• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    Tim-3抗腫瘤免疫的研究進(jìn)展①

    2020-01-14 04:47:39陳志芳
    中國免疫學(xué)雜志 2020年23期
    關(guān)鍵詞:免疫抑制配體結(jié)構(gòu)域

    董 頔 陳志芳

    (新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院,烏魯木齊 830054)

    免疫細(xì)胞和分子是腫瘤生物學(xué)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)點,具有支持或抑制腫瘤發(fā)展、生長、侵襲和轉(zhuǎn)移的能力。腫瘤免疫逃逸是指腫瘤細(xì)胞通過多種機(jī)制逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)識別和攻擊,從而得以在體內(nèi)生存和增殖的現(xiàn)象[1]。近年來,針對腫瘤免疫逃逸機(jī)制進(jìn)行的癌癥免疫療法取得了令人矚目的臨床效果[2,3]。程序性死亡受體(programmed cell death protein 1,PD-1)作為免疫抑制分子,在腫瘤免疫逃逸機(jī)制中發(fā)揮著重要作用[4]。盡管針對PD-1的檢查點阻斷策略取得了成功,但大部分癌癥患者尚未從這種新療法中獲益[5]。T細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)已被發(fā)現(xiàn)在傳染病、自身免疫疾病和腫瘤小鼠模型中介導(dǎo)免疫耐受[6-8]。Tim-3作為癌癥免疫療法的潛在候選因子已經(jīng)獲得突出地位,并且已經(jīng)證明Tim-3與其他檢查點抑制劑的體內(nèi)阻斷增強(qiáng)了抗腫瘤免疫力并抑制了幾種臨床前腫瘤模型中的腫瘤生長[8-10]。

    1 Tim-3的分子結(jié)構(gòu)

    Tim-3(T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3)在人和小鼠的多種免疫細(xì)胞類型中表達(dá)。小鼠的Tim-3由281個氨基酸殘基組成,而其人類同源物由302個氨基酸殘基組成,與小鼠Tim-3具有63%的同源性[11]。Tim-3屬于免疫球蛋白超家族(IgSF),包括膜遠(yuǎn)端免疫球蛋白(IgV)結(jié)構(gòu)域、胞漿區(qū)、跨膜區(qū)、黏蛋白區(qū)和信號肽區(qū)。其中胞漿區(qū)主要功能是參與信號傳遞,決定下游信號通路的傳導(dǎo),IgV結(jié)構(gòu)域與適當(dāng)配體的結(jié)合對于Tim-3的免疫調(diào)節(jié)具有重要作用,有助于誘導(dǎo)外周耐受和抑制抗腫瘤免疫[12]。與跨膜結(jié)構(gòu)域相鄰的Tim-3細(xì)胞質(zhì)尾部含有5個酪氨酸殘基的保守區(qū)域,其中兩個對于偶聯(lián)到下游信號傳導(dǎo)途徑至關(guān)重要[13]。這兩個酪氨酸殘基的肽序列在人和小鼠之間高度保守,并且作為SH2結(jié)構(gòu)域結(jié)合基序起作用。含SH2結(jié)構(gòu)域的激酶許多是T細(xì)胞受體(T cell receptor,TCR)信號通路的關(guān)鍵組成部分,說明Tim-3和TCR通路之間存在功能關(guān)系[14]。

    2 Tim-3的配體

    2.1Galectin-9 關(guān)于Tim-3配體,最初鑒定了兩種細(xì)胞膜外相關(guān)蛋白,其分子量分別約為35 kD和60 kD,并與Tim-3IgV結(jié)構(gòu)域結(jié)合。分子量為35 kD的細(xì)胞膜外相關(guān)蛋白在生物化學(xué)上被表征為C型凝集素Galectin-9[15]。Galectin-9是一種含有兩個串聯(lián)碳水化合物識別結(jié)構(gòu)域的可溶性蛋白質(zhì),特異性識別Tim-3 IgV結(jié)構(gòu)域中N-連接糖鏈的結(jié)構(gòu),但不識別Tim-2和Tim-4等Tim家族蛋白質(zhì)[16]。與Tim-3 IgV結(jié)構(gòu)域和其他半乳糖凝集素(包括半乳糖凝集素-1,半乳糖凝集素-3和半乳糖凝集素-4)的相互作用相比,Tim-3IgV結(jié)構(gòu)域和Galectin-9之間的結(jié)合具有最高親和力,表明Galectin-9和Tim-3之間存在特異性結(jié)合的相互作用[17]。Galectin-9和Tim-3之間的相互作用引發(fā)Th1細(xì)胞死亡,從而抑制組織產(chǎn)生炎癥反應(yīng),減少自身免疫疾病的發(fā)生[18]。相同的,Galectin-9還誘導(dǎo)結(jié)腸癌Tim-3+CD8+TIL的凋亡[19]。然而,因為Galectin-9被發(fā)現(xiàn)可增加Tim-3介導(dǎo)的NK細(xì)胞系中IFN-γ的產(chǎn)生,所以并非所有Galectin-9-Tim-3相互作用都會導(dǎo)致細(xì)胞死亡[20]。在人類THP-1骨髓細(xì)胞中,Galectin-9激活Tim-3介導(dǎo)的PI3KmTOR信號傳導(dǎo)通路而不誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[21]。

    Galectin-9和Tim-3在單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞上的相互作用可能會導(dǎo)致細(xì)胞因子的產(chǎn)生改變,其通過改變IL-12和IL-23的產(chǎn)生從而影響Th1或Th17的應(yīng)答[22]。

    Tim-3與Galectin-9之間存在反向作用。小鼠結(jié)核病模型的研究表明,Tim-3通過小鼠和人類細(xì)胞中Galectin-9依賴性機(jī)制,對誘導(dǎo)IL-1β的產(chǎn)生和增強(qiáng)巨噬細(xì)胞中的抗分枝桿菌活性非常重要[23]。研究發(fā)現(xiàn),Tim-3 T細(xì)胞轉(zhuǎn)基因CD4+T細(xì)胞控制Galectin-9陽性的巨噬細(xì)胞中的結(jié)核分枝桿菌復(fù)制,進(jìn)一步證實了Tim-3-Galectin-9反式相互作用介導(dǎo)的負(fù)性信號對于巨噬細(xì)胞中的抗結(jié)核分枝桿菌活性至關(guān)重要[24]。這種負(fù)性信號通路在控制感染者的結(jié)核分枝桿菌生長方面起著重要作用,這些人T細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)會增加。總的來說,Tim-3反向作用于Galectin-9,使Th1和Tc1控制細(xì)胞內(nèi)病原體來清除被感染的巨噬細(xì)胞[25]。IFN-γ誘導(dǎo)Galectin-9表達(dá)可促進(jìn)巨噬細(xì)胞內(nèi)病原體的清除,同時確保T細(xì)胞上的Tim-3分子不會對Th1細(xì)胞應(yīng)答產(chǎn)生克隆增殖[26]。

    2.2Ceacam1 第二個被發(fā)現(xiàn)的Tim-3配體是癌胚抗原細(xì)胞黏附分子1(Ceacam1),其分子量約為60 kD[27]。Ceacam1膜遠(yuǎn)端Ig V區(qū)是一種高度保守的結(jié)構(gòu),與Tim-3的Ig V區(qū)具有結(jié)構(gòu)相似性,并且沿著它們的FG環(huán)相互作用,研究者們推測這就是配體的結(jié)合位點[28]。當(dāng)Ceacam1過表達(dá)時,可以顯著增強(qiáng) Tim-3 分子的負(fù)性免疫調(diào)控功能,并且在沒有Ceacam1表達(dá)的情況下Tim-3的抑制功能會被削弱[27]。此外,Ceacam1-Tim-3反式相互作用會抑制效應(yīng)T細(xì)胞功能,并且對維持T細(xì)胞耐受是必需的[29]。Galectin-9和Ceacam1分別與Tim-3的Ig V區(qū)中的不同區(qū)域結(jié)合,均會導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)尾部釋放Tim-3信號通路抑制性調(diào)節(jié)劑Bat3這樣的下游效應(yīng)發(fā)生[30]。因此,這兩種配體可能在調(diào)節(jié)Tim-3信號傳導(dǎo)中具有協(xié)同作用。

    2.3HMGB1 高遷移率族蛋白B1(high mobility group protein,HMGB1)作為Tim-3配體,是一種與損傷相關(guān)的分子模式蛋白,可以感知內(nèi)源性危險信號[31]。HMGB1可以從活化的樹突狀細(xì)胞主動釋放,以促進(jìn)T細(xì)胞和B細(xì)胞的反應(yīng)。在樹突狀細(xì)胞中,HMGB1在核酸轉(zhuǎn)運到內(nèi)體囊泡過程中起關(guān)鍵作用,這是樹突狀細(xì)胞感知腫瘤衍生的應(yīng)激因子或病原體相關(guān)的分子模式的關(guān)鍵步驟,并產(chǎn)生對腫瘤或病原體感染的保護(hù)性免疫反應(yīng)[32]。在腫瘤微環(huán)境中,腫瘤浸潤性樹突狀細(xì)胞中Tim-3表達(dá)水平高于正常組織樹突狀細(xì)胞中Tim-3的表達(dá)水平。Tim-3與HMGB1結(jié)合以阻斷核酸向內(nèi)體的轉(zhuǎn)運,從而抑制模式識別受體介導(dǎo)的對腫瘤衍生核酸的先天免疫應(yīng)答[33]。因此,阻斷Tim-3介導(dǎo)的核酸感應(yīng)系統(tǒng)的抑制作用可能會有助于DNA疫苗的開發(fā)和化療用藥的進(jìn)展。有趣的是,Tim-3上的HMGB1結(jié)合表位與Tim-3上的Ceacam1結(jié)合表位大部分重疊,F(xiàn)G環(huán)中的Q62(人類E62)是與HMGB1和Ceacam1相互作用的必需氨基酸殘基,由此衍生出了HMGB1和Ceacam1之間潛在競爭性結(jié)合Tim-3的問題[34]。

    2.4PtdSer 磷脂酰絲氨酸(PtdSer)是Tim-3的非蛋白質(zhì)配體,與Tim-3 IgV結(jié)構(gòu)域的FG-CC′環(huán)結(jié)合。 由于FG-CC′環(huán)形成的裂縫是所有Tim蛋白共有的特征結(jié)構(gòu),因此PtdSer也是Tim家族其他蛋白的配體[35,36]。PtdSer與Tim蛋白的結(jié)合與凋亡細(xì)胞的清除有關(guān)[37]。因為T細(xì)胞沒有清除凋亡小體的作用,所以T細(xì)胞中Tim-3-PtdSer的相互作用目前尚不清楚[38]。然而,IL-10與Tim-3陽性的T細(xì)胞共表達(dá),所以Tim-3與PtdSer的相互作用可能誘導(dǎo)T細(xì)胞產(chǎn)生IL-10。

    由于Tim-3 IgV結(jié)構(gòu)域中FG-CC′環(huán)存在重疊的結(jié)合位點,因此了解Ceacam1、HMGB1和PtdSer如何協(xié)調(diào)它們與Tim-3的相互作用并調(diào)節(jié)特異性免疫是非常重要的。

    3 Tim-3與腫瘤

    3.1Tim-3生物學(xué)特性與癌癥的關(guān)系 Tim-3除了在免疫細(xì)胞和腫瘤中的表達(dá)升高外,它的遺傳多態(tài)性也與癌癥有關(guān)。在中國人的啟動子區(qū)域(-574G/T,-882C/T,-1516G/T和-1541C/T)和編碼區(qū)域內(nèi)鑒定出Tim-3基因的多態(tài)性(+4259T/G,氨基酸取代物:精氨酸替換亮氨酸)[39]。攜帶+4259TG基因型的受試者與對照組相比,患非小細(xì)胞肺癌的風(fēng)險增加2.81倍,且存活時間明顯縮短[40]。攜帶+4259 TG基因型和+4259G等位基因的受試者與對照組相比,胰腺癌患病率顯著增加[41]。

    3.2Tim-3與癌癥預(yù)后 多種腫瘤的癌細(xì)胞、腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(tumor infiltrating lymphocyte,TILs)和內(nèi)皮細(xì)胞中均已發(fā)現(xiàn)Tim-3的表達(dá)[42]。已有充分證據(jù)表明,在腫瘤組織樣本Tim-3的蛋白水平和mRNA表達(dá)水平均升高,并且與前列腺癌、腎透明細(xì)胞癌、結(jié)腸癌、膀胱尿路上皮癌和宮頸癌患者的預(yù)后不良有關(guān)[19,43-46]。腫瘤抗原特異性CD8+T細(xì)胞中Tim-3表達(dá)增加也與CD8+T細(xì)胞功能障礙和HBV相關(guān)肝細(xì)胞癌和前列腺癌患者預(yù)后不良有關(guān)[43,47]。同樣,胃癌患者NK細(xì)胞Tim-3表達(dá)增加與腫瘤進(jìn)展有關(guān)[4]。因此,人類免疫細(xì)胞中Tim-3的表達(dá)增加可作為各種腫瘤的潛在預(yù)后生物標(biāo)志物。

    3.3Tim-3參與腫瘤T細(xì)胞的調(diào)節(jié) 在不同癌癥中進(jìn)行的研究最終證實Tim-3由于其與腫瘤T細(xì)胞耗竭有關(guān)而充當(dāng)抗腫瘤免疫的負(fù)調(diào)節(jié)劑。在晚期黑色素瘤的患者中,有腫瘤-睪丸抗原家族NY-ESO-1抗原特異性表達(dá)的Tim-3+PD-1+CD8+T是腫瘤誘導(dǎo)的T細(xì)胞中功能高度失調(diào)的一種細(xì)胞,并且約30%的NYESO-1特異性CD8+T細(xì)胞表達(dá)Tim-3[48]。同樣的,在非小細(xì)胞肺癌患者中,近33%的CD8+TILs表達(dá)Tim-3[35]。在這些癌癥中,Tim-3+T細(xì)胞共同表達(dá)PD-1并表現(xiàn)出增殖功能和效應(yīng)細(xì)胞因子產(chǎn)生的不足。

    最近的研究證明了Tim-3除了具有調(diào)節(jié)癌癥CD8+T細(xì)胞效應(yīng)功能,還在調(diào)節(jié)人Tim-3+Foxp3+Treg細(xì)胞中起到關(guān)鍵作用,肝細(xì)胞癌,卵巢癌,結(jié)腸癌和宮頸癌中均有Tim-3+Foxp3+Treg細(xì)胞的存在[19,46,47,49]。在非小細(xì)胞肺癌患者中,約60%的CD4+Foxp3+TILs中表達(dá)Tim-3[35]。TILs中Tim-3+Foxp3+Treg細(xì)胞的存在與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和晚期癌癥有關(guān)。由于多種臨床模型腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)Tim-3+Foxp3+Treg細(xì)胞的存在,進(jìn)一步證實了Tim-3在Foxp3+Treg細(xì)胞中的作用[50]??赡苁怯捎贗L-10的表達(dá)增加,這些模型中的腫瘤組織表達(dá)了比Tim-3-Foxp3+Treg細(xì)胞更具免疫抑制性的Tim-3+Foxp3+Treg細(xì)胞。在這些模型中,Tim-3+Foxp3+Treg細(xì)胞被認(rèn)為促進(jìn)了CD8+TIL功能失調(diào)。另一種假設(shè)表明腫瘤微環(huán)境驅(qū)動了Foxp3+Treg細(xì)胞活化,并且Tim-3表達(dá)增加導(dǎo)致了更嚴(yán)重的腫瘤浸潤性CD8+T細(xì)胞的免疫抑制。

    3.4Tim-3調(diào)節(jié)腫瘤固有免疫細(xì)胞 與Tim-3在T細(xì)胞上的可誘導(dǎo)性表達(dá)相比,在固有免疫細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)了Tim-3的成組性表達(dá)。到目前為止進(jìn)行的大多數(shù)體內(nèi)研究已經(jīng)確定Tim-3在抗腫瘤固有免疫中起抑制作用[51]。

    Tim-3已經(jīng)被證實在人單核細(xì)胞中具有直接抑制作用[52]。它在未刺激的外周血CD14+單核細(xì)胞上呈成組性表達(dá),但TLR刺激后,伴隨IL-12產(chǎn)生的增加,Tim-3表達(dá)水平迅速下降。在通過TLR4/7刺激后,阻斷Tim-3會導(dǎo)致單核細(xì)胞中IL-12和IL-10的增加。

    最近的一項研究表明,Tim-3在肝細(xì)胞癌腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophages,TAM)的表達(dá)是由包括TGF-β在內(nèi)的腫瘤衍生信號誘導(dǎo)的[53]。由于可溶性因子如IL-6的分泌,進(jìn)一步促進(jìn)了TAM介導(dǎo)的肝細(xì)胞癌生長。此外,Tim-3的表達(dá)抑制了該模型中腫瘤特異性CD8+T細(xì)胞的活化。最近的研究表明M1巨噬細(xì)胞具有吞噬、呈遞抗原和促炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)生等多種功能,并有助于消除具有Tim-3低表達(dá)的癌細(xì)胞[54]。這證明了Tim-3在多種細(xì)胞類型中的起免疫抑制作用及其在腫瘤微環(huán)境中具有調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞相互作用的功能。

    3.5Tim-3和腫瘤細(xì)胞 越來越多的證據(jù)表明,Tim-3的表達(dá)不僅限于免疫細(xì)胞,也在癌細(xì)胞上表達(dá),如黑色素瘤、骨肉瘤、宮頸癌和腎透明細(xì)胞癌[44,48,55]。最近的兩項研究表明,Tim-3在急性髓性白血病干細(xì)胞(leukemia stem cells,LSCs)中高表達(dá), 但不在正常的造血干細(xì)胞(hemopoietic stem cells,HSCs)中表達(dá)[56,57]。 由于急性髓性白血病患者同時含有LSCs和HSC,因此Tim-3可作為LSC的標(biāo)志物監(jiān)測急性髓性白血病干細(xì)胞的產(chǎn)生。此外,還在淋巴瘤上皮細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)了Tim-3的表達(dá)。

    Tim-3在多種腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)說明了其在腫瘤進(jìn)展中的潛在作用。研究表明Tim-3可通過不同的機(jī)制促進(jìn)腫瘤進(jìn)展,包括促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲,通過激活I(lǐng)L-6-STAT3途徑直接抑制CD4+T細(xì)胞以抑制Th1極化,或激活A(yù)ML細(xì)胞中的mTOR功能[58]。

    由于Tim-3-Galectin-9負(fù)性信號通路對于骨髓來源的抑制性細(xì)胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)增殖至關(guān)重要, Tim-3在腫瘤細(xì)胞上的表達(dá)與其在TILs上的表達(dá)相似[59]。通過Galectin-9依賴機(jī)制形成MDSCs的免疫抑制功能從而在腫瘤免疫逃避中發(fā)揮重要作用。因此,需要進(jìn)一步研究以更好地了解Tim-3介導(dǎo)的免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間的相互作用。

    4 展望

    越來越多的證據(jù)支持Tim-3與人類癌癥相關(guān)。無論是在實驗?zāi)P瓦€是在人體中,現(xiàn)在已經(jīng)確定,Tim-3和PD-1標(biāo)記多種癌癥的功能失調(diào)T細(xì)胞。此外,在效應(yīng)T細(xì)胞、Treg細(xì)胞和固有免疫細(xì)胞等多種細(xì)胞類型中觀察到Tim-3的免疫抑制作用,并且由于Tim-3也在非T細(xì)胞中表達(dá),阻斷Tim-3可能將腫瘤微環(huán)境從免疫抑制狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槊庖呒せ罨蚩鼓[瘤狀態(tài),以上發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了在這些細(xì)胞中靶向Tim-3的重要性。由于Tim-3不僅在CD8+T細(xì)胞和Foxp3+Treg細(xì)胞這兩個關(guān)鍵的促腫瘤免疫抑制的免疫細(xì)胞上表達(dá),并且在骨髓細(xì)胞、NK細(xì)胞、癌癥干細(xì)胞和癌細(xì)胞本身也有表達(dá),而且Tim-3與免疫抑制和腫瘤促進(jìn)作用相關(guān),所以Tim-3是抗癌免疫治療的一個非常合適的靶向目標(biāo)。

    目前的實驗結(jié)果說明阻斷Tim-3可以提高細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫反應(yīng)。此外,Tim-3單克隆抗體可能與其他免疫治療方式共同作用來增加抗腫瘤治療的功效。徹底了解Tim-3在各種腫瘤和腫瘤免疫治療模型中的不同作用,有利于進(jìn)一步靶向Tim-3的藥物開發(fā)和設(shè)計與PD-1或CTLA-4單克隆抗體的組合療法。

    猜你喜歡
    免疫抑制配體結(jié)構(gòu)域
    豬免疫抑制性疾病的病因、發(fā)病特點及防控措施
    蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域劃分方法及在線服務(wù)綜述
    防控豬群免疫抑制的技術(shù)措施
    基于配體鄰菲啰啉和肉桂酸構(gòu)筑的銅配合物的合成、電化學(xué)性質(zhì)及與DNA的相互作用
    重組綠豆BBI(6-33)結(jié)構(gòu)域的抗腫瘤作用分析
    新型三卟啉醚類配體的合成及其光學(xué)性能
    組蛋白甲基化酶Set2片段調(diào)控SET結(jié)構(gòu)域催化活性的探討
    丹參總酚酸對大鼠缺血性腦卒中后免疫抑制現(xiàn)象的改善作用
    泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域與泛素化信號的識別
    基于Schiff Base配體及吡啶環(huán)的銅(Ⅱ)、鎳(Ⅱ)配合物構(gòu)筑、表征與熱穩(wěn)定性
    午夜免费男女啪啪视频观看 | 麻豆国产97在线/欧美| 成年女人看的毛片在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久午夜亚洲精品久久| 色吧在线观看| 精品电影一区二区在线| 免费av观看视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 色精品久久人妻99蜜桃| 最近视频中文字幕2019在线8| 久久精品人妻少妇| 特级一级黄色大片| 欧美色欧美亚洲另类二区| 欧美日韩乱码在线| 88av欧美| 不卡一级毛片| 色综合婷婷激情| 女人被狂操c到高潮| 久久久精品欧美日韩精品| 色在线成人网| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产亚洲欧美98| 亚洲av一区综合| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 看片在线看免费视频| bbb黄色大片| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲 国产 在线| 午夜日韩欧美国产| 国产成人av教育| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久精品人妻少妇| 日本熟妇午夜| 一本精品99久久精品77| 欧美色视频一区免费| a级毛片a级免费在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 熟女电影av网| 99精品在免费线老司机午夜| 国产亚洲欧美98| 成人亚洲精品av一区二区| 日本 欧美在线| 国产野战对白在线观看| 国产熟女xx| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 美女 人体艺术 gogo| 我要搜黄色片| 丰满人妻一区二区三区视频av | 午夜福利欧美成人| 亚洲中文字幕日韩| 中文字幕久久专区| 51国产日韩欧美| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 色综合亚洲欧美另类图片| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 亚洲av免费高清在线观看| 国产av不卡久久| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 又紧又爽又黄一区二区| 最近最新中文字幕大全电影3| 毛片女人毛片| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 十八禁人妻一区二区| 免费电影在线观看免费观看| 国产极品精品免费视频能看的| 99热精品在线国产| 国产成人av教育| 俺也久久电影网| 久久久精品欧美日韩精品| 国产欧美日韩一区二区三| 在线观看av片永久免费下载| 九九在线视频观看精品| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲自拍偷在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 欧美最黄视频在线播放免费| 51国产日韩欧美| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美性猛交黑人性爽| www日本黄色视频网| 在线天堂最新版资源| 国产亚洲精品一区二区www| 国产成人啪精品午夜网站| 久久午夜亚洲精品久久| 日本 欧美在线| 麻豆国产97在线/欧美| 在线观看av片永久免费下载| 在线观看66精品国产| 在线观看舔阴道视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 一级黄片播放器| 国产欧美日韩一区二区精品| 欧美激情在线99| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产三级在线视频| 一级黄色大片毛片| www.熟女人妻精品国产| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 美女黄网站色视频| 91av网一区二区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲中文字幕日韩| 免费无遮挡裸体视频| 欧美高清成人免费视频www| 高清在线国产一区| 精品无人区乱码1区二区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 免费观看人在逋| a级毛片a级免费在线| 久久中文看片网| 91av网一区二区| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产午夜福利久久久久久| 婷婷精品国产亚洲av| 国产探花极品一区二区| 一个人看的www免费观看视频| 老司机在亚洲福利影院| 丁香六月欧美| 一区二区三区激情视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产高潮美女av| 久久久久久久久大av| 嫩草影院精品99| 亚洲内射少妇av| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲av二区三区四区| 少妇的逼水好多| 国产成人啪精品午夜网站| 99热6这里只有精品| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲成av人片免费观看| 久久久久久久精品吃奶| 综合色av麻豆| 久久久久久国产a免费观看| 在线免费观看的www视频| 国内揄拍国产精品人妻在线| 搡老岳熟女国产| 日本与韩国留学比较| 成人国产一区最新在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲精品在线观看二区| av在线蜜桃| 精品一区二区三区人妻视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 免费av不卡在线播放| 国产毛片a区久久久久| 国产精品99久久久久久久久| 成人永久免费在线观看视频| 人人妻人人看人人澡| 激情在线观看视频在线高清| 一个人看视频在线观看www免费 | 国产伦精品一区二区三区视频9 | 亚洲av美国av| 丰满的人妻完整版| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲乱码一区二区免费版| 91字幕亚洲| 国产99白浆流出| 亚洲中文字幕日韩| 波野结衣二区三区在线 | 国产99白浆流出| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 嫩草影院精品99| 亚洲av成人av| 亚洲,欧美精品.| 国产成年人精品一区二区| 久久久久久久久大av| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 男人舔奶头视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲电影在线观看av| 欧美一区二区精品小视频在线| 日韩免费av在线播放| 国产精品99久久99久久久不卡| 成年版毛片免费区| 国产精品久久久久久久电影 | 变态另类丝袜制服| 欧美黑人欧美精品刺激| 天堂动漫精品| a级毛片a级免费在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 免费观看人在逋| 51午夜福利影视在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 偷拍熟女少妇极品色| 日韩欧美免费精品| 欧美成人一区二区免费高清观看| 最近最新免费中文字幕在线| 高清毛片免费观看视频网站| tocl精华| av片东京热男人的天堂| 99久国产av精品| 老司机福利观看| 亚洲第一电影网av| 最新美女视频免费是黄的| 欧美激情久久久久久爽电影| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产精品久久电影中文字幕| 国产成人a区在线观看| 在线国产一区二区在线| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 欧美三级亚洲精品| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 少妇丰满av| 变态另类丝袜制服| 日本 欧美在线| 亚洲精品456在线播放app | 一级黄片播放器| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产在视频线在精品| 99精品在免费线老司机午夜| 欧美日韩国产亚洲二区| 精品不卡国产一区二区三区| 免费在线观看影片大全网站| 男人舔奶头视频| 久久99热这里只有精品18| 变态另类丝袜制服| 天美传媒精品一区二区| 日本一二三区视频观看| 两人在一起打扑克的视频| 中出人妻视频一区二区| 脱女人内裤的视频| ponron亚洲| a级毛片a级免费在线| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲男人的天堂狠狠| 美女被艹到高潮喷水动态| 欧美激情久久久久久爽电影| 精品国产亚洲在线| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲熟妇熟女久久| 免费看美女性在线毛片视频| 午夜老司机福利剧场| 一级黄片播放器| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲无线观看免费| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲美女黄片视频| 久久精品国产清高在天天线| a级毛片a级免费在线| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美色视频一区免费| 午夜福利成人在线免费观看| 一级毛片女人18水好多| 国产精品国产高清国产av| 一进一出抽搐gif免费好疼| www.999成人在线观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 欧美色视频一区免费| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 久久久久久久久久黄片| 免费观看人在逋| 99在线视频只有这里精品首页| 内地一区二区视频在线| 中文资源天堂在线| 日本黄大片高清| 久久精品国产自在天天线| or卡值多少钱| 久久久久国内视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品一区二区免费欧美| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 12—13女人毛片做爰片一| 国产精品一及| 国产亚洲欧美在线一区二区| 91久久精品国产一区二区成人 | e午夜精品久久久久久久| 欧美中文综合在线视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 天天一区二区日本电影三级| av在线蜜桃| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产不卡一卡二| 有码 亚洲区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国内精品久久久久久久电影| 九色国产91popny在线| 欧美+日韩+精品| 亚洲国产高清在线一区二区三| 精华霜和精华液先用哪个| 免费高清视频大片| 国产精品久久视频播放| 热99re8久久精品国产| 男女那种视频在线观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲精品亚洲一区二区| 黄片小视频在线播放| 成人午夜高清在线视频| 俺也久久电影网| svipshipincom国产片| 久久久久免费精品人妻一区二区| 午夜两性在线视频| 欧美在线黄色| 有码 亚洲区| or卡值多少钱| 精品乱码久久久久久99久播| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲欧美激情综合另类| 国产精品免费一区二区三区在线| 精品国产三级普通话版| 少妇的逼好多水| 日本一二三区视频观看| 国产高清videossex| 精品福利观看| 啦啦啦免费观看视频1| 超碰av人人做人人爽久久 | 久久人妻av系列| 婷婷亚洲欧美| 成人三级黄色视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 成人欧美大片| 又紧又爽又黄一区二区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产一区二区激情短视频| 国产97色在线日韩免费| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲一区二区三区色噜噜| 99精品欧美一区二区三区四区| 最后的刺客免费高清国语| 成人18禁在线播放| 一个人看的www免费观看视频| 午夜福利欧美成人| 51午夜福利影视在线观看| 免费看日本二区| 欧美日韩国产亚洲二区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 黄色视频,在线免费观看| 国产亚洲欧美98| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 精品人妻1区二区| 午夜福利免费观看在线| 国产亚洲欧美98| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲精华国产精华精| 欧美另类亚洲清纯唯美| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲欧美日韩无卡精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 很黄的视频免费| 中文字幕高清在线视频| 男人舔奶头视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美日韩福利视频一区二区| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产午夜福利久久久久久| 日本 av在线| 两个人视频免费观看高清| 亚洲精品456在线播放app | 日韩欧美三级三区| 一本久久中文字幕| xxx96com| 国产99白浆流出| 哪里可以看免费的av片| 女警被强在线播放| 91九色精品人成在线观看| 国产野战对白在线观看| 一夜夜www| 老司机福利观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 美女免费视频网站| 久久久久久久精品吃奶| 欧美极品一区二区三区四区| 国产探花极品一区二区| 丁香欧美五月| 狠狠狠狠99中文字幕| 特大巨黑吊av在线直播| 婷婷精品国产亚洲av| 一区福利在线观看| 亚洲五月天丁香| 色尼玛亚洲综合影院| 免费无遮挡裸体视频| 国产精品av视频在线免费观看| 久久久久久久精品吃奶| 国产亚洲欧美98| 国产亚洲精品av在线| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品久久久久久久毛片微露脸| 成人无遮挡网站| 亚洲国产中文字幕在线视频| 看免费av毛片| 久久精品91蜜桃| 18禁国产床啪视频网站| 午夜老司机福利剧场| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 一级黄色大片毛片| 99热只有精品国产| 1024手机看黄色片| 夜夜躁狠狠躁天天躁| av在线蜜桃| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 黄片大片在线免费观看| 高清在线国产一区| 一本综合久久免费| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 成人av在线播放网站| 亚洲人成网站高清观看| 两个人的视频大全免费| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 99精品在免费线老司机午夜| 午夜影院日韩av| 亚洲精华国产精华精| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 老司机在亚洲福利影院| 国产精品,欧美在线| 午夜精品在线福利| 少妇的逼水好多| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 最近最新免费中文字幕在线| 国产精品永久免费网站| 麻豆久久精品国产亚洲av| 极品教师在线免费播放| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 悠悠久久av| 一个人免费在线观看电影| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 美女cb高潮喷水在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一级a爱片免费观看的视频| 午夜老司机福利剧场| 观看免费一级毛片| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲五月天丁香| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲精品成人久久久久久| 欧美乱妇无乱码| 无限看片的www在线观看| eeuss影院久久| 午夜福利视频1000在线观看| 18+在线观看网站| eeuss影院久久| 精品一区二区三区视频在线 | 午夜福利免费观看在线| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 天天添夜夜摸| 两人在一起打扑克的视频| 麻豆成人av在线观看| 亚洲av电影在线进入| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 51午夜福利影视在线观看| 日韩欧美在线二视频| 九九在线视频观看精品| or卡值多少钱| www.www免费av| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 少妇的逼好多水| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 在线播放无遮挡| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 叶爱在线成人免费视频播放| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 午夜福利18| 高清毛片免费观看视频网站| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产主播在线观看一区二区| 99在线视频只有这里精品首页| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产中年淑女户外野战色| 一级黄色大片毛片| 国产一区二区在线av高清观看| www国产在线视频色| 国产精品亚洲一级av第二区| 波多野结衣高清作品| 欧美丝袜亚洲另类 | 天天添夜夜摸| 级片在线观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 18美女黄网站色大片免费观看| 波多野结衣巨乳人妻| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲成人久久爱视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 极品教师在线免费播放| 国产 一区 欧美 日韩| 免费看a级黄色片| 久久久色成人| 手机成人av网站| 九九热线精品视视频播放| 国产综合懂色| 亚洲精品成人久久久久久| 国产麻豆成人av免费视频| 网址你懂的国产日韩在线| 中文字幕熟女人妻在线| 一本精品99久久精品77| 精品久久久久久,| 真人一进一出gif抽搐免费| 99久久九九国产精品国产免费| 九色成人免费人妻av| 日本三级黄在线观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 免费看十八禁软件| 老司机深夜福利视频在线观看| 变态另类丝袜制服| 黄色丝袜av网址大全| 午夜影院日韩av| 久久久色成人| 白带黄色成豆腐渣| 中文字幕熟女人妻在线| 久久久精品大字幕| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 女警被强在线播放| 在线天堂最新版资源| 亚洲av一区综合| 免费人成在线观看视频色| 丰满的人妻完整版| 欧美丝袜亚洲另类 | 国模一区二区三区四区视频| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产成年人精品一区二区| 日本三级黄在线观看| 91av网一区二区| 在线观看日韩欧美| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 观看美女的网站| 亚洲国产欧美网| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产精品永久免费网站| 无遮挡黄片免费观看| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美三级亚洲精品| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产伦在线观看视频一区| 国产精品日韩av在线免费观看| 日韩欧美在线二视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 欧美精品啪啪一区二区三区| 午夜福利免费观看在线| 最新美女视频免费是黄的| 精华霜和精华液先用哪个| 日本黄色片子视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 日本熟妇午夜| 久久久精品欧美日韩精品| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产精品,欧美在线| 国产成人啪精品午夜网站| 无遮挡黄片免费观看| 午夜激情福利司机影院| 久久久久久人人人人人| 俺也久久电影网| 757午夜福利合集在线观看| 舔av片在线| 99精品在免费线老司机午夜| 十八禁网站免费在线| 九色国产91popny在线| 久久久成人免费电影| 亚洲男人的天堂狠狠| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 精品一区二区三区视频在线 | 欧美zozozo另类| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久香蕉国产精品| 精品久久久久久久久久免费视频| 丰满的人妻完整版| 亚洲avbb在线观看| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 在线视频色国产色| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 最近在线观看免费完整版| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 午夜老司机福利剧场| 精品不卡国产一区二区三区| 最近最新免费中文字幕在线| 99久久九九国产精品国产免费| 狠狠狠狠99中文字幕| 99国产精品一区二区三区| 一夜夜www| 欧美激情久久久久久爽电影| 精品免费久久久久久久清纯| 韩国av一区二区三区四区| 欧美性感艳星| 国产伦在线观看视频一区| 综合色av麻豆| 久久久久久久久中文| 成人特级av手机在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 淫秽高清视频在线观看| 国产激情欧美一区二区| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产高清三级在线| 亚洲,欧美精品.| 九色国产91popny在线| 免费电影在线观看免费观看| 国产综合懂色| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲在线观看片| www.999成人在线观看| 男女那种视频在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 午夜久久久久精精品|