HPV-DNA聯(lián)合SCC-Ag、CEA、HE4檢測(cè)對(duì)宮頸癌患者的診斷價(jià)值研究

王元元 李 娜

女性高發(fā)惡性腫瘤之一為宮頸癌，具有極高發(fā)病率，有調(diào)查顯示，女性惡性腫瘤中，宮頸癌發(fā)病率僅次于乳腺癌，嚴(yán)重威脅到患者生命健康[1-2]。我國宮頸癌發(fā)生率正呈2%/年～3%/年的速度持續(xù)增長[3]。人乳頭瘤病毒(HPV)感染篩查屬于預(yù)防宮頸癌疾病重要措施，已得到國際腫瘤預(yù)防機(jī)構(gòu)認(rèn)可[4]。鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC-Ag)、癌胚抗原(CEA)、人附睪蛋白4(HE4)均為宮頸癌輔助診斷常用腫瘤標(biāo)志物。本文以宮頸癌患者、宮頸癌前病變患者、宮頸炎患者各60例以同期健康體檢者100例作為研究對(duì)象，探討HPV-DNA聯(lián)合SCC-Ag、CEA、HE4測(cè)定在宮頸癌患者診斷中的價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月至2018年3月我院宮頸癌患者(宮頸癌組)、宮頸癌前病變患者(宮頸癌前病變組)、宮頸炎患者(宮頸炎組)各60例，并取同期健康體檢女性100例納入對(duì)照組。入選標(biāo)準(zhǔn)：病理學(xué)檢查確診為宮頸癌、宮頸癌前病變、宮頸炎；具有完整臨床資料；入組前未接受任何治療；心肝腎功能正常；采血時(shí)非經(jīng)期；對(duì)研究知情，簽署知情同意書；符合倫理委員會(huì)相關(guān)研究審批標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：已經(jīng)接受手術(shù)或者放化療治療；合并前列腺、消化系統(tǒng)、卵巢、膽道系統(tǒng)或者乳腺等相關(guān)病變；妊娠或者哺乳婦女；拒絕采集靜脈血進(jìn)行腫瘤標(biāo)志物水平的檢測(cè)。宮頸癌組患者年齡28～65歲，平均(46.78±4.85)歲；宮頸癌FIGO分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期25例，Ⅲ期14例，Ⅳ期5例，包括37例鱗癌與23例腺癌。宮頸癌前病變組患者年齡26～68歲，平均(47.05±4.91)歲；宮頸炎組患者年齡25～67歲，平均(46.45±4.72)歲；對(duì)照組年齡20～62歲，平均(45.93±4.61)歲。

1.2 方法

HPV-DNA檢測(cè)：以基因芯片法檢測(cè)高危HPV-DNA，應(yīng)用基因擴(kuò)增儀(型號(hào)：WD-9402C)擴(kuò)增基因，所用試劑購自北京閱微基因技術(shù)有限公司，然后雜交擴(kuò)增后的基因與基因芯片(購自上海奇芯集團(tuán))，如若信號(hào)灰度與背景灰度之間的差值超過4，則表明基因型陽性，本次共檢測(cè)22種不同高危型別 (包括HPV16、18、31、33、35、39、42、43、44、51、52、53等)。

腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：抽取入選者清晨空腹靜脈血大約3～5 ml，采用3000轉(zhuǎn)/min速率離心10 min，然后分離血清；應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光分析儀(型號(hào)：羅氏E170)進(jìn)行血清SCC-Ag、CEA水平的檢測(cè)，試劑來自羅氏公司原裝配套試劑；以酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行血清HE4檢測(cè)，其中檢測(cè)試劑盒來自瑞典康乃格診斷公司。所有檢測(cè)步驟均需嚴(yán)格參照試劑盒說明書。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察宮頸癌不同分期與4組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯(lián)合檢測(cè)陽性率，比較4組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達(dá)水平、SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度。

SCC-Ag陽性標(biāo)準(zhǔn)：>1.5 ng/ml；CEA陽性標(biāo)準(zhǔn)：>5 ng/ml；HE4陽性標(biāo)準(zhǔn)：>150 U/ml。靈敏度=陽性檢出例數(shù)/患者例數(shù)×100%；特異度=對(duì)照組陰性檢出例數(shù)/對(duì)照組例數(shù)×100%；準(zhǔn)確度=(患者陽性檢出例數(shù)+健康對(duì)照組陰性檢出例數(shù))/總例數(shù)×100%[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 4組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達(dá)水平比較

對(duì)照組與宮頸炎組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達(dá)水平比較無明顯差異(P>0.05)；宮頸癌前病變組與宮頸癌組各指標(biāo)水平明顯高于對(duì)照組與宮頸炎組(P<0.05)，且宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組(P<0.05)，見表1。

表1 4組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達(dá)水平比較

注：與對(duì)照組比較，#為P<0.05；與宮頸炎組比較，*為P<0.05；與宮頸癌前病變組比較，△為P<0.05。

2.2 4組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯(lián)合檢測(cè)陽性率比較

宮頸癌前病變組與宮頸癌組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯(lián)合檢測(cè)陽性率均明顯高于對(duì)照組、宮頸炎組(P<0.05)，且宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組(P<0.05)，見表2。

表2 4組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯(lián)合檢測(cè)陽性率比較(例，%)

注：與對(duì)照組比較，#為P<0.05；與宮頸炎組比較，*為P<0.05；與宮頸癌前病變組比較，△為P<0.05。

2.3 不同分期宮頸癌SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯(lián)合檢測(cè)陽性率比較

Ⅰ/Ⅱ期患者SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA陽性率明顯高于Ⅲ/Ⅳ期患者(P<0.05)，見表3。

表3 2組不同分期宮頸癌SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯(lián)合檢測(cè)陽性率比較(例，%)

2.4 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度比較

聯(lián)合檢測(cè)靈敏度、準(zhǔn)確度明顯高于 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨(dú)檢測(cè)(P<0.05)，見表4。

表4 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度比較/%

注：與聯(lián)合檢測(cè)比較，△為P<0.05。

3 討論

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，醫(yī)學(xué)界已經(jīng)認(rèn)識(shí)到HPV能引發(fā)宮頸癌。相關(guān)文獻(xiàn)指出，99.8%左右宮頸癌患者產(chǎn)生HPV感染，HPV陰性者基本沒有罹患宮頸癌可能性，HPV 屬于引發(fā)宮頸癌病變直接因素[6-7]。故臨床進(jìn)行HPV-DNA 檢測(cè)屬于宮頸病變首選篩查方式，對(duì)HPV-DNA陽性患者采取及時(shí)有效治療措施，為逆轉(zhuǎn)宮頸病變以及防治宮頸癌關(guān)鍵。通常只有持續(xù)感染HPV，女性才可能產(chǎn)生宮頸癌，故如果HPV-DNA陰性，則體檢者在往后3～5 年內(nèi)無需再行相同檢測(cè)[8-9]。

腫瘤標(biāo)志物為人體細(xì)胞癌變出現(xiàn)、發(fā)展、浸潤以及轉(zhuǎn)移期間形成的或者宿主對(duì)腫瘤組織細(xì)胞反應(yīng)性的相應(yīng)活性物質(zhì)，一般存在于癌變組織以及宿主體液之內(nèi)，非腫瘤患者體液里面不存在或表達(dá)水平較低。宮頸腫瘤病變?cè)缙诎l(fā)展過程中，影像學(xué)無法檢出，但是血液里面一些腫瘤標(biāo)志物已產(chǎn)生不同程度升高趨勢(shì)，故檢測(cè)血液里面腫瘤標(biāo)志物表達(dá)水平可成為早期診斷并發(fā)現(xiàn)腫瘤有效方法?，F(xiàn)階段，多項(xiàng)研究表明，腫瘤標(biāo)志物可同時(shí)存在于正常與腫瘤組織、非腫瘤與腫瘤患者體液之內(nèi)，但其表達(dá)質(zhì)和量存在非常大的差異，卻又具有相互交叉以及界限模糊特點(diǎn)[10-11]。在免疫學(xué)、現(xiàn)代分子生物學(xué)不斷發(fā)展的背景下，宮頸癌患者血清里面多種腫瘤標(biāo)志物逐漸得以被發(fā)現(xiàn)。其中，SCC-Ag為臨床診斷宮頸癌相對(duì)可靠腫瘤標(biāo)記物之一，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于宮頸磷癌早期診斷、治療效果與預(yù)后判定、腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)中，然而其對(duì)宮頸腺癌或者腺鱗癌臨床診斷價(jià)值并不高[12-13]。CEA主要存在于人體胃腸黏膜上皮、部分惡性腫瘤細(xì)胞表面上，比如肺癌、結(jié)腸癌以及乳腺癌等，其已經(jīng)在多種腫瘤診斷中得帶廣泛應(yīng)用，且開始應(yīng)用于宮頸癌診斷中。HE4 屬于近年來醫(yī)學(xué)界發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物，首次發(fā)現(xiàn)于人附睪遠(yuǎn)端相應(yīng)上皮細(xì)胞。相關(guān)研究指出，多種婦科腫瘤存在HE4高表達(dá)現(xiàn)象，比如子宮內(nèi)膜癌與卵巢癌等女性腺癌組織[14-15]。

本組研究顯示，健康對(duì)照組與宮頸炎組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達(dá)水平比較無明顯差異，但宮頸癌前病變組與宮頸癌組各指標(biāo)水平明顯高于其他兩組，且宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組，表明隨著宮頸病變發(fā)展，血清SCC-Ag、CEA、HE4水平亦明顯升高。結(jié)果還顯示，宮頸癌前病變組與宮頸癌組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯(lián)合檢測(cè)陽性率均明顯高于其他兩組，宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組，與潘靜等[16]研究結(jié)論一致。說明宮頸病變?cè)絿?yán)重，陽性檢出率越高。宮頸癌Ⅰ/Ⅱ期SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA陽性率明顯高于Ⅲ/Ⅳ期患者，提示隨著宮頸癌發(fā)展，腫瘤標(biāo)志物與HPV-DNA陽性率顯著升高。此外，聯(lián)合檢測(cè)靈敏度、準(zhǔn)確度明顯高于 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨(dú)檢測(cè)，表明相較于單種檢測(cè)方式，SCC-Ag、CEA、HE4聯(lián)合HPV-DNA檢測(cè)能提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性與靈敏度。

綜上，與單一檢測(cè)相比HPV-DNA聯(lián)合SCC-Ag、CEA、HE4檢測(cè)可有效增加檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性與敏感度，宮頸癌分期越大，陽性檢出率越高，能有效指導(dǎo)患者臨床診治。