雞新城疫抗體檢測(cè)技術(shù)在診斷中的應(yīng)用

韋成威，劉正超

（1.河池市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 547000；2.河池市金城江區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 547000）

雞新城疫俗稱雞瘟， 該疾病在一年四季均有可能發(fā)生，氣候寒冷以及多變的季節(jié)更容易出現(xiàn)。 由于該疾病傳染性強(qiáng)，同時(shí)死亡率高，所以當(dāng)前很多養(yǎng)殖人員也十分重視該疾病的防疫，同時(shí)當(dāng)前也是十分重視動(dòng)物疫病的檢測(cè)工作， 應(yīng)用各項(xiàng)抗體檢測(cè)技術(shù)，去做好疾病的診斷和治療。

1 臨床癥狀

雞新城疫一旦發(fā)病，呈現(xiàn)群發(fā)的狀態(tài)，各個(gè)年齡階段的雞，都有可能感染此疾病。 且主要的臨床癥狀有：呼吸困難、體溫升高，腹瀉且會(huì)排出黃白色、黃綠色以及綠色的糞便。 還有一部分表現(xiàn)為神經(jīng)性癥狀，雙腿麻痹，站立困難等。 嗉囔內(nèi)常充滿液體及氣體，口中還有酸臭液體。 黏膜和漿膜有出血癥狀，發(fā)病率和死亡率在90%以上。 該疾病的潛伏期在2～15d，雞在感染之后，會(huì)咳嗽氣喘，頭頸伸直，食欲銳減且日漸消瘦。

2 剖檢變化

通過剖檢能夠發(fā)現(xiàn)患病雞的喉部、氣管出血，氣管中也有少量的黏液，在小腸的前部分、小腸近盲腸的部分還有十二指腸的位置有點(diǎn)狀和斑塊狀的出血，嚴(yán)重的病例還有潰瘍存在。 脾臟腫大且有白色的壞死點(diǎn)，肝臟、肺臟、腎臟基本上正常，沒有明顯的變化。 同時(shí)也能夠見到其身體的各處黏膜和漿膜出血，盲腸、扁桃體出血、腫脹，心冠脂肪、外心膜點(diǎn)狀出血[1]。

3 雞新城疫的實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 細(xì)菌涂片和分離培養(yǎng)

對(duì)雞新城疫做好確診， 除了結(jié)合具體的臨床特征之外，還需要結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行確診。 我們可以取病死雞的脾臟、肝臟或是腦部組織制作接觸片， 之后用美蘭染色以及革蘭氏染色法進(jìn)行鏡檢，觀察有無細(xì)菌。 或是取上述組織分別接種普通瓊脂平板、SS 瓊脂平板、血清瓊脂平板，置于37℃的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，24h 之后觀察是否有細(xì)菌生長。

3.2 病毒分離

首先，進(jìn)行病毒分離工作，在無菌的狀態(tài)下，取剛剛死亡的雞脾臟、腦部等組織，將其剪碎、研磨之后凍融兩次，之后用無菌生理鹽水進(jìn)行稀釋，4000r/min 離心15min，取上清液，放置4℃冰箱作用4～12h，以作備用。

其次，進(jìn)行雞胚接種，將雙抗處理的病料上清液通過尿囊腔接種30 枚11 日齡的SPF 雞胚，劑量為0.2mL，之后用石蠟封孔，繼續(xù)孵化，去除24h 之內(nèi)死亡的雞胚，之后每3h 照蛋一次，同時(shí)將死亡雞胚放置在冰箱中冷藏備用。

再次，做病毒鑒定。 首先先做病毒血凝實(shí)驗(yàn)，取雞胚接種分離的尿囊液作血凝實(shí)驗(yàn)，用微量法在血凝版上做倍比稀釋，之后設(shè)置生理鹽水對(duì)照孔，之后向孔內(nèi)加1%的雞紅細(xì)胞，搖均，之后進(jìn)行觀察。 若是生理鹽水對(duì)照孔中的紅細(xì)胞成為明顯的紐扣狀沉到孔底的時(shí)候判斷結(jié)果，若病毒存在凝集性，那么說明病死雞的病原體也具有血凝性。

3.3 抗體檢測(cè)

抗體檢測(cè)需要對(duì)雞進(jìn)行ND 抗體檢測(cè)， 檢測(cè)是否存在抗體異常升高的情況，之后結(jié)合臨床表現(xiàn)以及剖檢變化等，檢測(cè)是否感染病毒。

4 急救措施

一旦在養(yǎng)殖區(qū)域中發(fā)現(xiàn)雞新城疫患病病例， 需要及時(shí)隔離和淘汰患病雞，同時(shí)對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境進(jìn)行消毒和清潔。 對(duì)于病死雞，要做好無害化處理，避免造成二次感染。 對(duì)于沒有出現(xiàn)感染的病例，需要做好緊急接種，依據(jù)實(shí)際情況，選擇免疫方式。 避免應(yīng)激反應(yīng)對(duì)雞生長的影響。 患病雞不能急性接種，但是可以進(jìn)行抗血清治療，避免繼發(fā)感染。 或是在飼料和水中加入適量的抗菌類藥物[2]。

5 應(yīng)用

要在養(yǎng)殖區(qū)域中開展ND 抗體檢測(cè)， 不斷提高免疫接種的質(zhì)量，避免漏針情況的出現(xiàn)。 具體的免疫程度有：在雞7～10 日齡中，可以進(jìn)行首次免疫，用NDII 系或IV 系滴鼻點(diǎn)眼。 在20～25日齡之后，用II 系或IV 系疫苗進(jìn)行第二次滴鼻點(diǎn)眼，配合0.3mL ND 油乳劑滅活苗，可以進(jìn)行皮下注射或是肌肉注射。 在60 日齡的時(shí)候， 需要進(jìn)行1 次弱毒或是聯(lián)苗注射，120 日齡注射油苗或聯(lián)苗注射。

要依據(jù)雛雞實(shí)際的生長狀況來確定首次免疫的日齡， 在做好首次免疫的時(shí)候，需要做定期抽檢，選擇合適的時(shí)機(jī)，適時(shí)進(jìn)行強(qiáng)化免疫。 在做好首次免疫、二次免疫之后，需要對(duì)免疫的有效期進(jìn)行評(píng)定，雞的HI 抗體均值在2log2 以上，比同日齡雞高，則可以認(rèn)定為免疫成功。

6 結(jié)語

綜上所述，雞新城疫會(huì)嚴(yán)重影響?zhàn)B殖業(yè)的發(fā)展，需要做好實(shí)驗(yàn)室診斷，并且在診斷過程中應(yīng)用好抗體檢測(cè)技術(shù)，采取有效的急救措施，有效降低發(fā)病率和死亡率，促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。