芽孢桿菌蛋白酶復(fù)合制劑對蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響

丁 鵬 單紅艷 賀 喜* 趙麗芳 郭寶林 王 璐 宋澤和

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院飼料安全與高效利用教育部工程研究中心 湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南長沙410128；2.北京昕大洋科技發(fā)展有限公司，北京100081）

隨著生活水平的提高，人類對于畜禽產(chǎn)品比以前更加關(guān)注品質(zhì)。雞蛋是日常生活中最常見的畜禽產(chǎn)品之一，也是人類補(bǔ)充蛋白質(zhì)主要來源之一，如何改善雞蛋蛋品質(zhì)是畜禽生產(chǎn)中重要的問題。研究表明提高雞蛋蛋品質(zhì)最主要的方式是從蛋雞日糧入手，改善蛋雞日糧飼料的營養(yǎng)成分，提高蛋雞對飼料養(yǎng)分的消化吸收利用效率，進(jìn)而改善雞蛋的蛋品質(zhì)[1-2]。通過將芽孢桿菌添加至畜禽日糧中的大量研究發(fā)現(xiàn)，芽孢桿菌可以通過改善動物腸道中的微生態(tài)環(huán)境，維護(hù)動物機(jī)體健康，從而促進(jìn)畜禽生產(chǎn)性能。蛋白酶在畜禽日糧中的應(yīng)用研究也十分廣泛，在畜禽日糧中添加蛋白酶可以有效的提高動物機(jī)體對飼料中蛋白質(zhì)的消化吸收，改善動物機(jī)體生產(chǎn)性能的同時還能產(chǎn)生可觀的經(jīng)濟(jì)效益[3-4]。綜合兩種飼料添加劑應(yīng)用于畜禽日糧中的研究較為少見，根據(jù)前期本課題組在芽孢桿菌制劑對蛋雞的影響研究確定了芽孢桿菌制劑在蛋雞飼養(yǎng)上的最佳添加量，以及結(jié)合蛋白酶在家禽飼養(yǎng)上的應(yīng)用效果，本試驗研究旨在通過在產(chǎn)蛋后期羅曼蛋雞日糧中添加芽孢桿菌蛋白酶復(fù)合生物制劑，探討芽孢桿菌蛋白酶復(fù)合生物制劑對羅曼蛋雞產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能及各項蛋品質(zhì)綜合指標(biāo)的影響，為芽孢桿菌蛋白酶復(fù)合生物制劑在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)，以及為科學(xué)高效的改善蛋雞養(yǎng)殖效益提供幫助。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

芽孢桿菌蛋白酶復(fù)合制劑中益生菌部分主要由枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌及凝結(jié)芽孢桿菌（平均2×1010CFU/g）組成，蛋白酶活性為93 000 U/g。來源于某科技發(fā)展公司。

1.2 試驗設(shè)計

選取360 羽60 周齡左右體況基本一致的產(chǎn)蛋后期羅曼蛋雞，隨機(jī)分為2 個處理，每個處理6 個重復(fù)，每個重復(fù)30 羽。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在基礎(chǔ)日糧中添加芽孢桿菌蛋白酶制劑。試驗分為兩個階段，1～14 d 為前階段，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg 的芽孢桿菌蛋白酶制劑；15～28 d 為后階段，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 mg/kg 的芽孢桿菌蛋白酶制劑。試驗飼糧及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧配方及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理與采樣

試驗于2018 年11 月至2018 年12 月在湖南省常德市安鄉(xiāng)縣興鑫蛋雞場進(jìn)行，根據(jù)蛋雞場常規(guī)程序進(jìn)行飼養(yǎng)管理。預(yù)試期3 d 后開始正式試驗，試驗期間蛋雞自由飲水，根據(jù)蛋雞體重每天人工飼喂2 次，避免蛋雞過肥。在試驗期的最后1 d每個重復(fù)隨機(jī)拾取10枚雞蛋用于蛋品質(zhì)相關(guān)指標(biāo)的測定。

1.4 測定指標(biāo)及測定方法

1.4.1 蛋雞生產(chǎn)性能

在整個試驗期間，每天以重復(fù)為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重和死淘數(shù)，稱取剩余飼料重量，記錄蛋雞采食量，并計算產(chǎn)蛋率（%）、平均蛋重（g）、平均日采食量（g）、料蛋比（g/g）和日產(chǎn)蛋量（g），計算所用公式如下：

產(chǎn)蛋率(%)=總產(chǎn)蛋數(shù)/（雞只數(shù)×試驗天數(shù)）×100；

平均蛋重（g）=總蛋重量/蛋個數(shù)；

料蛋比（g/g）=總采食量/總蛋重量；

平均日采食量(g)=總采食量/(雞只數(shù)×試驗天數(shù))；

日產(chǎn)蛋量（g）=總蛋重量/雞只數(shù)。

1.4.2 雞蛋蛋品質(zhì)測定

蛋形指數(shù)：用蛋形指數(shù)測定儀(以色列NFN385)進(jìn)行測定；

蛋殼厚度：采用數(shù)顯型游標(biāo)卡尺量取鈍端、銳端、中腰部位進(jìn)行測定，取平均值；

蛋殼強(qiáng)度：采用蛋殼強(qiáng)度分析儀進(jìn)行測定；

蛋重、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色采用多功能蛋品質(zhì)檢測儀測定；

蛋殼重、蛋黃重：將蛋打開, 采用蛋黃分離器分離蛋黃，使用精確到0.01 g 的電子天平分別測定蛋殼重、蛋黃重。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

采用Excel 2007 和SPSS 20.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，兩個處理組間進(jìn)行t檢驗，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表2 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2 可知，在前期階段（1～14 d）蛋雞生產(chǎn)性能中，芽孢桿菌酶制劑試驗組相比對照組羅曼蛋雞產(chǎn)蛋率和平均日產(chǎn)蛋量均有所提高，其中產(chǎn)蛋率提高了4.82%，但差異均不顯著（P＞0.05）；料蛋比有所下降（P＞0.05），其余蛋雞生產(chǎn)性能指標(biāo)均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表3 可知，在后期階段（15～28 d）蛋雞生產(chǎn)性能中，芽孢桿菌酶制劑試驗組相比對照組羅曼蛋雞產(chǎn)蛋率和平均日產(chǎn)蛋量有些許的提高，但未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）；試驗組料蛋比均有所下降（P＞0.05），其余蛋雞生產(chǎn)性能指標(biāo)均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表4 可知，在各處理組全階段蛋雞生產(chǎn)性能中，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組相比對照組羅曼蛋雞平均日采食量有升高的趨勢（P=0.09）；產(chǎn)蛋率和平均日產(chǎn)蛋量均有所提高（P＞0.05）；試驗組料蛋比相比對照組均有所下降（P＞0.05）；各處理組之間雞蛋平均蛋重沒有顯著差異（P＞0.05）。

2.2 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

表5 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表5可知，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組雞蛋蛋殼強(qiáng)度相比對照組提高了11.37%，有一定的趨勢（P=0.07）；雞蛋蛋黃顏色和蛋黃重量相比對照組就有所提高，但未達(dá)到差異顯著（P＞0.05）；雞蛋哈氏單位相比對照組提高了4.39%，但差異不顯著（P＞0.05）；雞蛋蛋殼厚度、蛋殼比重、蛋形指數(shù)和蛋白高度均無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

益生菌在畜禽飼糧中的應(yīng)用研究已經(jīng)十分廣泛，芽孢桿菌作為最常見的益生菌之一，絕大部分將芽孢桿菌應(yīng)用于畜禽飼糧中的研究表明芽孢桿菌可以通過維護(hù)畜禽腸道內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，改善畜禽機(jī)體的健康狀況，從而有效促進(jìn)畜禽的生產(chǎn)性能；同樣畜禽飼糧中添加酶制劑在生產(chǎn)應(yīng)用中已經(jīng)非常普遍，研究表明將蛋白酶添加到畜禽飼糧中可以有效的改善動物機(jī)體對于飼料中蛋白質(zhì)的消化吸收，提高飼料中蛋白質(zhì)利用的同時還可以促進(jìn)畜禽生產(chǎn)性能，帶來良好的經(jīng)濟(jì)效益[5-6]。根據(jù)蛋雞生產(chǎn)養(yǎng)殖的特點，在蛋雞產(chǎn)蛋高峰期過后產(chǎn)蛋率及日產(chǎn)蛋量開始逐漸降低，從而進(jìn)入蛋雞的產(chǎn)蛋后期，如何有效提高蛋雞產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋率和日產(chǎn)蛋量或者延緩蛋雞產(chǎn)蛋后期來臨時間是提高蛋雞養(yǎng)殖生產(chǎn)收益的關(guān)鍵所在[7]。朱復(fù)躍[8]將復(fù)合枯草芽孢桿菌制劑添加至蛋雞飼糧中研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)合枯草芽孢桿菌制劑試驗組蛋雞產(chǎn)蛋率相比對照組均有所提高，試驗組平均蛋重相比對照組最多提高了13.52%，差異顯著，同時試驗組蛋雞料蛋比相比對照組均有所降低。張旭等[9]同樣在蛋雞日糧中添加一定濃度的枯草芽孢桿菌制劑研究發(fā)現(xiàn)，試驗組蛋雞產(chǎn)蛋率及日產(chǎn)蛋量相比對照組均有所提高。裴躍明等[10]研究表明，在產(chǎn)蛋后期蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑后，試驗組蛋雞產(chǎn)蛋率相比對照組最高提升了3.08%，雞蛋平均蛋重最高提升了2.17%，破殼率相比對照組降低了41.94%，料蛋比降低了4.98%，同時枯草芽孢桿菌試驗組蛋雞腹瀉率相比對照組降低了47.6%，有效的改善了蛋雞健康狀況，提高了蛋雞生產(chǎn)性能。說明芽孢桿菌在蛋雞日糧中應(yīng)用均取得了良好的效果。

本試驗研究中，各處理組之間在每個試驗階段芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組蛋雞的產(chǎn)蛋率和日產(chǎn)蛋量均高于對照組，且試驗組蛋雞料蛋比低于對照組，從全階段來看，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組蛋雞平均日采食量相比對照組有提高的趨勢，說明芽孢桿菌蛋白酶制劑對于產(chǎn)蛋后期羅曼蛋雞的生產(chǎn)性能有一定的促進(jìn)作用，可以延后蛋雞產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋量下降的時間，與李俊波等[11]利用芽孢桿菌飼喂蛋雞的試驗結(jié)果相類似，有效的提高了蛋雞養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。

3.2 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

雞蛋蛋品質(zhì)的評定指標(biāo)主要分為雞蛋外部指標(biāo)和內(nèi)部指標(biāo)，其中外部指標(biāo)主要包括蛋形指數(shù)及蛋殼相關(guān)指標(biāo)等，蛋品質(zhì)內(nèi)部指標(biāo)主要包括蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃重量及哈氏單位等[12]。蛋雞養(yǎng)殖過程中，雞蛋蛋殼品質(zhì)是影響雞蛋商業(yè)價值的重要因素之一，良好的蛋殼品質(zhì)可以有效的保證雞蛋運輸?shù)冗^程的完整，也可以避免軟殼蛋、破殼蛋和畸形蛋的形成。雞蛋蛋殼的主要成分是無機(jī)鹽，無機(jī)鹽中碳酸鈣的含量達(dá)到93%左右，其余多為碳酸鎂及碳酸鎂和碳酸鈣的混合物，約占整個無機(jī)鹽含量的3.8%左右，另外，蛋殼中還包含多種礦物元素，如銅、鐵、鋅、錳、硒等。大量研究表明，提高蛋雞雞蛋蛋殼品質(zhì)的關(guān)鍵在于改善蛋雞對飼料中鈣、磷等礦物質(zhì)元素的消化代謝，陳連民等[13]研究發(fā)現(xiàn)，在海蘭褐商品蛋雞日糧中添加芽孢桿菌制劑后，試驗組雞蛋破殼率相比對照組顯著降低，蛋殼重量和蛋殼強(qiáng)度相比對照組顯著提高；雞蛋蛋殼中鈣的沉積水平達(dá)到一定程度后，蛋殼中鈣元素含量的高低不再是決定雞蛋蛋殼強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)，若蛋殼中鈣元素含量過高而引起蛋殼中鈣元素不均勻?qū)?dǎo)致沙殼蛋的形成[14]，該試驗研究表明，芽孢桿菌試驗組雞蛋蛋殼中碳元素和氮元素的相對比重顯著高于對照組，而鈣、磷、鎂和氧元素的相對比重顯著低于對照組；通過掃描電鏡對蛋殼斷面的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，芽孢桿菌試驗組相比對照組蛋殼斷面結(jié)構(gòu)更加整齊致密，乳突層延展厚度和蛋殼乳突間隙較對照組更為優(yōu)良，說明芽孢桿菌可以通過調(diào)節(jié)蛋雞機(jī)體對飼料中礦物質(zhì)元素的消化代謝來提高雞蛋蛋殼的機(jī)械性能，從而有效的改善蛋殼品質(zhì)。王文娟等[15]研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌可以通過抑制蛋雞腸道中大腸桿菌和沙門氏菌的生長繁殖，促進(jìn)有益菌的增殖，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡的同時改善蛋雞腸道健康，從而改善蛋雞腸道對飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，進(jìn)而提升雞蛋蛋殼品質(zhì)。本試驗研究中，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組蛋雞蛋殼厚度和蛋殼比重和對照組沒有明顯差異，但是試驗組雞蛋蛋殼強(qiáng)度相比對照組有提高的趨勢，此結(jié)果與王翔宇等[16]在蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌后的結(jié)果相類似，說明芽孢桿菌蛋白酶制劑可以通過促進(jìn)蛋雞對于飼料中養(yǎng)分的消化吸收，一定程度上調(diào)節(jié)鈣磷等礦物質(zhì)元素的代謝，進(jìn)而改善蛋殼品質(zhì)。同樣本試驗中復(fù)合生物制劑中的蛋白酶成分也改善了蛋雞對于飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高飼料利用率的同時也改善了蛋雞的機(jī)體健康狀況，可能一定程度上有益于雞蛋蛋殼品質(zhì)的提高，芽孢桿菌與蛋白酶之間對于雞蛋蛋殼品質(zhì)的改善是否存在一定的相關(guān)關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

蛋白高度和哈氏單位是評價雞蛋蛋清品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，主要受雞蛋蛋清中濃蛋白含量的影響，當(dāng)?shù)鞍赘叨群凸蠁挝坏臄?shù)值越大時，蛋清的粘稠度越高，表示雞蛋蛋清的品質(zhì)越好，其中哈氏單位的降低表明雞蛋蛋清的凝膠性下降，蛋清品質(zhì)下降[17]；蛋黃顏色是評價雞蛋品質(zhì)中比較直觀的指標(biāo)，在一定范圍內(nèi)蛋黃顏色的加深，蛋黃顏色評分的提高表示蛋黃品質(zhì)的上升，研究表明蛋黃顏色的變化取決于蛋雞對飼糧中葉黃素及胡蘿卜素等物質(zhì)的吸收和蛋雞機(jī)體對這些物質(zhì)的沉積有關(guān)[18]。蔣一秀等[19]研究發(fā)現(xiàn)，在如皋黃雞日糧中添加枯草芽孢桿菌后，試驗組雞蛋蛋黃重量相比對照組有提高的趨勢，顯著的提高了試驗組雞蛋蛋白高度和哈氏單位，同時表明0.75%枯草芽孢桿菌添加量的試驗組雞蛋平均蛋重、蛋黃重量、蛋白高度以及哈氏單位相比其他組取得了最優(yōu)效果。葉密等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在初產(chǎn)蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌對蛋雞蛋品質(zhì)有一定的改善作用，其中0.5%枯草芽孢桿菌添加量組相比其余各處理組雞蛋蛋白高度和哈氏單位均顯著提高，同時發(fā)現(xiàn)各枯草芽孢桿菌添加試驗組雞蛋蛋清彈性及蛋清黏聚性均顯著高于對照組，雞蛋熟化后蛋黃和蛋清的硬度、黏聚性以及咀嚼度相比對照組均有一定程度的改善，不同濃度的枯草芽孢桿菌制劑均能改善雞蛋蛋品質(zhì)，且0.5%枯草芽孢桿菌添加量在各項蛋品質(zhì)指標(biāo)中表現(xiàn)最佳。綜上說明芽孢桿菌應(yīng)用于蛋雞日糧中可以有效的改善蛋白高度、哈氏單位及蛋黃顏色等蛋品質(zhì)指標(biāo)，而酶制劑如蛋白酶等在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用主要集中在提高蛋雞對飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，研究其對于蛋雞生產(chǎn)性能的較多，對于蛋品質(zhì)的研究較為少見。本試驗研究中，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組雞蛋蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃相對重量以及哈氏單位相比對照組均有所提高，說明芽孢桿菌蛋白酶制劑可以一定程度上改善產(chǎn)蛋后期羅曼蛋雞蛋品質(zhì)。

4 結(jié)論

將芽孢桿菌制劑及蛋白酶制劑復(fù)合使用可以有效發(fā)揮益生菌作用的同時還可以協(xié)同蛋白酶的作用。本研究表明芽孢桿菌蛋白酶復(fù)合生物制劑可以提高產(chǎn)蛋后期羅曼蛋雞產(chǎn)蛋率和平均日產(chǎn)蛋量，改善料蛋比；同時可以提高產(chǎn)蛋后期羅曼蛋雞蛋殼強(qiáng)度、蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃重量以及哈氏單位，改善了雞蛋蛋品質(zhì)，為蛋雞的科學(xué)高效養(yǎng)殖提供了新的思路。