“藍(lán)天使”玉簪組培快繁適宜培養(yǎng)基配方篩選試驗(yàn)初報(bào)

陳慧蘭 陳 權(quán) （上海孫橋現(xiàn)代溫室種子種苗有限公司，上海市浦東新區(qū) 201210）

李文劍 （上海孫橋溢佳農(nóng)業(yè)技術(shù)股份有限公司，上海市浦東新區(qū) 201210）

李洪霞 （上海孫橋現(xiàn)代農(nóng)業(yè)聯(lián)合發(fā)展有限公司，上海市浦東新區(qū) 201210）

玉簪（Hosta plantaginea）屬宿根草本，耐旱、耐寒、喜陰，是一種重要的園林地被植物。玉簪除可供觀賞外，其鮮花含有芳香油，可用于提取制作芳香浸膏；同時(shí)，玉簪的嫩芽可供食用，全草可入藥。因此，近年來，玉簪已成為極具開發(fā)前景的野生花卉和藥用植物，我國也陸續(xù)從美國和歐洲引進(jìn)了不少優(yōu)良品種進(jìn)行栽培試驗(yàn)。目前，已有部分品種在國內(nèi)園林綠化上獲得應(yīng)用，其中，“藍(lán)天使”玉簪備受關(guān)注。近年來，為促進(jìn)玉簪的推廣應(yīng)用，常使用組培方式進(jìn)行快速、大量繁殖玉簪。在此背景下，筆者擬以“藍(lán)天使”玉簪為試驗(yàn)材料，通過分析不同培養(yǎng)基對其愈傷組織的形成、芽的分化增殖和生根等的影響，篩選出適合“藍(lán)天使”玉簪組培快繁的最佳培養(yǎng)基配方?，F(xiàn)將相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材 料

選擇“藍(lán)天使”玉簪當(dāng)年生無菌分株基部塊莖作試驗(yàn)材料。

1.2 培養(yǎng)條件

以MS為基本培養(yǎng)基，附加不同種類和濃度的激素進(jìn)行處理，另加3%蔗糖和0.6%瓊脂粉（生根階段的蔗糖濃度降為2%，基本培養(yǎng)基為1/2 MS），pH為5.8；培養(yǎng)過程中，光照時(shí)數(shù)為12 h/d，光照強(qiáng)度為2 500～3 000 Lux，溫度控制在（25±1) ℃。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基篩選

共設(shè)7個(gè)處理，分別為：（1）MS+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（2）MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（3）MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（4）MS+1.5 mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA；（5）MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（6）MS+1.5 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA；（7）MS+2.0 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA。

1.3.2 芽增殖培養(yǎng)基篩選

共設(shè)8個(gè)處理，分別為：（A）MS+0.2 mg/L 6-BA；（B）MS+0.5 mg/L 6-BA；（C）MS+1.0 mg/L 6-BA；（D）MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA；（E）MS+1.5 mg/L 6-BA；（F）MS+2.0 mg/L 6-BA；（G）MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA ；（H）MS+0.5 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA。

1.3.3 生根培養(yǎng)基篩選

共設(shè)9個(gè)處理，分別為：①1/2 MS+0.2 mg/L IBA；②1/2 MS+0.2 mg/L IAA；③1/2 MS+0.2 mg/L NAA；④1/2 MS+0.5 mg/L IBA；⑤1/2 MS+0.5 mg/L IAA；⑥1/2 MS+0.5 mg/L NAA；⑦1/2 MS+1.0 mg/L IBA；⑧1/2 MS+1.0 mg/L IAA；⑨1/2 MS+1.0 mg/L NAA。

1.3.4 計(jì)算公式

芽誘導(dǎo)率（%）＝（有芽生成的塊莖數(shù)÷無菌塊莖數(shù)）×100；芽分化增殖比例=接種數(shù)量÷分切后數(shù)量，在轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；生根率（%）=（生根苗數(shù)量÷接種數(shù)量）×100，在生根單株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基30 d后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，以每株苗長根2～3條、根長0.5～1 cm為生根苗。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對塊莖形成愈傷組織和芽誘導(dǎo)的影響

從玉簪一年生無菌苗上取其基部塊莖，接種到不同培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)基接種20個(gè)塊莖，培養(yǎng)培養(yǎng)30 d后觀察統(tǒng)計(jì)其愈傷組織和芽誘導(dǎo)情況，結(jié)果見表1。

表1 不同處理對玉簪愈傷組織的形成和芽誘導(dǎo)的影響

由表1可知，各處理均可出芽。處理(1)、(2)基本上不形成愈傷組織，每個(gè)塊莖均可出苗，苗粗壯但出苗少；處理(5)可形成較好的愈傷組織，愈傷組織生成率達(dá)到100%，出芽數(shù)量多；處理(6)的愈傷組織塊大，但有玻璃化現(xiàn)象，出苗比處理(5)少。由此分析可知，NAA有利于愈傷組織的形成，6-BA有利于芽的形成，且能促進(jìn)芽的分化生成，但高劑量的NAA和6-BA組合會(huì)形成過多愈傷組織并出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象。在本試驗(yàn)中，使用2.0 m g/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的組合可得到滿意的愈傷組織和芽的誘導(dǎo)效果。

2.2 不同處理對芽增殖的影響

將分化并帶有芽的愈傷組織塊（每塊愈傷組織帶有1個(gè)芽）接種在不同增殖培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)基接種20塊，培養(yǎng)30 d后觀察芽增殖情況，結(jié)果見表2。

由表2可知，各處理間芽的增殖比例存在極顯著差異，其中處理（A）、（B）、（C)的芽增殖比例較處理（D）、（E）、（F）、（G）、（H)低；處理（D）、（H）的芽增殖比例達(dá)4以上，且分化芽的質(zhì)量較好；處理（F）、（G）的芽增殖比例高，但因激素使用過量，芽的高度不如處理（D）、（H），且有玻璃化現(xiàn)象；處理（G）使用了玉米素，價(jià)格昂貴。由此可知，6-BA用量是芽分化增殖的關(guān)鍵，但劑量過高易出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象。在本試驗(yàn)中，使用1.5 mg/L 6-BA與0.1 mg/L IAA的組合可提高芽的均勻度和高度，從而提高分化芽的質(zhì)量，達(dá)到較好的增殖效果。

表2 不同處理對玉簪芽增殖的影響

2.3 不同處理對生根的影響

在增殖培養(yǎng)形成的大量叢生芽中，選擇生長較好的單株芽（芽高3～5 cm），接種于不同生根培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)基接種100株，培養(yǎng)30 d后觀察統(tǒng)計(jì)生根情況，以單株長根2～3條、根長0.5～1.0 cm為合格生根苗，結(jié)果見表3。

表3 不同處理對玉簪生根的影響

由表3可知，處理④、⑥、⑦、⑨均有較好的生根效果。其中，處理④、⑦均選用IBA，濃度分別為0.5 mg/L和1.0 mg/L，但使用0.5 mg/L IBA的生根效果優(yōu)于使用1.0 mg/L IBA；處理⑥與處理⑨均選用NAA，濃度分別為0.5 mg/L和1.0 mg/L，雖然NAA也能得到100%的生根率，但因其基部有愈傷組織生成，生根效果不如IBA。因此，在本試驗(yàn)中，以1/2 MS+0.5 mg/L IBA為最佳的生根培養(yǎng)基。

3 結(jié) 論

試驗(yàn)結(jié)果表明，在玉簪基部塊莖誘導(dǎo)階段，以培養(yǎng)基MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+3%蔗糖的芽誘導(dǎo)效果最好；在芽分化增殖階段，以培養(yǎng)基 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+3%蔗糖的芽增殖效果最佳；在生根階段，以培養(yǎng)基1/2 MS+0.5 mg/L IBA+2%蔗糖的生根效果最好。