大麻成分提取工藝綜述

李觀麗，張榮平

（昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，云南昆明650032）

大麻(Cannabis sativa)又名火麻、線麻、胡麻，屬桑科Moraceae植物，原產(chǎn)于印度地區(qū)，現(xiàn)各國(guó)均有野生或栽培，在我國(guó)東北、華北、華東、中南等地區(qū)也有栽培或半野生。大麻可用于紡織業(yè)、油用、造紙和建材業(yè)，藥理研究表明，大麻具有鎮(zhèn)痛、降眼壓、治療癲癇、抗嘔吐、抗腫瘤、抗菌、抗血栓、抗炎等作用。大麻的化學(xué)成分復(fù)雜，現(xiàn)已分離出碳?xì)浠衔?、黃酮類化合物、萜類化合物、脂類化合物、生物堿等多種成分。大麻中含有一種致幻成分四氫大麻酚（THC），可以用于提煉毒品，嚴(yán)重危害社會(huì)健康，因此本文主要敘述工業(yè)大麻（THC＜0.3%）有效成分的提取工藝。

1 大麻酚類化合物的提取

已知的大麻酚類化合物主要有大麻酚（CBN）、大麻二酚（CBD）、四氫大麻酚（THC）等。由于THC具有很強(qiáng)的成癮性，本文將不再敘述。藥理研究表明，CBD可用于治療腫瘤、癲癇、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病，還具有一定的鎮(zhèn)痛作用，且不良反應(yīng)發(fā)生率較低。通過查閱文獻(xiàn)，本文總結(jié)概括了以下6 種CBD的提取工藝。

1.1 浸漬法

香港同盛實(shí)業(yè)有限公司[1]以乙醇為提取劑，采用高速逆流色譜分離純化得到大麻二酚。以大麻花或葉為原料，經(jīng)50%～95%乙醇提?。╣/v=1∶5～1∶10)，濃縮，5～8℃水沉24h，真空旋蒸得大麻粗提物。將粗提物用乙醇溶解后，加樣至大孔樹脂（D101、AB-8或HPD-100），用5%～85%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，收集體積百分濃度70%～85%的乙醇溶液洗脫段，真空旋蒸后得大麻二酚粗提物。以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水[v/v/v/v=5∶(0～1)∶5∶(1～3)]為分離溶劑體系，進(jìn)行高速逆流色譜分離純化，收集大麻二酚的餾分段，回收溶劑，經(jīng)減壓濃縮、結(jié)晶和真空冷凍干燥，得大麻二酚。該制備過程簡(jiǎn)便、安全、環(huán)保，能夠連續(xù)進(jìn)行，是一種高效快捷的富集純化大麻二酚的方法。

根據(jù)欒云鵬[2]的研究，閃式提取的速度較傳統(tǒng)提取方法快百倍以上，對(duì)有效成分含量的影響較小。取工業(yè)大麻花葉粗粉，加10倍體積的60%～100%乙醇水溶液，用閃式提取器提取3次，3～15min·次-1，過濾，合并濾液，濃縮，高效液相色譜法測(cè)得大麻二酚純度為14.5%。

1.2 回流法

昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院[3]將大麻提取部位粉碎，用60%～70%乙醇溶液回流提取2～3次，每次1.5～2.5h（第1次提取加樣品質(zhì)量7～8倍體積的乙醇溶液，后2 次可加5～6倍質(zhì)量體積的乙醇溶液）。合并提取液，回收溶劑，得乙醇提取濃縮流浸膏。加入流浸膏體積2～3倍的水，再用堿性溶液（NaOH、三乙胺、氨水或三乙醇胺水溶液）調(diào)pH=11～12，回流提取2～3次。棄濾渣，合并濾液，再加稀鹽酸調(diào)pH為7，再加入等體積的氯仿-石油醚（v/v=1∶1～1∶2）萃取3～4 次，將大麻二酚萃取到有機(jī)相中，回收有機(jī)溶劑得大麻二酚粗膏。加入20%～30%乙醇，形成混懸液后過聚酰胺柱，依次用純凈水、40%～50%乙醇、70%～80%乙醇洗脫，收集含有大麻二酚的洗脫液，濃縮回收乙醇后得聚酰胺層析大麻二酚濃縮物。再上氧化鋁柱，依次用氯仿-石油醚（v/v=1∶3）和氯仿-甲醇-四氫呋喃（v/v/v=8∶1∶1或10∶0.5∶2）洗脫，收集大麻二酚洗脫液，濃縮得大麻二酚粗品。再用甲醇溶解，過氨基鍵合硅膠柱（或氰基鍵合硅膠柱、苯基鍵合硅膠柱），加壓柱層析，用甲醇溶液洗脫（20%甲醇溶液平衡，40%～50%甲醇洗脫2～3個(gè)體積柱，65%～70%甲醇進(jìn)行大麻二酚洗脫），收集大麻二酚洗脫液，濃縮。濃縮物用丙酮溶解，加入冰醋酸，結(jié)晶、過濾，低溫干燥得大麻二酚。該方法的產(chǎn)品純度高于98%，回收率高，適于工業(yè)化推廣。

高哲、張志軍等人[4]用單因素實(shí)驗(yàn)得出大麻二酚熱回流法的最佳工藝條件：火麻葉60℃烘干至恒重，粉碎過0.833mm 篩，按料液比1∶15加入正己烷作為提取溶劑，80℃提取3h，冷卻抽濾，旋蒸濃縮得浸膏。在最佳工藝條件下，浸膏得率為5.24%，浸膏中大麻二酚含量為43.16mg·g-1。

1.3 微波提取法

鳳陽縣小崗村永和營(yíng)養(yǎng)保健品有限公司[5]將工業(yè)大麻花葉粗品溶于水配成飽和溶液，超聲處理，過濾除去固體微粒，收集濾液。將濾液泵入動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱（十八烷基鍵合硅膠為固定相，流動(dòng)相為乙腈和水的混合溶液，乙腈和水的體積比為20∶80～40∶60）進(jìn)行分離，利用紫外檢測(cè)器在220nm 檢測(cè)，收集保留時(shí)間在155～240min 的餾分即為大麻二酚。將收集到的餾分進(jìn)行減壓旋蒸濃縮，冷卻干燥后經(jīng)HPLC分析，大麻二酚純度高達(dá)99%。

根據(jù)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院麻類研究所[6]的研究，將大麻植株干燥粉碎后溶于正己烷-乙酸乙酯(v/v=9∶1)的混合溶劑中超聲提取，提取液與5%～10%的KOH溶液按5∶1混合后進(jìn)行萃取，靜置，得到上層有機(jī)相、中層沉淀相和下層水相，上層有機(jī)相和下層水相均含有大麻二酚。將上層有機(jī)相在60℃條件下旋干2～3min，下層水相在80℃條件下旋干10～20min 后得到固體，水洗即得大麻二酚。該方法簡(jiǎn)單且有較高的純度（CBD純度84%～90%）和較高的富集率（80%）。

王丹等人[7]取大麻樣品陰干，粉碎，每1g 樣品加入80mL 甲醇，浸泡12h，超聲震蕩15min，索氏提取2 次，過濾，得甲醇提取物。以甲醇/水/乙腈作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，充分提取大麻二酚。

高寶昌等人[8]將漢麻樣品按1∶20 加入無水甲醇中，超聲震蕩15min，離心取上清液，重復(fù)上述步驟。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，3次超聲能充分提取工業(yè)大麻中的大麻二酚，上ODS柱，以甲醇/水=78∶22為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，分離出大麻二酚。

大興安嶺林格貝寒帶生物科技股份有限公司[9]將工業(yè)大麻根莖葉干燥粉碎后，加入60%～75%乙醇，在400～600W、8～12 倍料液比的條件下微波逆流提取10～30min，加石油醚，分層去除脂肪油；回收乙醇，上大孔吸附樹脂（DA201、D101、HPD300 或AB-8），依次用純水、40%～95%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，減壓干燥，得到大麻二酚半成品粗粉。將所得的大麻二酚半成品粗粉溶于乙酸乙酯，加適量硅膠攪拌，上硅膠層析柱，以氯仿-甲醇或石油醚-乙酸乙酯溶液按85∶2～95∶2 進(jìn)行洗脫，收集大麻二酚洗脫液，濃縮干燥，得含量在90%以上的大麻二酚粉末。

黑龍江陽光工業(yè)大麻研究院[10]將工業(yè)大麻葉在45～55℃真空烘干，使其含水量在3%以下，經(jīng)超微粉碎后過0.019mm 篩，得到工業(yè)大麻粉末。調(diào)節(jié)工業(yè)大麻粉末含水量在8%～10%，與正己烷-石油醚-乙醚（v/v/v=1∶1∶2）混合溶劑按質(zhì)量比1∶3混合，600～800W條件下微波提取20～30min。采用三相分離機(jī)得到溶劑相，將溶劑相減壓蒸餾（55～65 ℃），得含有大麻二酚的油脂，25MPa、120℃～130℃條件下進(jìn)行分子蒸餾，收集170～190℃餾分，得大麻二酚。該方法適用于大麻二酚的大規(guī)模提取，提取率為98.08%。

1.4 超臨界流體萃取法

開遠(yuǎn)伯盛科技有限公司[11]將大麻原料粉碎至0.154～0.45mm，然后80～160℃下干燥0.5～1h，再將粉碎原料進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，得大麻二酚初提浸膏（萃取溫度30～50℃，壓力10～30MPa，萃取1～4h；解析溫度30～40℃，壓力4～10MPa）。將初提浸膏加熱至40～100℃后進(jìn)行分子蒸餾（80～200℃，真空度1.33～1999.8Pa），得大麻二酚富集物。以大孔樹脂或MCI樹脂或C18硅膠為固定相，超臨界二氧化碳為流動(dòng)相，乙醇為夾帶劑（超臨界二氧化碳和乙醇質(zhì)量比為85∶15～98∶2），分離純化，得到無四氫大麻酚且純度大于99%的大麻二酚。

云南漢木森生物科技責(zé)任有限公司[12]將大麻花葉在120℃干燥0.5～4h，粉碎至0.30mm 以上，在55℃、30MPa 條件下，采用二氧化碳超臨界萃?。ú捎脻穹?，上樣前先用1BV的磷酸緩沖液進(jìn)行柱平衡，再用2BV 10%的乙醇溶液進(jìn)行柱平衡），回收二氧化碳，得大麻花葉初提物。而后溶解于10 倍體積的乙醇或甲醇中，0℃靜置12h，過濾去除雜質(zhì)，蒸干溶劑后備用。再上苯乙烯大孔樹脂或?qū)游龉枘z，用不同濃度的乙醇洗脫（25%、35%、45%、55%、65%、75%、85%、95%），收集大麻二酚洗脫液，蒸干后得大麻二酚粗品。本方法在提高大麻二酚含量的同時(shí)降低了四氫大麻酚的含量。

在提取大麻花葉油時(shí)還可以使用夾帶劑。云南漢木森生物科技責(zé)任有限公司[13]將大麻的花和葉在125～135℃條件下干燥0.1～0.4h，得到含水量小于6%的原料A。將原料A粉碎至0.35～0.50mm 得粉末B，將粉末B在125～135℃下干燥0.2～0.4h 得到含水量小于4%的粉末C。對(duì)粉末C進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取（萃取溫度30～40℃，壓力10～20MPa；解析溫度30～40℃，壓力2～10MPa）得到液體D和殘?jiān)麰。將液體D加熱至60℃保持10min 后，再放入勻質(zhì)機(jī)中，經(jīng)節(jié)流膨脹析出大麻二酚。在上述萃取過程中還可以使用夾帶劑（夾帶劑與萃取物比例為0.3∶100～1.0∶100），夾帶劑與萃取物之間會(huì)形成化學(xué)鍵，可提高萃取效率。常用的夾帶劑有乙酸乙酯、溶劑汽油和石油醚，但使用夾帶劑，則提取難度和成本均增加。

提取大麻花葉油時(shí)，可先進(jìn)行高溫干燥粉碎以破壞細(xì)胞壁。云南漢木森生物科技責(zé)任有限公司[14]將大麻的花和葉在105℃干燥0.5h，得到含水量小于7%的原料A。將原料A粉碎至0.30mm 得粉末B，將粉末B與水按質(zhì)量比3∶1混合后放入球磨機(jī)，200r·min-1研磨得到混合物C，將混合物C在105℃干燥0.5h 得到含水量小于5%的粉末D。待溫度降至18℃時(shí)進(jìn)行超臨界二氧化碳萃?。ㄝ腿囟?0℃，壓力5MPa，時(shí)間1h）得到液體E和殘?jiān)麱。液體E在20℃、1MPa 條件下解析出大麻花葉油并回收得到溶劑G。將溶劑G 加熱至70℃保持10min后，再放入勻質(zhì)機(jī)中進(jìn)行下一步處理。

黑龍江省科學(xué)院大慶分院[15]同樣采用超臨界CO2提取，但利用大孔樹脂和硅膠柱進(jìn)行分離。將漢麻成熟期的花葉去除水分后粉碎（30～60℃烘干1～4h），用超臨界二氧化碳萃取大麻二酚（萃取溫度為45℃，壓力30MPa，萃取3h），得到大麻二酚浸膏。將大麻二酚浸膏溶解于無水乙醇，離心，取上清液，上大孔吸附樹脂（NKA-Ⅱ、H-103、DM-130、X-5、D101的一種或幾種），25℃下震蕩12h，用60%乙醇洗脫。重復(fù)上述步驟，最后濃縮得大麻二酚濃縮液。裝入硅膠分離柱，以石油醚-乙酸乙酯(95∶5)洗脫，收集大麻二酚餾分，減壓濃縮后得大麻二酚純化液。

晉城市漢恩寶生物科技有限公司[16]對(duì)火麻花葉進(jìn)行干熱處理（70～100℃烘干2～3h），粉碎，采用亞臨界萃取裝置（溶劑為正丁烷、乙醇或兩者不定比例的混合物，用量為花葉質(zhì)量的5～8 倍，20%～40%乙醇為夾帶劑，萃取溫度為35～45℃，壓力0.4～0.6MPa，萃取40～60min），得到富含CBD的粗浸膏。將粗浸膏溶于乙醇溶液進(jìn)行低溫冬化處理（乙醇用量為粗浸膏的5～10 倍，冬化處理溫度為-10～-40℃，時(shí)間為45～60min），4500～6000r·min-1離心20～30min。取上清液，加入活性炭（用量為粗浸膏質(zhì)量的6%～10%）進(jìn)行脫色，旋蒸除去乙醇，可得富含CBD的火麻浸膏。

1.5 酶解法

大興安嶺林格貝寒帶生物科技股份有限公司[17]使用的是內(nèi)、外切葡聚糖酶和纖維素酶，將大麻根莖葉干燥1.5～2h，粉碎過0.42～0.84mm 篩，按料液比1∶5加入內(nèi)、外切葡聚糖酶和纖維素酶（v/v/v=1∶1∶1，酶濃度為0.5‰～1.5‰），調(diào)pH=4.5，40～50℃下酶解1～2h。以75%～95%乙醇為溶劑，200～500W 微波提取5～10min，過濾，濃縮得大麻二酚粗提物。按1∶3 加入60%乙醇于高壓處理袋內(nèi)，400MPa 下加壓提取20～30min。過濾，提取2次，將濾液濃縮后得膏狀物。將膏狀物上硅膠層析柱，用乙酸乙酯-氯仿=5∶1～7∶1洗脫，收集洗脫液真空干燥后得大麻二酚，回收率達(dá)90%以上。

黑龍江陽光工業(yè)大麻研究院[18]使用的是纖維素酶、木質(zhì)素降解酶和半纖維素酶。將工業(yè)大麻花和葉于55～65℃烘干后粉碎，過0.74～0.124mm篩，得工業(yè)大麻粉。調(diào)節(jié)工業(yè)大麻粉末的含水量為18%～20%，擠壓膨化（溫度65～75℃，螺桿轉(zhuǎn)速80～120r·min-1，膜孔孔徑10～30mm）后得膨化產(chǎn)物。加水溶解后，調(diào)節(jié)溫度至35～45℃，pH=2.5～4.5，向混合液中加入纖維素酶、木質(zhì)素降解酶和半纖維素酶[5∶2∶(1～3)]，混合酶解，總添加量為0.1%～0.25%。向酶解液中加入石油醚、乙醚、正己烷的一種或多種混合物浸提，用三相分離機(jī)分離得到水相、殘?jiān)坝袡C(jī)相。用超濾膜（0.001～0.01μm)濃縮有機(jī)相，得到含有大麻二酚的浸膏，大麻二酚提取率為92.31%～96.96%。

廣州市德力漁業(yè)有限公司[19]將火麻葉在100℃條件下烘干2h，冷卻，按1mL·g-1加入酶液（纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶中的一種或幾種），搖床內(nèi)水解1h。向水解液中加入足量萃取劑（每g 水解液中加入3～20mg 萃取液，本實(shí)驗(yàn)所用萃取液為正己烷）。1000r·min-1攪拌均勻，分離取上清液，蒸干萃取劑，得到油狀物。加入油狀物5 倍體積量的甲醇，-40℃環(huán)境下處理1h，-6℃條件下離心。取上清液加入活性炭，脫色30min，過濾，濾液旋蒸，即得富含大麻二酚的浸膏。

吳俊鋒等人[20]使用的是Viscozyme L(含有纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶等多種多糖酶)。將火麻葉置于100℃烘箱中加熱處理2h，冷卻密封備用。按1∶10（g∶mL）加入酶液Viscozyme L，與酸性蛋白酶水解1h，加入正己烷作為萃取劑，1000r·min-1快速攪拌3h，分離出上層的正己烷，旋蒸除掉溶劑得油狀物。按1∶5 加入甲醇，-40℃冰箱內(nèi)放置1h，-6℃離心。取上清液，加入油狀物10%的活性炭脫色30min，過濾，濾液旋蒸后即得富含大麻二酚的浸膏。

1.6 利用微生物提取

云南綠新生物藥業(yè)有限公司[21]以大麻根莖葉為原料，依次用50%乙醇和一級(jí)無菌水清洗表面污漬和細(xì)菌，PDA 平板培養(yǎng)基中無菌培養(yǎng)24～96h。從平板中挑取白色菌絲體，在試管斜面接種白色菌絲體，繼續(xù)培養(yǎng)48～120h。將大麻花葉粉碎，加入花葉重量0.5%～10%的真菌，移入發(fā)酵床進(jìn)行固體發(fā)酵（發(fā)酵溫度20～55℃，發(fā)酵時(shí)間24～96h），發(fā)酵終點(diǎn)依據(jù)HPLC檢測(cè)目標(biāo)物含量變化情況決定。將發(fā)酵處理后的原料轉(zhuǎn)移至提取罐中，加入1～6倍的甲醇/乙醇/乙酸乙酯/正己烷或其混合溶劑進(jìn)行提?。ㄌ崛囟?5～60℃，時(shí)間1～3h），回收溶劑后得工業(yè)大麻提取浸膏。特殊處理后加入正己烷萃取2～3次，真空減壓濃縮后得大麻提取物粗品。將提取物粗品用3倍量正己烷溶解，干法上硅膠柱，用正己烷-乙酸乙酯=8∶1洗脫，回收洗脫液得大麻二酚半成品。將半成品用乙醇溶解，加適量水，靜置過夜，過濾，真空干燥得大麻二酚成品。使用酶促反應(yīng)可使浸提時(shí)間縮短，溶劑用量減少，還可使CBD提取率提高110%～130%，可得到99%以上高純度的CBD原料。

2 黃酮類成分的提取

2.1 乙醇溶劑法

李婷婷等人[22]取漢麻果膠，分別用15、10、8倍的80%乙醇提取1.5h，合并濾液，減壓濃縮，蒸干溶劑。實(shí)驗(yàn)確定D-101型大孔樹脂是純化漢麻果膠中總黃酮的最佳材料，依次用10 倍去離子水、10 倍70%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，可得到較好的分離效果。

2.2 超聲輔助提取法

郝利民等人[23]取一定量的漢麻葉干粉，加入20倍體積的70%乙醇溶液，60℃超聲輔助浸提40min，過濾除渣，提取物的黃酮總含量為28.32mg·g-1。

3 大麻基因組DNA的提取

3.1 SDS法

利用高濃度SDS（含 NaCl、Tris-HCl、EDTA、2-巰基乙醇，調(diào)pH=8），在一定條件下裂解大麻植物細(xì)胞，使蛋白質(zhì)變性，染色體離析，釋放出核酸。除去蛋白質(zhì)和多糖后，離心取上清液，用酚或氯仿抽提，用乙醇沉淀水相中的DNA，即得大麻基因組DNA[24]。

3.2 CTAB法

取新鮮大麻葉片置于研缽中，加入液氮研磨，加入CTAB緩沖液混合均勻，一定溫度下水浴30min，離心取上層水相，加入等體積的Tris-酚和氯仿異戊醇，離心。取上層水相，加入等體積的氯仿異戊醇混合均勻，離心。取上層水相，加入0.6 倍體積的異丙醇，輕輕混勻，-20℃沉淀30min，離心。去上清液，加入70%乙醇洗滌沉淀，即得大麻基因組DNA[25]。

3.3 高鹽低pH法

取大麻新鮮植株，加液氮研磨，加入混合提取液（NaAc，pH=4.8；EDTANa2，pH=8.0；NaCl、2%PVP、1.4%SDS），水浴提取20min，4℃離心。取上清液，加入1/3體積的KAc（pH=4.8）沉淀蛋白質(zhì)，4℃離心。取上清液，加入0.7 倍體積的-20℃異丙醇使核酸充分沉淀，4℃離心。收集沉淀，70%乙醇洗滌沉淀，即得大麻基因組DNA[26]。實(shí)驗(yàn)得到大麻基因組DNA 提取方法的優(yōu)先順序?yàn)椋焊啕}低pH法＞SDS法＞CTAB法[27]。

4 大麻抑菌活性物質(zhì)的提取

除CBD外，黑龍江康源生物科技有限公司[28]還提取出了其他抑菌活性成分。將工業(yè)大麻根洗凈、干燥、粉碎后，加入10 倍體積的95%乙醇滲漉提取，滲漉液在55℃減壓濃縮，回收溶劑，得大麻根提取物浸膏。加水混懸浸膏，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取1～3次，回收溶劑得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相。將石油醚相上硅膠柱，用石油醚-乙酸乙酯洗脫；將乙酸乙酯相上大孔樹脂進(jìn)行柱層析，用乙醇/水進(jìn)行梯度洗脫，可得到大麻二酚、次大麻二酚、大麻酚、齊墩果烯、齊墩果酸等有抑菌活性的物質(zhì)。

張正海等人[29]將工業(yè)大麻葉陰干，粉碎后按體積比12.5∶1加入80%乙醇，150W 超聲波輔助提取，濾渣再加乙醇提取20min，重復(fù)3 次。合并濾液，40℃旋蒸濃縮，0.45μm 微孔濾膜除菌過濾后，得工業(yè)大麻提取物儲(chǔ)備液。此條件下得到的工業(yè)大麻提取物對(duì)金黃色葡萄球菌有較好的抑制作用。

5 大麻相關(guān)產(chǎn)品的提取

5.1 大麻纖維

大麻纖維質(zhì)地柔軟，拉力、韌性強(qiáng)，廣泛用于日常生活中。大麻纖維提取過程中最大的困難是脫膠，以下是我國(guó)目前采用的大麻脫膠技術(shù)。

5.1.1 自然法

原麻扎把→裝籠→酸浸（硫酸/DTPA）→水洗→煮練（氫氧化鈉為煮練劑，水玻璃、硫化鈉、多聚磷酸鈉、亞硫酸鈉為助劑）→水洗→敲麻→漂白→水洗→酸洗→水洗→脫水→開松→裝籠→給油→脫油水→抖撒→烘干→精麻[30]。

5.1.2 生物酶-化學(xué)聯(lián)合脫膠

用果膠酶/纖維素酶/木質(zhì)素降解酶及不同的酶進(jìn)行混合脫膠，直接使用生物酶可縮短耗時(shí)和節(jié)約成本，易于推廣使用[31]。

5.1.3 微生物脫膠法

用芽孢桿菌制取酶液脫膠，殘膠率約在6%～9%，且纖維分離較好，對(duì)纖維沒有損傷[32]。

5.1.4 物理脫膠法

超聲波、蒸汽爆破等手段，目前只作為預(yù)處理的方法，還需要與其他方法配合使用[32]。

5.2 漢麻仁油

5.2.1 水酶法

漢麻仁粉碎，加入4倍體積的去離子水，攪拌，調(diào)pH至5.8，加入2%堿性蛋白酶，60℃酶解2h，離心，收集游離油[33]。

5.2.2 壓榨法

60℃壓榨漢麻仁，過濾，重復(fù)2次即得到漢麻仁油[33]。

5.2.3 浸提法

李秀娟等人[34]將漢麻仁粉碎研磨，以石油醚為溶劑，超聲，離心取上清液，減壓蒸餾除去石油醚得漢麻仁油。

5.2.4 超臨界CO2流體萃取

火麻仁去殼粉碎并干燥，將樣品放入萃取釜，超臨界二氧化碳流體萃取操作流程為：液態(tài)二氧化碳→高壓泵→萃取釜（進(jìn)入超臨界狀態(tài)）→分離釜Ⅰ→分離釜Ⅱ→循環(huán)，萃取壓力不斷升高，每隔5min 從分離釜中收集樣品，直至無樣品分離出來為止[35]。

5.3 火麻蛋白

晉城市漢恩生物科技有限公司[36]取變性火麻粕（高溫榨取火麻油的副產(chǎn)物）置于不銹鋼罐中，按料液比1∶10 加入工業(yè)用水，邊攪拌邊加入10%氫氧化鈉溶液，調(diào)pH為9.0，轉(zhuǎn)入立式膠體磨中進(jìn)行研磨。然后將料液轉(zhuǎn)入噴射蒸煮器系統(tǒng)中，130℃處理120s，轉(zhuǎn)移至臥式離心機(jī)離心后，上清液轉(zhuǎn)移至不銹鋼超濾膜系統(tǒng)進(jìn)行超濾。收集火麻蛋白濃縮液，噴霧干燥后得富含CBD的火麻濃縮蛋白粉。

劉淑霞等人[37]確定的“火麻1號(hào)”麻籽中蛋白質(zhì)的提取工藝為：火麻籽粉碎脫脂后加入NaOH提取，離心；取上清液加入0.05mol·L-1的HCl 調(diào)pH=11，離心。除去上清液，得到的蛋白質(zhì)沉淀中加入4 倍體積的蒸餾水，離心；除去上清液，冷凍干燥48h后得火麻蛋白，重復(fù)上述操作3次。

5.4 大麻果膠

大麻原麻經(jīng)超聲波處理，洗凈烘干，用草酸銨從麻皮中提取大麻果膠。過濾，濾液調(diào)pH=3.0～5.5，旋蒸后冷卻，加入等體積的無水乙醇沉淀果膠，過濾，70℃烘干[38]。

6 結(jié)語

本文對(duì)大麻酚類、黃酮類、大麻基因組DNA、抑菌活性物質(zhì)及大麻相關(guān)產(chǎn)品的提取工藝進(jìn)行總結(jié)。其中大麻酚類尤其是大麻二酚因具有抗焦慮、抗精神病、止吐、抗炎、抗腫瘤等多方面特性而被用于臨床。通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)，總結(jié)了大麻二酚6種不同的提取方式，以期能為大麻二酚更高純度的提取和工業(yè)大麻更高效率的提取提供新的思路。