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    9684例輸血患者Rh血型系統(tǒng)抗原頻率及不規(guī)則抗體檢測臨床價(jià)值分析

    2020-02-07 08:35:24張冬霞王曉寧李凌波
    關(guān)鍵詞:表現(xiàn)型血型抗原

    趙 震,張冬霞,王曉寧,劉 冰*,李凌波

    (1.吉林大學(xué)第一醫(yī)院 輸血科,吉林 長春130021;2.吉林省腫瘤醫(yī)院 輸血科;3.長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司)

    近來,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了6個(gè)新的血型系統(tǒng),截至2018年12月,人類紅細(xì)胞血型系統(tǒng)達(dá)到36個(gè),紅細(xì)胞血型相關(guān)抗原360個(gè)[1]。2012年7月,在墨西哥坎昆國際會(huì)議上,ISBT紅細(xì)胞免疫遺傳和血型命名工作組批準(zhǔn)FORS、JR和LAN為新的血型系統(tǒng)[2-4]。而后,Vel血型抗原的分子基礎(chǔ)得以闡明,補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白CD59及核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ENT1均被證明是獨(dú)立的血型系統(tǒng)[5,6]。人類血型抗原有許多都具有轉(zhuǎn)運(yùn)功能,這是人類血型表達(dá)的功能之一。人類血型是人體生理生化代謝、人體免疫機(jī)制的一部分。血型抗原大多具有遺傳的多態(tài)性,這是人類適應(yīng)自然進(jìn)化的結(jié)果,很多功能也與臨床密切相關(guān),其功能的缺失或是在臨床導(dǎo)致某種疾病或是使某些治療失效。同時(shí),人類血型抗原也能引發(fā)免疫反應(yīng)。如Rh血型系統(tǒng)即含有多種具有很強(qiáng)免疫原性的抗原,截止2018年12月ISBT確認(rèn)的Rh系統(tǒng)抗原達(dá)到55個(gè)(http://www.isbtweb.org),其5種主要抗原RH1-RH5,即由D、C、E、c、e免疫產(chǎn)生的抗Rh同種抗體可導(dǎo)致嚴(yán)重或致命的溶血性輸血反應(yīng)(HTRs)與嚴(yán)重的胎兒及新生兒溶血病(HDFN)[7]。本項(xiàng)研究了吉林地區(qū)待輸血患者紅細(xì)胞Rh系統(tǒng)表型構(gòu)成,以及各血型抗體在上述患者中的陽性分布,以探討Rh系統(tǒng)抗體產(chǎn)生的規(guī)律和為提出解決辦法提供思路。

    1 資料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)樣本選擇

    樣本采自2018年6月至2019年4月檢測吉林大學(xué)第一醫(yī)院、吉林省腫瘤醫(yī)院需要輸血且能明確追溯免疫史(輸血及妊娠史)的患者血液標(biāo)本共9684例,其中男4398例,女5286例,年齡0天-90歲,明確有臨床免疫史患者4860例,無免疫史患者4824例。

    1.2 儀器與試劑

    ABO、RhD血型定型檢測卡(單克隆抗體)、Rh血型抗原檢測卡(單克隆抗體)、抗人球蛋白檢測卡、ABO血型反定型試劑、不規(guī)則抗體檢測試劑、低離子強(qiáng)度鹽溶液(LISS)均由長春博迅公司生產(chǎn);抗體鑒定譜細(xì)胞(10人份),由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)。以上所有試劑均在效期內(nèi)使用。Microlab STARlet IVD卡式全自動(dòng)血型分析儀由瑞士哈美頓公司生產(chǎn)。

    1.3 方法

    樣本ABO、RhD、RhC、RhE、Rhc、Rhe血型檢測:采集被檢對象靜脈血,加入含EDTA抗凝劑的試管中,將采集的標(biāo)本采用卡式全自動(dòng)血型分析儀進(jìn)行檢測。樣本不規(guī)則抗體篩查:患者標(biāo)本靜脈血采入無抗凝劑試管中,37℃放置2 h后離心,2 000 rpm 10 min,取上清。使用LISS將1號至3號篩選紅細(xì)胞配制成0.8%懸液,采用卡式全自動(dòng)血型分析儀進(jìn)行檢測。不規(guī)則抗體鑒定:陽性標(biāo)本用1-10 號譜細(xì)胞進(jìn)行微柱凝膠法抗體特異性鑒定。按卡式法說明書操作,并根據(jù)與譜細(xì)胞的反應(yīng)格局判定抗體的特異性。應(yīng)用2-Me排除自身冷凝集素。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)或率(%)描述,組間率的比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 患者Rh血型系統(tǒng)表現(xiàn)型

    應(yīng)用Rh血型抗原檢測卡對9684例臨床樣本進(jìn)行Rh血型系統(tǒng)5種主要抗原的檢測(以5種抗Rh抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗e,可將Rh血型系統(tǒng)分為18個(gè)表現(xiàn)型[8]),測得Rh血型表現(xiàn)型共16種,其中RhD陽性表現(xiàn)型9種共9651例(99.66%),RhD陰性表現(xiàn)型7種33例(占0.34%),未檢出弱D型,見表1。

    表1 Rh血型抗原檢測卡檢測9684例患者Rh血型分布結(jié)果

    注:“0”代表陰性,“+”代表陽性

    2.2 患者D、C、c、E、e抗原分布

    9684例患者D、C、c、E、e抗原分布見表2?;颊?種抗原陽性所占百分率由高到低依次為D>e>C>c>E。

    表2 9684例患者D、C、c、E、e抗原分布

    2.3 患者不規(guī)則抗體篩查及鑒定結(jié)果

    9684例患者血清中共檢出抗體102例,陽性率1.05%,102例陽性樣本分別為抗E 20例,抗D 14例,抗C 10例,抗e 3例,抗cE 3例,抗c 2例,抗M 8例,抗Fya5例,抗Leb3例,抗Jka2例,抗Dia2例,抗Mur 2例,抗C與抗M并存1例,抗E與抗Leb并存1例,自身抗體26例。其中Rh血型系統(tǒng)抗體54例,占全部檢出抗體的52.94%,檢出的明確特異性的抗體中,抗-E最多占19.61%。

    2.4 有無輸血或妊娠史的患者Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體陽性率比較

    全部Rh系統(tǒng)單獨(dú)抗體共52例,在有臨床免疫史患者中檢出率為1.01%(49/4860),與無免疫史患者檢出率0.06%(3/4824)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=40.57,P<0.01),見表3。

    表3 有無輸血或妊娠史患者Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體陽性率比較

    3 討論

    安全有效的臨床輸血,是現(xiàn)代臨床治療過程中重要措施之一,準(zhǔn)確的血型鑒定是安全輸血的前提與保障。臨床輸血治療中,Rh系統(tǒng)是除ABO系統(tǒng)以外最重要的血型系統(tǒng),也是最復(fù)雜、最富有多態(tài)性的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)之一。

    Rh血型系統(tǒng)在輸血醫(yī)學(xué)中重要性僅次于ABO系統(tǒng),RhD陰性的人接受RhD陽性血后,大部分可能會(huì)產(chǎn)生免疫性抗-D抗體,將導(dǎo)致再次配血的困難及輸血的不安全性或?qū)е履贻p女性未來生育的隱患。除了RhD抗原,RhC、Rhc、RhE、Rhe抗原在輸血相容性中也具有重要意義,特別是RhE、Rhc抗原隨機(jī)輸注均可能會(huì)導(dǎo)致免疫性抗體產(chǎn)生的問題[9]。檢測待輸血患者人群中Rh血型表型分布情況,探討不規(guī)則抗體分布規(guī)律,有利于實(shí)現(xiàn)紅細(xì)胞的精準(zhǔn)輸注,有利于減少患者輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。

    本研究對吉林省部分地區(qū)需要輸血且能明確追溯免疫史的9684例患者進(jìn)行了檢測,測得16種Rh血型表現(xiàn)型,其中RhD陽性表現(xiàn)型9種,其中以DCe(41.50%)和DCcEe(39.57%)所占比例最高,與文獻(xiàn)報(bào)道[9]的吉林省部分地區(qū)患者Rh表型分布情況基本一致,而其中檢測到1例罕見的DCE表型,據(jù)報(bào)道[10]北京地區(qū)檢測8萬人次的獻(xiàn)血者僅發(fā)現(xiàn)1例。國內(nèi)現(xiàn)行《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》只要求輸血患者常規(guī)檢測ABO正、反定型和RhD抗原,對Rh系統(tǒng)其余抗原無明確要求,有研究[11]表明吉林地區(qū)待輸血患者包括全部表型的RhE抗原陽性頻率接近52%(RhE陰性頻率49%),且由于紅細(xì)胞RhE抗原非同型的“盲輸”,如此接近的RhE陰陽性頻率又導(dǎo)致了本地區(qū)不規(guī)則抗體的產(chǎn)生以抗-E抗體為第一位。上述研究結(jié)論與本研究中患者RhE抗原分布及不規(guī)則抗體檢測結(jié)果也一致,即本研究中RhE抗原頻率50.93%,產(chǎn)生的抗體以抗-E抗體最多占到了19.61%,鑒于本地區(qū)RhE、RhC、Rhc、Rhe抗原陰性頻率均顯著高于RhD抗原,在僅常規(guī)檢測RhD的情況下,其他Rh抗原非同型的“盲輸”,必將給臨床輸血帶來一系列隱患。特別需要注意的是,由于Rh系統(tǒng)抗原均具有較強(qiáng)的免疫原性,抗體產(chǎn)生的原因可由于輸血和(或)妊娠等免疫因素而產(chǎn)生紅細(xì)胞同種抗體[11]。如本研究結(jié)果顯示,在可明確追溯免疫史(輸血及妊娠史)的患者中,產(chǎn)生的Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體具有明顯差異,有無輸血或妊娠史患者出現(xiàn)Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,有免疫史所占比例顯著高于無免疫史患者(χ2=40.57,P<0.01)。這提示我們在臨床輸血工作中要特別注意曾反復(fù)輸血患者及需要輸血的女性患者,對于RhE、RhC、Rhc、Rhe抗原引起的同種免疫反應(yīng)提高警惕。

    對于臨床輸血治療,有時(shí)最好的做法就是提供表型匹配且抗原陰性的紅細(xì)胞作為預(yù)防措施。例如,當(dāng)DCe表型(E抗原陰性)的患者第一次輸血時(shí)或已產(chǎn)生抗-E時(shí),可為此類患者準(zhǔn)備E和c抗原均為陰性的紅細(xì)胞,主要是因?yàn)楫a(chǎn)生抗-E的免疫刺激也可能同時(shí)刺激產(chǎn)生抗-c或抗-cE,而常規(guī)檢測卻難以檢測到這種抗-c或抗-cE。類似地,對于血清中明確含有抗-C的DEc患者,可以考慮使用e陰性的供者血液[12]。

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