足手術(shù)條件的FNA不確定結(jié)節(jié)非常有用，如結(jié)節(jié)太小、患者拒絕手術(shù)或無癥狀甲狀腺腫。目前GEC是美國應(yīng)用最廣泛的分子檢測方法，有助于臨床醫(yī)師對甲狀腺FNA Ⅲ類、Ⅳ類結(jié)節(jié)進行手術(shù)或隨訪[36]。有醫(yī)療機構(gòu)使用GEC進行FNA Ⅲ類和Ⅳ類結(jié)節(jié)的排除測試，良性結(jié)果意味著患惡性腫瘤的風(fēng)險為5%～6%，該機構(gòu)的The Afirma GEC總靈敏度為95.7%，總特異度為30.5%[37]。另有研究顯示，在Ⅳ類結(jié)節(jié)中，GEC檢測具有較高的陰性預(yù)測值(negative predictive value，NPV)，可將惡性腫瘤的風(fēng)險降低至5%～6%，等同于活檢為良性[25]，因此對于FNA Ⅳ類結(jié)節(jié)，GEC檢測為良性則無需手術(shù)。除此之外，2014年添加了Afirma MTC和Afirma BRAF這兩個信使RNA分類器，用于識別髓樣癌[38]和BRAF[39]的基因表達特征。截至目前，有研究表明GEC的靈敏度(98%)、特異度(>99%)、PPV(98%)、NPV(>99%)均非常高，但仍需進一步驗證[40]。甲狀腺髓樣癌并不常見，對于其FNA診斷的準(zhǔn)確率相對較低，尤其是與嗜鉻細(xì)胞瘤相關(guān)時，Afirma MTC作為髓樣癌的術(shù)前檢測有很大的發(fā)展空間和潛力。綜上所述，對于GEC結(jié)果良性和細(xì)胞學(xué)結(jié)果良性的結(jié)節(jié)可進行類似的臨床管理。

7 下一代測序

下一代測序(nextgen sequencing,NGS)是一種較為準(zhǔn)確、靈敏的基因測序方法，與Sanger測序等傳統(tǒng)測序方法相比，NGS允許高通量的多基因同步目標(biāo)測序，只需要非常少的DNA，在總體上是更經(jīng)濟有效的方法。

7.1ThyroSeq Nikiforova等[40]制訂了一個NGS檢測小組，即初代ThyroSeq:將已知與甲狀腺癌發(fā)生有關(guān)的12個基因中的284個突變熱點作為對象，該檢測包括已知與甲狀腺癌相關(guān)的最常見突變以及潛在侵襲性腫瘤的標(biāo)志物，如腫瘤蛋白53 (tumor protein 53，TP53)和端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(telomerase reverse transcriptase，TERT)[40]。一項關(guān)于247例FNAⅣ類甲狀腺結(jié)節(jié)患者的初步研究報道了ThyroSeq的性能參數(shù)，包括靈敏度(57%)、特異度(97%)、準(zhǔn)確度(86%)、NPV(86%)和PPV(87%)[12]。Moore等[41]認(rèn)為，即使等位基因頻率低至3%時，ThyroSeq仍能提供突變等位基因的定量評估。對于具有“陽性”ThyroSeq結(jié)果的結(jié)節(jié)，突變的類型和組合可以預(yù)測癌癥的發(fā)生率，也可以評估癌癥風(fēng)險。因此，結(jié)合臨床表現(xiàn)可能有助于醫(yī)師選擇最合適患者的手術(shù)方式。

7.2Thyroseq v2.0 Thyroseq v2.0可用于檢測14個基因中的點突變和小插入/缺失、42種基因融合、16個基因表達水平的改變，對于這些基因改變的選擇是基于對90%的乳頭狀癌和其他甲狀腺癌的突變熱點和基因融合的分析[23]。TERT和TP53突變是無病生存的獨立預(yù)測因子。TP53突變發(fā)生在腫瘤進展晚期，最常見于低分化和間變性甲狀腺癌，這些甲狀腺癌起源于分化良好的PTC[42]。TERT突變與FTC和FVPTC有關(guān)，并與更具侵襲性的行為有關(guān)[43]。Xu等[44]證實了TERT突變與遠處轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并認(rèn)為TERT可能是更可靠的長期預(yù)后預(yù)測因子。甲狀腺癌最差的分子檢測結(jié)果為BRAF和RAS突變合并TERT、TP53、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亞單位α或蛋白激酶B1突變[45-46]，存在這種突變的腫瘤可能受益于甲狀腺全切。Nikiforov等[47]用Thyroseq v2.0檢測143例FNAⅣ類甲狀腺結(jié)節(jié)患者發(fā)現(xiàn)，其靈敏度為90%，特異度為93%，PPV為83%，NPV為96%。Nikiforov等[48]用ThyroSeq v2.0評估了465例FNAⅢ類甲狀腺結(jié)節(jié)患者，結(jié)果顯示，Thyroseq v2.0的特異度為92.1%，靈敏度為90.9%，準(zhǔn)確度為91.8%，PPV為76.9%，NPV為97.2%。由于Thyroseqv2.0的高靈敏度以及在癌癥檢測中表現(xiàn)出較高的PPV，Thyroseqv2.0可作為細(xì)胞學(xué)不確定結(jié)節(jié)的“rule-in”和“rule-out”檢驗[37],Thyroseqv2.0在ThyroSeq的基礎(chǔ)上不僅提高了鑒別甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)診斷的準(zhǔn)確率，也可用于發(fā)現(xiàn)甲狀旁腺疾病。

7.3ThyroSeq v3.0 ThyroSeq v3.0檢測擴大了ThyroSeq v2.0檢測的面板，檢測了112個基因的DNA或RNA，包括ThyroSeq v2.0中所有的基因，并檢測12 135個單核苷酸變異、插入和缺失，超過120種基因融合,19種基因表達水平的改變,FNA樣品中10個基因組區(qū)域拷貝數(shù)的變化，組織樣本中的27個基因組區(qū)域[37],同時也提高了檢測Hurthle細(xì)胞病變的準(zhǔn)確性[49]。ThyroSeq v3.0檢測對Hurthle細(xì)胞良惡性病變的靈敏度為92.9%，特異度為69.3%[37]。對224例FNAⅢ和Ⅳ類病例的研究顯示，ThyroSeq v3.0檢測的靈敏度為94%，特異度為82%，其最大優(yōu)勢在于NPV達97%以上[50-51]，這意味著檢查結(jié)果為陰性時，診斷性手術(shù)的必要性大大降低，與現(xiàn)有的分子檢測相比進一步提高了癌癥檢測的靈敏度。此外，ThyroSeq v3.0也保留了準(zhǔn)確檢測甲狀腺髓樣癌和甲狀旁腺結(jié)節(jié)的功能。

8 微RNA分析

基于微RNA(microRNA,miRNA)的分析方法被稱為RosettaGX Reveal，是一種商業(yè)上可用的方法，其將不確定的甲狀腺結(jié)節(jié)分為良性、可疑惡性或惡性。miRNA是一種小型的非編碼RNA，長度約為23個核苷酸，miRNA的失調(diào)可能導(dǎo)致包括甲狀腺癌在內(nèi)的多種實體腫瘤的發(fā)生和進展。Yu等[52]發(fā)現(xiàn)，PTC患者的血清中有3種miRNAs(let-7e、miR-151-5p和miR-222)，與健康受試者和良性結(jié)節(jié)患者相比存在明顯的過表達。研究表明，miRNA分析診斷FNA Ⅲ～Ⅳ類甲狀腺結(jié)節(jié)的靈敏度為100%，特異度為80%[53]。

Cantara等[54]首次對白種人分化型甲狀腺癌或良性甲狀腺腫患者及健康人血清中miRNA的表達譜進行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在白種人甲狀腺結(jié)節(jié)病患者的血清中miR-190和miR-95聯(lián)合可以準(zhǔn)確識別惡性風(fēng)險高的結(jié)節(jié)。Pilli等[55]認(rèn)為，血清miR-95和miR-190聯(lián)合檢測是一種準(zhǔn)確、無創(chuàng)的甲狀腺結(jié)節(jié)鑒別診斷工具?；趍iRNA的分子檢測通常是多種分析和(或)臨床性能特征的組合，很大程度上能指導(dǎo)患者避免不必要的手術(shù)。

ThyGenX TEST使用七基因小組(BRAF、KRAS、NRAS、HRAS、RET/PTC1、RET/PTC3、PAX8/PPARγ)為平臺,增加了對磷脂酰肌醇-3-激酶催化亞單位α基因的分析，并使用NGS平臺識別超過100個與甲狀腺惡性腫瘤相關(guān)的基因改變，只有被診斷為Bethesda Ⅲ類和Ⅳ類的病例才能接受ThyGenX分析。而ThyraMIR測試則是基于分析10種不同miRNAs的一項測試,這10個miRNAs包括miR-29b-1-5p、miR-31-5p、miR-138-1-3p、miR-139-5p、miR-146b-5p、miR-155、miR-204-5p、miR-222-3p、miR-375、miR-551b-3p[56]，ThyGenX檢測結(jié)果為陰性時，miRNA檢測能正確識別出ThyGenX突變陰性標(biāo)本中64%的惡性病例和98%的良性病例[57]。研究表明，miRNA分子參與甲狀腺異常的細(xì)胞周期進展、分化和增殖，在FNA Ⅲ類和Ⅳ類結(jié)節(jié)中miRNA具有潛在的診斷價值[58]。Interpace公司提倡ThyGenX和ThyraMIR結(jié)合使用對FNA Ⅲ和Ⅳ類不確定結(jié)節(jié)進行進一步診斷，與ThyGenX聯(lián)合使用時，ThyraMIR診斷不確定FNA樣本的特異度為89%，靈敏度為85%，NPV為94%,PPV為74%；在32%的癌癥患病率中，61%的分子結(jié)果為良性，NPV為94%，PPV為74%，當(dāng)兩項測試結(jié)果均為陰性時，在潛在惡性率為32%的環(huán)境中，這種情況剩余的癌癥風(fēng)險非常低(6%)，若排除癌癥患病率的影響，相較GEC，該測試將真實的良性結(jié)果提高了65%，并將可避免的診斷性手術(shù)率降低了69%[56]?；诙嗥脚_和RNA檢測具有較高的PPV和NPV，對陽性(惡性)結(jié)果的患者可以進行手術(shù)治療，而陰性(良性)結(jié)果的患者可以采用積極隨訪這種更保守的治療方法而不進行手術(shù)治療。雖然目前全球已有很多研究數(shù)據(jù)說明上述分子檢測平臺對甲狀腺結(jié)節(jié)的良惡性診斷有重要作用，但為了確定ThyGenX和ThyraMIR平臺如何有效和準(zhǔn)確區(qū)分良性和腫瘤性甲狀腺結(jié)節(jié)，仍需進一步臨床驗證。

9 展 望

FNA和分子檢測的目標(biāo)均是為了提高甲狀腺結(jié)節(jié)診斷和預(yù)后評估的準(zhǔn)確性，以及協(xié)助臨床醫(yī)師在術(shù)前更有效的管理甲狀腺結(jié)節(jié)。甲狀腺分子檢測是一個快速發(fā)展的領(lǐng)域，分子檢測降低了不確定甲狀腺結(jié)節(jié)的手術(shù)率，在減少甲狀腺結(jié)節(jié)診斷的不確定性方面顯示出巨大的潛力。上述大部分檢測方法在術(shù)前均可以利用小樣本的DNA、RNA或從FNA抽吸物中提取的miRNA進行檢測。

分子檢測已從單基因檢測發(fā)展到小型、大型的多面板突變分析，實現(xiàn)高NPV仍然是分子測試的一個關(guān)鍵目標(biāo)。不同的檢測方法有其各自的優(yōu)勢和局限性，這些分子檢測技術(shù)最顯著的局限性為分子檢測結(jié)果為良性的甲狀腺結(jié)節(jié)很少被切除，缺乏長期的隨訪，因此在臨床實踐中這些檢查的假陰性率未知。目前使用分子檢測指導(dǎo)治療的數(shù)據(jù)仍不夠充分，建議進行更多來自更大樣本和更長隨訪時間的隊列研究，同時強烈建議密切監(jiān)測分子檢測結(jié)果為陰性的結(jié)節(jié)?；蚋淖兪菍?dǎo)致患者患惡性腫瘤的眾多因素之一，盡管分子檢測有助于甲狀腺結(jié)節(jié)管理，但現(xiàn)臨床上仍不能單獨以分子檢測的結(jié)果來診斷結(jié)節(jié)的性質(zhì)。因此，分子檢測應(yīng)始終與細(xì)胞學(xué)、臨床和超聲檢查結(jié)果相結(jié)合。雖然目前甲狀腺癌的分子診斷學(xué)尚未完全了解，但在這一領(lǐng)域所取得的顯著進展拓寬了甲狀腺癌的診斷、治療和預(yù)后的視野。