PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法對陰道細菌的檢驗價值

陸麗潔

細菌性陰道炎是由腸球菌、加特納菌、棒狀桿菌等致病菌所引發(fā)的細菌性感染，患者患上此病后陰道內(nèi)的有益菌會驟然減少，腸球菌、加特納菌、棒狀桿菌顯著增多，陰道內(nèi)菌群因此而失調(diào)，進而出現(xiàn)細菌性炎癥[1]。在我國，細菌性陰道炎約有1%的發(fā)病率，患者需要及時接受有效治療，否則將有可能惡化為宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎，甚至是慢性盆腔炎，進而對其生殖系統(tǒng)帶來較大的損害，嚴重者甚至可能不孕[2]。而及時有效的治療，關(guān)鍵在于迅速準確的檢驗，目前檢驗陰道細菌的方法主要有細菌培養(yǎng)法和PCR 檢驗法，二者各有其優(yōu)缺點。本文選取2018 年1 月—2019 年1 月期間于本院治療細菌性陰道炎的50 例患者，試對比細菌培養(yǎng)法、PCR檢驗法對陰道細菌的陽性總檢出率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月—2019 年1 月期間于筆者所在單位治療細菌性陰道炎的50 例患者作為本次的研究對象，將隨機數(shù)字表法作為分組方法，將患者分入對照組、研究組，每組25 例。研究組：年齡23～53 歲，平均（38.99±6.73）歲；病程4 個月～3 年，平均（1.76±0.34）年；已育者15 例，未育者10 例。對照組：年齡24～52 歲，平均（38.87±6.92）歲；病程5 個月～3 年，平均（1.79±0.32）年；已育者14 例，未育者11 例。將平均年齡、平均病程、生育與否等資料納入統(tǒng)計學(xué)軟件進行對比，結(jié)果為P＞0.05，即差異不存在統(tǒng)計學(xué)意義，兩組之間具有可比性。

納入標準：（1）年齡不低于18 歲；（2）均有白帶異常、陰道瘙癢等癥狀表現(xiàn)，確診為細菌性陰道炎；（3）2 周內(nèi)未對陰道進行局部用藥；（4）主要臟器未發(fā)生嚴重病變；（5）研究內(nèi)容已經(jīng)充分告知患者及其家屬，其出于自愿參與本研究并簽署協(xié)議，醫(yī)院倫理部門也批準此次研究[3]。

排除標準：（1）合并有其他生殖系統(tǒng)疾病；（2）合并有惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病或其他傳染?。唬?）妊娠、哺乳、月經(jīng)期女性；（4）近期有性生活；（5）存在視聽障礙、神經(jīng)疾病或精神異常等對配合完成研究有影響的疾病[4]。

1.2 方法

兩組患者均以相同的方法采集陰道分泌物，即以無菌棉拭子旋轉(zhuǎn)擦拭陰道后穹窿處，棉拭子將蘸取少量的陰道分泌物，將其分為2 份，放入3 mL 的無菌生理鹽水中保存，隨后及時送交實驗室進行檢驗。

1.2.1 細菌培養(yǎng)法 取其中一份標本，接種到瓊脂培養(yǎng)基中，放入含有5%二氧化碳的孵育保溫箱中進行恒溫（35℃）培養(yǎng)，時間為48 h，待菌落形成后取呈露滴狀、光滑、呈灰色或半透明樣的菌群進行鑒定。

1.2.2 PCR 檢驗法 取另一份標本，給予轉(zhuǎn)速12 000 r/min、時間15 min 的離心操作，待離心完畢后去除上清液，加入適量的堿性裂解液，置入60℃水浴中加熱15 min，或在98℃下加熱10 min，隨后給予轉(zhuǎn)速12 000 r/min、時間10 min 的離心操作，取上清液，制作DNA 模板，最后將其放入熒光PCR 儀進行擴增、循環(huán)處理，分析標本中細菌的種類。

1.3 觀察指標

比較兩組對腸球菌、加特納菌、棒狀桿菌的檢出率以及陽性總檢出率。其中，PCR 檢驗法陽性標準為：條帶寬度邊緣均非常整齊且不超過1 cm，背景中未發(fā)現(xiàn)引物二聚體；細菌培養(yǎng)法陽性標準為：培養(yǎng)基中形成的典型菌落即是目的菌落。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

在SPSS 19.0 版統(tǒng)計學(xué)軟件中納入本研究中所有研究對象的臨床數(shù)據(jù)，計量資料采用（）表示，行t檢驗；計數(shù)資料采用（%）表示，行χ2檢驗，通過統(tǒng)計分析后結(jié)果若為P＜0.05，則差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究組對腸球菌、加特納菌、棒狀桿菌的檢出率分別為20.00%、20.00%、52.00%，均高于對照組的4.00%、8.00%、36.00%，研究組的陽性總檢出率為92.00%，高于對照組的48.00%，差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

3 討論

由厭氧菌與加特納菌等致病菌所引起的細菌性陰道炎是一種混合感染，正常情況下，陰道中雖然存在有大量的球菌或桿菌，但陰道分泌物是堿性的，可以抑制多種微生物的生長，使陰道內(nèi)部環(huán)境保持平衡，而細菌性陰道炎的發(fā)生，會使大量致病菌滋生、大量有益菌死亡，諸如腸球菌、加特納菌、棒狀桿菌等致病菌取代陰道中原本存在的大量益生菌，使陰道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境失去平衡，酸堿度紊亂，進而使陰道分泌出更多的分泌物，令患者出現(xiàn)白帶異常、外陰瘙癢等癥狀表現(xiàn)。而在細菌性陰道炎發(fā)生后，患者需要及時進行有效的治療，不要因為發(fā)病初期癥狀較輕而不加以重視，否則會延誤最佳治療時機，使病情加重，進而引發(fā)盆腔感染或是更嚴重的疾病[5-7]。

對于細菌性陰道炎而言，臨床應(yīng)在早期開展對陰道細菌的檢驗，以便能有效預(yù)防和控制陰道炎的發(fā)生。本文便為對照組采取了細菌培養(yǎng)法，為研究組采取了PCR 檢驗法，其中細菌培養(yǎng)法是一種非常傳統(tǒng)的臨床診斷方法，其在臨床上應(yīng)用非常早，至今為止都極為常用，但是隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，醫(yī)學(xué)工作者們發(fā)現(xiàn)細菌培養(yǎng)法存在著很多的不足之處，例如：其操作步驟較為復(fù)雜、繁多，需要較長的時間才能得出結(jié)果；其容易受到環(huán)境的干擾，對設(shè)備及檢驗人員具有較高的要求，檢出率較低，這些缺陷使得其愈加不適合在臨床廣泛應(yīng)用，尤其是基層醫(yī)院，很難輕松開展此項檢查[8-11]。而PCR 檢驗法是一種新興的檢驗技術(shù)，其兼有DNA 雜交特異性與PCR 敏感性兩種優(yōu)勢，可以高效進行陰道細菌的檢驗，與傳統(tǒng)的細菌培養(yǎng)法相比，其操作步驟較為簡單，耗時較短，可以快速得出檢驗結(jié)果；其精度準、檢出率高；其對設(shè)備和檢驗人員要求較低，不容易受到外界因素的干擾，檢驗結(jié)果更加準確；其檢驗費用較低，更加容易被廣大醫(yī)護人員、檢驗人員、患者所接受，可以說，PCR 檢驗法非常適合在臨床中廣泛開始，尤其是設(shè)備、環(huán)境均相對一般的基層醫(yī)院，也可以放心開展，故PCR 檢驗法在陰道細菌的檢驗上具有比細菌培養(yǎng)法更高的臨床價值[12-14]。

表1 對腸球菌、加特納菌、棒狀桿菌檢出率及陽性總檢出率的組間對比（%）

見結(jié)果，研究組對腸球菌、加特納菌、棒狀桿菌的檢出率均高于對照組（20.00%vs.4.00%、20.00%vs.8.00%、52.00%vs.36.00%），并且研究組的陽性總檢出率也高于對照組（92.00%vs.48.00%），可以證明PCR 檢驗法具有比細菌培養(yǎng)法更高的診斷準確性。將張婷研究報告《陰道細菌檢驗應(yīng)用PCR 檢驗法和細菌培養(yǎng)法的臨床價值體會》中采取PCR 檢驗法的A 組89.13%的陽性總檢出率與本文中研究組92% 的陽性總檢出率進行對比，可以發(fā)現(xiàn)二者較為相近，可見“PCR 檢驗法對陰道細菌檢驗有顯著臨床價值”的結(jié)論真實可靠[15]。

對于細菌性陰道炎，臨床應(yīng)在治療前給予快速準確的診斷，而PCR 檢驗法正是陰道細菌檢驗的最佳方法之一，其不僅操作簡單方便，對設(shè)備人員要求低，其陽性總檢出率也比細菌培養(yǎng)法更高。