金蓮花中8種黃酮類成分的肝微粒體生物轉(zhuǎn)化研究△

劉雙月，安燕南，劉斯琪，丁鵬敏，王青青，龐月笙，王如峰

北京中醫(yī)藥大學 生命科學學院，北京 102488

金蓮花(Flos Trollii)為毛茛科金蓮花屬植物金蓮花TrolliuschinensisBunge的干燥花，主要含黃酮類、酚酸類和生物堿類成分，具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤、抑菌等活性[1-2]。黃酮類化合物含量最高，約占金蓮花干質(zhì)量的18%[3-4]，金蓮花中大部分黃酮類化合物為黃酮碳苷，例如葒草素、牡荊素、異當藥黃素、金蓮花碳苷Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ及其衍生物等。除黃酮碳苷外，還有黃酮醇及氧苷類成分，如槲皮素、異槲皮素等[5-11]。這些化合物的生物活性及體內(nèi)代謝情況對確定金蓮花的有效成分研究具有重要的作用。雖然黃酮類化合物的代謝研究報道較多[12-14]，但是這些研究大多集中于黃酮氧苷的代謝，而由于黃酮碳苷在植物中的分布相對較窄，其代謝研究特別是肝代謝研究卻鮮有報道。肝臟是代謝的主要器官，其中富含代謝酶系，肝微粒體細胞色素P-450酶系(CYP450)是其中催化藥物生物轉(zhuǎn)化的主要酶系統(tǒng)，可發(fā)生Ⅰ相代謝，如氧化、還原、水解等反應(yīng)以及Ⅱ相代謝，如葡萄糖醛酸、硫酸和氨基酸等軛和反應(yīng)[15]。目前肝微粒體轉(zhuǎn)化模型在藥物體外代謝研究中被廣泛應(yīng)用，該方法可排除體內(nèi)諸多干擾因素，專一地模擬研究藥物在肝臟內(nèi)的代謝情況。鑒于此，本研究采用大鼠肝微粒體轉(zhuǎn)化模型分別對金蓮花中的牡荊素、葒草素、葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、異當藥黃素、日本異當藥素、2″-O-(2?-甲基丁?；?異當藥黃素、金蓮花碳苷Ⅰ和異槲皮素等8種黃酮類成分的肝臟代謝過程進行了研究。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Waters高效液相色譜儀；Thermo LTQ ORBITRAP XL質(zhì)譜儀；勻漿器(德國IKA)；超速離心機CP100WX(株式會社日立制作所)；氮吹儀(北京市優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司)；AE240十萬分之一電子天平(Mettler公司)；渦旋混勻器(海門市氣林貝雨儀器廠)；水浴振蕩器(金壇市華立實驗儀器廠)。

氧化型輔酶Ⅱ(NADP)、還原型輔酶Ⅰ(NADH)、葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PDH)均購于Sigma公司；二硫酸蘇糖醇(DTT)購于北京拜爾迪生物技術(shù)有限公司；苯巴比妥鈉注射液購于中國中醫(yī)科學院望京醫(yī)院；氯化鉀、氯化鎂、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、乙二胺四乙酸二鈉、乙酸乙酯、甲醇、乙腈均購于北京高華偉業(yè)食品添加劑有限公司；Folin-酚試劑盒購于北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限公司；金蓮花黃酮類化合物均為本實驗室分離、鑒定得到的單體化學成分，結(jié)構(gòu)見圖1。

圖1 金蓮花中8種黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)式

1.2 實驗動物

清潔級SD大鼠，20只，體質(zhì)量(220±20) g，由北京大學醫(yī)學部實驗動物中心提供，合格證編號：SCXK(京)2006-0008。

1.3 大鼠肝微粒體的制備

SD大鼠20只，每天腹腔注射一次苯巴比妥鈉0.9%氯化鈉溶液(按80 mg·kg-1劑量)，連續(xù)注射3 d。禁食12 h，自由飲水，于第4天脫頸椎處死，快速解剖取出大鼠肝臟。參照文獻方法[16]，采用二次離心法制備大鼠肝微粒體。制備的肝微粒體溶液分裝，-80 ℃保存，備用。

1.4 肝微粒體的總蛋白濃度測定

按照Lowry法，測定大鼠肝微粒體中蛋白濃度，以梯度濃度的牛血清白蛋白(BSA)作標準液測定吸光度值并制作濃度(X)-吸光度值(Y)標準曲線，得到回歸方程Y=0.968 1X+0.033 9，r=0.999 1，線性范圍0.025～0.25 mg·mL-1。以水溶液代替樣品作空白對照，據(jù)上述結(jié)果計算，所制備的微粒體蛋白質(zhì)量濃度為22.8 mg·mL-1。

1.5 肝微粒體的CYP450酶含量及活性測定

采用CO還原差示光譜法測定CYP450酶含量[17]，結(jié)果所測CYP450蛋白的濃度為0.55 nmol·mL-1。以CYP450酶能氧化氯唑沙宗生成6-羥基氯唑沙宗為原理進行活性驗證，用HPLC測定轉(zhuǎn)化結(jié)果[18]，從而間接地證明所制備的肝微粒體具有CYP450酶活性。

1.6 肝微粒體模型體外代謝轉(zhuǎn)化實驗

精密稱取各單體化合物，溶于適量磷酸鹽緩沖液(50 mmol·L-1KH2PO4-K2HPO4，pH 7.4)中，配制成底物化合物原液。采用酶法再生輔酶NADPH系統(tǒng)，用磷酸鹽緩沖液配制輔酶體系(包括1.0 mmol·L-1NADP，0.5 mmol·L-1NADH，10 mmol·L-1G-6-P，1.0 IU·mL-1G-6-PDH和4.0 mmol·L-1MgCl2)。在配制的輔酶體系中定量加入肝微粒體(滅活組：將肝微粒體于80 ℃水浴加熱處理10 min)，搖勻后，37 ℃水浴中溫孵5 min，定量加入底物化合物反應(yīng)，實驗反應(yīng)體系見表1。反應(yīng)2 h后加入等體積預(yù)冷的乙酸乙酯終止反應(yīng)。

表1 肝微粒體模型體外代謝反應(yīng)體系 mL

1.7 液質(zhì)聯(lián)用色譜檢測

1.7.1 檢測樣品預(yù)處理 將反應(yīng)終止后的樣品在16 162×g離心10 min，除去肝微粒體，加入等體積乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯層，氮氣吹干。再加入1 mL甲醇超聲溶解，0.22 μm微孔濾膜過濾，待HPLC-LTQ Orbitrap MS檢測。

1.7.2 色譜/質(zhì)譜條件 Phenomenex色譜柱(250 mm×4.6 mm，4 μm)，流動相乙腈-水，流速1.0 mL·min-1，進樣量10 μL，各組待測樣本分別按照適應(yīng)的流動相比例梯度洗脫。Thermo LTQ Orbitrap XL質(zhì)譜儀，Accela 600 泵，電噴霧離子源(ESI)，負離子掃描模式，掃描范圍m/z：100～800。毛細管溫度350 ℃，毛細管電壓-35 V，氣化溫度300 ℃，鞘流氣流量17 L·min-1。

1.8 數(shù)據(jù)處理

將肝微粒體轉(zhuǎn)化組與空白組和對照組的總離子流圖進行對比(見圖2)，新增加的峰推測可能為代謝產(chǎn)物，根據(jù)質(zhì)荷比獲得代謝產(chǎn)物峰的提取離子流圖，對各產(chǎn)物的一級質(zhì)譜和二級質(zhì)譜碎片信息進行數(shù)據(jù)庫檢索及分析。

注：A.牡荊素；B.葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷；C.異當藥黃素；D.2″-O-(2?-甲基丁?；?異當藥黃素；E.金蓮花碳苷Ⅰ；F.異槲皮素；G.葒草素；H.日本異當藥素；A1、A2、B1、B2、C1、C2、D1、D2、D3、D4、E1、E2、E3、F1、F2為各代謝產(chǎn)物；a.空白對照組；b.陰性對照組；c.滅活對照組；d.轉(zhuǎn)化組。 圖2 金蓮花中8種黃酮類化合物肝微粒體轉(zhuǎn)化的總離子流圖

圖3 已確定結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物肝微粒體代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)圖

2 結(jié)果與分析

2.1 金蓮花黃酮類化合物質(zhì)譜裂解規(guī)律分析

對底物化合物的LC-MS數(shù)據(jù)進行分析，歸納出8種黃酮類化合物在質(zhì)譜電噴霧離子源(ESI)系統(tǒng)中易斷裂的部位及形成的碎片，見表2。黃酮碳苷類主要是以糖環(huán)內(nèi)部的斷裂為主要斷裂形式，單六碳糖碳苷主要脫去m/z90和120的碎片，產(chǎn)生典型的[M-C3H6O3-H]-和[M-C4H8O4-H]-碎片離子，雙糖碳苷主要脫去m/z120、90和60的碎片離子。由于碎片離子結(jié)構(gòu)中含有羰基，質(zhì)譜圖中常見丟失CO的小分子碎片離子。衍生物先斷掉衍生取代基后會按照母核的斷裂方式繼續(xù)斷裂黃酮碳苷部分及苷元部分，O-糖基或O-甲基丁?；环€(wěn)定，會優(yōu)先碎裂。當C-7位有甲氧基時，易發(fā)生脫甲基斷裂。這與研究報道的黃酮化合物裂解規(guī)律一致。

表2 金蓮花中8種黃酮類化合物的質(zhì)譜碎片信息

化合物分子量分子式準分子離子m/z二級碎片離子m/z牡荊素432.38C21H20O10431.10[M-H]-341.00[M-C3H6O3-H]- ([M-H-90]-)、311.02[M-C4H8O4-H]-([M-H-120]-)、283.09[M-C4H8O4-CO-H]- ([M-H-120-28]-)葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷610.15C27H30O16609.14[M-H]-519.07[M-C3H6O3-H]- ([M-H-90]-)、489.09[M-C4H8O4-H]-([M-H-120]-)、429.06[M-C4H8O4-C2H4O2-H]-([M-H-120-60]-)、369.19[M-C6H12O6-C2H4O2-H]-([M-H-180-60]-)、309.07[M-C6H12O6-C4H8O4-H]- ([M-H-180-120]-)、357.03、327.05、298.96異當藥黃素446.40C22H22O10445.12[M-H]-325.06[M-C4H8O4-H]- ([M-H-120]-)、297.01[M-C4H8O4-CO-H]- ([M-H-120-28]-)、282.00[M-C4H8O4-CO-CH3-H]-([M-H-148-15]-)2″-O-(2?-甲基丁酰基)異當藥黃素530.52C27H30O11529.17[M-H]-445.05[M-C5H8O-H]-([M-H-84]-)、427.12[M-C5H8O-H2O-H]-([M-H-84-18]-)、337.12[M-C5H10O2-C3H6O3-H]-([M-H-102-90]-)、307.01[M-C5H10O2-C4H8O4-H]-([M-H-102-120]-)金蓮花碳苷Ⅰ546.17C27H30O12545.17[M-H]-461.09[M-C5H8O-H]-([M-H-84]-)、443.03[M-C5H8O-H2O-H]-([M-H-84-18]-)、353.07[M-C5H10O2-C3H6O3-H]-([M-H-102-90]-)、323.04[M-C5H10O2-C4H8O4-H]- ([M-H-102-120]-)異槲皮素464.38C21H20O12463.09[M-H]-445.05[M-H2O-H]- ([M-H-18]-)、301.04[M-C6H10O5-H]- ([M-H-162]-)葒草素448.38C21H20O11447.10[M-H]-357.04[M-C3H6O3-H]-([M-H-90]-)、327.07[M-C4H8O4-H]-([M-H-120]-)、298.96[M-C4H8O4-CO-H]- ([M-H-120-28]-)日本異當藥素462.41C22H22O11461.11[M-H]-341.07[M-C4H8O4-H]- ([M-H-120]-)、312.94[M-C4H8O4-CO-H]-([M-H-120-28]-)、298.00[M-C4H8O4-CO-CH3-H]-([M-H-148-15]-)

表3 金蓮花中8種黃酮類化合物肝微粒體代謝轉(zhuǎn)化產(chǎn)物檢測結(jié)果

2.2 代謝轉(zhuǎn)化產(chǎn)物結(jié)構(gòu)特征分析

牡荊素(vitexin)，分子式C21H20O10，分子量432.38。經(jīng)肝微粒體轉(zhuǎn)化后有兩個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(A1和A2)。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物A1，保留時間14.18 min，準分子離子峰m/z473.11[M-H]-，分子式C23H22O11，推測其為牡荊素的乙酰化產(chǎn)物。其二級碎片離子m/z431.06[M-H-42]-為脫去乙?；笮纬?，m/z341.14為[M-H-42-90]-，m/z353.14為[M-H-120]-，m/z311.04為[M-H-120-42]-，m/z283.00為[M-H-120-42-28]-，碎片離子及斷裂方式與牡荊素一致，推測其乙?；奈恢每赡茉谔擒盏?位或黃酮母核上。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物A2，保留時間10.38 min，準分子離子峰m/z447.09[M-H]-，分子式C21H20O11。黃酮類B環(huán)是發(fā)生代謝反應(yīng)的主要部位，B環(huán)上沒有或僅有1個羥基時，易被代謝成3′，4′-二羥基黃酮[19]。根據(jù)反應(yīng)規(guī)律，推測是牡荊素發(fā)生羥基化反應(yīng)生成了葒草素，其產(chǎn)生的二級碎片離子m/z357.18[M-H-90]-，327.10[M-H-120]-，與葒草素碎片離子及斷裂方式一致。

葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷(2″-O-β-L-galactopyranosylorientin)，分子式C27H30O16，分子量610.15。經(jīng)肝微粒體轉(zhuǎn)化后得到兩個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(B1和B2)。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物B1，保留時間11.83 min，準分子離子峰m/z771.20[M-H]-，分子式C33H40O21，推測其為糖基化產(chǎn)物。其二級碎片離子m/z591.21[M-H-180]-很可能是丟失C6H12O6中性碎片后形成，碎片離子m/z489.29、369.01、357.07、327.06與葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷碎片離子一致，推測其是增加了一個六碳糖，但糖基化位置無法確定。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物B2，保留時間16.43 min，準分子離子峰m/z651.16 [M-H]-，分子式C29H32O17，推測其為乙?；a(chǎn)物。其二級碎片離子m/z609.27是其脫掉乙?；笮纬?，m/z519.13、489.09是半乳糖部分斷裂形成，m/z471.11是其丟失180(-C6H12O6)后形成，m/z429.08為繼續(xù)脫掉乙?；笮纬?。另外，碎片離子m/z357.11和327.01與葒草素的碎片一致，說明產(chǎn)物的乙?；恢貌辉诎肴樘巧?，也不在糖苷上，很可能在黃酮母核上。

異當藥黃素(isoswertisin)，分子式C22H22O10，分子量446.40。經(jīng)肝微粒體轉(zhuǎn)化后有兩個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(C1和C2)。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物C1，保留時間12.69 min，準分子離子峰m/z431.10[M-H]-，分子式C21H20O10，推測其為異當藥黃素脫掉甲基后生成的牡荊素。其二級碎片離子m/z341.07、311.00和282.99與牡荊素碎片離子及斷裂一致。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物C2，保留時間18.08 min，準分子離子峰m/z487.13[M-H]-，分子式C24H24O11，推測其為異當藥黃素的乙?；a(chǎn)物。其二級碎片離子m/z445.15為脫去乙酰基后形成，m/z427.13為[M-H-60]-，m/z325.00為[M-H-42-120]-，m/z297.02為[M-H-42-148]-，m/z282.04為繼續(xù)丟失CH3碎片，不能確定乙?；恢?。

2″-O-(2?-甲基丁?；?異當藥黃素[2″-O-(2?-methylbutyryl)isoswertisin]，分子式C27H30O11，分子量530.52。經(jīng)肝微粒體轉(zhuǎn)化后有4個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(D1～D4)。其中有3個不同保留時間的準分子離子峰為m/z545.17[M-H]-的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，且其分子式均為C27H30O12，推測是在不同位置發(fā)生了羥基化，生成3個產(chǎn)物D1、D2和D3。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物D1，保留時間為13.33 min，準分子離子峰為m/z545.17[M-H]-，二級碎片離子m/z461.14、443.09、353.07和323.05為連續(xù)丟失84、18、90和120碎片而形成，根據(jù)文獻[20]推測其為金蓮花碳苷Ⅰ，如圖3所示的結(jié)構(gòu)。另外兩個m/z545.17[M-H]-的準分子離子峰，保留時間分別為11.60(轉(zhuǎn)化產(chǎn)物D2)和11.96 min(轉(zhuǎn)化產(chǎn)物D3)，由于2?-甲基丁?；峡梢园l(fā)生ω氧化或ω-1氧化反應(yīng)，且二級碎片離子中都有m/z501和445，其三級碎片離子中有m/z427、337、307碎片，且對m/z501進行二級掃描發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生有m/z427、337、307碎片，與2″-O-(2?-甲基丁?；?異當藥黃素斷裂一致，推測為2″-O-(2?-甲基-4?-羥基丁?；?異當藥黃素(2″-O-(2?-methyl-4?-hydroxybutyryl)isoswertisin)和2″-O-(2?-甲基-3?-羥基丁?；?異當藥黃素(2″-O-(2?-methyl-3?-hydroxybutyryl) isoswertisin)，見圖3所示的結(jié)構(gòu)。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物D4，保留時間12.34 min，準分子離子峰m/z515.16[M-H]-，分子式C26H28O11，推測其為脫甲基產(chǎn)物。其二級碎片離子m/z431.28為[M-H-84]-，是脫去了甲基丁酰基后形成，m/z413.09可能為繼續(xù)脫去一分子水，m/z311.08為[M-H-84-120]-，推測其為2″-O-(2?-甲基丁?；?牡荊素(2″-O-(2?-methylbutyryl)vitexin)，見圖3所示的結(jié)構(gòu)。

金蓮花碳苷Ⅰ(trollisin I)，分子式C27H30O12，分子量546.17。經(jīng)肝微粒體轉(zhuǎn)化后有3個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(E1～E3)。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物E1，保留時間12.71 min，準分子離子峰m/z587.18[M-H]-，分子式C29H32O13，推測其為乙?；a(chǎn)物。其二級碎片離子m/z545.16為其脫去乙?；笮纬?，m/z503.08為其脫去甲基丁酰基后形成，m/z485.08為[M-H-42-60]-，碎片離子m/z443.13、353.12和323.06與金蓮花碳苷Ⅰ碎片一致，說明乙酰化部位不在甲基丁酰基上。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物E2和E3的準分子離子峰為m/z561.16[M-H]-，分子式C27H30O13，保留時間分別為9.02 min(轉(zhuǎn)化產(chǎn)物E2)和9.28 min(轉(zhuǎn)化產(chǎn)物E3)。由于2?-甲基丁酰基上可以發(fā)生ω氧化或ω-1氧化反應(yīng)，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物E2和E3的二級碎片離子中都有m/z517、461、443、353和323，與金蓮花碳苷Ⅰ斷裂一致，推測分別為2″-O-(2?-甲基-4?-羥基丁酰基)日本異當藥素(2″-O-(2?-methyl-4?-hydroxybutyryl)isoswertiajaponin)和2″-O-(2?-甲基-3?-羥基丁?；?日本異當藥素(2″-O-(2?-methyl-3?-hydroxybutyryl) isoswertiajaponin)，見圖3 所示的結(jié)構(gòu)。

異槲皮素(isoquercitrin)，分子式C21H20O12，分子量464.38。經(jīng)肝微粒體轉(zhuǎn)化后有兩個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(F1和F2)。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物F1，保留時間15.41 min，準分子離子峰m/z505.10[M-H]-，分子式C23H22O13，推測其為乙酰化產(chǎn)物。其二級碎片離子m/z463.13為[M-H-42]-，m/z445.05為[M-H-42-18]-，m/z301.04為[M-H-42-162]-，不能確定乙酰化位置。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物F2，保留時間11.55 min，準分子離子峰m/z625.14[M-H]-，分子式C27H30O17，推測其為糖基化產(chǎn)物。其二級碎片離子m/z462.94為[M-H-162]-，m/z301.03為[M-H-162-162]-，不能確定糖基化位置。

葒草素(orientin)，分子式C21H20O11，分子量448.38。葒草素與牡荊素A環(huán)結(jié)構(gòu)相同，肝微粒體轉(zhuǎn)化形式相似，但由于轉(zhuǎn)化組和滅活組均檢測到了準分子離子峰為m/z489.11[M-H]-，分子式為C23H22O12的物質(zhì)，不能確定其是否發(fā)生了乙酰化，可能是滅活的體系殘留一定的酶活性造成的。

日本異當藥素(isoswertiajaponin)，分子式C22H22O11，分子量462.41。日本異當藥素比異當藥黃素多一個羥基，A環(huán)結(jié)構(gòu)相同，理論上會發(fā)生脫甲基反應(yīng)，但由于對照品中有準分子離子峰為m/z447.10[M-H]-，分子式為C21H20O11的物質(zhì)，不能確定其是否發(fā)生了脫甲基反應(yīng)。

3 討論

本研究中肝微粒體可促進黃酮苷類化合物發(fā)生羥基化、乙?；⑻腔约懊摷谆磻?yīng)，說明建立的肝微粒轉(zhuǎn)化模型中不止發(fā)生了I相代謝，也發(fā)生了以乙酰化和糖基化反應(yīng)為代表的Ⅱ相代謝。黃酮碳苷類化合物，在C-8位通過C-C鍵將苷元和糖鏈連接，C-苷鍵不易水解，實驗中沒有直接脫糖的產(chǎn)物生成，異槲皮素是黃酮氧苷類化合物，容易發(fā)生O-苷鍵的水解，但實驗中未能找到直接脫糖的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物?；瘜W成分經(jīng)大鼠肝微粒體轉(zhuǎn)化后，發(fā)生的羥基化、脫甲基和糖基化反應(yīng)，會使轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的極性增強，有利于化合物的排泄，減少化合物的體內(nèi)存留時間，降低毒性。酰化反應(yīng)后，黃酮類化合物的脂溶性和水溶性提高，并能促進脂肪及類脂代謝[21]。本實驗中，金蓮花黃酮類單體成分在大鼠肝微粒體模型中轉(zhuǎn)化率較低，所以沒有檢測到大量的新產(chǎn)物生成。代謝反應(yīng)中存在化合物相互轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象，說明金蓮花的部分藥理活性很可能是由其原形化合物產(chǎn)生的，例如牡荊素、葒草素等[22-23]是已經(jīng)報道的金蓮花中活性較強的成分。

黃酮苷類化合物在腸道中較難吸收，主要在肝臟部位發(fā)生生物轉(zhuǎn)化[14]。肝臟代謝的主要作用是對進入機體的外源性化學成分進行結(jié)構(gòu)修飾，使其易于排出體外，同時化學成分經(jīng)生物轉(zhuǎn)化后的藥理活性變化復(fù)雜，可能進一步產(chǎn)生活性成分，增強藥效或產(chǎn)生毒性成分等。金蓮花中的化學成分被機體吸收后，可直接到達靶器官發(fā)揮藥效，或者通過代謝組織代謝產(chǎn)生的活性產(chǎn)物來發(fā)揮藥效。本文采用大鼠肝微粒體轉(zhuǎn)化模型模擬肝臟代謝過程，對金蓮花中黃酮類單體成分進行了轉(zhuǎn)化研究，并采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進行了結(jié)構(gòu)分析，可進一步為金蓮花成分的體內(nèi)代謝途徑研究和確定活性成分等奠定基礎(chǔ)，也對黃酮類化合物新藥開發(fā)及臨床應(yīng)用具有指導(dǎo)意義。