基層疾控中心微生物檢驗(yàn)的常見(jiàn)問(wèn)題與對(duì)策分析

趙 丹

（盤(pán)錦市大洼區(qū)疾病預(yù)防控制中心，遼寧 盤(pán)錦 124200）

基層疾控中心屬于政府職能部門(mén)們，在我國(guó)分布較為廣泛。疾控中心主要工作內(nèi)容是預(yù)防及控制傳染性及慢性非傳染性疾病，因而微生物檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)對(duì)傳染性疾病預(yù)防工作質(zhì)量造成直接影響。現(xiàn)階段，在我國(guó)基層疾控中心的微生物檢驗(yàn)中存在一定問(wèn)題，因而本文以此為切入點(diǎn)，總結(jié)微生物檢測(cè)中存在的問(wèn)題，并以此穩(wěn)基礎(chǔ)制定相應(yīng)解決措施。

1 微生物檢驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題

1.1 送檢標(biāo)本質(zhì)量低：檢驗(yàn)人員對(duì)患者真實(shí)狀況進(jìn)行檢驗(yàn)的基礎(chǔ)為一份合格的患者標(biāo)本，因而這就表明在對(duì)微生物檢驗(yàn)進(jìn)行質(zhì)量管理的過(guò)程中，不能僅僅局限于檢測(cè)過(guò)程中的管理，還需要加強(qiáng)對(duì)檢驗(yàn)分析前的質(zhì)量管理。通常情況下，造成保本送檢質(zhì)量低的原因?yàn)槿缦滤狞c(diǎn)：①?zèng)]有對(duì)標(biāo)本采集工作進(jìn)行規(guī)范化操作[1]。如臨床科室在對(duì)標(biāo)本進(jìn)行采集的過(guò)程中沒(méi)有嚴(yán)格規(guī)范采集時(shí)間、采集量、采血姿勢(shì)、標(biāo)本收集容器以及防腐劑或抗凝劑的使用等。②通常情況下對(duì)于細(xì)菌培養(yǎng)的血標(biāo)本在采集時(shí)應(yīng)該在患者使用抗生素前，但60%以上的住院患者在入院前均已經(jīng)接受了門(mén)診的相應(yīng)治療，因而對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成了不良影響。③對(duì)于血液標(biāo)本的采集應(yīng)該采取溫和處理措施，一旦血液標(biāo)本發(fā)生了溶血，則會(huì)降低血漿或血清中的測(cè)定值。④一部分標(biāo)本在采集完成運(yùn)送的過(guò)程中，無(wú)法在規(guī)定時(shí)間內(nèi)將其送至微生物檢驗(yàn)室，從而便會(huì)造成污染正常菌落的情況。

1.2 檢驗(yàn)指標(biāo)問(wèn)題：在當(dāng)前的基層疾控中心中，微生物檢測(cè)指標(biāo)方面也存在一定的問(wèn)題。其主要為以下幾點(diǎn)：①檢測(cè)指標(biāo)欠缺完整性。在現(xiàn)有的檢測(cè)中，微生物檢測(cè)種類(lèi)遺漏問(wèn)題較為明顯，從而在疾病防控的布置措施中存在不完整等情況，導(dǎo)致發(fā)病概率增加，疾控時(shí)效性降低。如在檢測(cè)水質(zhì)衛(wèi)生物中，具體存在總大腸桿菌群、菌落總數(shù)、大腸埃希菌、耐熱大腸菌等，但是總大腸桿菌群中存在檸檬酸桿菌屬、埃希菌屬、腸桿菌屬、克雷伯菌屬，實(shí)際檢測(cè)中卻總會(huì)忽視總大腸菌群中的某些菌屬，整體檢測(cè)并不完善；②檢測(cè)不突出重點(diǎn)。這一問(wèn)題導(dǎo)致現(xiàn)有的大型微生物檢測(cè)中準(zhǔn)確性降低，影響了疾控防控的參數(shù)，降低了疾控的有效性。如食物微生物檢測(cè)，檢測(cè)重點(diǎn)應(yīng)該側(cè)重于能夠引發(fā)人類(lèi)生理系統(tǒng)病變之類(lèi)的有害微生物，但實(shí)際工作中卻經(jīng)常忽視此種問(wèn)題。

1.3 檢驗(yàn)環(huán)境不合格：微生物檢驗(yàn)過(guò)程中對(duì)于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求較高，但對(duì)于基層疾控中心而言，因其自身?xiàng)l件有所限制從而使得大多數(shù)的微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境無(wú)法達(dá)到相關(guān)要求，最終便會(huì)對(duì)微生物檢驗(yàn)結(jié)果造成影響。

1.4 缺乏規(guī)范檢驗(yàn)流程：在對(duì)基層疾控中心調(diào)查中，一部分檢驗(yàn)人員在對(duì)標(biāo)本進(jìn)行接種、細(xì)菌培養(yǎng)、菌落篩選、藥敏試驗(yàn)、涂片、染色以及鑒定等過(guò)程中沒(méi)有嚴(yán)格執(zhí)行相關(guān)操作規(guī)程。同時(shí)沒(méi)有對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)量監(jiān)控，也無(wú)法有效地確保檢驗(yàn)分析中的各個(gè)環(huán)節(jié)，還有一部分的檢驗(yàn)人員沒(méi)有充分認(rèn)識(shí)到病原菌類(lèi)型，且部分菌落鑒定漏網(wǎng)會(huì)對(duì)終末質(zhì)量造成影響[2]。

1.5 檢驗(yàn)設(shè)備落后：基層疾控中心檢測(cè)設(shè)備十分重要，是檢測(cè)效率與標(biāo)準(zhǔn)提升的基礎(chǔ)，但是實(shí)際工作中檢測(cè)設(shè)備卻存在一定的缺陷，其穩(wěn)定性較差，檢測(cè)結(jié)構(gòu)不能滿足微生物檢驗(yàn)的需求。并且，基層疾控中心因其自身?xiàng)l件有限因而相關(guān)的檢驗(yàn)設(shè)備均由國(guó)家分配，但由于政策從制定到落實(shí)需要一定時(shí)間，因此導(dǎo)致基層疾控中心的檢驗(yàn)設(shè)備與技術(shù)較為落后，且缺乏一定數(shù)量。

2 質(zhì)量控制措施

2.1 確定檢驗(yàn)方法：當(dāng)使用新的檢驗(yàn)方法之前，需要通過(guò)一定樣本數(shù)量進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，核實(shí)驗(yàn)證方法的精準(zhǔn)性與準(zhǔn)確性，證明在實(shí)驗(yàn)室中可以重復(fù)試驗(yàn)指標(biāo)。并將現(xiàn)有的工作有關(guān)手冊(cè)、指導(dǎo)、標(biāo)準(zhǔn)等保證其有效性，方便工作人員開(kāi)展微生物檢驗(yàn)。

2.2 保證實(shí)驗(yàn)環(huán)境良好：實(shí)驗(yàn)室環(huán)境是微生物檢測(cè)中的重要部分，對(duì)環(huán)境需求較高。應(yīng)當(dāng)保證實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)換氣設(shè)備的管維工作，則可以有效控制實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)環(huán)境，其環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)如下：濕溫度、照明、噪音、風(fēng)量等。還需要?jiǎng)澐治⑸餀z測(cè)實(shí)驗(yàn)室的4個(gè)模塊，設(shè)置相應(yīng)的標(biāo)志牌，以免工作過(guò)程中工作人員走錯(cuò)出現(xiàn)交叉感染等問(wèn)題，影響了工作人員的身體健康。定期進(jìn)行維護(hù)與監(jiān)測(cè)，使用紫外線燈每月進(jìn)行消毒監(jiān)測(cè)，設(shè)置監(jiān)測(cè)與維護(hù)的記錄備查，并且應(yīng)有實(shí)驗(yàn)室主管的復(fù)合簽字。

2.3 監(jiān)控質(zhì)控菌株：在微生物檢測(cè)中，質(zhì)控菌株是其中的參考體系，是典型穩(wěn)定的生物學(xué)特征，需要有認(rèn)可部門(mén)或者權(quán)威機(jī)構(gòu)提供。通常在菌種保存中心機(jī)構(gòu)購(gòu)買(mǎi)，或者是上級(jí)業(yè)務(wù)主管發(fā)送。微生物實(shí)驗(yàn)室中需要有金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌這三種，建立相應(yīng)的菌株檢測(cè)、保存等操作程序，從而保證生物安全性。若是實(shí)驗(yàn)室中不存在規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)菌株，也可以用同一種類(lèi)的菌株替代。對(duì)于菌株購(gòu)買(mǎi)、保存等都應(yīng)該具有細(xì)致的記錄，設(shè)置完善的措施，沒(méi)有管理者允許則不能獲得菌株。

2.4 檢查培養(yǎng)基及使用試劑：為了提升微生物檢測(cè)質(zhì)量，需要檢查所用試劑的外觀，數(shù)量、生產(chǎn)廠家等各項(xiàng)基礎(chǔ)參數(shù)，購(gòu)買(mǎi)試劑與培養(yǎng)基的時(shí)候，應(yīng)當(dāng)向供貨商索取“三證”，使用之前需要評(píng)估以下內(nèi)容：固體試劑潮解程度；液體試劑均勻性與透明性；培養(yǎng)基厚度在均勻中是否表面光滑平整。并且，按照規(guī)定要求存儲(chǔ)試劑，在有效期之間使用，不能混用不同批次之間的培養(yǎng)基與試劑，使用時(shí)需要有相應(yīng)的配置記錄。對(duì)于不同批次的商品試劑或培養(yǎng)基等都需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)、選擇性實(shí)驗(yàn)等質(zhì)量檢測(cè)。同時(shí)，不同培養(yǎng)基需要根據(jù)不同的培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，使用相應(yīng)菌種接種；生化培養(yǎng)基鑒定細(xì)菌；陽(yáng)性菌株鑒定觸酶、氧化酶試劑；標(biāo)準(zhǔn)菌株使用染液控制等。

2.5 診斷血清：當(dāng)進(jìn)行血清的簽收時(shí)，工作人員需要確定血清的各項(xiàng)基本參數(shù)，其中包含了生產(chǎn)批號(hào)與生產(chǎn)廠家的審核，保證檢測(cè)工作開(kāi)展在無(wú)菌環(huán)境之中。

2.6 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)：當(dāng)檢測(cè)人員收到檢測(cè)任務(wù)與樣品單后，需要對(duì)任務(wù)單上的內(nèi)容進(jìn)行核對(duì)，看其是否與送檢樣品相符，其中包含了檢測(cè)項(xiàng)目、方法、包裝、數(shù)量、狀態(tài)等，只有無(wú)誤后才能安排檢測(cè)。檢測(cè)前需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，做好基本的質(zhì)量控制，如培養(yǎng)基配置、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室消毒、設(shè)備調(diào)控、防護(hù)檢測(cè)人員、防污染等準(zhǔn)備。

微生物檢驗(yàn)時(shí)，通常情況下樣品并不能進(jìn)行復(fù)檢，若是在檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)異常，客戶或者審核人員對(duì)于檢測(cè)數(shù)據(jù)提出了異議等，則可以進(jìn)行微生物復(fù)檢，而停氣、停電等對(duì)于樣品檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性有所影響的意外情況，檢測(cè)人員需要立即停止檢測(cè)，恢復(fù)檢測(cè)條件則可以繼續(xù)檢測(cè)，若是不能檢測(cè)則重新采集樣品。

檢測(cè)之后，所有與檢測(cè)相關(guān)的場(chǎng)所、器具、物品等需要消毒滅菌處理。若是必要，則可以實(shí)施目標(biāo)菌生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)，確定為無(wú)菌生長(zhǎng)時(shí)，焚毀清洗。

3 解決措施分析

3.1 創(chuàng)建完整的檢測(cè)指標(biāo)體系：若是想要提升微生物檢測(cè)質(zhì)量，則需要?jiǎng)?chuàng)建完整的檢測(cè)指標(biāo)體系。其主要應(yīng)當(dāng)從兩方面進(jìn)行：①通過(guò)分析資料確定檢測(cè)指標(biāo)項(xiàng)目。具體而言，主要是由于微生物的分布具有一定的空間性與時(shí)間性，但是其中又存在不確定性，因此，需要相關(guān)工作人員利用以往的檢測(cè)資料，總結(jié)基層疾控中心中存在的微生物種類(lèi)，并將其納入到檢測(cè)體系之中，可以有效改善檢測(cè)遺漏等問(wèn)題；②利用區(qū)域時(shí)間，對(duì)微生物檢測(cè)重點(diǎn)名單進(jìn)行總結(jié)確定，重點(diǎn)檢驗(yàn)與監(jiān)控具有重大影響的微生物。通過(guò)上述兩種方法，創(chuàng)建出較為完整的微生物檢測(cè)指標(biāo)體系，加強(qiáng)檢測(cè)工作的指導(dǎo)。

3.2 加強(qiáng)專業(yè)技能培訓(xùn)：為了能夠提高臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量，就需要進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)檢驗(yàn)人員能力與技能的培養(yǎng)，同時(shí)在判讀檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)，需要檢驗(yàn)人員具備較強(qiáng)的主觀判斷能力。除此之外，檢驗(yàn)人員需要掌握免疫學(xué)、臨床抗生學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、病原生物學(xué)以及醫(yī)院流行病學(xué)等多方面的知識(shí)，如此才能在微生物檢驗(yàn)中有效地解決分析前質(zhì)量控制中技術(shù)問(wèn)題。最終才能確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與科學(xué)合理性，確保藥敏與藥敏、細(xì)菌鑒定與藥敏之間結(jié)果的吻合。同時(shí)還需要對(duì)基層疾控中心的各科護(hù)土進(jìn)行教育培訓(xùn)，因而為了能夠進(jìn)一步提高標(biāo)本質(zhì)量，可以由檢驗(yàn)科主任為臨床護(hù)土長(zhǎng)傳授向知識(shí)，主要講解終末質(zhì)量與標(biāo)本質(zhì)量之間的關(guān)系。并對(duì)標(biāo)本采集方式與注意事項(xiàng)進(jìn)行詳細(xì)介紹，嚴(yán)格要求標(biāo)本采集的部位與采集量，堅(jiān)決退回不合格的標(biāo)本[3]。

培訓(xùn)之后，還要對(duì)檢測(cè)人員專業(yè)技能進(jìn)行統(tǒng)一考核，保證培訓(xùn)的有效性，其主要包含兩方面內(nèi)容：一是加標(biāo)實(shí)驗(yàn)與樣品重測(cè)的考核；二是培訓(xùn)期間各項(xiàng)技能的學(xué)習(xí)情況，由指導(dǎo)教師進(jìn)行最終評(píng)估。

3.3 樣品采集運(yùn)輸保存：若是想要獲得更加可靠精準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果，除了工作人員專業(yè)技能達(dá)到相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)之外，最為重要的就是對(duì)微生物樣本的采集。需要工作人員依據(jù)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、方法、目的等確定選擇采樣工具、方法、時(shí)機(jī)、部位、數(shù)量以及存放容器等，樣本的采集需要具有典型性、代表性與適時(shí)性。樣本在采集之后則應(yīng)當(dāng)根據(jù)相應(yīng)的需求包裝送檢，避免出現(xiàn)樣本污染等情況，若是不能實(shí)現(xiàn)立即送檢，則需要有充足的冷藏冷凍設(shè)備，將樣品存儲(chǔ)其中，封口樣品容器，貼上明顯標(biāo)識(shí)，以免樣品出現(xiàn)損毀、丟失、污染、變質(zhì)等情況。樣品的接收人員則需要根據(jù)送檢單核對(duì)樣本信息，只有確定送檢的樣本符合相應(yīng)要求，才能簽收登記。通常情況下，在送檢樣品中需要提供同一批次的平行雙樣，方便后續(xù)的復(fù)檢工作開(kāi)展。

3.4 提高檢驗(yàn)人員專業(yè)素養(yǎng)：臨床微生物檢驗(yàn)工作具有較高的風(fēng)險(xiǎn)性與技術(shù)性，因而其對(duì)于臨床微生物檢驗(yàn)人員的操作能力較高。基層疾控中心為了提高檢驗(yàn)質(zhì)量需要進(jìn)一步培養(yǎng)微生物檢驗(yàn)人員的業(yè)務(wù)水平，提高檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)。同時(shí)作為基層疾控中心管理者，在日常工作中應(yīng)該積極地組織檢驗(yàn)人員進(jìn)行相關(guān)的學(xué)術(shù)培訓(xùn)與交流會(huì)，以不斷地加強(qiáng)技術(shù)及學(xué)術(shù)交流，更好地掌握新的檢驗(yàn)技術(shù)。

3.5 引進(jìn)先進(jìn)檢驗(yàn)設(shè)備：基層疾控中心根據(jù)自身的實(shí)際情況，管理者分階段、分批次地對(duì)新的檢驗(yàn)儀器進(jìn)行購(gòu)置，及時(shí)地對(duì)技術(shù)落伍的檢驗(yàn)儀器進(jìn)行淘汰，從而保證微生物檢驗(yàn)工作順利開(kāi)展。除此之外，管理者還應(yīng)該對(duì)微生物檢驗(yàn)儀器管理制度予以進(jìn)一步完善，從而確保檢驗(yàn)儀器的使用及維護(hù)，并安排專人建立檢驗(yàn)儀器相關(guān)檔案。

并且定期檢測(cè)檢驗(yàn)設(shè)備的性能，數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)想對(duì)比，其儀器設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)如下：①恒溫恒濕培養(yǎng)箱的箱內(nèi)溫度應(yīng)當(dāng)在36～45 ℃，而霉菌箱其溫度應(yīng)當(dāng)在28 ℃左右。冰箱內(nèi)部最低溫溫度是-20 ℃，而保鮮冰箱溫度則約為4 ℃。②滅菌器。需要對(duì)新購(gòu)買(mǎi)的滅菌器進(jìn)行效果檢測(cè)，當(dāng)合格之后才能在實(shí)驗(yàn)室中使用，每周進(jìn)行一次監(jiān)測(cè)。壓力蒸汽滅菌器滅菌效果通常使用化學(xué)指法或者生物法進(jìn)行滅菌效果的監(jiān)測(cè)?；瘜W(xué)指法主要是通過(guò)化學(xué)指示卡監(jiān)測(cè)，生物法則是使用生物指示劑監(jiān)測(cè)。③生物安全柜。通常的基層疾控中心實(shí)驗(yàn)室中主要使用二級(jí)生物安全柜，初次安裝與使用是都需要有專業(yè)的人員檢漏高效過(guò)濾器，若有問(wèn)題則及時(shí)更換，檢定風(fēng)速、壓差等因素，保證樣本環(huán)境、人員的安全性，做好監(jiān)控記錄等工作。④紫外線燈。其在實(shí)驗(yàn)室中主要具有空氣消毒的作用。對(duì)于紫外線燈是否合格的檢測(cè)，則是根據(jù)生物學(xué)指標(biāo)以及物理學(xué)指標(biāo)。生物學(xué)指標(biāo)是指示菌殺滅率，以枯草桿菌黑色變種芽孢以及大腸桿菌為指示菌，殺滅率在照射一段時(shí)間后＞99.99%；而物理學(xué)指標(biāo)則是紫外線輻射照度，安裝的新燈管初始階段，其紫外線照射強(qiáng)度應(yīng)當(dāng)超過(guò)94%，室溫為23 ℃時(shí)普通30 W直管紫外線燈輻射強(qiáng)度超過(guò)75 μW/cm2，高強(qiáng)度的紫外線燈相同條件下則超過(guò)210 μW/cm2。⑤稱量設(shè)備。量筒、天平、移液器等需要每年有專業(yè)的技術(shù)檢測(cè)機(jī)構(gòu)，或者是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢測(cè)中心校準(zhǔn)檢定，合格后在其上貼上綠色標(biāo)識(shí)，才能繼續(xù)使用。

4 總結(jié)

綜上所述，對(duì)于微生物檢驗(yàn)工作而言，檢驗(yàn)人員專業(yè)素質(zhì)、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及檢驗(yàn)設(shè)備均具有嚴(yán)格要求。因此，為了提高檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性與準(zhǔn)確性，需要加強(qiáng)對(duì)微生物檢驗(yàn)工作的重視，對(duì)檢驗(yàn)操作進(jìn)行嚴(yán)格規(guī)范，并引進(jìn)先進(jìn)的檢驗(yàn)設(shè)備，提高檢驗(yàn)質(zhì)量。