高粱炭疽病抗性機(jī)理研究進(jìn)展

鄧小鋒， 彭 秋， 李青風(fēng)， 劉天友

(貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 旱糧研究所， 貴州 貴陽 550006)

高粱〔Sorghumbicolor(L.)Moench〕是世界第五大作物，廣泛用于飼料、糧食、釀造加工和能源等行業(yè)。高粱炭疽病是世界性病害，近年來，其流行區(qū)域不斷擴(kuò)展，我國各高粱主產(chǎn)區(qū)，包括貴州省的栽種區(qū)均有發(fā)生，且病情嚴(yán)重，給高粱品種選育帶來巨大壓力。目前國內(nèi)外專家學(xué)者已對(duì)該病害進(jìn)行了大量研究。以高粱作原料的白酒釀造是貴州省的支柱產(chǎn)業(yè)之一。目前，貴州省高粱種植區(qū)主要位于遵義、仁懷、金沙和安順等市縣，2018年全省高粱種植面積不少于8.67萬hm2，包括4萬余hm2有機(jī)高粱[1]，品種幾乎都是當(dāng)?shù)氐某Ｒ?guī)高粱品種?，F(xiàn)今除外省選育的一些雜交糯高粱品種對(duì)炭疽病有一定抗性外，貴州省內(nèi)常規(guī)糯高粱品種幾乎對(duì)炭疽病都沒有穩(wěn)定抗性?，F(xiàn)全省除貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院已開展炭疽病相關(guān)研究外，還未見其他單位有相關(guān)研究報(bào)道。貴州省內(nèi)生產(chǎn)的高粱主要作為釀酒原料，但省內(nèi)選育的高粱優(yōu)良品種數(shù)量少，雜交種更少。開展高粱炭疽病抗性研究和抗性育種對(duì)滿足貴州省白酒釀造產(chǎn)業(yè)對(duì)綠色、有機(jī)高粱原料的不斷需求，推動(dòng)貴州省山地農(nóng)業(yè)的發(fā)展及高粱生產(chǎn)向“高效、綠色、有機(jī)”方式的轉(zhuǎn)變具有重大意義。鑒于此，對(duì)20世紀(jì)80年代以來國內(nèi)外有關(guān)高粱炭疽病抗性機(jī)理的研究進(jìn)行梳理，從高粱炭疽病危害特征、抗性資源鑒定、病原菌侵染機(jī)理、抗性機(jī)理及抗性育種等方面進(jìn)行總結(jié)，以期為貴州省相關(guān)領(lǐng)域研究和高粱育種提供借鑒，并為高粱產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展提供參考。

1 高粱炭疽病的危害特征

高粱炭疽病是由禾生炭疽菌(ColletotrichumsublineolumP. Henn.，Kabát and Bubák)侵染導(dǎo)致的病害，1902年在西非首次報(bào)道，各國高粱栽種區(qū)均有發(fā)生。該病害在高溫潮濕地區(qū)易流行，是高粱最具毀滅性的病害之一[2-3]，病害嚴(yán)重發(fā)生時(shí)感病品種籽粒和莖稈產(chǎn)量減產(chǎn)達(dá)67%，其中，籽粒產(chǎn)量減產(chǎn)36%[4]。近年來，該病害在貴州高粱栽種區(qū)發(fā)生趨勢(shì)加重。

高粱生長(zhǎng)發(fā)育各階段炭疽菌都能侵染其所有地上組織，其中，以葉部病害最為常見，病癥先從下部葉片開始出現(xiàn)，且孕穗期癥狀開始明顯。即在葉片上出現(xiàn)細(xì)小圓形、橢圓形、方形的斑點(diǎn)或細(xì)長(zhǎng)病變，有紅色、褐色或者黑紫色邊緣；隨著病情發(fā)展，感病品種的病斑上出現(xiàn)黑色小點(diǎn)，即炭疽菌分生孢子盤，周圍的組織逐漸死亡并連成片，最終使葉片枯萎，葉片的光合作用與物質(zhì)合成能力逐漸喪失。分生孢子可通過水流或氣流傳播至附近的葉片上進(jìn)行危害；此外，帶菌種子也是重要的傳播方式[5]。田間高粱葉片和莖稈殘?bào)w中的菌核是主要的初侵染源[6]。

2 高粱炭疽病抗性資源的鑒定

在高粱生產(chǎn)上要實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的目標(biāo)，對(duì)區(qū)域內(nèi)主要病害炭疽病的研究和監(jiān)測(cè)是一項(xiàng)必然要求，此外取決于高粱品種本身的生產(chǎn)潛力，特別是抗病穩(wěn)定性。CHALA等[7]研究發(fā)現(xiàn)，炭疽菌的遺傳多樣性豐富，存在不同的生理小種，選育對(duì)多個(gè)生理小種有穩(wěn)定抗性的高粱品種比較困難，因此鑒定篩選對(duì)種植區(qū)生理小種有穩(wěn)定抗性的高粱材料或品系是進(jìn)一步開展研究和品種選育的基礎(chǔ)。國際半干旱作物研究中心于1982—1991年先后對(duì)1.3萬余份資源和品系進(jìn)行鑒定發(fā)現(xiàn)，有11個(gè)材料在印度和非洲多年表現(xiàn)出對(duì)高粱炭疽病的穩(wěn)定抗性[8]。美國國家植物種質(zhì)庫保存有4.3萬余份高粱資源，美國農(nóng)業(yè)部熱帶農(nóng)業(yè)研究站、南方平原農(nóng)業(yè)研究中心從2003年起，持續(xù)對(duì)多份資源進(jìn)行系統(tǒng)鑒定發(fā)現(xiàn)，抗性資源絕大部分來源于非洲國家[9-15]。姜鈺等[16]從2013年開始對(duì)我國北方高粱育種上廣泛應(yīng)用的優(yōu)良高粱種質(zhì)資源或品系進(jìn)行鑒定，從中篩選得到抗炭疽病材料51份。PROM等[17]采用18個(gè)高粱品種作為鑒定系統(tǒng)進(jìn)行不同生理小種的鑒定。

炭疽菌菌株間遺傳多樣性豐富，不同地理位置區(qū)域內(nèi)的炭疽菌存在多個(gè)?；突蛏硇》N，且同一地理位置區(qū)域內(nèi)的菌株間異質(zhì)性也很高[17]。目前，雖然已經(jīng)測(cè)定炭疽菌的基因組序列[18]，但還未見有關(guān)菌株間高異質(zhì)性原因的研究報(bào)道。

貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院旱糧研究所在鑒定高粱炭疽病抗性資源方面做了一些工作，先后收集了多份貴州地方高粱資源，并選送資源到吉林鑒定中心進(jìn)行鑒定；同時(shí)，與貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院品種資源研究所合作，陸續(xù)對(duì)收集的地方資源進(jìn)行抗性鑒定，并得到一些高粱抗病材料[19]。但貴州省內(nèi)缺乏一套可行的高粱鑒定標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)，相關(guān)研究與育種還遠(yuǎn)不能滿足貴州省內(nèi)高粱產(chǎn)業(yè)的發(fā)展需求。目前，未見有關(guān)貴州高粱種植區(qū)高粱炭疽病調(diào)查、炭疽菌遺傳多樣性及生理小種方面的研究報(bào)道，也未見有關(guān)貴州省高粱品種炭疽病抗性系統(tǒng)鑒定的報(bào)道。

3 高粱抗炭疽菌侵染的機(jī)理

3.1 抗性反應(yīng)

炭疽孢子在高粱葉片上一般9～12 h后開始侵染。先萌發(fā)形成附著胞，然后穿入葉片表皮細(xì)胞的細(xì)胞壁和膜形成侵染囊泡。若宿主有抗性，2～3 h后受侵染細(xì)胞和鄰近細(xì)胞開始積累高濃度3-脫氧花色素；若無有效抗性，侵染囊泡接著發(fā)展出主菌絲和次生菌絲侵入鄰近的表皮和葉肉細(xì)胞，最后形成分生孢子盤。

NICHOLSON等[20]于1987年在細(xì)胞囊泡的內(nèi)含物中首次發(fā)現(xiàn)3-脫氧花色素，其是一類植物抗毒素。內(nèi)含物破裂后3-脫氧花色素被釋放到細(xì)胞中抑制炭疽菌的生長(zhǎng)[21]，或者殺死真菌和植物細(xì)胞本身，阻止其向臨近細(xì)胞侵染[22-23]。目前已鑒定出高粱中含有至少5種3-脫氧花色素：芹菜定、木樨黃定、5-氧芹菜定糖咖啡酸酯、5-甲氧基木樨黃定和7-甲氧基芹菜定[24]?？共〔牧虾透胁〔牧戏e累的3-脫氧花色素種類或者濃度不同。NICHOLSON等[20]發(fā)現(xiàn)，某些抗病材料的細(xì)胞可積累芹菜定和木樨黃定2種3-脫氧花色素，而感病材料細(xì)胞只能積累芹菜定。WHARTON等[24]研究發(fā)現(xiàn)，一些感病材料的表皮細(xì)胞雖然也分泌囊泡內(nèi)含物，但顏色淺、3-脫氧花色素濃度低，對(duì)病菌的生長(zhǎng)沒有明顯抑制作用；在某些感病品種中未檢測(cè)到木樨黃定和5-甲氧基木樨黃定。LO等[25]研究證明，木樨黃定和5-甲氧基木樨黃定2種植物抗毒素對(duì)真菌的毒性大于芹菜定、5-氧芹菜定糖咖啡酸酯和7-甲氧基芹菜定。從時(shí)效看，一些感病材料應(yīng)答時(shí)間晚，受侵染后66 h才合成3-脫氧花色素；而抗病宿主在侵染囊泡剛形成時(shí)細(xì)胞內(nèi)就開始產(chǎn)生含高濃度3-脫氧花色素的內(nèi)含物[22-23]。

BASAVARAJU等[26]發(fā)現(xiàn)，高粱對(duì)炭疽菌的抗性反應(yīng)，細(xì)胞除合成3-脫氧花色素外，還可合成H2O2及富羥脯氨酸糖蛋白(Hydroxyproline-rich glycoproteins，HRGP蛋白)。炭疽孢子侵染囊泡剛穿透宿主細(xì)胞壁，抗性材料宿主細(xì)胞就合成H2O2和3-脫氧花色素阻止病菌增殖，而感病材料在接種后第5天才合成H2O2，導(dǎo)致葉片組織壞死。HRGP蛋白作為植物細(xì)胞壁的重要組成部分，病菌侵染時(shí)會(huì)被誘導(dǎo)合成，加強(qiáng)細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)，是一種快速防御機(jī)制[27]。BASAVARAJU等[26]還發(fā)現(xiàn)，高粱受炭疽孢子侵染位置的細(xì)胞壁可形成乳突、胼胝質(zhì)沉積和蛋白質(zhì)交聯(lián)；只在抗性材料中觀察到HRGP蛋白?？剐院桶肟剐圆牧现行纬扇橥?、胼胝質(zhì)沉積和蛋白質(zhì)交聯(lián)的現(xiàn)象明顯多于感病材料。

黃酮類物質(zhì)在宿主防御體系中起著重要作用。如高粱植株受炭疽菌侵染20 h后，可檢測(cè)到黃酮Apigenin(芹菜素)和Luteolin(木犀草素)的積累，其能顯著抑制炭疽孢子的萌發(fā)[28]。

已有研究表明，植物防御炭疽菌侵染包括合成3-脫氧花色素、H2O2、HRGP蛋白及黃酮類物質(zhì)，細(xì)胞壁形成乳突、胼胝質(zhì)沉積和蛋白質(zhì)交聯(lián)等多種方式?？共『透胁〔牧系牟町惐憩F(xiàn)在能否快速合成上述物質(zhì)或形成類似結(jié)構(gòu)。感病材料對(duì)抗炭疽菌侵染存在2種情況，一是細(xì)胞合成的防御物質(zhì)種類少或者濃度低，無法有效地殺死或阻止炭疽菌；二是完全無法合成防御物質(zhì)，推測(cè)其原因可能是相關(guān)功能基因的無效突變，或入侵炭疽菌能夠抑制宿主細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，使宿主細(xì)胞無法及時(shí)調(diào)控下游防御系統(tǒng)功能基因的表達(dá)。

3.2 應(yīng)答脅迫分子機(jī)理

代謝組學(xué)分析顯示，高粱受炭疽菌侵染后，合成最多的次生代謝產(chǎn)物是類黃酮化合物、苯丙烷類代謝途徑化合物及色氨酸代謝途徑化合物[29]。類黃酮化合物包括花青素、3-脫氧花色素和黃酮類3種。3類物質(zhì)的合成從共同的前體Naringenin(柚皮素)開始。該類化合物的合成途徑是苯丙烷類代謝途徑的一個(gè)分支，通過研究確定了多個(gè)反應(yīng)步驟的酶，許多酶的編碼基因已經(jīng)克隆。總結(jié)前人研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，類黃酮化合物合成有4條途徑(圖1)[30]：花青素合成途徑(A)、3-脫氧花色素芹菜定合成途徑(B)、木犀黃定的合成途徑(C)及黃酮類物質(zhì)芹菜素和木犀草素的合成路線(D)。

由圖1看出，查爾酮在查爾酮異構(gòu)酶的催化下轉(zhuǎn)變?yōu)殍制に睾?，在后續(xù)不同酶的調(diào)控下，分別合成花青素、3-脫氧花色素和黃酮，以滿足自身生長(zhǎng)和抵御外界生物脅迫的需求。正常光照條件下，植物合成花青素，而3-脫氧花色素的合成不需要光照[31-32]。當(dāng)光照和病菌侵染同時(shí)存在時(shí)，植株先合成3-脫氧花色素，而抑制花青素的合成。研究顯示，參與該合成途徑的酶基因PAL(Phenylalanine ammonia lyase，苯丙氨酸氨裂解酶)和CHS(Chalcone synthase，查爾酮合成酶)的表達(dá)上調(diào)，而負(fù)責(zé)合成花青素的酶基因F3H(flavanone 3-hydroxylase，黃烷酮3-羥化酶)、DFR(dihydroflavonol 4-reductase，二氫黃酮醇4-還原酶)和ANS(anthocyanidin synthase，花青素合成酶)的表達(dá)被抑制，從而應(yīng)對(duì)病菌的侵染[31]。雖然F3’H(flavonoid 3’-hydroxylase，類黃酮3’-羥化酶)同時(shí)參與花青素和3-脫氧花色素的合成，但該基因家族不同成員執(zhí)行不同角色。已克隆的2個(gè)F3’H基因，1個(gè)參與光特異性的花青素的積累，1個(gè)參與特異性病害反應(yīng)的3-脫氧花色素的合成[33]。對(duì)炭疽菌不同抗性品種2個(gè)基因表達(dá)模式不同。遭受侵染時(shí)，抗性品種CHS和PR-10(pathogenesis-related protein，病程相關(guān)蛋白)基因的上調(diào)表達(dá)更早[34]，而感病品種2個(gè)基因的表達(dá)于侵染后24 h開始，但其他非致病菌侵染時(shí)，2個(gè)基因的表達(dá)于侵染6 h后開始[35]。據(jù)此推測(cè)，炭疽菌對(duì)感病品種調(diào)控該途徑的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)有抑制作用。

圖1 類黃酮化合物的合成途徑

從生化和分子層面的研究結(jié)果看出，類黃酮物質(zhì)及其合成途徑、上游信號(hào)途徑和合成步驟相關(guān)酶基因的表達(dá)調(diào)控途徑是高粱防御炭疽菌侵染的核心組分之一。MIZUNO等[36]報(bào)道，高粱葉片在切割脅迫后邊緣至少可以呈現(xiàn)3種顏色：紫色、棕褐色和淺棕色，其均與類黃酮物質(zhì)合成途徑的缺陷有關(guān)。若高粱材料只合成3-脫氧花色素，不能合成黃酮，則呈紫色，其對(duì)應(yīng)基因FNSII的無效突變；能正常合成2種黃酮，不能合成3-脫氧花色素，則呈棕褐色，其對(duì)應(yīng)基因FNR的無效突變；若只能合成1種黃酮芹菜素，不能合成木犀草素則呈淺棕色，對(duì)應(yīng)基因F3’H和FNR的無效突變。該研究雖然沒有鑒定試驗(yàn)高粱材料對(duì)炭疽菌的抗性，但首次分析了3-脫氧花色素與黃酮合成途徑參與基因的無效突變情況，在分子層面解釋了某些感病材料形成的原因?？梢姡囼?yàn)中的高粱材料合成的類黃酮物質(zhì)與正常的材料相比有所缺失，因此，其抗性會(huì)弱于正常材料。

H2O2及HRGP蛋白合成途徑的研究較3-脫氧花色素的少，其功能基因、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)控途徑信息等目前尚不清楚。對(duì)參與防御炭疽菌入侵的轉(zhuǎn)錄因子基因的研究?jī)?nèi)容也較少，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子基因Y1參與調(diào)控3-脫氧花色素的合成，Y1蛋白調(diào)控CHS、CHI(chalcone isomerase，查爾酮異構(gòu)酶)和DFR基因的表達(dá)[38]。

3.3 抗性相關(guān)基因的基因組定位

為研究高粱抗炭疽病原理，定位抗性相關(guān)基因，進(jìn)而提高抗性育種效率，許多研究者對(duì)抗性進(jìn)行遺傳分析、抗性基因連鎖分析和基因組定位。MEHTA等[38]的研究顯示，抗性性狀既有顯性也有隱性，許多材料，如G73、Redlan、SC748-5、Bk7、SC155-14E和SC414-12E的抗性均由主效QTL控制[39-43]。與這些材料的抗性基因連鎖的分子標(biāo)記也被開發(fā)用于品種選育，如對(duì)G73設(shè)計(jì)的SCAR(sequence characterized amplified region，序列特異性擴(kuò)增區(qū))標(biāo)記[39]，SC748-5關(guān)聯(lián)的AFLP(amplified fragment length polymorphism，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性)和SSR(simple sequence repeat，簡(jiǎn)單重復(fù)序列)標(biāo)記[41]。利用分子標(biāo)記的初步定位顯示高粱基因組中存在一些抗性基因富集的區(qū)段，其與炭疽病的有效抗性有關(guān)[42-44]，但該區(qū)段中哪些基因參與抗病過程目前還不清楚。

CUEVAS等[45]對(duì)包含335個(gè)核心高粱材料的群體進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，定位了基因組中5個(gè)炭疽病抗性相關(guān)基因，是除參與3-脫氧花色素、黃酮及病程相關(guān)蛋白合成途徑的基因外，首次發(fā)現(xiàn)與炭疽病抗性有關(guān)的基因。這些基因分別位于1號(hào)和5號(hào)染色體上，為R家族基因和免疫反應(yīng)相關(guān)基因，分別編碼F-box結(jié)構(gòu)域蛋白、蛋白酪氨酸激酶、葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶和過氧化物酶等。

4 對(duì)高粱炭疽病抗性研究與育種的思考

4.1 抗性研究

高粱對(duì)炭疽菌侵染反應(yīng)的相關(guān)研究主要集中在宿主細(xì)胞形態(tài)研究、類黃酮化合物的合成及合成途徑的功能基因鑒定、定位，其他方面，如信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與防御反應(yīng)的基因表達(dá)調(diào)控層面的研究較少。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)層面，只確定1個(gè)蛋白酪氨酸激酶(Sobic. 005G182400)[45]；轉(zhuǎn)錄因子方面，只確定基因Y1參與調(diào)控3-脫氧花色素的合成。對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和表達(dá)調(diào)控的研究，可從高粱對(duì)炭疽反應(yīng)的轉(zhuǎn)錄水平分析入手，以揭示炭疽菌侵染早期抗病材料分子水平的反應(yīng)。炭疽孢子萌發(fā)后侵入細(xì)胞的2～3 h是關(guān)鍵時(shí)段，在該時(shí)段內(nèi)抗性材料通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)控基因表達(dá)進(jìn)行有效防御反應(yīng)；感病材料或是因?yàn)榛蛉毕?，或是轉(zhuǎn)導(dǎo)與表達(dá)調(diào)控途徑被入侵病菌抑制而無法合成足夠的物質(zhì)或形成相應(yīng)的結(jié)構(gòu)開展有效防御。對(duì)該時(shí)段轉(zhuǎn)錄水平的分析可以找到更多的參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因與調(diào)控下游功能基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子基因。除3-脫氧花色素外，H2O2及HRGP蛋白合成的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與表達(dá)調(diào)控途徑也值得研究，并將進(jìn)一步在分子水平揭示高粱的抗性機(jī)理。

黃酮類物質(zhì)3-脫氧花色素和黃酮均對(duì)炭疽菌有毒性作用。高粱中至少有5種3-脫氧花色素，是否存在對(duì)炭疽菌有毒性的其他3-脫氧花色素及黃酮類物質(zhì)還有待進(jìn)一步研究。已鑒定或者克隆的參與3-脫氧花色素合成途徑的基因有F3’H和FNR，參與黃酮化合物合成的基因有FNSII和F3’H。從無色芹菜定轉(zhuǎn)變?yōu)榍鄄硕ǎ~黃素轉(zhuǎn)變?yōu)槟鞠S定，催化該轉(zhuǎn)變反應(yīng)的關(guān)鍵酶及其編碼基因尚未確定；此外，是否還有其他酶參與該合成途徑，通過對(duì)多個(gè)高粱材料的對(duì)比研究有望得到更多信息。

針對(duì)貴州省主要高粱栽種區(qū)炭疽菌的不同生理小種，需要對(duì)更多高粱資源的抗性性狀進(jìn)行重復(fù)鑒定，為進(jìn)一步研究和育種創(chuàng)造材料。同時(shí)，進(jìn)一步實(shí)踐和完善田間及實(shí)驗(yàn)室鑒定方法，不同生育期的鑒定方法及其成效。在生化層面和分子層面完善高粱應(yīng)對(duì)脅迫反應(yīng)的標(biāo)志性化合物的檢測(cè)技術(shù)，如對(duì)各種3-脫氧花色素、黃酮、H2O2和HRGP蛋白的檢測(cè)技術(shù)，使其能適應(yīng)檢測(cè)大群體樣本、快速及準(zhǔn)確的需求，進(jìn)而推動(dòng)該領(lǐng)域迅速發(fā)展。另外，使用連鎖分析、關(guān)聯(lián)分析等方法定位不同材料之間抗性相關(guān)的具體基因，闡述抗性在材料間差異的分子機(jī)理。已有研究中使用連鎖分析方法確定了一些材料中抗性相關(guān)基因的連鎖標(biāo)記[39，41-44]，但由于使用的群體小，均未能定位到具體的基因。

4.2 抗性育種

雖然防治高粱炭疽病的措施多種多樣，但選育穩(wěn)定的抗病品種仍是最經(jīng)濟(jì)的方法。育種時(shí)應(yīng)針對(duì)當(dāng)?shù)氐纳硇》N，盡量選擇遺傳多樣性豐富的抗性材料。對(duì)于抗性基因位于基因組不同位點(diǎn)的材料，可結(jié)合分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行基因聚合，使選育品系的抗性更穩(wěn)定和持久；同時(shí)，結(jié)合其他農(nóng)藝性狀，如產(chǎn)量、丹寧含量、糯質(zhì)、穗形及株形等，用回交等方式將抗性性狀轉(zhuǎn)移到品系中。為加快品種選育過程，還需要先確定材料中抗性相關(guān)基因的各種連鎖標(biāo)記，以確保其在不同病害選擇壓力的環(huán)境中正常使用。此外，可選育多個(gè)不同遺傳背景的抗性品種進(jìn)行混合種植，以降低炭疽菌生理小種的變異速率。