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    抗壞血酸和谷胱甘肽復合抗氧化劑對鮮切蘋果防褐變效果的研究

    2019-12-02 07:53:54梁舒妍王漫君鐘先鋒
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2019年21期
    關(guān)鍵詞:褐變抗壞血酸抗氧化劑

    張 瑾,梁舒妍,王漫君,劉 宇,鐘先鋒

    (1. 佛山科學技術(shù)學院食品科學與工程學院,廣東佛山 528231;2. 廣東省傳統(tǒng)發(fā)酵食品工程技術(shù)研究中心,廣東佛山528231;3. 廣東省食品流通安全控制工程技術(shù)研究中心,廣東佛山 528231;4. 佛山市釀造工程技術(shù)研究中心,廣東佛山528231;5. 佛山農(nóng)業(yè)生物制造工程技術(shù)研究中心,廣東 佛山 528231)

    0 引言

    近年來,隨著生活水平的不斷提高,人們對水果需求量越來越大。鮮切水果的銷售產(chǎn)業(yè)在我國迅速發(fā)展,用于鮮切加工的水果主要有木瓜、芒果、甜瓜、菠蘿、火龍果、獼猴桃、葡萄、草莓等不易褐變的果實[1-2]。然而蘋果、雪蓮果、香蕉等在鮮切加工產(chǎn)業(yè)中并不常見,主要是因為水果鮮切加工后,果肉組織遭到破壞,容易發(fā)生褐變,導致食用品質(zhì)降低,進而影響銷售價值。蘋果和梨產(chǎn)生褐變是因為植物組織中含有的酚類物質(zhì)與醌之間保持著氧化還原的動態(tài)平衡,當遭到機械破壞后,氧化還原平衡失調(diào),造成醌的積累,并進一步氧化聚合,形成黑色物質(zhì)[3],切分造成組織傷害易引起組織合成酚類化合物,同時提高多酚氧化酶的活性及可溶性,增加植物組織的褐變敏感度。研究表明,降低褐變程度的方法有薄膜自發(fā)氣調(diào)包裝、抗壞血酸、檸檬酸等結(jié)合處理[4]。龔新[5]發(fā)現(xiàn)低溫貯藏能在一定程度上抑制果實切片的組織褐變和品質(zhì)下降,隨著需求量的增大,消費者對鮮切水果品質(zhì)的要求越來越高,蘋果和梨的防褐變技術(shù)仍有待研究與開發(fā)。

    抗壞血酸俗稱維C,常作為水果防褐變的抗氧化劑,在中性或堿性條件下可通過自身分解起到抗氧化作用,已有研究表明,抗壞血酸和檸檬酸可減緩褐變能力[6]。谷胱甘肽是蘋果中多酚氧化酶活性的最佳抑制劑,試驗證明,經(jīng)300 μmol/L 谷胱甘肽處理后的蘋果切片,多酚氧化酶活性為50%;經(jīng)500 μmol/L谷胱甘肽處理后的蘋果切片,多酚氧化酶活性為0[7],抑制了多酚氧化酶活性,進而可減緩褐變程度、延長蘋果切片的貯藏期。

    抗壞血酸和谷胱甘肽結(jié)合的報道都是應(yīng)用于醫(yī)學方面,在水果褐變方面鮮有報道,試驗用不同濃度的抗壞血酸和谷胱甘肽處理鮮切蘋果切片,對蘋果切片的色度(L*),褐變強度(BD) 進行測定,研究出2 種抗氧化劑的最佳復配濃度,得出有效抑制鮮切蘋果切片褐變的最佳抗褐變劑。

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    供試材料:山東水晶富士蘋果,購于永旺超市。包裝材料:中號密實袋,永旺特惠優(yōu)國際貿(mào)易(上海) 有限公司提供。

    1.2 儀器與試劑

    CR410 型色差計、7200 型可見分光光度計、ME104 型電子天平、ALLEGRA-64R 型臺式高速大容量離心機。

    谷胱甘肽,廣州化學試劑廠提供;抗壞血酸,國藥集團化學試劑有限公司提供;鄰苯二酚、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉,天津市大茂化學試劑廠提供。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 單因素試驗

    選擇大小、色澤均一,無蟲害、無損傷的山東水晶富士蘋果進行試驗。先將蘋果洗凈、去皮、去核、切成1.5 cm 厚,立即放進抗氧化劑中浸泡進行保鮮處理,10 min 后將切片取出,瀝干水分,放入托盤,用保鮮膜蓋住,于4 ℃條件下貯藏觀察,貯藏5 d,每天測試一下指標(褐變強度、色澤),試驗重復3 次。

    抗壞血酸處理:用蒸餾水配置0,0.01,0.03,0.05,0.07,0.09 mol/L 的抗壞血酸溶液。將蘋果切片分別置于不同濃度的抗壞血酸溶液中浸泡10 min。

    谷胱甘肽處理:用蒸餾水配置0,300,350,400,450,500 μmol/L 的谷胱甘肽溶液。將蘋果切片分別置于不同濃度的谷胱甘肽溶液中浸泡10 min。

    1.3.2 抗褐變指標的測定

    (1) 色度測定[8]。蘋果切片處理后,于室溫下測定色澤的變化,每次測定取3 個樣品,取平均值,用L*值分析褐變程度。以后每隔1 d 用色差儀CR-400/410 測定1 次L*值,每個值取3 個樣品測定,取平均值,共測5 d。

    (2) 褐變強度 (BD) 的測定[8]。取約2 g 果肉,按1∶10 比例加蒸餾水,低溫下研磨2 min,過濾后取濾液于25 ℃下保溫5 min,測定褐變強度,共測3 次,取平均值,結(jié)果以D410 nm×10 表示。每隔1 d測定1 次,共測5 d。

    褐變強度(BD) 值越高,代表其褐變強度越高,色差計所測出來的指標,L*值為亮度指數(shù),它從0~100 變化,L*=0 表示黑色,而L*=100 表示白色,其值越大亮度越高,表面褐變越輕,反之褐變越嚴重。

    1.3.3 Box- Behken 試驗設(shè)計

    由單因素試驗結(jié)果得出最佳水平:0.05,0.07,0.09 mol/L 的抗壞血酸和350,400,450 μmol/L 的谷胱甘肽和10,15,20 min 浸泡時間,利用Design Expert 軟件,采用Box-Behnken 中心組合設(shè)計試驗,探索出最佳復合配方方案。

    Box-Behken 試驗設(shè)計的因素與水平設(shè)計見表1。

    表1 Box-Behken 試驗設(shè)計的因素與水平設(shè)計

    1.3.4 數(shù)據(jù)處理方法

    數(shù)據(jù)采用WPS Excel 2013 統(tǒng)計分析、Design Expert 8.0.6 軟件分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單一處理的試驗結(jié)果

    2.1.1 抗壞血酸的處理對鮮切蘋果切片的影響

    在貯藏條件為4 ℃,經(jīng)不同濃度的抗壞血酸處理的鮮切蘋果切片的色度(L*值) 和褐變強度(BD)的變化。

    經(jīng)過抗壞血酸處理的鮮切蘋果切片色度L*值的變化見圖1。

    圖1 經(jīng)過抗壞血酸處理的鮮切蘋果切片色度L*值的變化

    由圖1 可知,在4 ℃的儲存條件下,鮮切蘋果光澤總體呈下降趨勢,失去原來的光澤,根據(jù)試驗結(jié)果可得出,當抗壞血酸濃度大于0.05 mol/L 后,能減緩鮮切蘋果切片的褐變程度,與對照組相比,經(jīng)過0.07 mol/L 和0.09 mol/L 的抗壞血酸浸泡的蘋果切片,在前4 d,它們的L*值都比蒸餾水浸泡的蘋果切片要高,但是在第4 天后,可看出,由0.09 mol/L浸泡后的蘋果切片亮度比0.05 mol/L 和0.07 mol/L 浸泡過后的蘋果切片色澤要暗,是因為抗壞血酸的濃度不宜太大,因為濃度越大,自身氧化褐變越明顯,反過來也會影響產(chǎn)品的色澤[9]。由此可以得出,0.07 mol/L 的防褐變效果最好。

    經(jīng)過抗壞血酸處理的鮮切蘋果切片褐變強度BD的變化見圖2。

    圖2 經(jīng)過抗壞血酸處理的鮮切蘋果切片褐變強度BD 的變化

    由圖2 可知,總體呈上升趨勢,經(jīng)過0.01,0.03 mol/L 抗壞血酸浸泡過的蘋果切片在前2 d 褐變強度比對照組的大,在第3 天褐變強度有所下降,其原因是植物組織在遭到機械破壞時,其多酚氧化酶會增多以保護自身,而抗壞血酸并不能抑制多酚氧化酶活性,因此其褐變強度在前2 d 有所上升,但是抗壞血酸具有還原性,能將褐變產(chǎn)生的有色物質(zhì)鄰二醌還原成無色物質(zhì)鄰二酸[10],從而達到抑制褐變的效果,因此第3 天呈下降趨勢。總體來看,試驗組的褐變強度較對照組好,而且,經(jīng)過抗壞血酸濃度為0.07 mol/L 和0.09 mol/L 的浸泡過的鮮切蘋果切片,褐變強度從第1 天開始就比對照組低。

    綜上所述,結(jié)合各項指標來看,經(jīng)由抗壞血酸濃度為0.07 mol/L 浸泡過的鮮切蘋果切片防褐變效果最佳。

    2.1.2 谷胱甘肽的處理對鮮切蘋果切片的影響

    經(jīng)過谷胱甘肽處理的鮮切蘋果切片色度L*值的變化見圖3。

    圖3 經(jīng)過谷胱甘肽處理的鮮切蘋果切片色度L*值的變化

    由圖3 可知,在貯藏期間,由不同濃度的谷胱甘肽處理后的鮮切蘋果切片的色澤,隨著天數(shù)的變化,明顯比對照組要亮,特別是谷胱甘肽濃度為350 μmol/L 和400 μmol/L 時浸泡過的鮮切蘋果切片,貯藏5 d 后色澤仍保持在75 以上。

    經(jīng)過谷胱甘肽處理的鮮切蘋果切片褐變強度BD的變化見圖4。

    圖4 經(jīng)過谷胱甘肽處理的鮮切蘋果切片褐變強度BD 的變化

    由圖4 可知,經(jīng)過谷胱甘肽浸泡的鮮切蘋果的褐變強度始終低于對照組,由試驗數(shù)據(jù)可得400 μmol/L浸泡的處理組褐變強度最低。在第5 天時褐變強度均呈下降趨勢,其推測原因是鮮切蘋果切片褐變后由酪氨酸通過一系列反應(yīng)變成5,6-2 羥吲哚- 2 - 羧酸,羥基和羧基均為助色基團,但在410 nm 處不顯色,因此試驗結(jié)果顯示褐變強度會下降。綜上所述,4 000 mol/L 谷胱甘肽浸泡的鮮切蘋果切片防褐變效果最好。

    2.2 優(yōu)化篩選復合抗氧化劑

    Box-Behnken 設(shè)計方案及響應(yīng)值見表2。

    根據(jù)試驗結(jié)果,用谷胱甘肽濃度(B),抗壞血酸濃度(A),浸泡時間(C) 為自變量,鮮切蘋果切片的色澤L*值(Y) 為因變量,共設(shè)計17 個處理組。因為鮮切蘋果切片一般會在3 d 內(nèi)銷售完畢,故選擇第3 天的試驗數(shù)據(jù)。

    表2 Box-Behnken 設(shè)計方案及響應(yīng)值

    回歸方程模型方差分析見表3。

    表3 回歸方程模型方差分析

    2.3 多元二次響應(yīng)面回歸模型的建立與分析

    利用Design Expert 軟件對表2 試驗數(shù)據(jù)進行多元回歸擬合和方差分析,得到各因子對響應(yīng)值的二次多項回歸模型為:

    由表3 可知,模型總體p<0.000 1 高度顯著,失擬項0.430 1>0.05 不顯著,證明該模型對鮮切蘋果切片護色有現(xiàn)實意義,決定系數(shù)R2=0.990 8,校正系數(shù)R2=0.979 0,表明該模型對于鮮切蘋果復合護色工藝中L*值的實際值與預(yù)測值之間具有很好的擬合度。模型中A,B,C 的均顯著(p<0.05),且各因素影響對鮮切蘋果褐變的影響程度依次順序為A>C>B,二次項A2和B2都極其顯著 (p<0.01)。

    2.4 響應(yīng)面結(jié)果分析

    各因素交互條件對鮮切蘋果切片褐變的影響見圖5。

    圖5 各因素交互條件對鮮切蘋果切片褐變的影響

    由圖5 可知,曲面圖開口向下,表明在試驗范圍內(nèi)存在響應(yīng)值的最大值,當L*值為75.9 時,谷胱甘肽濃度和浸泡時間交互作用對響應(yīng)值二次影響作用,隨著谷胱甘肽濃度和浸泡時間的增加,L*值先增大后減少,在接近中心點時達到最大值。從圖5可知,曲面圖開口向下,表明在試驗范圍內(nèi)存在響應(yīng)值的最大值,隨著谷胱甘肽濃度和浸泡時間的增加,L*值先增大后減少,在接近中心點時達到最大值。根據(jù)Desgin Expert 軟件中的回歸模型分析,得到最優(yōu)抗氧化劑的配方為抗壞血酸0.08 mol/L,谷胱甘肽401.62 μmol/L,浸泡時間15.70 min,此時L*值為76.54。

    3 驗證試驗

    為了驗證該模型對鮮切蘋果切片抗褐變效果的預(yù)測是否準確,將得到的最佳工藝條件定為0.08 mol/L抗壞血酸,401.62 μmol/L 谷胱甘肽,浸泡時間15.70 min,在此條件下進行3 次重復試驗。結(jié)果表明,鮮切蘋果切片的L*值為76.54±0.58,與預(yù)測值接近,說明模型準確有效。

    4 結(jié)論

    試驗研究了抗壞血酸與谷胱甘肽對鮮切水果防褐變的影響,抗壞血酸是眾所周知果蔬的抗氧化劑,谷胱甘肽也是抗氧化劑,卻尚未被利用于防水果褐變的應(yīng)用中,水果褐變引起的原因有酶促褐變和非酶促褐變。試驗所用的抗壞血酸溶液是在非酶促褐變的方面減緩褐變程度,而谷胱甘肽是在酶促褐變的方面減緩褐變程度,故從褐變機理的2 個方面共同抑制褐變程度。研究通過了Box-Behnken 設(shè)計方案,優(yōu)化了抗氧化劑的最佳配比,為鮮切蘋果切片的品質(zhì)提供了科學依據(jù)。

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