邢 蕾,熊忙利,杜 飛
(1.咸陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院,陜西 咸陽 712000;2.咸陽市天使寵物醫(yī)院,陜西 咸陽 712000)
紫錐菊又稱“紫松果菊”,為松果菊屬植物,其內(nèi)含多糖、黃酮、菊苣酸、糖蛋白、咖啡酸衍生物、生物堿和烷基酰胺類等多種有效成分。目前,紫錐菊及其各種制劑被廣泛用于預(yù)防和治療呼吸系統(tǒng)、皮膚感染以及由免疫缺陷引起的疾病[1],臨床效果顯著[2]。
相關(guān)研究顯示,紫錐菊可有效提高和改善動(dòng)物的免疫功能。Kuhn 等研究懷孕和哺乳母豬使用紫錐菊后,其免疫系統(tǒng)相關(guān)功能性指標(biāo)均明顯得以改善,且未影響其后代胴體、生長(zhǎng)性能[3]。王長(zhǎng)彥等研究認(rèn)為,紫錐菊的合理使用可提高仔豬成活率及日增重,降低腹瀉發(fā)生率,同時(shí)有效增強(qiáng)仔豬的免疫機(jī)能[4]。
目前關(guān)于紫錐菊及其制劑在豬、禽、魚類等動(dòng)物中的應(yīng)用報(bào)道較多,但在犬中的應(yīng)用效果罕見報(bào)道。筆者試驗(yàn)旨在研究紫錐菊復(fù)方超微粉在幼犬飼糧中按照不同劑量添加后對(duì)幼犬生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響。
45日齡的中華田園犬幼犬16只,體重1.2~1.6 kg左右,由咸陽市長(zhǎng)武縣犬繁育基地提供。試驗(yàn)前常規(guī)驅(qū)蟲與免疫,定時(shí)定量喂食,自由飲水。
紫錐菊、黃芪、甘草、板藍(lán)根、魚腥草,購自咸陽市禮泉縣中醫(yī)院。
犬免疫球蛋白IgA,IgG,IgM,γ-干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒購自菲恩生物科技有限公司。
1.2.1 配制紫錐菊復(fù)方超微粉 分別將紫錐菊、黃芪、甘草、板藍(lán)根、魚腥草分別置于 37 ℃溫箱中烘干,經(jīng)過 500 目超微粉碎(WFJ-18型微粉碎機(jī))處理后按照 2∶1∶1∶1∶1比例混合均勻制成紫錐菊復(fù)方超微粉。陰涼處密閉保存,備用[5]。
1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 16只中華田園犬幼犬隨機(jī)分為4組(即Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組),每組4只。Ⅰ組為空白對(duì)照組;Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組為添加紫錐菊復(fù)方超微粉組,添加比例分別為0.25%、0.50%和 0.75%。預(yù)試期 7 d,正試期 30 d,試驗(yàn)期間4組試驗(yàn)犬飼喂管理?xiàng)l件一致,每天定點(diǎn)飼喂兩次相應(yīng)日糧,上午8時(shí)下午18時(shí)各飼喂1次,每次150g,自由飲水。
1.2.3 基礎(chǔ)日糧配制及營(yíng)養(yǎng)水平 參照國標(biāo)GB/T 31216-2014配制基礎(chǔ)日糧,原料選用優(yōu)質(zhì)肉類及其副產(chǎn)品、玉米粉、小麥粉、精煉大豆油、動(dòng)物性脂肪、骨粉、青菜、全脂奶粉、魚肝油、酵母、胡蘿卜?;A(chǔ)日糧成分及配比見表1。
1.2.4 試驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定 在試驗(yàn)開始前和結(jié)束后對(duì)所有犬只空腹稱重,計(jì)算各處理組每只犬的平均日增重。分別于試驗(yàn)的第0、15和30 d采集血液,采血前保證試驗(yàn)犬空腹12 h,前肢靜脈采血(每次每只采血2 mL),3 000 轉(zhuǎn)·min-1離心 10 min,分離血清,分裝于 EP 管內(nèi),采用ELISA法檢測(cè)血清中IgA、IgM、IgG、IFN-γ水平,嚴(yán)格依照說明書操作。
應(yīng)用spss20.0軟件分析試驗(yàn)數(shù)據(jù),具體進(jìn)行單因素方差分析和Duncan多重比較,結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
由表2可知,與Ⅰ組比較,Ⅲ組、Ⅳ組平均日增重均顯著提高(P<0. 05); 與Ⅱ組比較,Ⅲ組平均日增重顯著提高(P<0. 05),試驗(yàn)Ⅲ組平均日增重比對(duì)照Ⅰ組提高了7.04%,說明在幼犬基礎(chǔ)日糧中添加 0.50%、0.75% 的紫錐菊復(fù)方超微粉可顯著改善幼犬的生長(zhǎng)性能,且添加劑量為0.50%時(shí)改善效果更明顯。
由表3可知,第0天時(shí),各組IgA、IgM、IgG水平差異均不顯著(P>0.05);第15 d時(shí),Ⅲ組IgA水平顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。Ⅲ組、Ⅳ組IgM水平顯著高于Ⅰ組(P<0.05);第30 d時(shí),Ⅲ組、Ⅳ組IgA、IgG、IgM水平均顯著高于Ⅰ組。Ⅲ組、Ⅳ組IgA水平差異顯著(P<0.05)。Ⅲ組、Ⅳ組IgG、IgM水平差異不顯著??梢?,堅(jiān)持在幼犬基礎(chǔ)日糧中添加一定比例紫錐菊復(fù)方超微粉可顯著提高幼犬的IgA、IgG、IgM水平,添加比例0.50%時(shí)免疫效果改善最明顯。
表1 基礎(chǔ)日糧成分及配比
表2 幼犬生長(zhǎng)性能測(cè)定結(jié)果
注:同列小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05),相同表示差異不顯著(p>0.05)。
表3 幼犬免疫球蛋白水平測(cè)定結(jié)果
注:同行小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05),相同表示差異不顯著(p>0.05)。
由表4可知,第0天時(shí),各組IFN-γ水平差異不顯著(P>0.05);第15 d時(shí),Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組都顯著高于Ⅰ組(P<0.05);第30 d時(shí),Ⅲ組顯著高于Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅳ組(P<0.05)。Ⅱ組、Ⅳ組也顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。
表4 幼犬血清中IFN-γ水平檢測(cè)結(jié)果
注:同列小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05),相同表示差異不顯著(p>0.05)。
劉榮生[5]等研究表明,在仔豬飼糧中使用紫錐菊添加劑可顯著改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能,差異顯著(P<0. 05)。筆者試驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn)Ⅲ組平均日增重最大,比對(duì)照Ⅰ組提高了7.04%(P<0. 05),與上述研究結(jié)果一致,說明在幼犬基礎(chǔ)飼糧中使用紫錐菊復(fù)方超微粉可有效改善飼糧口味,刺激幼犬食欲,調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)功能,促進(jìn)新陳代謝,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率,進(jìn)而提高飼料轉(zhuǎn)化率,有效提高幼犬平均日增重,從而顯著改善幼犬生長(zhǎng)性能。
免疫球蛋白是一類具有抗體活性和重要生物學(xué)功能的動(dòng)物蛋白,在整個(gè)機(jī)體體液免疫中擔(dān)負(fù)著重要使命,血清免疫球蛋白(Ig)的測(cè)定是檢查體液免疫功能最常用的方法,是反映體液免疫功能強(qiáng)弱的重要參考指標(biāo)。血清中的免疫球蛋白主要有三種,即IgA、IgM、IgG,其測(cè)定值可直接反映研究對(duì)象體液免疫功能情況,測(cè)定值越高則研究對(duì)象體液免疫功能越強(qiáng),反之越弱[6~8]。楊侃侃等[9]研究表明,在仔豬日糧中添加刺五加提取物可有效增強(qiáng)仔豬免疫功能。筆者試驗(yàn)中,添加0.50%復(fù)方超微粉的試驗(yàn)Ⅲ組血清中IgA、IgG、IgM水平均較Ⅰ組顯著提高 (P<0. 05)。
干擾素含量微少但可發(fā)揮多種生物學(xué)功能,是細(xì)胞應(yīng)對(duì)外界刺激自行產(chǎn)生的一種特殊蛋白質(zhì),其中IFN-γ最重要的功能是激活巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞,輔助抗體和吞噬細(xì)胞抵抗病原微生物的侵害,介導(dǎo)免疫溶菌作用,起到增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫功能的作用。伍參榮等[10]認(rèn)為七味白術(shù)散可有助于增強(qiáng)仔鼠IFN-γ的表達(dá),提高細(xì)胞活性,有效增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力。舒迎霜等[11]試驗(yàn)結(jié)果證明,黃芪多糖可顯著或極顯著提高犬血清中IFN-γ、IgA、IgM、IgG水平,從而增強(qiáng)犬的免疫能力。從表4可見,在犬糧中使用紫錐菊復(fù)方超微粉可增強(qiáng)幼犬血清中IFN-γ水平,其中試驗(yàn)Ⅲ組顯著高于對(duì)照Ⅰ組(P<0. 05)。
綜上所述,本試驗(yàn)原料選用黃芪、甘草、板藍(lán)根、魚腥草與紫錐菊,制成復(fù)方超微粉,其含有豐富的活性物質(zhì)和微量礦物質(zhì)元素,可起到健胃消積、清熱解毒、涼血利咽、疏風(fēng)散熱、增加飼料適口性的作用。該復(fù)方超微粉同時(shí)具有營(yíng)養(yǎng)和藥物作用,試驗(yàn)結(jié)果表明,以0.50%的比例添加到幼犬基礎(chǔ)日糧中可顯著改善幼犬的生長(zhǎng)性能和免疫功能。