女性HPV感染及基因分型年齡分布的臨床調(diào)查

李瑞敏 宋文月 尹保娜 安 芳 褚艷蓉 張 莉

人類(lèi)乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是宮頸癌及癌前病變的主要病因，預(yù)防和監(jiān)測(cè)HPV感染可有效防治宮頸癌。HPV感染率及亞型分布在不同人群、不同地域、年齡之間存在明顯的差異［1，2］。本研究通過(guò)對(duì)焦作市婦幼保健院18 336例婦科門(mén)診患者宮頸刷片標(biāo)本進(jìn)行HPV亞型檢測(cè)，分析HPV感染及基因分型年齡分布情況，為該地區(qū)宮頸癌篩查和防治工作提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象 2015年1月～2017年12月在焦作市婦幼保健院婦科門(mén)診就診并參加HPV分型檢測(cè)的女性患者18 336例，年齡15～89歲。分為5個(gè)年齡段：＜26、26～35、36～45、46～55和 ＞55歲。

1.2樣本采集 暴露宮頸，用棉簽擦去分泌物，用HPV采樣刷在宮頸口順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)5周，緩緩取出采集刷，將采樣刷放入取樣管中，-20℃保存，避免反復(fù)凍融，1周內(nèi)檢測(cè)完畢。

1.3檢測(cè)方法 具體操作按照21種（HPV）分型檢測(cè)試劑盒（廣東凱普生物科技股份有限公司）說(shuō)明進(jìn)行病毒DNA提取、PCR擴(kuò)增、雜交、顯色，診斷脫落細(xì)胞標(biāo)本中的21種HPV病毒DNA分子的存在。

1.4統(tǒng)計(jì)方法 應(yīng)用SPASS 19.0軟件，計(jì)數(shù)資料以%表示；采用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1HPV亞型感染分布情況 對(duì)18 336例婦科門(mén)診患者進(jìn)行HPV分型檢測(cè)，HPV43未被檢出，其余20種亞型均被檢出（見(jiàn)圖1）。HPV感染前3位的亞型為HPV16（5.2%）、HPV52（3.5%）和 HPV58（2.9%），均為高危亞型。

圖1 21種HPV亞型感染分布

2.2HPV感染率情況 18 336例的總感染率為22.3%（4084/18 336）。2015、2016、2017年感染率分別為 24.2%（1106/4571）、21.2%（1249/5891）、18.9% （1488/7874）；HPV感染率呈下降趨勢(shì)，三年比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；HPV感染前3位的亞型HPV16、HPV52、HPV58三年比較無(wú)下降趨勢(shì)（圖2）。

圖2 2015、2016、2017年度HPV感染率

2.3HPV感染年齡分布 總檢測(cè)樣本年齡段中：＜26歲組感染率最高（32.9%，250/779），其次為 ＞55歲段（27.0%，210/778），與其他3年齡段比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；5組年齡段感染率呈U型分布（圖3-A）。

HPV感染前3位的亞型 HPV16、HPV52、HPV58各年齡斷均呈U型分布，HPV16在各段中感染率均為最高（圖3-B）。

HPV感染患者中單純高危亞型、高+低危亞型、低危亞型感染率分別為18.4%、1.7%、2%，3組感染率在不同年齡段亦均呈現(xiàn)出U型趨勢(shì)分布，且在不同年齡段均以單純高危亞型感染為主（圖3-C）。

HPV感染患者中一、二、三重感染的感染率分別為16.8%、4.2%、0.5%。3組感染率在不同年齡段亦均呈現(xiàn)出U型趨勢(shì)分布，且在不同年齡段均以一重感染為主（圖3-D）。

圖3 HPV感染年齡分布

3 討論

目前，宮頸癌是女性最常見(jiàn)的生殖道惡性腫瘤，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，居全球第2位。1977年，著名學(xué)者zur Hausen就提出，HPV感染可能會(huì)導(dǎo)致宮頸癌。1995年，國(guó)際癌癥研究中心正式宣布宮頸HPV感染為宮頸癌發(fā)病的主要原因。2005年，宮頸HPV檢測(cè)被推薦為宮頸癌篩查方法。2014年，世界衛(wèi)生組織宣布HPV分型檢測(cè)是宮頸癌篩查的重要初篩手段。因此，研究HPV感染趨勢(shì)、亞型分布特征、區(qū)域流行情況，對(duì)于HPV疫苗研發(fā)、數(shù)據(jù)監(jiān)控及宮頸癌的防治具有重要的臨床指導(dǎo)意義。

根據(jù)HPV的致病性，HPV分為與惡性腫瘤有關(guān)的高危亞型和與良性病變有關(guān)的低危亞型。本研究采用的導(dǎo)流雜交技術(shù)可檢測(cè)出21種亞型，其中包括15種高危亞型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68）和 6種低危亞型（6、11、42、43、44、81/CP8304）。HPV感染亞型分布有一定區(qū)域性。全球范圍內(nèi)最主要的基因型是HPV16型，第2位是HPV18型［3］，而本研究中HPV感染前3位的亞型依次為HPV16、52、58，與其有一定差異，但與我國(guó)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［4～6］，提示焦作地區(qū)可能與我國(guó)其他地區(qū)感染亞型基本一致，應(yīng)以這三種亞型為主要預(yù)防對(duì)象。

本研究中門(mén)診患者總HPV感染率為22.3%，2015、2016、2017年HPV感染率分別為24.2%、21.2%、18.9%，呈明顯下降趨勢(shì)。其原因可能與政府不斷的進(jìn)行宮頸癌知識(shí)宣傳教育和宮頸癌普查有關(guān)。但近三年HPV16、52、58三種高危亞型并無(wú)下降趨勢(shì)，進(jìn)一步提示其為主要預(yù)防對(duì)象。

HPV感染率在不同年齡段存在差異，本研究中＜26歲段感染率最高（32.9%），隨著年齡的增加，感染率逐漸降低，46歲以后感染率開(kāi)始回升，和國(guó)內(nèi)外一些研究結(jié)果相一致［7，8］。女性26歲前是 HPV感染的高峰期，可能是由于年輕女性性生活比較頻繁，衛(wèi)生習(xí)慣和健康意識(shí)薄弱，宮頸炎發(fā)病率較高，宮頸上皮黏膜屏障遭到破壞后，病毒易入侵所致。但年輕女性的的HPV感染多為一過(guò)性感染，大多數(shù)患者經(jīng)過(guò)一定時(shí)間通過(guò)自身免疫能將HPV病毒自然清除。女性55歲后是HPV感染的另一高峰期，可能是由于該年齡段女性自身免疫力下降易受病毒入侵、且對(duì)病毒清除能力下降所致［9］。這就提示年輕女性和老年女性是HPV感染的高發(fā)人群，宮頸癌篩查時(shí)要多給以關(guān)注。

不同亞型HPV感染對(duì)宮頸細(xì)胞惡性病變的發(fā)生、發(fā)展有不同的影響，高危型HPV感染常導(dǎo)致宮頸癌［10］。本研究中高危型檢測(cè)結(jié)果還顯示，門(mén)診患者中高危型HPV感染率（18.7%）明顯高于高危+低危型（1.4%）和低危亞型（2%）。在各個(gè)年齡段中，前三位的HPV感染亞型亦呈現(xiàn)出U型趨勢(shì)分布。其提示年輕女性是高危HPV感染的好發(fā)年齡段，這可能是導(dǎo)致近些年宮頸癌發(fā)病率升高、發(fā)病年齡提前且逐漸出現(xiàn)年輕化趨勢(shì)的原因。HPV感染有一重感染，亦有多重感染，多重感染因患者攜帶病毒量多，易發(fā)生癌變。本研究中雖然一重感染多，但多重感染亦呈現(xiàn)U型分布，因此年輕女性和老年女性癌變幾率較大。這也提示我們?cè)趯m頸癌篩查時(shí)要多關(guān)注年輕女性和老年女性。

綜上所述，本臨床調(diào)查顯示HPV感染以HPV16、52、58為主要亞型，在不同年齡組分布存在差異，在宮頸癌篩查中對(duì)年輕女性或老年女性的患者要多給予關(guān)注。