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      ICAM1、XIAP 在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義研究

      2019-12-23 08:57:40黃蜜王曦暉曹登成
      癌癥進(jìn)展 2019年22期
      關(guān)鍵詞:宮頸炎分化宮頸癌

      黃蜜,王曦暉,曹登成

      1崇州市婦幼保健院檢驗(yàn)科,四川 崇州 611230

      2崇州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,四川 崇州 611230

      3成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,成都 610019

      宮頸癌是臨床常見的婦科惡性腫瘤,近年來,盡管臨床對(duì)宮頸癌的篩查技術(shù)在不斷提高及推廣,但其發(fā)病率仍居高不下,且發(fā)病人群趨于年輕化,對(duì)女性的身體健康及生命安全造成嚴(yán)重威脅[1-2]。目前對(duì)宮頸癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,腫瘤細(xì)胞凋亡受限制、細(xì)胞的惡性增殖及細(xì)胞周期的紊亂均是導(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生與發(fā)展的重要因素[3-4]。隨著各種分子檢測(cè)方法的出現(xiàn)和對(duì)宮頸癌致病因素的認(rèn)識(shí),更多的宮頸癌分子標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)[5]。細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM1)廣泛存在于機(jī)體正常細(xì)胞表面,但是在腫瘤組織中的表達(dá)情況鮮有報(bào)道[6]。X連鎖凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)是一種凋亡抑制蛋白,據(jù)相關(guān)研究顯示,XIAP參與多種腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[7]。本研究主要探討ICAM1、XIAP在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義,現(xiàn)報(bào)道如下。

      1 對(duì)象與方法

      1.1 研究對(duì)象

      選取2017年8月至2018年8月崇州市婦幼保健院收治的76例宮頸癌患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)病理學(xué)檢查確診為宮頸癌;術(shù)前未接受過放療和化療。排除標(biāo)準(zhǔn):伴其他惡性腫瘤。76例宮頸癌患者中,年齡31~59歲,平均年齡(48.12±5.19)歲;病理類型:鱗狀細(xì)胞癌42例,腺癌34例;國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,F(xiàn)IGO)分期:Ⅰ~Ⅱ期51例,Ⅲ~Ⅳ期25例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例。另選取同期行婦科疾病檢查的宮頸炎患者43例,年齡29~56歲,平均年齡(45.28±4.92)歲。選取健康體檢者39例,年齡25~60歲,平均年齡(47.39±6.46)歲。選取76例宮頸癌患者的宮頸癌組織標(biāo)本為宮頸癌組,43例宮頸炎患者的宮頸炎組織標(biāo)本為宮頸炎組,39例健康體檢者的正常宮頸組織標(biāo)本為對(duì)照組。本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),且所有受試者均對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書。

      1.2 檢測(cè)方法

      采用免疫熒光組化法檢測(cè)3組宮頸組織中ICAM1、XIAP的表達(dá)情況。鼠抗人ICAM1單克隆抗體購自Santa Cruz公司,兔抗人XIAP多克隆抗體購自美國Abcam公司,二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenzidine,DAB)顯色劑購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。用4%多聚甲醛對(duì)收集的標(biāo)本進(jìn)行固定,然后進(jìn)行石蠟包埋,將石蠟切片分別置于二甲苯及75%、85%、90%、95%、100%乙醇中浸泡5 min,磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline,PBS)沖洗2次,1%過氧化氫處理后室溫下孵育10 min,PBS洗滌3次,將石蠟切片放置在枸櫞酸鈉緩沖液中,并置于微波爐中加熱15 min,PBS洗滌3次,然后置入山羊血清,在室溫下封閉10 min,加入一抗,在溫度為4℃的環(huán)境下孵育過夜,取出后恢復(fù)到室溫滴加二抗,在室溫下孵育30 min,PBS沖洗后,進(jìn)行DAB顯色,自來水終止染色,蘇木素復(fù)染,梯度乙醇脫水,中性樹脂封片觀察。以PBS作為陰性對(duì)照。

      1.3 陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)

      ICAM1主要定位于細(xì)胞膜,XIAP主要定位于細(xì)胞質(zhì),出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒時(shí)為陽性表達(dá)。根據(jù)陽性細(xì)胞所占百分比及著色強(qiáng)度評(píng)分綜合評(píng)價(jià)。陽性細(xì)胞所占百分比:無陽性細(xì)胞為0分,<10%為1分,10%~50%為2分,51%~80%為3分,>80%為4分。著色強(qiáng)度:細(xì)胞無顯色為0分,淺黃色為1分,棕黃色為2分,黃褐色為3分。上述兩種計(jì)分方法得分相乘為總分,總分0~12分,≥4分為陽性表達(dá)。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

      采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以例數(shù)及率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析;以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.13 組組織中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)情況的比較

      3組組織中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。其中,宮頸癌組中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)率均高于宮頸炎組與對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);宮頸炎組與對(duì)照組中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)率比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(表1、圖1)

      表1 3組組織中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)情況的比較[n(%)]

      圖1 宮頸癌組織中ICAM1、XIAP 陽性表達(dá)的免疫組化圖(DAB染色,×200)

      2.2 不同臨床特征宮頸癌患者宮頸癌組織中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)情況的比較

      不同年齡、腫瘤直徑、病理類型的宮頸癌患者的宮頸癌組織中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)率比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);FIGO分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化的宮頸癌患者的宮頸癌組織中ICAM1陽性表達(dá)率分別高于FIGO分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化的宮頸癌患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.404、6.345、15.585,P<0.05);FIGO分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化的宮頸癌患者的宮頸癌組織中XIAP陽性表達(dá)率分別高于FIGO分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化的宮頸癌患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.685、10.011、14.650,P<0.05)。(表2)

      表2 不同臨床特征宮頸癌患者的宮頸癌組織中ICAM1、XIAP陽性表達(dá)情況(n=76)

      2.3 宮頸癌組織中ICAM1與XIAP 表達(dá)的相關(guān)性分析

      Spearman相關(guān)分析顯示,宮頸癌組織中ICAM1與XIAP表達(dá)無相關(guān)性(r=0.097,P>0.05)。

      3 討論

      近年來,隨著人們生活方式的改變,宮頸癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展是一個(gè)動(dòng)態(tài)發(fā)展的過程,若不及時(shí)診斷與治療,患者治療效果及預(yù)后極差,因此在宮頸癌患者的早期診斷過程中尋找一種靈敏度及特異度均較高的標(biāo)志物,一直是臨床學(xué)者研究的重點(diǎn)[8-10]。ICAM1屬免疫球蛋白超家族成員,是一種細(xì)胞表面跨膜糖蛋白,多分布于細(xì)胞表面,多為人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1和淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1的配體,其能夠介導(dǎo)多種細(xì)胞在免疫反應(yīng)過程中的相互作用,在某些病理狀態(tài)下在血清或組織中的表達(dá)水平會(huì)出現(xiàn)不同程度的升高[11-14]。據(jù)相關(guān)研究報(bào)道,ICAM1在肺癌、胃癌、霍奇金病、黑色素瘤、結(jié)直腸癌、乳腺癌及肝癌中均存在過表達(dá),但其在宮頸癌組織中的表達(dá)情況及是否與宮頸癌的發(fā)生及發(fā)展有關(guān)卻鮮有報(bào)道[15-16]。本研究結(jié)果顯示,宮頸癌組織中ICAM1的陽性表達(dá)率高于宮頸炎組與對(duì)照組,且宮頸炎組與對(duì)照組ICAM1陽性表達(dá)率無明顯差異,說明ICAM1在宮頸癌組織中呈異常表達(dá),在正常宮頸組織及宮頸炎組織中表達(dá)極低或無表達(dá),提示ICAM1可能與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。目前,ICAM1與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及侵襲生長的關(guān)系已經(jīng)成為一個(gè)新的研究熱點(diǎn),在本研究對(duì)ICAM1陽性表達(dá)情況與宮頸癌臨床特征的關(guān)系分析中顯示,F(xiàn)IGO分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化的宮頸癌患者的宮頸癌組織中ICAM1陽性表達(dá)率分別高于FIGO分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化的宮頸癌患者(P<0.05),提示ICAM1陽性表達(dá)與宮頸癌患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度有關(guān)。分析其原因主要是因?yàn)镮CAM1能夠抑制淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞與自然殺傷細(xì)胞,進(jìn)而使腫瘤細(xì)胞能夠逃逸機(jī)體免疫,促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

      XIAP是凋亡抑制蛋白家族中的一員,主要通過選擇性調(diào)控caspase 9、caspase 7、caspase 3蛋白的表達(dá),對(duì)細(xì)胞凋亡產(chǎn)生抑制作用。XIAP在正常組織中的陽性表達(dá)率極低甚至不表達(dá),而在肝癌、肺癌、宮頸癌及乳腺癌等惡性腫瘤組織中具有較高的表達(dá)水平[17-19]。本研究結(jié)果顯示,宮頸癌組織中XIAP的陽性表達(dá)率高于宮頸炎組與對(duì)照組,結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致[20-21],說明XIAP作為一種抗凋亡因子在宮頸癌組織中異常表達(dá)。此外本研究還發(fā)現(xiàn),F(xiàn)IGO分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化的宮頸癌患者的宮頸癌組織中XIAP陽性表達(dá)率分別高于FIGO分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化的宮頸癌患者(P<0.05),提示XIAP陽性表達(dá)與宮頸癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度有關(guān),分析其原因主要是因?yàn)閄IAP能夠抑制宮頸癌細(xì)胞凋亡,使宮頸癌細(xì)胞存活時(shí)間延長,進(jìn)而促進(jìn)宮頸癌的惡性發(fā)展。在對(duì)宮頸癌組織中ICAM1、XIAP表達(dá)的相關(guān)性分析顯示,二者之間無相關(guān)性,由于本研究樣本量較少,該觀點(diǎn)還需進(jìn)一步增加研究樣本深入研究。

      綜上所述,ICAM1、XIAP在宮頸癌組織中呈異常表達(dá),且與宮頸癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度有關(guān),對(duì)宮頸癌的診斷及病情判斷具有一定的臨床意義。

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